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1.1特殊的教學(xué)對象
1)目前多數(shù)學(xué)生是獨生子女,自我為中心的意識很強,他們渴望成功卻又缺乏吃苦耐勞的精神,心里想學(xué)習(xí)卻又不具備自我約束的能力;2)基礎(chǔ)課程的上課方式多為同專業(yè)、甚至是不同專業(yè)的多個班級的合班課,學(xué)生人數(shù)較多,化學(xué)基礎(chǔ)知識層次不齊,任課教師在課堂上很難做到照顧每一個學(xué)生的學(xué)習(xí)情況,再加上學(xué)時數(shù)的壓縮,學(xué)生的學(xué)習(xí)效果直接面臨一些困惑和難題:聽課效果不好、抄作業(yè)現(xiàn)象常有發(fā)生、考試結(jié)果不盡如人意、無法與后續(xù)專業(yè)課程銜接等等;3)非化學(xué)專業(yè)學(xué)生對化學(xué)基礎(chǔ)課的學(xué)習(xí)較被動,創(chuàng)新的主動性與積極性不強[3].以某高校園藝專業(yè)為例,在大一學(xué)年的第二學(xué)期,“分析化學(xué)”課程往往與英語及一些專業(yè)課程同時開課,相比而言,分析化學(xué)知識零碎,各類公式多,且抽象、難以理解,學(xué)生學(xué)習(xí)起來有枯燥無味之感,普遍反應(yīng)記不住,因而缺乏興趣,積極主動性不高,甚至出現(xiàn)畏懼心理;同時“重專業(yè)知識,輕基礎(chǔ)知識”的現(xiàn)象也普遍存在.因此如何激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)基礎(chǔ)課的興趣與主動性,最大程度地發(fā)揮他們的潛能,是擺在大學(xué)基礎(chǔ)課教師面前的一個新課題.
1.2繁雜的課程內(nèi)容
“分析化學(xué)”學(xué)科在整個學(xué)習(xí)階段起著承上啟下的作用.它由一系列分析方法所構(gòu)成,主要包括化學(xué)分析法和儀器分析法,經(jīng)典的化學(xué)分析法又可分為重量分析法和滴定分析法;儀器分析法主要有光學(xué)分析法、電化學(xué)分析法、色譜分析法等等,其中每一種分析方法因響應(yīng)信號機制不同還可進(jìn)一步細(xì)分.不同的分析方法具有不同的原理、條件、儀器、特點和適用范圍等,既相互聯(lián)系又各自成體系,涉及的知識很廣,并且還在以日新月異的速度向前發(fā)展,各種新理論、新方法和新技術(shù)層出不窮.因此在這樣的大背景下,如何在“分析化學(xué)”學(xué)科的教學(xué)中營造一種活躍思維、主動學(xué)習(xí)、充分體現(xiàn)學(xué)生主體地位的氛圍,真正地提高課堂的教學(xué)效率,是每一位承擔(dān)這門課程的教師值得思考和探討的問題.
1.3機械的實驗教學(xué)
在實驗設(shè)計方面,簡單的驗證性實驗多,綜合設(shè)計的研究性實驗較少[4],實驗內(nèi)容不能及時反映分析化學(xué)的發(fā)展現(xiàn)狀與相關(guān)學(xué)科間的滲透交叉,并且多數(shù)實驗都是在教師的“精心安排”下進(jìn)行“照方抓藥”,學(xué)生只需按部就班地跟著教材走就能完成實驗,獨立思考的機會不多,嚴(yán)重缺乏在方案設(shè)計、樣品前處理及數(shù)據(jù)處理等方面的創(chuàng)造性鍛煉.在實驗授課方面,多數(shù)實驗課程仍采用傳統(tǒng)的“教師先講解原理———學(xué)生接受,然后動手實驗”的模式.教師“傾囊相授”,希望將所有的知識點都傳授于學(xué)生,但與教師的教學(xué)熱情相反,學(xué)生的積極性卻往往不高,無動于衷,對實驗內(nèi)容的理解與設(shè)計基本依賴于教師的講解,缺乏對未知知識的探求精神以及獨立進(jìn)行實踐操作的能力.在實驗操作方面,對于移液、稱量等基本操作,雖然教師已詳細(xì)講解并演示,學(xué)生操作仍不規(guī)范,如在減量法稱量時直接用手接觸稱量瓶,未用紙條和紙片;滴定時不注意觀察標(biāo)準(zhǔn)溶液滴落點周圍的顏色變化,卻不時地抬頭觀察滴定管的讀數(shù);未進(jìn)行半滴操作等.還有一些儀器較為精密、貴重,數(shù)量偏少,不能保證每個學(xué)生都能掌握所有實驗細(xì)節(jié),再加上操作步驟較多,一些學(xué)生怕操作不當(dāng)?shù)貌坏嚼硐氲臄?shù)據(jù),只簡單做一些輔助的配合工作,甚至站在旁邊“冷眼觀看”,基本上是學(xué)無所獲.綜上所述,不難看出,目前“分析化學(xué)”實驗教學(xué)相對比較機械.所以,如何建立新型的分析化學(xué)實驗課程體系,采用新穎的教學(xué)方法,賦予學(xué)生更廣闊、更自主的學(xué)習(xí)空間,使學(xué)生在知識和能力上獲得雙豐收,是一個巨大的挑戰(zhàn).
1.4單一的評價方式
多年來,“分析化學(xué)”課程的考核方式為期末閉卷考試這種單一的考核形式,課程最終成績?yōu)槠谀┛荚嚨木砻娉煽?、實驗成績和平時成績加權(quán)后的總評成績.成績高的學(xué)生可能是“臨時抱佛腳”即考前幾天突擊復(fù)習(xí)的結(jié)果.這種考核方式雖然能較好地考察學(xué)生對“分析化學(xué)”課程基礎(chǔ)知識的儲備情況,卻不能很好地反映出他們綜合分析問題、解決問題的能力.因此,要使學(xué)生的創(chuàng)新能力、綜合運用知識能力得到真正的提高,必須要建立一套科學(xué)的評價方式.
2“分析化學(xué)”課程教學(xué)改革的主要措施
2.1激發(fā)學(xué)生興趣
美國教育家杜威指出:教育不是一件“告訴”和“被告訴”的事情,而是一個主動建設(shè)的過程.因此,在教學(xué)過程中應(yīng)充分調(diào)動學(xué)生的積極性,激發(fā)他們的學(xué)習(xí)興趣.為此,可采取在傳統(tǒng)授課方式的基礎(chǔ)上,增加圖片、動畫效果、視頻等多樣化的多媒體內(nèi)容幫助學(xué)生理解晦澀難懂的理論內(nèi)容,并注重與相關(guān)學(xué)科之間的銜接與聯(lián)系,適時地把一些化學(xué)史、應(yīng)用實例或社會熱點問題引入課堂,使學(xué)生認(rèn)識到理論源于實踐,又能指導(dǎo)實踐.對于食品類專業(yè)的學(xué)生,在講解色譜分析法時,可介紹2008年我國發(fā)生的非法添加三聚氰胺的毒奶粉事件,進(jìn)而向?qū)W生提出可用高效液相色譜法測定飼料和植物蛋白粉中的三聚氰胺,此外還可介紹引起社會廣泛關(guān)注的二噁英、蘇丹紅、瘦肉精等食品安全事件及奧運會期間興奮劑的檢測;針對生物學(xué)專業(yè)的學(xué)生,在介紹緒論“分析化學(xué)”課程的重要性及應(yīng)用性時,如果只是泛泛地說分析化學(xué)在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域有著非常重要的作用,學(xué)生其實并沒有深刻的體會,這時可列舉在生物大分子研究領(lǐng)域做出重大貢獻(xiàn)而獲得2002年諾貝爾化學(xué)獎的三位分析化學(xué)家約翰•芬恩、田中耕一和庫爾特•維特里希,緊接著介紹分析化學(xué)在他們熟知的領(lǐng)域,如基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)和代謝組學(xué)中發(fā)揮的重要作用.這種講授方法不但會使學(xué)生進(jìn)一步認(rèn)識到“分析化學(xué)”課程在其所學(xué)專業(yè)的重要地位和作用,而且還能開拓他們的視野,最大程度地激發(fā)他們的求知欲和創(chuàng)新性,進(jìn)而參與到分析化學(xué)的科研工作中來.另一方面,還應(yīng)在現(xiàn)代教學(xué)理論的指導(dǎo)下,以“教師為主導(dǎo)、學(xué)生為主體,并凸顯主體”為研究突破口,發(fā)揮學(xué)生主觀能動性,把教師的“教”和學(xué)生的“學(xué)”統(tǒng)一起來,探索以學(xué)生為主體的教學(xué)模式,改變現(xiàn)在普遍存在的學(xué)生學(xué)得枯燥,教師教得艱難,大家都感到無所適從的局面,以達(dá)到在教學(xué)過程中,學(xué)生真正成為學(xué)習(xí)的主人,“快樂學(xué)習(xí)”、“學(xué)會學(xué)習(xí)”,最終達(dá)到提高人才培養(yǎng)質(zhì)量的目標(biāo).例如,在教學(xué)實踐中可采取學(xué)生參與的方式,先由教師提出分析任務(wù),如水環(huán)境中As含量的測定、重要藥物溶菌酶的測定[5]等,學(xué)生依據(jù)興趣自由分組,先完成綜述小論文,再由教師指導(dǎo)討論各種分析方法的優(yōu)缺點.這樣,學(xué)生先是對這些分析任務(wù)產(chǎn)生濃厚興趣,水環(huán)境中As的含量究竟是多少?國家標(biāo)準(zhǔn)允許的含量是多少?經(jīng)常飲用超標(biāo)水,會對當(dāng)?shù)厝?、畜產(chǎn)生怎樣的不良后果?在此基礎(chǔ)上,深刻認(rèn)識到準(zhǔn)確測定的重要性.通過查閱文獻(xiàn)資料,了解到As的測定方法有滴定分析法、原子吸收光度法、電分析方法及紫外-可見吸收光譜法等,最后根據(jù)環(huán)境水樣中As的含量范圍及實驗室現(xiàn)有的儀器資源,確定選用紫外-可見分光光度法.在此過程中,學(xué)生可將課堂中學(xué)到的分析方法的評價指標(biāo)及各種分析方法的原理用于解決實際問題,逐步形成為達(dá)到分析目的而應(yīng)采取的分析化學(xué)專業(yè)思維的方式和方法.
