動物實驗研究全文(5篇)

1實驗設(shè)計

在開展生物醫(yī)學(xué)研究時，研究者通過正確地運用統(tǒng)計學(xué)知識，可直接影響研究的質(zhì)量。統(tǒng)計學(xué)設(shè)計的任務(wù)在于對研究的部署、實施，直到研究結(jié)果的解釋進行系統(tǒng)的安排，力爭做到以最少的人力、物力獲得可靠的結(jié)論和信息。其目的在于確定某種處理是否會表現(xiàn)出某種特定的效應(yīng)。在實驗設(shè)計時應(yīng)遵循惟一差異原則，即在進行兩組比較時，兩者之間僅有因處理因素不同而引起的差異，而其他實驗條件相關(guān)的非處理因素都應(yīng)保持等同。然而，處理組與對照組在反應(yīng)上表現(xiàn)出的差別并不一定意味著是處理的結(jié)果。另有兩種引起差別的可能性，即偏倚和偶然性。偏倚是指系統(tǒng)性差別，它不是因組間在處理上的不同所引起。生物醫(yī)學(xué)實驗中統(tǒng)計學(xué)設(shè)計和分析的目標就是消除潛在的偏倚，減少偶然性[2]。

1.1實驗的偏倚和控制

偏倚是在研究中從設(shè)計到實驗實施和結(jié)果分析的各環(huán)節(jié)存在一些人為的、有系統(tǒng)傾向的非隨機誤差，它不是由于抽樣造成的，而是某種偏性使得實驗結(jié)果偏離它的真值。從所選擇的生物醫(yī)學(xué)問題到研究方案的制訂與實施、實驗的完成過程、實驗的分析與解釋，乃至實驗結(jié)果的發(fā)表，均可能存在各式各樣的偏倚[2]。這種偏倚常常表現(xiàn)為系統(tǒng)誤差。偏倚的大小取決于研究的方法和具體的實驗條件。常見的偏倚主要有選擇性偏倚、觀察性偏倚和混雜性偏倚。必須認識實驗過程的偏倚，從實驗設(shè)計起直到整個研究過程結(jié)束均要加以控制。正確的實驗設(shè)計可控制選擇性的偏倚，事前人為控制和采取相應(yīng)的措施可避免和減少觀察性的偏倚。對于混雜性偏倚，可將重要的混雜因素在設(shè)計階段進行分層隨機設(shè)計，使混雜因素在組間分布均衡；在統(tǒng)計分析階段將混雜因素作為分層因素或采用有協(xié)變量分析方法，以消除混雜因素的影響。只有有效地控制或消除偏倚，方可減少結(jié)果的假陽性或假陰性。

1.2減少偶然性的潛在影響

偶然性因素的作用可以減少，但不能完全排除。因為即使是在精心實施的研究中，接受同樣處理的動物，其反應(yīng)也不可能完全一樣。適當?shù)慕y(tǒng)計分析可使實驗人員評估出現(xiàn)假陽性的概率，即根本不存在處理效應(yīng)的情況下觀察到差異的概率。這種概率越小，實驗者發(fā)現(xiàn)真實效應(yīng)的可能性就越大。為了更有把握地檢測出真實效應(yīng)，有必要減少偶然性的作用，并通過實驗設(shè)計確保能在“噪聲”之上識別真正的“信號”。

1.3實驗設(shè)計的要素

摘要：防疫工作一直是實驗動物安全管理的重要環(huán)節(jié)。根據(jù)醫(yī)學(xué)與生命科學(xué)實驗室特點以及清華大學(xué)實驗動物中心的具體情況，采取6項有效措施，探索了實驗動物生物安全管理模式，建立了安全、健康的實驗環(huán)境，加強了實驗動物安全管理體系，提升了實驗動物專業(yè)技術(shù)服務(wù)水平和科研支撐能力，有效地保障了實驗教學(xué)及科學(xué)研究的順利開展。

