人生低谷精選(九篇)
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第1篇：人生低谷范文
鮮為人知的是，何晟銘年少成名，21歲作為“中國(guó)力量”主唱登上央視春晚?？墒聵I(yè)巔峰時(shí)，他卻選擇了單飛，之后長(zhǎng)達(dá)十幾年星途暗淡，甚至一度為謀生不得不轉(zhuǎn)做幕后工作。何晟銘經(jīng)歷了怎樣坎坷的星途？少年成名的他，又是如何從人生的低谷再次走向成功的？
少年何敏，張揚(yáng)背后讀不懂父愛(ài)
22歲之前，何晟銘一直叫何敏，這是父親給他起的名字。父親是湖北仙桃一位農(nóng)村教師，在何敏讀小學(xué)時(shí)，父親就教他學(xué)電子琴，識(shí)曲譜；教他做人要有禮節(jié)，為人謙虛；還教他寫(xiě)得一手漂亮的毛筆字……可在年少的何敏看來(lái)，父愛(ài)太過(guò)嚴(yán)厲。進(jìn)入中學(xué)后，叛逆心理讓他開(kāi)始抵觸父親。他不僅燙了頭發(fā)，還偷偷地打了耳洞，學(xué)別人戴起耳釘。父親發(fā)現(xiàn)后，狠狠打了他一頓。之后，何敏內(nèi)心急切地想要逃離“嚴(yán)酷”的父親。
何敏初中畢業(yè)，父親將他送到湖北荊州藝術(shù)學(xué)校。他興奮不已：終于可以擺脫父親了！
在藝校，何敏的特長(zhǎng)得以發(fā)揮，也助長(zhǎng)了他愛(ài)出風(fēng)頭、張揚(yáng)的個(gè)性。他組建了三人組合，還找裁縫量身定做了一套紅色西服，經(jīng)常在學(xué)校操場(chǎng)上表演。大膽的行為吸引來(lái)包括附近學(xué)校的女孩，經(jīng)常有女生在校門(mén)口等候何敏，這讓有的男生嫉妒之下要教訓(xùn)他。
一個(gè)周末，何敏三人在校門(mén)口和幾個(gè)女孩聊天，走來(lái)兩個(gè)男生，其中一個(gè)指著何敏警告：“以后離這幾個(gè)女孩遠(yuǎn)點(diǎn)，別找不自在！”年少輕狂的何敏與對(duì)方吵了起來(lái)，結(jié)果雙方動(dòng)了手。何敏他們?nèi)齻€(gè)人將對(duì)方打得鼻血直流。誰(shuí)知，落敗的男生喊來(lái)七八十人，拎著長(zhǎng)短不一的木棍，闖進(jìn)宿舍要找穿紅西服的何敏。恰巧何敏不在，而班長(zhǎng)正在宿舍試穿何敏的紅西服。結(jié)果可想而知，班長(zhǎng)被打得頭破血流，當(dāng)即被送到了醫(yī)院。
因?yàn)榇耸掠绊憳O壞，校領(lǐng)導(dǎo)研究后決定開(kāi)除何敏，并通知何敏的父親來(lái)校接兒子。了解情況后，父親找老師求情，并積極籌錢(qián)為住院的班長(zhǎng)交納了所有醫(yī)療費(fèi)……最后，校領(lǐng)導(dǎo)答應(yīng)暫時(shí)不開(kāi)除何敏，但下不為例。
一切處理妥當(dāng)，何敏送父親離校。在學(xué)校門(mén)口，本以為父親會(huì)好好教訓(xùn)自己，但父親只是看了他一眼，然后頭也不回地走遠(yuǎn)了。那是一輩子都難以抹去的場(chǎng)景，望著父親遠(yuǎn)去的背影，何敏心里說(shuō)不清是什么滋味，眼淚潸然而下。也就從那一刻起，何敏暗暗發(fā)誓，再也不惹事生非。
多年后，再與父親談起此事，父親說(shuō)：“男孩子可以闖禍，只要認(rèn)識(shí)到錯(cuò)誤，這就是成長(zhǎng)。當(dāng)時(shí)從你恐慌的眼神中，知道你內(nèi)心認(rèn)錯(cuò)了，我就不想多說(shuō)你，看你日后的表現(xiàn)了……”
打架事件后，何敏像換了一個(gè)人，他把所有心思都放在了練功上，早出晚歸，廢寢忘食。1994年，何敏靠著出色的成績(jī)，被廣東東莞藝術(shù)團(tuán)錄用為舞蹈演員。
當(dāng)時(shí)的廣東，演藝歌舞團(tuán)非常多，很多藝人白天上班，晚上到酒吧串場(chǎng)，何敏就是其中一個(gè)。半年后，父母放心不下他，就按信上的地址去東莞看他。恰巧何敏正在酒吧唱歌，他高興地說(shuō)：“爸、媽?zhuān)任以俪獌蓚€(gè)小時(shí)，就能拿著工資請(qǐng)你們吃飯了?！蹦翘?，父親長(zhǎng)長(zhǎng)出了一口氣，他看到兒子懂事了。