2.2優(yōu)化教學(xué)內(nèi)容
“分析化學(xué)”課程教材難度大、內(nèi)容多、學(xué)時少,因此,教學(xué)改革首先要以優(yōu)化教學(xué)內(nèi)容為核心,重點突出專業(yè)性和實用性:
1)對課程內(nèi)容進(jìn)一步優(yōu)化和精簡,壓縮同其他基礎(chǔ)課程中相同或相近的內(nèi)容,如氫離子濃度的計算等,這些在普通化學(xué)部分章節(jié)已經(jīng)提到,可略講甚至不講,讓學(xué)生自己去復(fù)習(xí).
2)對于相似的知識點,應(yīng)培養(yǎng)學(xué)生歸納、比較和觸類旁通的能力.在滴定分析法中,可精講酸堿滴定法,包括滴定分析法的共性(基本原理、滴定曲線、突躍范圍及影響因素、指示劑、終點誤差和應(yīng)用等),然后通過對比和歸納手段,講解配位滴定法和氧化還原滴定法;在講授紫外-可見分光光度法時,可以給學(xué)生列舉蛋白質(zhì)含量測定的光度方法,如考馬斯亮藍(lán)染色法、雙縮脲法(Biuret法),并將這些方法和之前學(xué)習(xí)的凱式定氮法相比較,使學(xué)生了解各種方法的優(yōu)缺點.通過這樣前后知識的貫通融合,達(dá)到了以點帶面、以小見大、觸類旁通的作用,不但大大節(jié)約了課時,也培養(yǎng)了學(xué)生自主學(xué)習(xí)的能力.
3)對于儀器分析內(nèi)容,應(yīng)把握教學(xué)重點,理清知識主線,突出方法間的聯(lián)系與區(qū)別[6].儀器分析的主要內(nèi)容實際上就是響應(yīng)信號與被測物性質(zhì)(與結(jié)構(gòu)有關(guān))、濃度之間的關(guān)系,教師應(yīng)讓學(xué)生徹底理解并掌握“利用峰位置可進(jìn)行定性分析,峰高或峰面積可進(jìn)行定量分析”這一基本規(guī)律.在三大類分析中(包括光譜分析、電分析和色譜分析),利用各自的峰位置可推斷被測物的結(jié)構(gòu)信息,而峰面積或峰高則可以反映被測物的含量或濃度信息.這種講授方法會使學(xué)生對儀器分析知識有一整體性的認(rèn)識,在此基礎(chǔ)上再對不同方法進(jìn)行比較.這樣不僅可以收到較好的教學(xué)效果,還能幫助學(xué)生掌握學(xué)習(xí)知識的方法,最終達(dá)到雙贏的目的.
4)將學(xué)科的前沿發(fā)展動態(tài)引入課堂教學(xué).徐光憲院士指出,應(yīng)把21世紀(jì)分析化學(xué)生龍活虎、立體多維的形象展示給學(xué)生,引起學(xué)生對該課程的極大興趣.因此在實際教學(xué)中,應(yīng)結(jié)合課程進(jìn)度,適度地把學(xué)科最前沿的知識和最新的研究動態(tài)介紹給學(xué)生,注重知識面的補充和延伸.例如,在講解分光光度法時,可引進(jìn)現(xiàn)今發(fā)展最為迅速的碳納米材料.碳材料的基本組成元素雖然相同,但由于這些元素的空間排布不同繼而可形成不同的形態(tài),有零維的碳點、一維的碳納米管、二維的石墨烯等,不同的碳材料在紫外-可見光區(qū)域有不同的吸收峰,根據(jù)吸收峰(尤其是最大吸收波長)的位置可進(jìn)行定性分析,區(qū)分不同的碳材料,根據(jù)吸光度的大小可進(jìn)行定量分析,確定碳材料的濃度或含量.同時可利用透射電鏡、原子力顯微鏡等進(jìn)一步確定碳材料內(nèi)部的精確結(jié)構(gòu),用共聚焦顯微成像儀可觀察其在細(xì)胞內(nèi)的成像情況,為將其進(jìn)一步應(yīng)用在重大疾病的診斷和治療方面提供理論依據(jù).另外,對于現(xiàn)代分析化學(xué)中單細(xì)胞實時分析、單分子檢測等前沿技術(shù),可以專題的形式介紹給學(xué)生.最后,還可以讓學(xué)生通過圖書館的網(wǎng)絡(luò)資源(如中文的CNKI和英文的WebofScience)追蹤相關(guān)領(lǐng)域的最新動態(tài),這樣不僅為課堂注入了新鮮血液,而且能激發(fā)學(xué)生探索科學(xué)的興趣,有利于創(chuàng)新能力的培養(yǎng).
2.3強化實驗環(huán)節(jié)
“分析化學(xué)”是一門以實驗為基礎(chǔ)的學(xué)科,實驗教學(xué)起著課堂教學(xué)不可替代的特殊作用,它不僅能使學(xué)生驗證和鞏固理論知識,而且能培養(yǎng)學(xué)生觀察、分析和解決問題的能力,養(yǎng)成嚴(yán)謹(jǐn)、細(xì)致、實事求是的科學(xué)態(tài)度.因此,如何使學(xué)生的實驗效率最大化,用“心”體會實驗內(nèi)容,一直是“分析化學(xué)”教育工作者長期以來不斷追求的目標(biāo).最近幾年,有關(guān)實驗教學(xué)的改革如火如荼,筆者所在的學(xué)校也積極響應(yīng)號召,針對“分析化學(xué)”實驗教學(xué)進(jìn)行改革.
1)在實驗內(nèi)容的安排上,保留具有代表性的經(jīng)典實驗,通過這些實驗的練習(xí),使學(xué)生規(guī)范地掌握基礎(chǔ)實驗的分析方法和操作要領(lǐng).除此之外,增加一些與實際生活有緊密聯(lián)系的綜合設(shè)計性實驗,內(nèi)容的選擇注重各專業(yè)的通用性,如食醋中總酸度的測定、日用衛(wèi)生紙中熒光增白劑的檢測,并讓學(xué)生自行提供樣品.這些實驗很好地鍛煉了學(xué)生在文獻(xiàn)檢索、實驗方案設(shè)計、樣品前處理、儀器操作及用計算機軟件處理數(shù)據(jù)等方面的能力,大大地提高了學(xué)生的參與感和成就感,全方位地培養(yǎng)學(xué)生的化學(xué)素養(yǎng).
2)在實驗講授和學(xué)生的操作訓(xùn)練方面,摒棄教師“一切包辦”的理念和“老師講,學(xué)生聽”的單一模式.對于分析天平、滴定管等常規(guī)儀器,在課前預(yù)習(xí)的基礎(chǔ)上,教師對每一項基本操作技能(包括操作規(guī)范、操作要點和技巧、注意事項及影響實驗成敗的關(guān)鍵因素等)邊講邊示范,讓學(xué)生先在感官上對基本操作技能有初步的印象,然后再通過大量的獨立操作練習(xí)得以強化;對于一些涉及到精密貴重儀器的實驗內(nèi)容,可采用“虛擬實驗”的方式,通過圖片、視頻等多媒體仿真動畫教學(xué),將儀器工作原理和實驗過程通過三維虛擬動畫的模式直觀展現(xiàn)出來,教師要適時地對操作中可能出現(xiàn)的問題進(jìn)行講解與引導(dǎo),盡可能提示操作可能出錯的地方以及出錯所導(dǎo)致的不良結(jié)果,增強學(xué)生的感性認(rèn)識,減少實驗中由于操作不當(dāng)?shù)仍斐傻牟槐匾膿p失和浪費.
2.4科學(xué)評價學(xué)生成績
要培養(yǎng)適應(yīng)社會發(fā)展需要的多元化創(chuàng)新人才,必須要有科學(xué)的評價方式.基于此,要改變以“考試分?jǐn)?shù)論英雄”的做法,強化對學(xué)習(xí)過程、學(xué)習(xí)能力的評價,構(gòu)建多元評價體系.筆者在授課過程中均采用結(jié)構(gòu)評分來組成課程的總成績,即總成績=平時成績(10%)+實驗成績(30%)+期末考試成績(60%)綜合考察學(xué)生學(xué)習(xí)情況,其中平時成績改變以往所用的點名或簽到次數(shù)計算的方式,而是通過對學(xué)生在課前預(yù)習(xí)、隨堂練習(xí)、課堂討論及課后復(fù)習(xí)的總體表現(xiàn)來確定;實驗成績采用綜合評定標(biāo)準(zhǔn),包括預(yù)習(xí)報告、實驗操作、實驗報告、紀(jì)律清潔四部分,學(xué)生編造實驗數(shù)據(jù)及結(jié)果的不良風(fēng)氣得以糾正.實踐證明,這種成績評定方式有利于調(diào)動學(xué)生學(xué)習(xí)的主動性,激發(fā)其學(xué)習(xí)熱情,真實地反映了學(xué)生對“分析化學(xué)”課程“三基”知識的掌握情況,最終達(dá)到提高教學(xué)質(zhì)量的目的.