關(guān)鍵詞：實驗動物；防疫工作；生物安全；安全管理

實驗動物作為實驗醫(yī)學(xué)與生命科學(xué)研究的重要支撐條件[1]，在歐美、日本等世界發(fā)達國家都有著50年以上長足的發(fā)展，實驗動物硬件條件和行業(yè)管理規(guī)范也已經(jīng)非常完善，具備先進的微生物檢測和控制水平，實驗動物質(zhì)量也越來越高，比如嚙齒類動物都已普及到無特定病原體（specificpathogenfree，SPF）級[2]。我國從1988年國家科委《實驗動物管理條例》以來，也逐漸建立了法制化、規(guī)范化與標準化的管理體制[3]。尤其是近10年來，實驗動物在生命科學(xué)與醫(yī)學(xué)研究中的重要作用越發(fā)凸顯出來，與國外發(fā)達國家逐漸飽和并略有降低的實驗動物使用量趨勢不同的是，我國實驗動物使用量成倍增長，高校與科研院所、醫(yī)藥企業(yè)都相繼投入大量人力、物力、財力，建設(shè)了越來越多的大型實驗動物設(shè)施，設(shè)施規(guī)模、硬件配備都已經(jīng)與歐美等發(fā)達國家比肩。隨著設(shè)施規(guī)模的擴大和數(shù)量的增多，實驗動物從業(yè)人員也迅速增加，而實驗動物的飼養(yǎng)方式，尤其是嚙齒類實驗動物，大多是以高度密集化的方式進行飼養(yǎng)和動物實驗，如采用獨立通氣式籠具（individualventilatedcages，IVC）使得單位空間飼養(yǎng)量比常規(guī)飼養(yǎng)方式提高了近兩倍。在我國實驗動物生產(chǎn)和使用的種類、數(shù)量迅速增加的同時，實驗動物標準和質(zhì)量也在逐漸提高[4]。實驗動物生產(chǎn)供應(yīng)專業(yè)化、規(guī)?；惭杆侔l(fā)展。但與之相應(yīng)的實驗動物微生物檢測手段、檢測水平以及實驗動物微生物質(zhì)量與西方發(fā)達國家還有一定距離，具體表現(xiàn)在嚙齒類實驗動物使用質(zhì)量還一直停留在清潔級水平，SPF級供應(yīng)量和使用量比例還很低，另外國家標準實驗動物微生物和寄生蟲檢測病原種類和檢測方法還存在一定差距[5]。可以說，我國大規(guī)模的繁育和使用實驗動物給實驗動物生物安全管理帶來越來越多的風(fēng)險和挑戰(zhàn)。

1近年來實驗動物生物安全問題的事故案例

實驗動物生物安全是指對實驗中使用的動物可能存在的風(fēng)險與危害進行相應(yīng)的防范和控制，其中存在的生物安全隱患包括繁育、運輸、抓取、麻醉、采血等[6]。此外使用實驗動物時，在風(fēng)險評估中要充分考慮動物源性感染性微生物的傷害特征。有證據(jù)顯示，實驗動物還能通過唾液、尿液和糞便散布動物源性、感染性微生物和其他的感染性因子[7]?？傊畬嶒瀯游锷锇踩珕栴}一直伴隨著實驗動物科學(xué)的發(fā)展，成為揮之不去的陰影。尤其是最近國際權(quán)威雜志《自然》對我國兩家科研機構(gòu)近百名的科研人員和研究生同時被發(fā)現(xiàn)感染了實驗室源性布魯氏細菌事件發(fā)表評述并提醒業(yè)界關(guān)注。2019年12月7日，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所確認96名教職員工和學(xué)生的布魯氏菌感染呈陽性。隨后12月10日黑龍江省衛(wèi)健委官方網(wǎng)站也確認在哈爾濱獸醫(yī)研究所的13名學(xué)生也感染了該布魯氏菌，他們是曾經(jīng)去蘭州獸醫(yī)研究所實習(xí)過的49名學(xué)生中的13名?！蹲匀弧愤€披露早在2011年東北農(nóng)業(yè)大學(xué)28名學(xué)生和員工被教學(xué)用山羊布魯氏菌感染的事件[8-9]。有關(guān)實驗動物獲得性病原感染事件在國內(nèi)外引起的實驗室生物安全事件在媒體和雜志上屢見報道。如何明忠等[10]2004年對實驗室感染流行性出血熱調(diào)查顯示，20世紀末全國各地實驗大鼠和工作人員進行流行性出血熱感染檢測的陽性率都非常高；2003年北京某實驗室在實驗操作過程中感染SARS病毒并引起一定范圍內(nèi)傳染事件；2004年天津某醫(yī)院收治9位來自同一實驗室工作人員感染流行性出血熱病例[11]；2006年長春某高校中藥系實驗室76名實驗學(xué)生中發(fā)生10名感染流行性出血熱事件[12]；2009年法國食品衛(wèi)生安全署的科學(xué)家在實驗室中對動物病體進行實驗研究時，意外感染致命性炭疽病菌，受感染的5名人員被緊急隔離至醫(yī)院監(jiān)控以及治療[13]；2011年，芝加哥大學(xué)實驗室一研究員因?qū)嶒瀯游锒l(fā)皮膚感染蠟狀芽孢桿菌[14]。以上這些案例的發(fā)生表明實驗動物生物安全管理工作必須引起高度重視。本文以清華大學(xué)為例，對高校實驗動物生物安全管理模式進行了探究。