不久，何敏離開(kāi)東莞，去廣州發(fā)展。在廣州，何敏發(fā)現(xiàn)酒吧夜演的藝人雖然很多，但無(wú)一不是獨(dú)唱。他靈光一閃，想到創(chuàng)立一個(gè)組合，他的想法很快得到同為歌手的彭亮和楊光的認(rèn)可，三人一拍即合，開(kāi)始以組合的形式出現(xiàn)在廣州的各個(gè)演藝場(chǎng)所。由于三人皆能歌善舞，又充滿(mǎn)青春活力，很受大眾喜歡。1995年末的一天，當(dāng)何敏三人演出結(jié)束后，一名中年男子微笑著走過(guò)來(lái)，說(shuō)：“我叫王文光，很欣賞你們的勁舞組合，如果方便，我想和你們談一談合作?！彪m然三人并不認(rèn)識(shí)來(lái)者，但對(duì)于王文光的大名卻早有耳聞，他被譚詠麟稱(chēng)作“音樂(lè)教父”，在圈內(nèi)享有很高的知名度。
原來(lái)，王文光已經(jīng)是第四天來(lái)觀(guān)看演出，他很欣賞這三個(gè)小伙子，準(zhǔn)備對(duì)其進(jìn)行培訓(xùn)并加以包裝。何敏三人興奮不已，次日就簽約了王文光的公司。
培訓(xùn)，包裝，試演，在經(jīng)歷近一年的學(xué)習(xí)后，1996年，王文光推出了勁舞組合“中國(guó)力量”。此后，何敏、彭亮和楊光，開(kāi)始出現(xiàn)在國(guó)內(nèi)各大舞臺(tái)上。1997年，王文光又為“中國(guó)力量”組合推出了首張專(zhuān)輯《Everyday每一天》。唱片一經(jīng)推出，很快在全國(guó)傳唱開(kāi)來(lái)，“中國(guó)力量”組合由此一炮而紅。同年，何敏和他的兩個(gè)搭檔在香港參加第一屆全球華人歌唱大賽，獲得銀獎(jiǎng)。
當(dāng)生活布滿(mǎn)鮮花和掌聲時(shí)，何敏開(kāi)始飄飄然。這時(shí)父親在電話(huà)里告誡他：“你要先做人，再做事，凡事要低調(diào)，不要被榮耀沖暈了頭腦……”可這時(shí)的何敏哪里還能聽(tīng)進(jìn)去父親的話(huà)，他認(rèn)為父親上了年紀(jì)，跟不上潮流了。
成名后的何味奇，坎坷星途讀懂父親
1998年，“中國(guó)力量”組合應(yīng)邀參加央視春節(jié)晚會(huì)。那是何敏最為激動(dòng)的一個(gè)月，在央視排練廳，他的腦海常會(huì)想象自己一人在舞臺(tái)上高歌的場(chǎng)景，他產(chǎn)生了單飛的念頭。春晚之后，“中國(guó)力量”組合已家喻戶(hù)曉，可何敏卻向恩師王文光提出了單飛的要求，王文光挽留不住，只好放手。
22歲的何敏來(lái)到香港，并改名何味奇。在女友的幫助下，何味奇推出了內(nèi)地第一本男藝人寫(xiě)真集，還請(qǐng)郭富城的制作人譚國(guó)政幫其作曲，出了個(gè)人唱片，他試圖盡快在香港打開(kāi)知名度。
但是事情并不像他想的那么簡(jiǎn)單，何味奇在香港遭遇“水土不服”。盡管他努力地練歌、排舞、演出，可是收效甚微，獲得的演出機(jī)會(huì)少之又少。從2001年初開(kāi)始，女友不再像以前那樣支持他的歌唱事業(yè)，開(kāi)始帶著他參加各種時(shí)尚派對(duì)與聚會(huì)。但何味奇總是有很多的不適應(yīng)，漸漸地，他變得沉默了。
一天，女友突然鄭重其事地對(duì)他說(shuō)：“最近我想了很多。既然歌唱事業(yè)發(fā)展不順，我覺(jué)得現(xiàn)在你應(yīng)該放棄，還是跟我一起做生意吧?！焙挝镀嬉幌伦哟糇×?，他早已把音樂(lè)當(dāng)成了自己畢生的追求，這條路無(wú)論走得多么艱難，他也從未想過(guò)要放棄。很長(zhǎng)一段時(shí)間，兩人誰(shuí)也說(shuō)服不了對(duì)方。感情也因此出現(xiàn)裂變。
2001年，何味奇與女友分手，離開(kāi)了香港。不久，他簽約廈門(mén)一家經(jīng)紀(jì)公司，并于2002年推出個(gè)人專(zhuān)輯《夢(mèng)見(jiàn)何味奇》，但反響很小，明顯沒(méi)有了當(dāng)初的人氣。
該如何再次崛起？何味奇陷入了沉思。此后幾年，他的名字漸漸被大家淡忘了。轉(zhuǎn)眼到了2005年，何味奇決定去北京，再戰(zhàn)樂(lè)壇。但這一次他沒(méi)那么幸運(yùn)了，由于人氣大不如前，他的演出量逐漸減少。
步入事業(yè)低谷期的何味奇內(nèi)心異常煩惱，為了平靜下來(lái)，他重新?lián)炱鹆藧?ài)寫(xiě)毛筆字的習(xí)慣，把自己關(guān)在出租房?jī)?nèi)練字磨心性。一晃半年過(guò)去了，不僅事業(yè)毫無(wú)起色，連經(jīng)濟(jì)收入也沒(méi)有了，他只能吃老本。
有天晚上，何味奇正在發(fā)呆，母親打來(lái)了電話(huà)。聽(tīng)到母親慈愛(ài)的聲音，何味奇幾乎哭了出來(lái)：“媽?zhuān)也幌氤枇?，好累……”母親一聽(tīng)就在電話(huà)里急了：“敏兒，你這是怎么了？你不是最?lèi)?ài)唱歌的嗎，怎么突然不想唱了？”為了不讓家人擔(dān)心，何味奇只好支吾著：“可能是這兩天太累了?！?/p>