3結(jié)語
堿基的組成和排列順序不同是DNA核苷酸之間存在差別的主要原因,因此,研究DNA分子中堿基的電化學(xué)性質(zhì)也具有十分重要的意義。本文僅對DNA鏈中的堿基在單壁碳納米管復(fù)合聚吖啶橙(SWNTs/POAO)電極上的電化學(xué)行為進(jìn)行研究。
(一)堿基對的氧化現(xiàn)象SWNTs/POAO電極既具有較大的比表面積大的π電子體系及大量的活性電位特點,又具有導(dǎo)電聚合物地性能。因此,在SWNTs/POAO電極上,嘌呤堿基和嘧啶堿基的氧化電位都隨著其結(jié)構(gòu)環(huán)系上的取代基增多而產(chǎn)生反向移動,且氧化的峰電流會隨著濃度增加而出現(xiàn)線性增長。由于嘌呤堿基是由嘧啶和咪唑酬和而成的環(huán)系,多π芳雜環(huán)系和缺π芳雜環(huán)系都在其結(jié)構(gòu)中存在,所以鳥嘌呤(GUA)和腺嘌呤(ADE)容易發(fā)生氧化,且氧化電流較大;而嘧啶堿基結(jié)構(gòu)中只有缺π芳雜環(huán),致使其比嘌呤堿基的氧化電位較正,氧化電流較小。由上所述,可以得出嘧啶堿基電氧化反應(yīng)的靈敏度比嘌呤堿基低的結(jié)論。
(二)嘌呤堿基氧化過程分析以ADE和GUA為研究對象,分別分析研究了其在不同電極的反應(yīng)(見圖2)。在圖中可以發(fā)現(xiàn),只有嘌呤堿基對的氧化電流峰,而沒有還原峰,由此可以得知嘌呤堿基的電極反應(yīng)是不可逆的過程。在圖中還可以看出,ADE和GUA的氧化峰電流在GCE(玻碳電極)和POAO(聚吖啶橙電極)上基本相同且都較?。欢赟WNTs修屎電極上比在GCE上有明顯增加,這表明碳單壁納米管增加了GCE電極的有效面積,且其自身帶有的—COOH、—OH基團(tuán)給電極提供了更多的反應(yīng)點,催化了GUA、ADE的反應(yīng),峰電流明顯增大。而在SWNTs/POAO電極上,嘌呤堿基的氧化電流增加更加明顯。
二、DNA堿基與金屬離子的相互作用
脫氧核糖核酸與金屬離子的相互作用,主要有其對金屬離子的吸附作用以及核糖核酸上特點結(jié)合點與金屬離子發(fā)生配位作用。本文僅對DNA嘧啶堿基與汞、銀離子的相互作用進(jìn)行分析。
(一)汞離子與胸腺嘧啶的相互作用汞離子與DNA的相互作用在1952年時就已經(jīng)被Katz發(fā)現(xiàn),但其觀點是汞離子與DNA鏈中的磷酸骨架發(fā)生了互相作用,到后來Thomas用紫外光譜證實汞離子是與DNA中的堿基發(fā)生作用。在這個發(fā)現(xiàn)之后,Katz于1963年又提出了T-Hg-T的假設(shè),這個假設(shè)內(nèi)容是汞離子與T堿基是以1:2的比例形成新配合物。近年來,日本人Ono等人通過溶解曲線、質(zhì)譜以及核磁共振等手段進(jìn)一步證實了T-Hg-T的假設(shè)[2]。由于有毒性是汞離子的具備的特點,利用DNA能夠與汞離子結(jié)合發(fā)生反應(yīng)的特性,可以來進(jìn)行環(huán)境汞離子含量的檢測。
(二)核糖核酸與胞嘧啶的相互作用銀離子與胞嘧啶的相互作用是在2002年才由Tanaka小組開始研究,他們通過研究銀離子與人工合成DNA雙鏈(含有嘧啶(Pyridine)修飾堿基形成的P-P錯配)發(fā)生特異性結(jié)合的現(xiàn)象,證實了銀離子與嘧啶反應(yīng)能夠形成穩(wěn)定的P-Ag-P結(jié)構(gòu)。2008年,One小組提出了銀離子可以與胞嘧啶形成穩(wěn)定的C-Ag-C結(jié)構(gòu),并通過變溫紫外的研究手段證實了銀離子具有能夠使錯配的DNA雙鏈更加穩(wěn)定。根據(jù)銀離子的這種特性,可以將其設(shè)計成分子信標(biāo),應(yīng)用在醫(yī)學(xué)診斷、生物工程研究等各個領(lǐng)域。
三、結(jié)語
BrukerAV-300,AV-500型核磁共振光譜儀;X4型數(shù)字顯示顯微熔點測定儀(溫度未校正);Agilent1100LC/MSDSL;LABCONCO冷凍干燥儀;JASCOP-1020旋光測定儀半制備型高效液相色譜儀Waters600型;檢測器Waters2487紫外雙波長檢測器;Agilent-1100高效液相色譜儀;柱色譜材料為硅膠(200-300目)、RP-C18(YMC;12nm)及SephadexLH-20(AmershamBiosciences);柱色譜試劑均為分析純,高效液相色譜試劑均為色譜純。
白芷根于200403采自江蘇省鹽城市洋馬鎮(zhèn),經(jīng)江蘇省中國科學(xué)院植物研究所袁昌齊研究員鑒定,憑證標(biāo)本現(xiàn)存放于江蘇省中國科學(xué)院植物研究所標(biāo)本館內(nèi)。
2提取與分離
白芷根(38kg)用95%的乙醇提取3次,合并提取液,減壓濃縮至無醇味。提取液依次用石油醚、醋酸乙酯萃取,剩余部分為水部分。將水部分上樣于D101大孔樹脂柱,水-乙醇梯度洗脫,分為6個部分。其中50%洗脫部分分別進(jìn)行硅膠柱層析,氯仿-甲醇(10∶1~7∶3)梯度洗脫,各流分采用薄層或高效液相檢識,合并相類似組分,反復(fù)反相柱層析分離,凝膠純化,得到6個化合物。
3結(jié)構(gòu)鑒定
3.1化合物1
白色無定形粉末(凍干),mp170~172℃,[α]21.7D=-52.40(c=0.065甲醇:水=40:60),紫外燈365,254nm下均顯示藍(lán)綠色熒光。ESI-MSm/z:509[M+Na]+,示其分子量為486,結(jié)合1H-NMR,13C-NMR譜數(shù)據(jù)推斷分子式為C21H26O13?;衔锏?H-NMR,13C-NMR,HMQC及HMBC譜數(shù)據(jù)詳見表1。綜合各譜數(shù)據(jù)及與文獻(xiàn)[1]對照鑒定化合物為7-O-β-D-Apiofuranosyl-(16)-β-D-Glucopyranosyl-Scopoletin(xeroboside)。表1化合物1的1H-NMR,13C-NMR,HMQC及HMBC譜數(shù)據(jù)(略)
3.2化合物2
白色無定形粉末(凍干),[α]21.7D=-55.20(c=0.065甲醇∶水=40∶60),紫外燈365nm及254nm下均顯示藍(lán)綠色熒光,ESI-MSm/z:495[M+Na]+,示其分子量為472,結(jié)合1H-NMR,13C-NMR譜數(shù)據(jù)推斷分子式為C20H24O13。化合物的1H-NMR,13C-NMR,HMQC及HMBC譜數(shù)據(jù)見表2。綜合以上各譜數(shù)據(jù)及與已知文獻(xiàn)[2]對照鑒定化合物為aesculetin-6-O-β-D-apiofuranosyl-(16)-O-β-D-glucopyranoside。
3.3化合物3白色無定形粉末(氯仿-甲醇),mp207℃,[α]21.7D=+47.75(c=0.07甲醇∶水=40∶60),紫外燈365,254nm下均顯示藍(lán)色熒光。ESI-MSm/z∶407[M+Na]+示其分子量為384,結(jié)合1H-NMR,13C-NMR譜數(shù)據(jù)推斷分子式為C17H20O10?;衔锏?H-NMR,13C-NMR,COSY,HMQC及HMBC譜數(shù)據(jù)詳見表3。綜合各譜數(shù)據(jù)[3]鑒定化合物為tomenin。表2化合物2的1H-NMR,13C-NMR,COSY,HMQC及HMBC譜數(shù)據(jù)(略)表3化合物3的1H-NMR,13C-NMR,COSY,HMQC及HMBC譜數(shù)據(jù)(略)
3.4化合物4
白色無定形粉末(凍干),mp140~141℃,[α]19.4d=-52.30(c=0.06甲醇∶水=40∶60),紫外燈365及254nm下均顯示藍(lán)色熒光,結(jié)合1H-NMR,13C-NMR譜數(shù)據(jù)推斷分子式為C16H18O9。1H-NMR(Pyridine-d5500MHz)δ:6.27(1H,d,J=9.5Hz,3-H),7.56(1H,d,J=9.5Hz,4-H),7.62(1H,s,5-H),6.90(1H,s,8-H),3.70(3H,s,OCH3),5.65(1H,d,J=7.1Hz,1-H-Glc)。綜合以上數(shù)據(jù)及與已知文獻(xiàn)[4]對照鑒定化合物為isoscopolin。
3.5化合物5
白色無定形粉末(凍干),[α]21.7D=-55.20(c=0.065甲醇∶水=40∶60),ESI-MSm/z:455[M+Na]+,示其分子量為432,結(jié)合1H-NMR,13C-NMR譜數(shù)據(jù)推斷分子式為C19H28O11。1H-NMR(Pyridine-d5500MHz)δ:7.07(2H,d,J=8.5Hz,3-H和5-H),7.19(2H,d,J=8.6Hz,2-H和6-H),2.96(2H,t,J=7.4Hz,β-H),4.34(1H,dd,J=7.5,11.2Hz,3''''a-α),3.88(1H,dd,J=7.4,11.2Hz,3''''a-α),4.82(1H,d,J=7.1Hz,1-H-Glc),5.75(1H,d,J=2.6Hz,1-H-Api)。13C-NMR(Pyridine-d5125MHz)δ:129.53(C-1),130.50(C-2),116.13(C-3),157.23(C-4),116.13(C-5),130.50(C-6),71.12(C-α),35.88(C-β),104.58(C-1-Glc),74.95(C-2-Glc),78.45(C-3-Glc),71.12(C-4-Glc),77.08(C-5-Glc),68.87(C-6-Glc),111.07(C-1-Api),77.74(C-2-Api),80.37(C-3-Api),75.00(C-4-Api),65.48(C-5-Api)。綜合以上數(shù)據(jù)及與文獻(xiàn)[5]對照鑒定化合物為OsmanthusideH。