2清華大學(xué)在實驗動物安全管理方面的實踐經(jīng)驗

隨著高校開展一流大學(xué)和一流學(xué)科（雙一流）的建設(shè)，生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)和藥學(xué)等方面的科學(xué)研究也得到了快速發(fā)展[15-16]，從而對實驗動物相關(guān)的服務(wù)和管理提出了新的要求和挑戰(zhàn)。我校實驗動物中心（以下簡稱“動物中心”）作為學(xué)校15個校級平臺之一，始建于2007年，是我?！笆晃濉逼陂g重點建設(shè)的校級平臺。我們在分析總結(jié)國內(nèi)外各單位的先進經(jīng)驗的基礎(chǔ)上，作出了適用于我國高?？茖W(xué)研究實驗動物相關(guān)的探索和嘗試。動物中心現(xiàn)有一期動物設(shè)施建筑面積2900m2，2009年9月正式投入使用，小鼠IVC籠位2萬個、大鼠IVC籠位300個、家兔100籠位；二期動物設(shè)施建筑面積4700m2，2019年11月份投入使用，小鼠IVC籠位3.5萬個。目前為校內(nèi)18個院系、近300個獨立實驗室的實驗動物研究項目提供技術(shù)服務(wù)保障。由于每天進出動物設(shè)施的工作人員和師生近600人次，因此做好實驗動物生物安全防疫工作至關(guān)重要。動物中心運行10年來，在學(xué)校實驗室管理處、生命科學(xué)學(xué)院、實驗動物使用與管理委員會（InstitutionalAnimalCareandUseCommittee，IACUC）和北京市實驗動物管理辦公室的指導(dǎo)下，動物中心的生物安全防疫工作管理制度逐步得到完善和落實，形成了一套嚴密的防止動物疫情發(fā)生和對動物進行醫(yī)護的管理制度。動物中心在實驗動物安全管理方面主要實施了以下6項有效措施。

摘要：中醫(yī)藥治療潰瘍性結(jié)腸炎（UC），在病因病機，治法治則，實驗研究方面取得了較大進展。潰瘍性結(jié)腸炎多以本虛標實為根本，外邪、血瘀、情志等為誘因。中醫(yī)的治療多從分期與分型出發(fā)。目前的實驗結(jié)果表明中醫(yī)藥能有效抑制炎癥細胞的浸潤，起到治療UC的作用。

關(guān)鍵詞：潰瘍性結(jié)腸炎；病因病機；治法；實驗研究

潰瘍性結(jié)腸炎（UC）是消化系統(tǒng)的常見疑難病，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對UC的病因及發(fā)病機制尚不明確。近年來在我國此病的發(fā)病率呈現(xiàn)上升趨勢，中醫(yī)對此病的治療積累了豐富的經(jīng)驗。根據(jù)其發(fā)病的主要癥狀特點，此病大體上相當于中醫(yī)的“下利”“久瀉”“久痢”“腸癖”“痢疾”等范疇?，F(xiàn)通過收集近5年中醫(yī)藥治療UC的文獻，總結(jié)UC的病因病機、治法及實驗研究，希望能初步構(gòu)建治療UC框架，對提高UC的診治水平有一定的幫助。

1病因病機

目前，西醫(yī)學(xué)認為潰瘍性結(jié)腸炎的病因?qū)W尚不明確。一般與免疫異常有關(guān)，寄生蟲、腸道細菌、病毒感染、精神創(chuàng)傷、遺傳等可能為誘發(fā)因素。戴寶林[1]認為UC多屬本虛標實之象，以脾胃虛弱為發(fā)病之本，濕熱是致病之標，血瘀為局部病理損害。危北海等[2]認為本病多因初起外邪留滯于大腸，郁熱破血致病。其病變可涉及氣分與血分。初期多屬氣分，久病則在血分。焦君良等[3]認為本病是因局部毒邪壅滯，產(chǎn)生包括各種致病因素的毒邪以及病理產(chǎn)物的毒邪，阻礙氣機，導(dǎo)致經(jīng)絡(luò)阻塞，氣血凝滯。病延日久，必將毒瘀壅滯，進而化瘀成癰，損及臟腑，耗傷正氣，而使病情反復(fù)發(fā)作遷延不愈。并提出了“從癰論治”治療觀。俞宜年等[4]認為潰瘍性結(jié)腸炎屬于“久瀉、腹痛”范疇，臨床多見氣血同病，多以腎陽虧虛為本，以肝郁、濕熱、血瘀等為標。