第二天晚上，當(dāng)何味奇疲憊地回到住處時(shí)，吃驚地發(fā)現(xiàn)：昏黃的街燈下，一個(gè)老人正一動(dòng)不動(dòng)地蜷縮在家門(mén)口打盹，花白的頭發(fā)在街燈下閃著點(diǎn)點(diǎn)銀絲。聽(tīng)到他的腳步聲，老人干咳著抬起頭，叫了聲：“敏兒，是我啊！”
何味奇心里一震，連忙將凍得渾身哆嗦的父親讓進(jìn)屋。原來(lái)，得知兒子 “不想再唱歌”，當(dāng)晚父親通宵未眠，萬(wàn)般擔(dān)憂(yōu)中，第二天一大早他就買(mǎi)票趕到了北京。
當(dāng)晚，多年來(lái)罕少對(duì)話(huà)的父子倆生平第一次睡在了同一張床上，心平氣和地談了很久。得知何味奇的近況后，父親憂(yōu)心忡忡地勸他：“兒子，人生哪里有永遠(yuǎn)的高地？有時(shí)候，退一步，停一下，反而能沖得更高。你現(xiàn)在之所以困惑，是因?yàn)槟氵€活在曾經(jīng)的光環(huán)下，你的心思太重了。你應(yīng)該讓心從高地上走下來(lái)……”父親還建議何味奇不妨變通一下，去找份工作，或許從中還能找到新的機(jī)會(huì)。
在父親的開(kāi)導(dǎo)下，何味奇轉(zhuǎn)變了思想。不久，有朋友找到他，問(wèn)：“一家公司招視覺(jué)督導(dǎo)，你有興趣做嗎？”視覺(jué)督導(dǎo)就是負(fù)責(zé)給藝人的宣傳照和MV做畫(huà)面把控。何味奇知道，這份工作只要具有一定審美能力就能勝任，并無(wú)技術(shù)含量。他稍有猶豫后，答應(yīng)去做。就職之前，他一次次告誡自己：人生不能永遠(yuǎn)活在過(guò)去的光環(huán)里，只要能生存下去，就有希望，就有出路……
崛起后的何晟銘，父親眼中的兒子長(zhǎng)大了
當(dāng)何味奇看著明星那么光鮮地拍照、拍片時(shí)，就會(huì)想到自己也曾經(jīng)在這個(gè)位置上，難免有些心酸。一次，當(dāng)他在為胡靜的廣告選片時(shí)，胡靜很驚訝地認(rèn)出了他，讓何味奇頗為難堪。私下里，胡靜說(shuō)：“干嘛這樣委屈自己，要不我托朋友幫你找個(gè)更好的工作吧?！?何味奇平靜了一下內(nèi)心，笑著說(shuō)：“謝謝。我覺(jué)得我要學(xué)習(xí)的東西很多，這樣很好?！?/p>
這件事后，何味奇一度想放棄視覺(jué)督導(dǎo)的工作，可一想到父親的話(huà)，他決定堅(jiān)持下來(lái)，并用毛筆寫(xiě)下了剛毅的兩個(gè)字――淡定。
在不斷地調(diào)節(jié)心理后，何味奇再遇到熟人，由最初的難為情變得坦然了。這份工作一干就是一年，雖然并沒(méi)有舞臺(tái)上的光鮮和高額的薪水，但對(duì)內(nèi)心的磨礪也成為了何味奇日后再次走紅時(shí)，能淡然處置的基石。
在人生的最低谷，何味奇養(yǎng)成了凡事努力、盡可能不去奢望虛浮名利的品性，并改名為何晟銘。有了這種心態(tài)，機(jī)會(huì)再次垂青于他。2007年下半年，經(jīng)朋友介紹，何晟銘認(rèn)識(shí)了著名編劇于正。于正當(dāng)時(shí)年僅29歲，卻已有8部作品先后被搬上熒幕。于正很欣賞何晟銘的傳奇經(jīng)歷和淡定心態(tài)，建議他不妨轉(zhuǎn)型，嘗試拍戲。2007年9月，何晟銘懷著既驚喜又忐忑的心情進(jìn)入于正監(jiān)制的電視劇《玫瑰江湖》劇組。
那是讓何晟銘刻骨銘心的幾個(gè)月，雖然有舞臺(tái)表演的底子，但畢竟是新的行業(yè)，在認(rèn)真學(xué)習(xí)拍戲之時(shí)，他還要小心翼翼地和演員們相處。多年后他回憶起來(lái)，那時(shí)的心情如履薄冰，生怕有一點(diǎn)失誤被別人給替掉。讓何晟銘慶幸的是，劇組殺青時(shí)，大家給予了他很高的評(píng)價(jià)，尤其覺(jué)得他品質(zhì)好。而于正也看出了何晟銘在表演方面很有潛質(zhì)，很快就將他簽至旗下工作室。
良好的開(kāi)頭為何晟銘打開(kāi)了新的局面，他先后參演了《美人心計(jì)》、《歡喜婆婆俏媳婦》、《被遺棄的秘密》、《唐宮美人天下》、《鎖清秋》等電視劇，且劇中的片頭曲也全由他包攬。2011年，于正的新作《宮鎖心玉》開(kāi)拍，何晟銘在劇中扮演四阿哥雍正。和往常一樣，開(kāi)機(jī)前他做足了功課，查看了二月河的《雍正王朝》和大量歷史資料，開(kāi)拍時(shí)他完全融入了角色。電視劇播出后，一個(gè)城府很深、心機(jī)很重的“四阿哥”讓觀(guān)眾連連驚嘆。而在接下來(lái)第二部《宮》中，他飾演的雍正更讓影迷們叫好。