4結(jié)果與討論
前人從茜草科植物山石榴Xeromphisspinosa[1]以及Xeromphisobovata[6]中分到過此化合物1,故此次為首次從傘形科中分離得到。但化合物的熔點有文獻(xiàn)[1]報道為238~234℃,有文獻(xiàn)[2]報道為192~197℃,而本次實驗測得的熔點為170~172℃,具體原因有待進(jìn)一步確定。
前人從忍冬科植物L(fēng)oniceragracilipes[3]中分得化合物2,但是只報道了1H-NMR,13C-NMR譜數(shù)據(jù),且C-6和C-7的歸屬顛倒了。本文通過對其進(jìn)行HSQC,HMBC等二維譜的研究,糾正了前人的錯誤,豐富了該化合物的波譜數(shù)據(jù)。
日本學(xué)者Hasegawa[3]最早從薔薇科植物Prunustomentosa中分離得到化合物3,但沒有報道核磁數(shù)據(jù),以后未見此化合物的報道。本文完善了該化合物的核磁數(shù)據(jù),并且用二維譜進(jìn)行了全歸屬,豐富了該化合物的波譜數(shù)據(jù),并首次報道了此化合物的旋光值。
化合物6在自然界植物中分布廣泛,但在傘形科植物中此類化合物較少見。
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在初中化學(xué)教材中,基本概念幾乎每節(jié)都有,而化學(xué)概念是學(xué)習(xí)化學(xué)必須掌握的基礎(chǔ)知識,準(zhǔn)確地理解概念對于學(xué)好化學(xué)是十分重要的。初中學(xué)生的閱讀和理解能力都比較差,因此,教師在教學(xué)過程中講清概念,把好這一關(guān)是非常重要和必要的。
一、講清概念中關(guān)鍵的字和詞
為了深刻領(lǐng)會概念的含義,教師不僅要注意對概念論述時用詞的嚴(yán)密性和準(zhǔn)確性,同時還要及時糾正某些用詞不當(dāng)及概念認(rèn)識上的錯誤,這樣做有利于培養(yǎng)學(xué)生嚴(yán)密的邏輯思維習(xí)慣。
例如,在講“單質(zhì)”與“化合物”這兩個概念時,一定要強調(diào)概念中的“純凈物”三個字。因為單質(zhì)或化合物首先應(yīng)是一種純凈物,即是由一種物質(zhì)組成的,然后再根據(jù)它們組成元素種類的多少來判斷其是單質(zhì)或者是化合物,否則學(xué)生就容易錯將一些物質(zhì)如金剛石、石墨的混合物看成是單質(zhì)(因它們就是由同種元素組成的物質(zhì)),同時又可誤將食鹽水等混合物看成是化合物(因它們就是由不同種元素組成的物質(zhì))。
又如在初中教材中,酸的概念是“電解質(zhì)電離時所生成的陽離子全部是氫離子的化合物叫做酸?!逼渲械摹叭俊倍直闶沁@個概念的關(guān)鍵了。因為有些化合物如NaHSO4,它在水溶液中電離是既有陽離子H+產(chǎn)生,但也有另一種陽離子Na+產(chǎn)生,陽離子并非“全部”都是H+,所以它不能叫做酸。因此在講酸和堿的定義時,均要突出“全部”二字,以區(qū)別酸與酸式鹽、堿與堿式鹽。
二、剖析概念,加深理解
對一些含義比較深刻,內(nèi)容又比較復(fù)雜的概念進(jìn)行剖析、講解,以幫助學(xué)生加深對概念的理解和掌握。
如“溶解度”概念一直是初中化學(xué)的一大難點,不僅定義的句子比較長,而且涉及的知識也較多,學(xué)生往往難于理解。因此在講解過程中,若將組成溶解度的四句話剖析開來,效果就大不一樣了。其一,強調(diào)要在一定溫度的條件下;其二,指明溶劑的量為100g;其三,一定要達(dá)到飽和狀態(tài);其四,指出在滿足上述各條件時,溶質(zhì)所溶解的克數(shù)。這四個限制性句式構(gòu)成了溶解度的定義,缺一不可。
又如在學(xué)習(xí)“電解質(zhì)”概念時,學(xué)生往往容易將“電解質(zhì)”與“非電解質(zhì)”,甚至同金屬的導(dǎo)電性混淆在一起,導(dǎo)致學(xué)習(xí)中的誤解。因此教師在講解時,可將“電解質(zhì)”概念剖析開來,強調(diào)能被稱為電解質(zhì)的物質(zhì)①一定是化合物;②該化合物在一定條件下有導(dǎo)電性;③條件是指在溶液中或熔化狀態(tài)下,二者居一即可,所以概念中用“或”不能用“和”。如NaCl晶體雖然不導(dǎo)電,但①它是化合物;②NaCl在水溶液中或熔化狀態(tài)下都能導(dǎo)電,所以NaCl是電解質(zhì)。而NaCl溶液和Cu絲雖然能夠?qū)щ?,但前者是混合物,后者是單質(zhì),所以它們既不是電解質(zhì)也不是非電解質(zhì)。在教學(xué)中若將概念這樣逐字逐句剖析開來講解,既能及時糾正學(xué)生容易出現(xiàn)的誤解,又有抓住特征,使一個概念與另一個概念能嚴(yán)格區(qū)分開來,從而使學(xué)生既容易理解,又便于掌握。
三、正反兩方,講清概念
有些概念,有時從正面講完之后,再從反面來講,可以使學(xué)生加深理解,不致混淆。
一、造成分化的原因
(一)缺乏學(xué)習(xí)數(shù)學(xué)的興趣和學(xué)習(xí)意志薄弱是造成分化的主要內(nèi)在心理因素。
對于初中學(xué)生來說,學(xué)習(xí)的積極性主要取決于學(xué)習(xí)興趣和克服學(xué)習(xí)困難的毅力。筆者對四處初中的抽樣調(diào)查表明,284名被調(diào)查學(xué)生中,對學(xué)習(xí)數(shù)學(xué)有興趣的占51%,其中有直接興趣的47人,占15%;有間接興趣的85人,占30%;原來不感興趣,后因更換老師等原因而產(chǎn)主興趣的17人,占6%;對數(shù)學(xué)不感興趣或興趣軟弱的占49%,其中直接不感興趣的20人,占7%,原來有興趣,后來興趣減退的118人,占42%。調(diào)查中還發(fā)現(xiàn),學(xué)習(xí)數(shù)學(xué)興趣比較淡薄的學(xué)生數(shù)學(xué)學(xué)習(xí)成績也比較差,學(xué)習(xí)成績與學(xué)習(xí)興趣有著密切的聯(lián)系。
學(xué)習(xí)意志是為了實現(xiàn)學(xué)習(xí)目標(biāo)而努力克服困難的心理活動,是學(xué)習(xí)能動性的重要體現(xiàn)。學(xué)習(xí)活動總是與不斷克服學(xué)習(xí)困難相聯(lián)系的,與小學(xué)階段的學(xué)習(xí)相比,初中數(shù)學(xué)難度加深,教學(xué)方式的變化也比較大,教師輔導(dǎo)減少,學(xué)生學(xué)習(xí)的獨立性增強。在中小銜接過程中有的學(xué)生適應(yīng)性強,有的學(xué)生適應(yīng)性差,表現(xiàn)出學(xué)習(xí)情感脆弱、意志不夠堅強,在學(xué)習(xí)中,一遇到困難和挫折就退縮,甚至喪失信心,導(dǎo)致學(xué)習(xí)成績下降。
(二)掌握知識、技能不系統(tǒng),沒有形成較好的數(shù)學(xué)認(rèn)知結(jié)構(gòu),不能為連續(xù)學(xué)習(xí)提供必要的認(rèn)知基礎(chǔ)。
相比小學(xué)數(shù)學(xué)而言,初中數(shù)學(xué)教材結(jié)構(gòu)的邏輯性、系統(tǒng)性更強。首先表現(xiàn)在教材知識的銜接上,前面所學(xué)的知識往往是后邊學(xué)習(xí)的基礎(chǔ);其次還表現(xiàn)在掌握數(shù)學(xué)知識的技能技巧上,新的技能技巧形成都必須借助于已有的技能技巧。因此,如果學(xué)生對前面所學(xué)的內(nèi)容達(dá)不到規(guī)定的要求,不能及時掌握知識,形成技能,就造成了連續(xù)學(xué)習(xí)過程中的薄弱環(huán)節(jié),跟不上集體學(xué)習(xí)的進(jìn)程,導(dǎo)致學(xué)習(xí)分化。
(三)思維方式和學(xué)習(xí)方法不適應(yīng)數(shù)學(xué)學(xué)習(xí)要求。
初二階段是數(shù)學(xué)學(xué)習(xí)分化最明顯的階段。一個重要原因是初中階段數(shù)學(xué)課程對學(xué)生抽象邏輯思維能力要求有了明顯提高。而初二學(xué)生正處于由直觀形象思維為主向以抽象邏輯思維為主過渡的又一個關(guān)鍵期,沒有形成比較成熟的抽象邏輯思維方式,而且學(xué)生個體差異也比較大,有的抽象邏輯思維能力發(fā)展快一些,有的則慢一些,因此表現(xiàn)出數(shù)學(xué)學(xué)習(xí)接受能力的差異。除了年齡特征因素以外,更重要的是教師沒有很好地根據(jù)學(xué)生的實際和教學(xué)要求去組織教
二、減少學(xué)習(xí)分化的教學(xué)對策
(一)培養(yǎng)學(xué)生學(xué)習(xí)數(shù)學(xué)的興趣