2治法

2.1分期論治王新月

摘要根據(jù)膿毒癥30的定義，膿毒癥是宿主對感染的反應(yīng)失控導(dǎo)致危及生命的器官功能衰竭。膿毒癥相關(guān)性腦病是由膿毒癥導(dǎo)致的非中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染的彌漫性腦功能障礙，其表現(xiàn)形式多樣，主要包括神志異常，激動易激惹，譫妄，昏迷等，幸存者恢復(fù)期亦有長期記憶損害等并發(fā)癥。目前該病的發(fā)病機制、診斷標準尚不明確，亦無特異性的治療方法。中醫(yī)在膿毒癥相關(guān)性腦病的治療中具有辨證施治的優(yōu)勢，可針對本病不同的癥狀和階段處方用藥，然而中醫(yī)藥在這方面的研究尚存不足，需進一步深入探討本病的病因病機，對中醫(yī)藥的治療機制進行深入研究。

關(guān)鍵詞膿毒癥相關(guān)性腦??；發(fā)病機制；中醫(yī)；研究思路

1膿毒癥相關(guān)性腦病的發(fā)病機制

1.1大腦信號傳遞障礙

膿毒癥時機體釋放出大量的炎性反應(yīng)因子，從而激發(fā)應(yīng)激反應(yīng)［34］。引發(fā)炎性以及抗炎性反應(yīng)因子，如NO、趨化因子、促炎因子等。這些因子將直接或間接作用于小膠質(zhì)細胞、星型膠質(zhì)細胞以及神經(jīng)元，使得神經(jīng)傳遞以及調(diào)節(jié)和神經(jīng)分泌的紊亂［5］。一些炎性反應(yīng)因子還可以作用于其他的大腦結(jié)構(gòu)產(chǎn)生病態(tài)行為如活動減少，厭食，沮喪和認知缺失等［6］。

1.2微循環(huán)障礙

膿毒癥時內(nèi)毒素和炎性細胞因子使內(nèi)皮細胞選擇素、血管細胞粘附分子和細胞間粘附分子的表達增加。在炎性遞質(zhì)的作用下內(nèi)皮細胞激活，使血管張力改變，并導(dǎo)致微循環(huán)和凝血功能障礙，這將引起缺血性或出血性損傷［79］。

［摘要］病理生理學(xué)的研究對象涉及到所有臨床疾病，主要討論疾病發(fā)生、發(fā)展過程中功能和代謝改變的規(guī)律及其機制。理論知識源于實驗研究，病理生理學(xué)實驗是理論課程的延伸，對于聯(lián)系醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)課程與臨床課程具有重要意義。中醫(yī)藥院校的病生實驗教學(xué)過程中會遇到一些常見問題，推動教學(xué)改革就需要深入探討注意事項，優(yōu)化教學(xué)方法，完善考核機制。

［關(guān)鍵詞］病理生理學(xué)；整體動物實驗；教學(xué)方法；考核機制

病理生理學(xué)是醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)課程，與生理學(xué)、生物化學(xué)、病理學(xué)和內(nèi)科學(xué)等基礎(chǔ)、臨床課程緊密聯(lián)系。實驗教學(xué)是醫(yī)學(xué)教育體系的重要支撐，與理論課相輔相成，病理生理學(xué)實驗是病生課程的有機組成，通過動物實驗結(jié)合病例討論共12學(xué)時的驗證性實驗，使學(xué)生加深對疾病的發(fā)生機制、機體的代謝變化等知識掌握。

一、設(shè)計實驗?zāi)Ｐ?，注重實驗形?/p>

病理生理學(xué)與疾病密切相關(guān)，因此病生實驗主要從復(fù)制疾病的角度設(shè)計。學(xué)生通過具體操作、觀察現(xiàn)象、分析實驗結(jié)果等，提高實踐技能和綜合能力。一般疾病模型包括三種：整體動物模型、離體器官模型、離體細胞模型。中醫(yī)藥院校的病生實驗以家兔和小鼠作為整體動物模型設(shè)計了實驗。整體動物模型可以全面體現(xiàn)臨床疾病的特點，最能體現(xiàn)人類疾病特征。但是動物與人體仍然存在很大差距，具有個體差異性，隨機性，實驗條件難以完全一致，所以動物實驗結(jié)果僅供參考，具體的方法要在臨床實踐之后再用于人類疾病的治療。學(xué)生以分組的形式進行實驗操作，旨在提高實踐能力、操作能力、團隊協(xié)作能力等。由帶教老師講解實驗內(nèi)容，教輔老師維持課堂秩序，巡視各組的操作情況，及時解決遇到的問題。

二、細化實驗內(nèi)容，記錄實驗過程

實驗開始時，指導(dǎo)老師先講授實驗原理及注意事項，回顧課堂知識，與理論結(jié)合，明白實驗?zāi)康?，熟悉實驗室環(huán)境和實驗流程。