何晟銘火了，大家這才發(fā)現(xiàn)，原來(lái)熟悉的“四阿哥”竟是當(dāng)年“中國(guó)力量”的主唱。鮮花和掌聲又一次伴隨在何晟銘的周?chē)?，而與13年前不同的是，他看得淡了。除了拍戲，更多的時(shí)間，他寧愿待在家里寫(xiě)毛筆字。即使剛剛接下了一個(gè)380萬(wàn)的廣告代言活動(dòng)，他依然堅(jiān)持去菜市場(chǎng)買(mǎi)菜，回家自己下廚。2011年秋，何晟銘終于在北京買(mǎi)了房子，裝修好后把父母都接了過(guò)來(lái)。
2012年9月9日晚，第二十六屆金鷹獎(jiǎng)暨第九屆金鷹節(jié)上，何晟銘獲得最受觀(guān)眾喜愛(ài)電視劇男演員獎(jiǎng)。那一刻，何晟銘無(wú)比激動(dòng)地說(shuō)：“如果說(shuō)人生有幾次要跌倒的話(huà)，我希望跌倒得越早越好。因?yàn)槲抑?，我還有時(shí)間爬起來(lái)！”
此后，何晟銘先后主演了多部電視劇，嘗試了不同類(lèi)型的角色，演藝之路越來(lái)越順暢。2014年3月，何晟銘在《愛(ài)的婦產(chǎn)科》一劇中飾演婦產(chǎn)科主任“楊俊波”，一位留美歸來(lái)的高材生，不僅長(zhǎng)相英俊，而且醫(yī)術(shù)精湛。為了表演更加真實(shí)，何晟銘還專(zhuān)門(mén)去醫(yī)院現(xiàn)場(chǎng)觀(guān)看孕婦被接生的全過(guò)程。何晟銘感嘆：“拍完這部戲，真的有好多女性朋友來(lái)找我咨詢(xún)婦產(chǎn)科知識(shí)，還有人稱(chēng)我‘護(hù)婦寶’！”
何晟銘的努力，父親看在了眼里。電視播出后，看著兒子精彩的表演，父親欣慰地點(diǎn)點(diǎn)頭，他眼中的兒子長(zhǎng)大了，成熟了！
2014年3月30日，何晟銘又一部情感大戲《幸福雙黃線(xiàn)》舉行看片會(huì)，他忙得不亦樂(lè)乎?；顒?dòng)結(jié)尾，他深情地說(shuō)：“作為一個(gè)演員，不斷有戲拍，有粉絲喜歡，就是件很幸福的事情了。”話(huà)語(yǔ)間，我們感受到：經(jīng)歷過(guò)歲月磨礪，何晟銘愈發(fā)沉穩(wěn)，豁達(dá)……
第2篇：人生低谷范文
一見(jiàn)鐘情
仗義帥哥贏得靚女芳心
1981年4月,劉光誠(chéng)出生在江西省鄱陽(yáng)縣一個(gè)普通家庭,他從小就發(fā)奮讀書(shū),立志用知識(shí)改變自己的命運(yùn)。經(jīng)過(guò)十幾年的寒窗苦讀,1999年秋季,他以?xún)?yōu)異成績(jī)考入江西某大學(xué)。2003年大學(xué)畢業(yè)后,他回到老家鄱陽(yáng)縣某中學(xué)任教。
劉光誠(chéng)在工作上刻苦努力,教學(xué)成績(jī)也很突出,學(xué)校領(lǐng)導(dǎo)準(zhǔn)備將他作為骨干教師培養(yǎng)。然而,劉光誠(chéng)總想能有一個(gè)更高的人生舞臺(tái)施展才華,教學(xué)之余,刻苦攻讀備戰(zhàn)考研。經(jīng)過(guò)努力,他于2006年如愿考上了江西某重點(diǎn)大學(xué)的碩士研究生。
劉光誠(chéng)家境一般,父母都年過(guò)六旬退休在家,而且退休工資都不高。他參加工作幾年來(lái),也沒(méi)多少積蓄,所以每年8000元的學(xué)費(fèi)以及不菲的生活費(fèi),讓他感到壓力非常大。為此,他應(yīng)聘到南昌一所職業(yè)技術(shù)學(xué)校做兼教老師,每月有1000多元的報(bào)酬,再加上每月200多元的研究生津貼,使他維持正常開(kāi)支還略有節(jié)余。
劉光誠(chéng)身高1.8米,長(zhǎng)得英武帥氣,讀大學(xué)時(shí)就是不少女生仰慕的對(duì)象,但他一直把精力放在學(xué)業(yè)上,從來(lái)沒(méi)有認(rèn)真考慮過(guò)自己的感情問(wèn)題。他相信緣分,認(rèn)為有了緣分,一切都會(huì)水到渠成。