興趣是推動學(xué)生學(xué)習(xí)的動力,學(xué)生如果能在學(xué)習(xí)數(shù)學(xué)中產(chǎn)生興趣,就會形成較強的求知欲,就能積極主動地學(xué)習(xí)。培養(yǎng)學(xué)生數(shù)學(xué)學(xué)習(xí)興趣的途徑很多,如讓學(xué)生積極參與教學(xué)活動,并讓其體驗到成功的愉悅;創(chuàng)設(shè)一個適度的學(xué)習(xí)競賽環(huán)境;發(fā)揮趣味數(shù)學(xué)的作用;提高教師自身的教學(xué)藝術(shù)等等。
(二)教會學(xué)生學(xué)習(xí)
有一部分后進(jìn)生在數(shù)學(xué)上費工夫不少,但學(xué)習(xí)成績總不理想,這是學(xué)習(xí)不適應(yīng)性的重要表現(xiàn)之一。教師要加強對學(xué)生的學(xué)習(xí)指導(dǎo),一方面要有意識地培養(yǎng)學(xué)生正確的數(shù)學(xué)學(xué)習(xí)觀念;另一方面是在教學(xué)過程中加強學(xué)法指導(dǎo)和學(xué)習(xí)心理輔導(dǎo)。
(三)在數(shù)學(xué)教學(xué)過程中加強抽象邏輯思維的訓(xùn)練和培養(yǎng)。
要針對后進(jìn)生抽象邏輯思維能力不適應(yīng)數(shù)學(xué)學(xué)習(xí)的問題,從初一代數(shù)教學(xué)開始就加強抽象邏輯能力訓(xùn)練,始終把教學(xué)過程設(shè)計成學(xué)生在教師指導(dǎo)下主動探求知識的過程。這樣學(xué)生不僅學(xué)會了知識,還學(xué)到了數(shù)學(xué)的基本思想和基本方法,培養(yǎng)了學(xué)生邏輯思維能力,為進(jìn)一步學(xué)習(xí)奠定較好的基礎(chǔ)。
(四)建立和諧的師生關(guān)系
論文摘要介紹掃描探針顯微鏡教學(xué)演示軟件。該軟件將CAI技術(shù)和SPM技術(shù)結(jié)合在一起,主要運用文字說明,靜態(tài)圖像,三維動畫,模擬仿真等方法,對SPM的初學(xué)者進(jìn)行SPM的原理介紹和使用培訓(xùn),可以大大縮短他們的學(xué)習(xí)時間,并能使其在較短的時間內(nèi)對SPM有一個較為深入和全面的了解。
ApplicationofScanningProbeMicroscopeinMachineryTeaching//YueRui,ZhuWengsheng
AbstractThissoftwarecombinesCAItechnologywithSPMtechnologyandmainlusesmethodsoftextexplanation,three-dimensionanimationaswellasmathematicalsimulationtotrainthebeginnersofSPM.Afterusingthesoftware,thebeginnerscanquicklygetdeepandwholeknowledgeofSPM.
KeywordsscanningtunnellingmicroscopeofNANOVISUAtape(STM);Pictureprocessing:ScanningProbeMicroscope(SPM);AtomicForceMicroscope;teachingeffictiveness
Author’saddress
1.GraduateSchool,NanjingAgricultureUniversity,210095,Nanjing,China
2.LianshuiVocationEducationCentre,223400,Lianshui,Jiangsu,China
1引言
1982年,IBM瑞士蘇黎士實驗室的葛·賓尼(G.Binning)和海·羅雷爾(H.Rohrer)研制出世界上第一臺掃描隧道顯微鏡(ScanningTunnellingMicroscope,簡稱STM).STM使人類第一次能夠?qū)崟r地觀察單個原子在物質(zhì)表面的[1]排列狀態(tài)和與表面電子行為有關(guān)的物化性質(zhì),在表面科學(xué)、材料科學(xué)、生命科學(xué)等領(lǐng)域的研究中有著重大的意義和廣泛的應(yīng)用前景,被國際科學(xué)界公認(rèn)為20世紀(jì)80年代世界十大科技成就之一。為表彰STM的發(fā)明者們所作出的杰出貢獻(xiàn),1986年賓尼和羅雷爾被授予諾貝爾物理學(xué)獎金.NanoVisual,教學(xué)型掃描隧道顯微鏡可在機械教學(xué)中發(fā)揮良好作用。
2教學(xué)型NANOVISUAL掃描隧道顯微鏡
NanoVisual是針對高等院校實驗課程和中學(xué)素質(zhì)教育而設(shè)計的教學(xué)型掃描隧道顯微鏡。為了適應(yīng)教學(xué)要求,NanoVisual去繁就簡,掃描部件高度集成,操作流程簡練便捷,具備工作原理清晰、穩(wěn)定性優(yōu)越等特點。在線控制軟件和后處理軟件用戶界面友好,輔以生動的教學(xué)課件,引導(dǎo)學(xué)生輕松掌握掃描隧道顯微鏡的原理和基本操作方法。[2]NanoVisual掃描隧道顯微鏡具有一定的可擴充性,可以根據(jù)需要增加某些功能部件,從而具備一定科研能力。
3主要性能
掃描圖像BMP/TIFF全兼容文件格式,當(dāng)前全部工作環(huán)境參數(shù)同步保存?;赪indowsXP/2000/9X的在線控制軟件和后處理分析軟件,簡約化的掃描隧道顯微鏡探頭,初學(xué)者只需經(jīng)簡單的培訓(xùn)即可掌握操作方法,具有I-V曲線等測量分析功能,具有圖形刻蝕模式和矢量掃描模式的納米加工技術(shù),樣品尺寸直徑30mm、厚度10mm。主控制系統(tǒng)采用德州儀器(TI)32位數(shù)字信號處理器(DSP),每秒可實現(xiàn)高達(dá)10億次32位運算。主控制系統(tǒng)采用10M/100M快速以太網(wǎng)(FastEthernet10/100)與計算機連接。[3]全數(shù)字控制,系統(tǒng)狀態(tài)、儀器類型、掃描器和探針架參數(shù)智能識別和控制。具針尖表征及圖像重建功能(針尖形貌估計/圖像重建/用已知針尖重建圖像)。按功能模塊劃分的縱向插卡式結(jié)構(gòu),便于日后系統(tǒng)維護(hù)和升級。
3.1.技術(shù)指標(biāo)
1)軟件系統(tǒng):基于WindowsXP/2000/9X的在線控制軟件和后處理軟件。
2)系統(tǒng)功能:掃描隧道顯微鏡(STM)。納米加工和操縱,包括圖形刻蝕模式和矢量掃描模式。
3)參數(shù)性能:電流檢測靈敏度:≤10pA。圖像分辨率:128X128,256X256,512X512,1024X1024。掃描角度:0~360°。掃描頻率:0.1~100Hz。預(yù)置隧道電流:0.1~10nA。偏置電壓:-2~+2V。
4)電子控制系統(tǒng):8通道16-bitDAC,建立時間1.5微秒。通信接口:10M/100M快速以太網(wǎng)(FastEthernet10/100)接口。
5)機械性能:樣品尺寸:最大可達(dá)直徑30mm,厚度10mm。全自動步進(jìn)電機控制進(jìn)樣系統(tǒng)。
4掃描隧道顯微鏡(STM)[1,2]原理分析
掃描隧道顯微鏡(STM)的基本原理是利用量子理論中的隧道效應(yīng)。將原子線度的極細(xì)探針和被研究物質(zhì)的表面作為兩個電極,當(dāng)樣品與針尖的距離非常接近時(通常小于1nm),在外加電場的作用下,電子會穿過兩個電極之間的勢壘流向另一電極。這種現(xiàn)象即是隧道效應(yīng)。隧道電流I是電子波函數(shù)重疊的量度,與針尖和樣品之間距離S和平均功函數(shù)Φ有關(guān).[4]。
隧道電流強度對針尖與樣品表面之間距非常敏感,如果距離S減小0.1nm,隧道電流I將增加一個數(shù)量級,因此,利用電子反饋線路控制隧道電流的恒定,并用壓電陶瓷材料控制針尖在樣品表面的掃描,則探針在垂直于樣品方向上高低的變化就反映出了樣品表面的起伏。
將針尖在樣品表面掃描時運動的軌跡直接在熒光屏或記錄紙上顯示出來,就得到了樣品表面態(tài)密度的分布或原子排列的圖象[5]。這種掃描方式可用于觀察表面形貌起伏較大的樣品,且可通過加在z向驅(qū)動器上的電壓值推算表面起伏高度的數(shù)值,這是一種常用的掃描模式。對于起伏不大的樣品表面,可以控制針尖高度守恒掃描,通過記錄隧道電流的變化亦可得到表面態(tài)度的分布。這種掃描方式的特點是掃描速度快,能夠減少噪音和熱漂移對信號的影響,但一般不能用于觀察表面起伏大于1nm的樣品[6]。
是利用SPM進(jìn)行納米加工的客觀依據(jù)。同時也說明,SPM不是簡單用來成像的顯微鏡,而是可以用于在原子、分子尺度進(jìn)行加工和操作的工具。
5教學(xué)課程安排
1)第一周:原理簡介與上機模擬。課后著手資料定向查詢并準(zhǔn)備實驗報告。
2)第二周:演示與學(xué)生實驗。先用鐵絲作探針練習(xí),熟練后再用鉑銥合金絲制作針。指定樣品(光柵)的測量。
3)第三周:改變電壓及掃描角度重新掃描,進(jìn)行圖像處理。課后資料定向查詢并完成實驗報告。報告內(nèi)容:心得、體會及建議,STM在某個領(lǐng)域的應(yīng)用或STM儀器的某部件的原理。
4)第四周:宣講實驗報告,每人15分鐘(包括5分鐘提問)。
6圖像處理
1)平滑處理:將像素與周邊像素做加權(quán)平均。
2)斜面校正:選擇斜面的一個頂點,以該頂點為基點,現(xiàn)行增加該圖像的所有像數(shù)值,可多次操作。
3)中值濾波:傅立葉變換。對圖像的周期性很敏感,在做原子圖像掃描時很有用.