2007年4月的一天,劉光誠(chéng)收到了某學(xué)術(shù)刊物寄來(lái)的300元稿費(fèi),錢(qián)雖然不多,但他很有成就感,因?yàn)檫@是他第一次在國(guó)家級(jí)學(xué)術(shù)刊物上。當(dāng)天下午,他前往學(xué)校附近的一家郵局取稿費(fèi)。當(dāng)他走進(jìn)郵局時(shí),發(fā)現(xiàn)一群人在柜臺(tái)前圍著一名中年婦女議論紛紛。走近一打聽(tīng),他才知道事情的原委:這位中年婦女是一名下崗女工,幾年前丈夫死于車(chē)禍,僅靠自己當(dāng)保潔員的微薄收入供兒子在外地讀大學(xué)。那天剛發(fā)了工資,她到郵局填寫(xiě)好匯款單準(zhǔn)備給兒子寄錢(qián)時(shí),突然發(fā)現(xiàn)口袋里的錢(qián)不翼而飛,當(dāng)場(chǎng)急得哭了起來(lái)。
劉光誠(chéng)在讀大學(xué)時(shí)也曾有過(guò)被人偷掉生活費(fèi)的經(jīng)歷,他深知一個(gè)學(xué)生沒(méi)有生活費(fèi)的尷尬,也十分同情一位貧困母親的難處。從郵局取出300元稿費(fèi)后,劉光誠(chéng)對(duì)這位母親說(shuō):“阿姨,你別難過(guò),我這兒有幾百塊稿費(fèi),你先拿去應(yīng)應(yīng)急?！闭f(shuō)完,將300元錢(qián)全部給了她。在劉光誠(chéng)的帶動(dòng)下,當(dāng)場(chǎng)有5個(gè)好心人向這位母親捐了款。
劉光誠(chéng)的義舉,使郵局內(nèi)一位當(dāng)班的青年女職工深受感動(dòng)。這位女工叫王妙青,時(shí)年25歲,大專(zhuān)畢業(yè),來(lái)自江西省九江市郊區(qū)。當(dāng)時(shí)她正在郵局匯兌柜臺(tái)值班,看到劉光誠(chéng)助人為樂(lè)的善舉,也拿出了100元錢(qián)捐給那位母親。當(dāng)劉光誠(chéng)要離開(kāi)郵局時(shí),王妙青放下女孩特有的矜持,主動(dòng)跟劉光誠(chéng)搭話(huà)。劉光誠(chéng)此前多次在王妙青手上辦理過(guò)匯兌業(yè)務(wù),對(duì)她的端莊秀麗和熱情服務(wù)也早有好感。兩人熱情地攀談了一會(huì)兒,臨別時(shí)還互留了手機(jī)號(hào)碼。
經(jīng)過(guò)幾次接觸和交流,兩顆年輕的心開(kāi)始越靠越近。一個(gè)月后,劉光誠(chéng)和王妙青確立了戀愛(ài)關(guān)系。
一念之差
碩士男友詐騙4500元被抓
劉光誠(chéng)和王妙青都是受過(guò)高等教育的現(xiàn)代青年,思想比較前衛(wèi)。他們認(rèn)為,既然兩人真心相愛(ài),就不必拘泥于形式。于是,他倆很快就在外面租房同居。
王妙青的家境也不富裕,她有一個(gè)弟弟在上大學(xué)、一個(gè)弟弟在讀高中,每個(gè)月她都要拿出一半的工資寄給兩個(gè)弟弟做生活費(fèi)。為此,劉光誠(chéng)主動(dòng)承擔(dān)了房租和兩人的生活費(fèi)?？墒菚r(shí)間一長(zhǎng),他也感到有點(diǎn)力不從心了。而劉光誠(chéng)又是個(gè)很要面子的人,他認(rèn)為,作為一個(gè)男人,就應(yīng)該多承擔(dān)一點(diǎn)責(zé)任。所以盡管囊中羞澀,他還是硬挺著。
到了2008年年初,劉光誠(chéng)的確有點(diǎn)支持不住了,他只好向?qū)W校申請(qǐng)緩交新學(xué)年的學(xué)費(fèi)。學(xué)校同意他推遲到6月份之前補(bǔ)交。轉(zhuǎn)眼就到了5月份,可他的學(xué)費(fèi)還沒(méi)著落,使他感到很郁悶。5月22日,劉光誠(chéng)來(lái)到一家網(wǎng)吧上網(wǎng)。無(wú)意間,他進(jìn)入一個(gè)交流“專(zhuān)升本”的QQ群里,看到有人在上面留言稱(chēng),如果誰(shuí)能提供“專(zhuān)升本”考試答案,愿出高價(jià)購(gòu)買(mǎi)。劉光誠(chéng)根據(jù)自己的經(jīng)驗(yàn)判斷,那些平時(shí)不好好讀書(shū),一到考試就想作弊的人,多半是些家庭條件優(yōu)越又不愿吃苦的人。想到這里,劉光誠(chéng)突然生出想捉弄一下那些人的想法。于是,他化名“戒指”在網(wǎng)上留言,稱(chēng)自己是某高校的教師,手上有“專(zhuān)升本”高等數(shù)學(xué)和英語(yǔ)考試的答案,并留下了自己的手機(jī)號(hào)碼。
接下來(lái)的幾天里,劉光誠(chéng)依然在為自己的學(xué)費(fèi)犯愁,他幾乎把自己在網(wǎng)上留言一事給忘了。沒(méi)想到5月28日,居然有幾個(gè)人給他打來(lái)電話(huà)要購(gòu)買(mǎi)答案。正為錢(qián)犯愁的劉光誠(chéng),決定來(lái)個(gè)假戲真演。于是,他在電話(huà)中跟對(duì)方談好價(jià)格以及交易方式和地點(diǎn)。接著,他從網(wǎng)上隨便搜索了一套“專(zhuān)升本”的模擬試卷,并將答案拷貝下來(lái)。