7結(jié)束語
在線控制軟件和后處理軟件用戶界面友好,輔以生動的教學(xué)課件,引導(dǎo)學(xué)生輕松掌握掃描隧道顯微鏡的原理和基本操作方法.作為一種CAI軟件,本軟件界面好,操作簡便。采用文字、圖形、三維動畫等方式將SPM這一尖端復(fù)雜儀器的原理和使用與計算機輔助教學(xué)這一形式結(jié)合起來,經(jīng)部分人員試用后,效果明顯,反應(yīng)良好??纱蟠笤黾硬僮髡邔W(xué)習(xí)SPM的興趣,并能起到事半功倍的效果,提高課堂教學(xué)效果。不足的是AFM和SNOM的數(shù)學(xué)模型還有待進(jìn)一步研究。
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現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明,花錨屬植物的主要化學(xué)成分為(口山)酮及(口山)酮苷類、裂環(huán)烯醚萜類、三萜類、黃酮類以及一些生物堿類化合物等。
1.1(口山)酮及(口山)酮苷孫洪發(fā)等[4]從橢圓葉花錨中得到五種(口山)酮成分,分別為1,7-二羥基-2,3,4,5-四甲氧基(口山)酮,1,5-二羥基-2,3,7-三甲氧基(口山)酮,1,2-二羥基-3,4,5-三甲氧基(口山)酮,1,5-二羥基-2,3-二甲氧基(口山)酮和1,7-二羥基-2,3-二甲氧基(口山)酮。
孫洪發(fā)等[5]又從橢圓葉花錨中得到3種(口山)酮苷成分,分別為1-o-[β-D-木吡喃糖-(1-6)-β-D-葡萄吡喃糖]-2,3,5,7-四甲氧基(口山)酮,1-o-[β-D-木吡喃糖-(1-6)-β-D-葡萄吡喃糖]-2,3,5-三甲氧基(口山)酮和1-o-[β-D-木吡喃糖-(1-6)-β-D-葡萄吡喃糖[-2,3,4,5-四甲氧基(口山)酮。其中1-o-[β-D-木吡喃糖-(1-6)-β-D-葡萄吡喃糖]-2,3,5,7-四甲氧基(口山)酮(花錨苷)和1-o-[β-D-木吡喃糖-(1-6)-β-D-葡萄吡喃糖[-2,3,5-三甲氧基(口山)酮(去甲氧基花錨苷)為該屬植物抗肝炎的兩種有效成分。
張德等[6]采用元素分析(EA)、核磁共振波譜(NMR)、質(zhì)譜(MS)、紅外光譜(IR)、紫外光譜(UV)、差示掃描量熱(DSC)等分析方法首次從藏藥花錨中分離得到兩種針狀結(jié)晶化合物,分別為1-羥基-3,7,8-三甲氧基(口山)酮(1-h(huán)ydroxy-3,7,8-trimethoxyxanthone)和1,7-二羥基-3,8-二甲氧基((口山))酮(1,7-dihydroxy-3,8-dimethoxyxanthone)。
高潔等[7]從橢葉花錨乙醇提取物醋酸乙酯萃取部分分離得到8個(口山)酮化合物,分別為1,7-二羥基-2,3,5-三甲氧基(口山)酮,1-羥基-2,3,4,7-四甲氧基(口山)酮,1,7-二羥基-2,3,4,5-四甲氧基(口山)酮,1,7-二羥基-2,3-二甲氧基(口山)酮,1,5-二羥基-2,3-二甲氧基(口山)酮,1-羥基-2,3,5-三甲氧基(口山)酮,1-羥基-2,3,4,5-四甲氧基(口山)酮和1-羥基-2,3,5,7-四甲氧基(口山)酮。
1.2其它成分Rodrigaez等[8]從花錨中分離得到了一種的黃酮類葡萄糖苷;高光躍等[9]從橢圓葉花錨全草中測出含有獐牙菜苦苷和當(dāng)藥苷;Dhasmana等[10]從橢圓葉花錨全草中分離得到齊墩果酸和谷甾醇葡萄糖苷;Rodrigaez等[11]從花錨中分離得到了一種二糖酯裂環(huán)烯醚萜。
2藥理活性
花錨為藏蒙藥中治療肝膽系統(tǒng)疾病的常用藥物,其主要分布于我國的、青海、四川、甘肅等地藏民族地區(qū),目前對花錨藥理活性的研究報道較少,有待進(jìn)一步深入研究。
2.1保肝降酶作用張經(jīng)明等[12]采用花錨煎劑(含花錨苷)對CCl4造成的肝損傷模型的研究表明,花錨苷可明顯增加核糖核酸;藥理實驗證明,花錨中的花錨苷和去甲氧基花錨苷具有明顯的保肝作用,可增加核糖核酸,增加肝糖元,促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成,促進(jìn)肝細(xì)胞的再生,加速壞死組織的修復(fù),是該植物抗肝炎的主要有效成分。周富強[13]通過不同劑量西寧花錨對CCl4實驗性肝損傷后肝糖元的含量的研究,發(fā)現(xiàn)西寧花錨對CCl4損傷后小鼠肝糖元的儲存的恢復(fù)有一定的藥效,可顯著提高肝糖元的含量。
馬學(xué)惠等[14]在齊墩果酸防治CCl4引起的大鼠急性肝損傷作用的研究中,發(fā)現(xiàn)該藥物能使血清GPT明顯下降,肝內(nèi)甘油三酯積累量減少;同時,能使肝細(xì)胞變性、壞死明顯減輕,糖原蓄積增加,具有明顯的保肝降酶作用。宮新江等[15]的齊墩果酸對環(huán)磷酰胺所致大鼠肝細(xì)胞損傷的保護(hù)作用的研究表明,齊墩果酸能抑制環(huán)磷酰胺所致的肝細(xì)胞上清液ALT,AST及LDH活力升高,肝細(xì)胞MTT值減小,說明齊墩果酸可抗環(huán)磷酰胺所致肝細(xì)胞損傷。
王曉峰等[16]采用原代培養(yǎng)的小鼠肝細(xì)胞,以3H-胸腺嘧啶和3H-亮氨酸摻入的方法,研究經(jīng)齊墩果酸預(yù)處理后的小鼠的肝細(xì)胞DNA和蛋白質(zhì)合成速率的變化,結(jié)果發(fā)現(xiàn)齊墩果酸能促進(jìn)肝細(xì)胞DNA及蛋白質(zhì)合成,且合成速率明顯增高,具有保肝作用。另外王曉峰等[17]報道齊墩果酸在對小鼠肝內(nèi)谷丙轉(zhuǎn)氨酶及谷草轉(zhuǎn)氨酶的直接作用時,小鼠血清樣品與不同濃度的齊墩果酸分別作用后,谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性則顯著降低,說明齊墩果酸對谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性具有明顯抑制作用。
2.2降血糖作用苗德田等[18]研究了齊墩果酸對大鼠血糖的影響,結(jié)果顯示,齊墩果酸對化學(xué)性高血糖模型大鼠有顯著的降血糖作用。柳占彪等[19]用齊墩果酸對高血糖大鼠治療,結(jié)果發(fā)現(xiàn)單一的齊墩果酸具有降低高血糖的作用,同時在血糖降低時肝糖原和血清胰島素均有明顯升高。
2.3抗炎作用戴岳等[20]采用多種實驗性炎癥模型證實齊墩果酸對二甲苯與乙酸引起的小鼠皮膚和腹腔毛細(xì)血管通透性增高及對角叉菜膠等多種致炎物引起的大量足墊腫脹都具有明顯抑制作用。
2.4抗氧化活性肝細(xì)胞膜的脂質(zhì)過氧化是造成肝損傷的重要原因之一,高潔等[7]在研究藏藥花錨中(口山)酮類成分及其抗氧化活性時,從橢葉花錨乙醇提取物醋酸乙酯萃取部分分離得到8個(口山)酮化合物,且該類化合物在一定程度上能顯著抑制Fe2+-Cys誘導(dǎo)大鼠肝微粒體丙二醛的生成,有效降低肝微粒體膜的氧化損傷。因此,具有一定的抗氧化活性。
2.5其他作用橢圓葉花錨的干浸膏可提高單核-巨噬細(xì)胞吞噬功能,具有調(diào)節(jié)體液免疫的作用,使降低的血清溶血素及脾細(xì)胞免疫溶血活性提高到正常水平[21]。另有報道橢圓葉花錨全草的氯仿可溶部分(富含口山酮葡萄糖苷)具有抗阿米巴作用[22]。
3人工栽培
高原野生重要植物資源的持續(xù)發(fā)展必須建立在生物資源可持續(xù)利用和生態(tài)環(huán)境保護(hù)的基礎(chǔ)上,培育地道地產(chǎn)中藏藥材是實現(xiàn)高原地區(qū)中藏藥資源可持續(xù)利用的主要途徑之一,也是保證中藏藥產(chǎn)業(yè)持續(xù)發(fā)展的必然選擇。
3.1人工栽培的重要意義花錨屬與獐牙菜屬植物等同屬于藏茵陳類藥物,被稱為“藏藥中的奇葩”,是治療肝中毒、肝炎的最佳藥物之一。但是這種藥物資源一般生長在人跡罕至的高寒缺氧環(huán)境中,其再生周期較長甚至不能再生,藏茵陳供需矛盾也由此變得越來越突出。
盡管野生橢圓葉花錨在青藏高原地區(qū)分布廣泛,資源較為豐富。但是近十多年來,隨著我國民族醫(yī)藥特別是藏藥事業(yè)的迅速發(fā)展,越來越多的企業(yè)開始投資藏醫(yī)藥領(lǐng)域,橢圓葉花錨的藥用資源需求量快速增加。但是,藏藥產(chǎn)業(yè)一度出現(xiàn)重成品生產(chǎn)輕藥材來源、重開發(fā)輕保護(hù)的問題,造成過度的采挖及收購現(xiàn)象,特別是在植物生長階段的花期大量采收導(dǎo)致資源量銳減,野生植物資源日益枯竭。因此,對作為原料植物藥的橢圓葉花錨進(jìn)行人工栽培的研究具有十分重要的意義。
3.2人工引種栽培為了解決藏茵陳類藥材資源嚴(yán)重短缺的實際問題,中國科學(xué)院西北高原生物研究所經(jīng)過3年的栽培與試驗,成功地解決了以往藏茵陳種子萌發(fā)率低、出苗率低、人工栽培難以成活等關(guān)鍵技術(shù)問題。3種藏茵陳類藥用植物——川西獐牙菜、抱莖獐牙菜和花錨人工種植成功,并通過鑒定。經(jīng)過專家的監(jiān)測和對比分析,這次人工栽培的3種植物,其主要有效成分齊墩果酸和芒果苷的含量基本接近于天然野生資源,川西獐牙菜的有效成分含量甚至顯著高于野生資源,人工條件下栽培藏茵陳類藥用植物的質(zhì)量及其本身的藥用價值完全可以得到保證。隨著青海省產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)的調(diào)整,橢圓葉花錨人工引種栽培技術(shù)的開發(fā)研究,青海省橢圓葉花錨人工種植規(guī)模逐漸擴大。橢圓葉花錨人工引種栽培試驗在該省也初見成效。陳桂琛等[23]對橢圓葉花錨的引種栽培的研究表明,栽培的橢圓葉花錨植株在植株高度、分枝數(shù)量、單株生物量等生長狀況指標(biāo)明顯高于野生植株,其有效化學(xué)成分接近野生狀態(tài)的水平,說明野生橢圓葉花錨的人工栽培是可行的。吉文鶴等[24]運用RP-HPLC建立了花錨中青蘭苷、去甲氧基花錨苷和花錨苷的含量分析方法,為栽培花錨替代野生花錨入藥提供一定的科學(xué)依據(jù)。研究表明,栽培花錨中花錨苷和去甲氧基花錨苷的含量和在野生花錨中的含量相比無明顯差別,可以初步證明栽培花錨可以替代野生花錨入藥。紀(jì)蘭菊等[25]在研究栽培花錨的品質(zhì)能否代替野生花錨入藥時,通過指紋圖譜的相似度分析,得出結(jié)論:同一產(chǎn)地的野生與栽培花錨藥材色譜分離圖疊加比較,顯示了良好的相似度。證明栽培花錨中的主要化學(xué)成分及數(shù)量符合花錨藥材的指紋特征,可以代替野生花錨藥材入藥。
3.3組織培養(yǎng)隨著對花錨屬植物藥用成分不斷深入的研究,藥用潛力的挖掘,該屬植物的需求量大大增加,造成了該屬植物野生資源的日益匱乏且面臨枯竭。該屬植物的人工引種栽培技術(shù)在一定程度上已經(jīng)可行,但是,還需要通過多種途徑來提高對其的培育效率。
藥用植物的組織培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用已有多年的發(fā)展歷史,但還有相當(dāng)多的植物目前尚沒有相應(yīng)的離體培養(yǎng)技術(shù)。目前,花錨屬植物的組織培養(yǎng)技術(shù)至今尚未見成功的報道,仍然是個空缺。因此,建立該屬藥用植物的離體快繁技術(shù)的需求日漸增加,它也是實現(xiàn)高原地區(qū)中藏藥資源可持續(xù)利用的主要途徑之一。
4最佳采集時期
從生物量的角度考慮,花期的生物量高于果期,更高于其他時期。楊慧玲等[26]在研究不同地區(qū)和生長物候期藏藥花錨有效成分齊墩果酸的含量變化實驗中,比較了野生狀態(tài)下不同海拔、栽培條件下不同生長時期花錨的齊墩果酸含量,為確定該藥材的采收時期、不同地區(qū)藥材的質(zhì)量以及栽培地點的選擇提供理論依據(jù)。該研究發(fā)現(xiàn)花錨花期齊墩果酸含量最高,而幼苗期、蕾期和果期都低于花期的含量。因此,花期得到的藥材最多質(zhì)量也最好。
吉文鶴等[24]研究了花錨中去甲氧基花錨苷和花錨苷的含量隨著不同生長期的變化趨勢,為藥材的合理栽培和采收提供科學(xué)依據(jù)。該研究表明,去甲氧基花錨苷和花錨苷含量在營養(yǎng)期含量最高,從6~9月逐漸降低,從抗肝炎活性成分的含量角度考慮,6月份(營養(yǎng)期)為花錨的最佳采收期。
5結(jié)語
花錨屬植物是藏蒙藥中治療肝炎類疾病的常用藥物,全草入藥,具有重要的藥用價值。該屬植物的主要有效成分為(口山)酮及(口山)酮苷、裂環(huán)烯醚萜類、三萜類化合物及其它黃酮苷等,具有抗肝炎、抗氧化活性和降血糖等功效。在我國,該屬植物藥用歷史較長,故具有很高的藥理研究價值,特別是有關(guān)抗肝炎方面的研究顯示出較大的市場潛力,值得進(jìn)一步深入研究;其降血糖作用、抗氧化活性和調(diào)節(jié)體液免疫的藥理活性研究報道較少,這些研究工作都亟待進(jìn)一步的深入;另外對野生植物的過度采挖造成資源貧乏,采用人工的方法達(dá)到該藥物資源的可持續(xù)利用也已成為目前及今后對該屬植物重點研究的目標(biāo)。
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Inova-600型核磁共振儀(中國人民軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院分析中心);BrukerAM-500型核磁共振儀(微量化學(xué)研究所分析中心)ZabspecE型質(zhì)譜儀(軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院分析中心);BuchiR-200型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀;Buchi615中壓液相色譜儀;Waters515型高壓液相色譜儀,Waters2996檢測器;Empower工作站;YMC-PackPh(5μm,250mm×10mm,I.D.)半制備柱;柱層析用硅膠(100~200與200~300目,硅膠H)均為青島海洋化工廠產(chǎn)品;聚酰胺100~200目為浙江省臺州市路橋三甲生化塑料廠產(chǎn)品。
實驗所用材料豆葉霸王(全草)11.5kg為李國強博士于200408間采自我國新疆維吾爾族自治區(qū),全部實驗材料均經(jīng)李國強博士鑒定其學(xué)名,原植物或原生藥憑證標(biāo)本藏于中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物標(biāo)本館(IMD),中國科學(xué)院新疆生物土壤地理研究所植物標(biāo)本館(XJBI),新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)植物標(biāo)本館(XJA)。
2方法與結(jié)果
2.1提取與分離豆葉霸王11.5kg,粉碎成粗粉,先用95%乙醇浸泡24h,然后用10倍量95%乙醇加熱回流提取3次,4h/次,然后再用60%乙醇回流提取3次。濾過,減壓蒸干溶劑,分散于水中,分別用石油醚、氯仿、醋酸乙酯、正丁醇萃取。對低極性部分進(jìn)行了系統(tǒng)分離,得到了7個化合物。
2.2結(jié)構(gòu)鑒定
2.2.1豆甾-4-烯-3-酮(Ⅰ)白色粉末(CHCl3),mp95~96℃,分子式為C29H48O。Libermann-Burchard反應(yīng)陽性;EIMSm/z(%):412(M+,21),271(11),229(32),124(100);1HNMR(600MHz,CDCl3)δ:5.72(1H,s,H-4),1.18(3H,s,Me-19),0.93(3H,d,J=6.0Hz,Me-21),0.86(3H,t,J=7.2Hz,Me-29),0.84(3H,d,J=7.8Hz,Me-26),0.82(3H,d,J=7.8Hz,Me-27),0.73(3H,s,Me-18);13CNMR(150MHz,CDCl3)δ:35.7(C-1),34.0(C-2),199.7(C-3),123.7(C-4),171.7(C-5),32.9(C-6),32.0(C-7),35.6(C-8),53.8(C-9),38.6(C-10),21.0(C-11),39.6(C-12),42.4(C-13),55.9(C-14),24.2(C-15),28.2(C-16),56.0(C-17),12.0(C-18),17.4(C-19),36.1(C-20),18.7(C-21),33.9(C-22),26.1(C-23),45.8(C-24),29.1(C-25),19.8(C-26),19.0(C-27),23.1(C-28),11.9(C-29)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的豆甾-4-烯-3-酮[1]一致,故鑒定為豆甾-4-烯-3-酮。
2.2.2正二十八烷醇(Ⅱ)白色粉末(CHCl3),mp82~83℃,分子式為C28H58O;EIMSm/z(%):392(M-H2O,1),364(1),139(8),125(15),111(28),97(55),83(57),69(42),57(100),55(42);1HNMR(600MHz,CHCl3)δ:3.64(2H,t,J=6.6Hz,H-1),1.57(2H,m,H-2),1.25(50H,brs,H-3~H-27),0.88(3H,t,J=7.2Hz,H-28);13CNMR(150MHz,CDCl3)δ:63.1(C-1),31.9(C-2),29.7,29.6,29.5,29.4(C-4~C-26),25.7(C-3),22.7(C-27),14.1(C-28)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的正二十八烷醇[2]一致,故鑒定為正二十八烷醇。