2008年5月30日下午,劉光誠(chéng)來(lái)到事先約好的見(jiàn)面地點(diǎn),將一份高等數(shù)學(xué)、一份英語(yǔ)的假答案給了一名男學(xué)生。同時(shí),給了他一套對(duì)講機(jī)。那位學(xué)生當(dāng)即將2000元錢(qián)交給了劉光誠(chéng)(每份答案各800元,對(duì)講機(jī)租金400元)。當(dāng)天晚上,劉光誠(chéng)以同樣的方式和手段騙得另一學(xué)生2500元現(xiàn)金。
拿著這輕易騙來(lái)的4500元錢(qián),劉光誠(chéng)心里忐忑不安。他知道,事情一旦敗露,不僅會(huì)使自己名聲掃地,還將受到法律的制裁。
第二天上課時(shí),劉光誠(chéng)神情恍惚,老想著昨天的事。導(dǎo)師發(fā)現(xiàn)他臉色特別難看,以為他病了,便勸他回去休息。劉光誠(chéng)回到了出租房,腦子亂得很,總擔(dān)心別人會(huì)去報(bào)警,嚇得連忙將手機(jī)關(guān)掉。
王妙青中午下班回來(lái)發(fā)現(xiàn)劉光誠(chéng)躺在床上,感到很奇怪,忙問(wèn)他怎么回事。劉光誠(chéng)支支吾吾,說(shuō)不清楚。見(jiàn)實(shí)在瞞不過(guò)去了,他只好如實(shí)將事情的原委說(shuō)出。王妙青聽(tīng)后大吃一驚:“你咋這么糊涂啊,沒(méi)錢(qián)交學(xué)費(fèi)你跟我說(shuō),你這么做可是犯法啊!”接著,王妙青建議劉光誠(chéng)趕緊跟那兩個(gè)學(xué)生聯(lián)系,主動(dòng)把錢(qián)退還給人家,爭(zhēng)取他們的原諒?？墒?劉光誠(chéng)不敢打電話(huà),只是在QQ群里留下一封道歉信,并承諾全額退款。
再說(shuō)那兩個(gè)學(xué)生,考試時(shí)發(fā)現(xiàn)買(mǎi)來(lái)的答案是假的,非常氣憤,打劉光誠(chéng)的手機(jī)又關(guān)機(jī),就到當(dāng)?shù)毓矙C(jī)關(guān)報(bào)案。辦案人員很快就將劉光誠(chéng)抓獲歸案。
真情拯救
迷途碩士走出人生低谷
在看守所內(nèi)的劉光誠(chéng),對(duì)自己的犯罪行為供認(rèn)不諱,悔恨不已,覺(jué)得自己無(wú)臉見(jiàn)人,既對(duì)不起師長(zhǎng)和父母,也對(duì)不起深?lèi)?ài)自己的女友王妙青。他萬(wàn)念俱灰,甚至作好了最壞的打算:一旦被判刑,出獄后便削發(fā)為僧隱遁空門(mén)。為此,他特意請(qǐng)求辦案人員轉(zhuǎn)告王妙青,一是真誠(chéng)向她道歉,二是請(qǐng)她離開(kāi)自己。
王妙青一開(kāi)始心里也怨恨過(guò)劉光誠(chéng),可后來(lái)冷靜一想,覺(jué)得這只是他的一念之差,并非不可饒恕的罪過(guò)。她甚至覺(jué)得,劉光誠(chéng)之所以走上犯罪的路,跟自己也有一定的關(guān)系。她想,如果不是劉光誠(chéng)一個(gè)人承擔(dān)房租和生活費(fèi),他的經(jīng)濟(jì)狀況就不會(huì)這么緊張;如果經(jīng)濟(jì)不緊張,他無(wú)論如何也不會(huì)走上這條邪路。想到這里,王妙青感到有些內(nèi)疚。她認(rèn)為,劉光誠(chéng)這個(gè)時(shí)候更需要關(guān)愛(ài)和幫助,若幫他一把,也許能讓他順利邁過(guò)這道坎。否則,他可能從此破罐破摔一蹶不振。
有了這種想法后,王妙青開(kāi)始了自己的拯救行動(dòng)。她四處找法律界人士咨詢(xún),有人認(rèn)為,像劉光誠(chéng)這種情況,只是初犯,且犯罪金額不大,如果認(rèn)罪態(tài)度好,并得到受害人的諒解,檢察機(jī)關(guān)有可能會(huì)做出不予批捕的決定。這時(shí),王妙青似乎看到了希望的曙光。
經(jīng)過(guò)多方打聽(tīng),王妙青終于找到了那兩個(gè)受騙的學(xué)生。她聲淚俱下地向兩個(gè)人道歉,并懇求他們給劉光誠(chéng)一個(gè)自新的機(jī)會(huì)。一開(kāi)始,兩個(gè)學(xué)生還在氣頭上,揚(yáng)言要讓法律嚴(yán)懲劉光誠(chéng)。王妙青急了,撲通一聲跪在他們面前。兩個(gè)學(xué)生終于被她的真誠(chéng)所感動(dòng),答應(yīng)不再追究劉光誠(chéng)的任何責(zé)任。