2.2.3正三十二烷醇(Ⅲ)白色粉末(CHCl3),mp88~89℃,分子式為C32H66O;EIMSm/z(%):448(M-H2O,28),420(10),392(15),364(7),139(15),125(25),111(50),97(88),83(100),69(65),55(95);1HNMR(600MHz,CHCl3)δ:3.64(2H,t,J=6.6Hz,H-1),1.57(2H,m,H-2),1.26(58H,brs,H-3~H-31),0.88(3H,t,J=6.6Hz,H-32);13CNMR(150MHz,CDCl3)δ:63.1(C-1),31.9(C-2),29.7,29.6,29.5,29.4(C-4~C-30),25.7(C-3),22.7(C-31),14.1(C-32)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的正三十二烷醇[3]一致,故鑒定為正三十二烷醇。
2.2.4胡蘿卜苷(Ⅳ)白色無定形粉末,mp295~297℃,難溶于氯仿、甲醇,Liebermann-Burchard反應(yīng)和Molish反應(yīng)均為陽性;EI-MS(m/z):414(M+,M-glc,13),396(100),397(85),381(17),329(8),303(10),255(20),213(18),145(25),81(22),69(20)。與胡蘿卜苷對照品混合熔點不下降,薄層層析Rf值。
2.2.5β-谷甾醇(Ⅴ)白色針狀結(jié)晶,mp140~141℃,Liebermann-Burchard反應(yīng)為陽性;EI-MS(m/z):414(M+,100),396(50),381(38),329(40),303(55),255(40),213(43),145(45),81(45),69(35)。與β-谷甾醇對照品混合熔點不下降,薄層層析Rf值與β-谷甾醇一致。
2.2.6紫云英苷(Ⅵ)黃色針狀結(jié)晶,mp170~171℃,鹽酸鎂粉反應(yīng)陽性;1HNMR(400MHz,MeOD)δ:8.00(2H,d,J=8.8Hz,H-2′,6′),6.83(2H,d,J=8.8Hz,H-3′,6′),6.56(1H,d,J=1.2Hz,H-8),6.29(1H,d,J=1.2Hz,H-6),5.20(1H,d,J=6.8Hz,H-1"),3.16~3.71(6H,m,H-2"~6");13CNMR(100MHz,MeOD)δ:156.9(C-2),133.9(C-3),177.9(C-4),161.5(C-5),98.4(C-6),164.6(C-7),93.3(C-8),157.5(C-9),104.1(C-10),121.2(C-1′),130.7(C-2′,6′),160.0(C-4′),114.4(C-3′,5′),102.6(C-1"),74.2(C-2"),76.5(C-3"),69.8(C-4"),76.9(C-5"),61.1(C-6")。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的紫云英苷[4]一致,故鑒定為紫云英苷。
2.2.73-O-[β-D-glucopyranosyl]-quinovicacid(Ⅶ)白色粉末,mp266~268℃,分子式:C36H56O10,Liebermann-Burchard反應(yīng)和Molish反應(yīng)均為陽性,薄層酸水解檢測含有葡萄糖;FAB-MSm/z:649[M+1]+,671[M+Na]+;1HNMR(400MHz,pyridine-d5)δ:5.99(1H,m,H-12),1.12(3H,s,H-23),0.94(3H,s,H-24),0.83(3H,s,H-25),1.08(3H,s,H-26),1.21(3H,d,J=6Hz,H-29),0.79(3H,d,J=6.4Hz,H-30),4.77(1H,d,J=7.6Hz,H-1′);13CNMR(100MHz,pyridine-d5)δ:40.6(C-1),28.0(C-2),90.0(C-3),41.3(C-4),57.0(C-5),19.9(C-6),38.2(C-7),40.7(C-8),48.4(C-9),38.8(C-10),24.6(C-11),130.2(C-12),135.4(C-13),58.1(C-14),27.7(C-15),26.8(C-16),50.0(C-17),56.2(C-18),39.0(C-19),40.3(C-20),31.9(C-21),38.4(C-22),29.3(C-23),18.4(C-24),17.8(C-25),20.2(C-26),181.3(C-27),179.3(C-28),19.5(C-29),22.6(C-30),108.2(C-1′),77.0(C-2′),79.5(C-3′),73.1(C-4′),80.0(C-5′),64.4(C-6′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的3-O-[β-D-glucopyranosyl]quinovicacid[5]一致,故鑒定為3-O-[β-D-glucopyranosyl]-quinovicacid。
3討論
前期的文獻(xiàn)工作表明皂苷類和黃酮類化合物是駝蹄瓣屬植物特征化學(xué)成分,我們的研究結(jié)果也表明了這一點,具有一定的化學(xué)分類學(xué)意義,為將來進(jìn)一步的研究該類植物提供了一定參考價值。
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1.1儀器島津GCMS-QP-5000型氣質(zhì)聯(lián)用儀。
1.2試劑乙醚、無水Na2SO4(均為AR)。
1.3藥材金針菇樣品由廣東省蠶桑研究所提供,經(jīng)該所所員劉學(xué)銘研究鑒定,為白蘑科菌類植物金針菇Flammulinavelutipes。
2方法
2.1供試品溶液的制備藥材切成約1.5~2cm的段,取約80g,按照《中國藥典》附錄XD揮發(fā)油測定法——甲法[4]操作,加蒸餾水800ml,加熱4h,收取揮發(fā)油提取器中油層和部分芳香水層,乙醚萃取,萃取液用無水Na2SO4脫水后備用。
2.2GC-MS分析
2.2.1色譜條件GC:DB-1石英毛細(xì)管色譜柱(30m×0.25mm),樣口溫度250℃;接口溫度230℃;載氣為氦氣;流速1.3ml·min-1;柱壓80kPa;分流比10∶1;進(jìn)樣量為1.0μl。升溫程序:初始柱溫60℃,保持1min,以10℃·min-1的速率升到280℃,保持5min。
2.2.2質(zhì)譜條件EI源(70ev),350V,雙燈絲;質(zhì)量范圍m/z40~450全程掃描,掃描間歇1.0s。檢測電子倍增器電壓1.4kV。檢索譜庫名稱NIST。
3結(jié)果
依法操作,得到揮發(fā)性成分的總離子流圖??鄢颐讶軇┍镜缀蠓蛛x得到30個組分,對相對含量較高的組分進(jìn)行質(zhì)譜分析,通過計算機檢索并與標(biāo)準(zhǔn)譜圖對照,鑒定出其中的6個組分。以扣除溶劑峰的色譜圖的全部峰面積作為100%,用歸一化法確定了各組分在揮發(fā)油中的相對含量。分析結(jié)果見表1,總離子流圖見圖1。表1金針菇揮發(fā)性成分中的化學(xué)成分及相對百分含量(略)
4討論
從GC-MS總離子流圖及GC-MS檢測結(jié)果可以看出,金針菇揮發(fā)性成分以亞麻酸為主,其相對含量達(dá)到32.74%。亞麻酸具有增長智力、延緩衰老、降低血壓和膽固醇、抗菌、抗炎、抗腫瘤等活性[5~7],是降血壓、降血脂藥物和保健品的重要原料之一,應(yīng)進(jìn)一步研究,加以利用。
本研究首次從金針菇揮發(fā)性成分中鑒定出亞麻酸(32.74%)、軟脂酸(6.41%)、鄰苯二甲酸異丁酯(5.23%)、軟脂酸乙酯(4.96%)、鄰苯二甲酸丁酯(3.07%)、苯乙醛(1.95%)等成分,占其揮發(fā)性成分相對含量的54.36%,但還有24個組分尚未能鑒定出其結(jié)構(gòu),可能是由于金針菇揮發(fā)性成分屬首次研究,其中一些成分尚未收入NIST檢索譜庫,有待于今后深入研究。
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