同時(shí),王妙青還多次找到承辦此案的檢察官,請(qǐng)求檢察官在法律允許的范圍內(nèi)給劉光誠(chéng)一個(gè)機(jī)會(huì),讓他改過(guò)自新繼續(xù)完成學(xué)業(yè)。
承辦此案的王檢察官,親自到劉光誠(chéng)就讀的學(xué)校查閱其檔案,并走訪(fǎng)了劉光誠(chéng)的導(dǎo)師和部分同學(xué),得知?jiǎng)⒐庹\(chéng)一貫表現(xiàn)良好而且學(xué)習(xí)成績(jī)也很好,便萌生了要挽救這個(gè)失足研究生的念頭。王檢察官還主動(dòng)到看守所與劉光誠(chéng)談心,幫助他重樹(shù)信心走出陰影。
最后,王檢察官根據(jù)本案實(shí)際情況,向檢委會(huì)提出了對(duì)劉光誠(chéng)不予批捕的建議。南昌市青山湖檢察院檢委會(huì)討論后,認(rèn)為劉光誠(chéng)系初犯,歸案后積極向當(dāng)事人退賠,并獲得對(duì)方原諒。本著以人為本、感化挽救的原則,對(duì)其作出不予批捕的決定。同時(shí),該院還向劉光誠(chéng)就讀的大學(xué)寫(xiě)了一份《檢察建議》,建議學(xué)校讓他繼續(xù)完成學(xué)業(yè),并協(xié)助檢察機(jī)關(guān)對(duì)其進(jìn)行跟蹤幫教。
第3篇：人生低谷范文
一只小鳥(niǎo)飛往南方過(guò)冬。天氣很冷，鳥(niǎo)凍僵了，從空中摔下來(lái)。鳥(niǎo)躺在地上，一動(dòng)也不動(dòng)，這時(shí)一頭牛恰好經(jīng)過(guò)，拉了一坨屎，正好掉在小鳥(niǎo)的身上。很快，熱乎乎的牛糞使凍僵的小鳥(niǎo)慢慢蘇醒過(guò)來(lái)并感到了無(wú)比的溫暖。小鳥(niǎo)很高興，禁不住在牛糞里引吭高歌。一只饑餓的野貓循聲而來(lái)，看到了這只牛糞里的小鳥(niǎo)，便急不可待地將它刨出來(lái)吃掉了。
啟示一：并不是每一個(gè)往你身上拉屎的人都是敵人。你的上司、同級(jí)對(duì)你批評(píng)指責(zé)，不要因他們的逆耳言詞而心生怨恨，其實(shí)他們是在保護(hù)你；并不是每一個(gè)把你從屎里救出來(lái)的人都是朋友。你的同級(jí)、下屬對(duì)你阿諛?lè)畛?，不要為他們的甜言蜜語(yǔ)所陶醉，其實(shí)他們是在陷害你。
啟示二：因幸運(yùn)而獲得成功的時(shí)候更應(yīng)具備冷靜的危機(jī)意識(shí)，因成功而得意忘形是邁向失敗的第一步。
井底的驢
一天，一個(gè)農(nóng)民的驢子掉到了枯井里。那可憐的驢子在井里凄慘地叫了好幾個(gè)鐘頭，農(nóng)民在井口急得團(tuán)團(tuán)轉(zhuǎn)，就是沒(méi)辦法把它救起來(lái)。最后，他斷然認(rèn)定：驢子已經(jīng)老了，這口枯井也該填起來(lái)了，不值得花這么大的精力去救驢子。
農(nóng)民把所有的鄰居都請(qǐng)來(lái)幫他填井。大家抓起鐵鍬，開(kāi)始往井里填土。
驢子很快就意識(shí)到發(fā)生了什么事，起初，它只是在井里恐慌地大聲哭叫。不一會(huì)兒，令大家都很不解的是，它居然安靜下來(lái)。幾鍬土過(guò)后，農(nóng)民終于忍不住朝井下看，眼前的情景讓他驚呆了。
每一鍬砸到驢子背上的土，它都作了出人意料的處理：迅速地抖落下來(lái)，然后狠很地用腳踩緊。
就這樣，沒(méi)過(guò)多久，驢子競(jìng)把自己升到了井口。它縱身跳了出來(lái)，快步跑開(kāi)了。在場(chǎng)的每一個(gè)人都驚詫不已。
啟示：其實(shí)，生活也是如此。各種各樣的困難和挫折，會(huì)如塵土一般落到我們的頭上，要想從這苦難的枯井里脫身逃出來(lái)，走向人生的成功與輝煌，辦法只有一個(gè)，那就是：將它們統(tǒng)統(tǒng)都抖落在地，重重地踩在腳下。因?yàn)椋钪形覀冇龅降拿恳粋€(gè)困難，每一次失敗，其實(shí)都是人生歷程中的一塊墊腳石。
世界上第二高峰時(shí)那座山？
世界第一高峰是哪座山?這個(gè)問(wèn)題不難，幾乎所有的人都知道，珠穆朗瑪峰是世界第一高峰。
第4篇：人生低谷范文
作為阿茲慕游艇在中國(guó)上海和江蘇地區(qū)的總經(jīng)銷(xiāo)商，上海遠(yuǎn)宏游艇銷(xiāo)售服務(wù)有限公司（Vela Marine）今年已是第六次參加上海的游艇盛會(huì)。針對(duì)阿茲慕游艇面向中國(guó)消費(fèi)者推出的三大系列共計(jì)20個(gè)不同型號(hào)的產(chǎn)品，上海遠(yuǎn)宏游艇著重向客戶(hù)推薦了幾款適合上海及周邊地區(qū)航行的游艇，如飛橋系列的40英尺、45英尺、64英尺和88英尺；運(yùn)動(dòng)系列的40S，以及頗具帝王氣質(zhì)的麥哲倫系列50英尺。
在堅(jiān)持開(kāi)拓市場(chǎng)多年之后，上海遠(yuǎn)宏游艇的業(yè)務(wù)范圍已涵蓋了豪華游艇銷(xiāo)售、售后服務(wù)及租賃服務(wù)，幫助船東實(shí)現(xiàn)享受水上品質(zhì)生活的夢(mèng)想。另外，通過(guò)實(shí)踐與探索后，上海遠(yuǎn)宏游艇組建了一支高水平、高效能的售后服務(wù)團(tuán)隊(duì)，為船東們提供全方位一對(duì)一跟蹤維護(hù)，尤其是首推的游艇四年專(zhuān)家服務(wù)，將部分保修項(xiàng)目時(shí)間延長(zhǎng)至四年，再加上對(duì)游艇的全面管理、定期檢測(cè)和維護(hù)，獲得了行業(yè)內(nèi)的一致贊譽(yù)。
面對(duì)海南、廈門(mén)等沿海城市近年來(lái)游艇市場(chǎng)大熱的現(xiàn)象，上海及周邊地區(qū)始終保持穩(wěn)步增長(zhǎng)的勢(shì)態(tài)。對(duì)此，上海遠(yuǎn)宏游艇的董事兼總經(jīng)理鳳時(shí)宏先生有著自己的見(jiàn)解：“沿海城市的游艇市場(chǎng)受到越來(lái)越多客戶(hù)的關(guān)注，說(shuō)明中國(guó)的消費(fèi)者接受了海洋文化和游艇產(chǎn)業(yè)，這是一個(gè)令人振奮的現(xiàn)象。目前我公司的服務(wù)區(qū)域雖受到一些硬件條件的制約，比如碼頭建設(shè)數(shù)量有待增加、周邊旅游環(huán)境有待改善等，但我們并不急于追求銷(xiāo)售數(shù)量的大幅上升，有效提高售后等各方面的服務(wù)水平是最重要的。華東區(qū)的客人多數(shù)追求高水準(zhǔn)的優(yōu)質(zhì)生活，更看中服務(wù)的細(xì)節(jié)，我們和品牌方一起，在售后服務(wù)方面做了很多努力，得到了客戶(hù)的認(rèn)可。品味超凡的忠實(shí)客戶(hù)群是我們持續(xù)發(fā)展的保證和動(dòng)力所在，‘提高服務(wù)水平，追求穩(wěn)步發(fā)展’也一直是遠(yuǎn)宏游艇的發(fā)展理念?！?/p>
2011年夏，上海遠(yuǎn)宏游艇成立了遠(yuǎn)宏游艇會(huì)，提供豪華游艇租賃服務(wù)，開(kāi)通了黃浦江沿岸的豪華商務(wù)游覽航線(xiàn)以及舟山群島等國(guó)內(nèi)旅游航線(xiàn)，讓更多的人可以即刻暢想海天之間的無(wú)限自由，真正享受到奢華尊貴的游艇生活。同時(shí)，遠(yuǎn)宏游艇會(huì)構(gòu)建了名流紳士暢享游艇生活的私密社交空間，豐富了會(huì)員們的休閑生活。
上海遠(yuǎn)宏游艇與意大利阿茲慕游艇品牌的協(xié)力共進(jìn)，為上海及周邊地區(qū)的游艇愛(ài)好者們實(shí)現(xiàn)暢享奢華生活的夢(mèng)想，零距離感受雅致浪漫的意式風(fēng)情，締造一段段美妙絕倫的人生故事。
阿茲慕在中國(guó)
2010~2011年整個(gè)航海季度（2010年10月~2011年9月），阿茲慕游艇在中國(guó)的銷(xiāo)售數(shù)量超過(guò)20艘，總長(zhǎng)度超過(guò)1500英尺，價(jià)值7500萬(wàn)歐元。作為意大利游艇銷(xiāo)售領(lǐng)軍人的阿茲慕游艇，經(jīng)過(guò)多年努力，也已成為中國(guó)豪華游艇中的領(lǐng)軍品牌。而中國(guó)市場(chǎng)在阿茲慕游艇全球市場(chǎng)中所占的比例也大幅度地增長(zhǎng)。
自1980年以來(lái)，阿茲慕游艇就開(kāi)始在全亞洲拓展銷(xiāo)售網(wǎng)絡(luò)并建立服務(wù)中心。如今，阿茲慕游艇已在深圳、三亞、上海、青島、大連和廈門(mén)等多個(gè)沿海城市建立了經(jīng)銷(xiāo)商網(wǎng)絡(luò)。
為更好地滿(mǎn)足中國(guó)客戶(hù)和經(jīng)銷(xiāo)商的需求，阿茲慕-貝尼蒂集團(tuán)直接投資的子公司——阿茲慕（上海）貿(mào)易有限公司于2012年1月正式成立。公司總部設(shè)在上海，由原阿茲慕游艇中國(guó)首席代表白銘先生擔(dān)任公司首席執(zhí)行官。這是阿茲慕-貝尼蒂集團(tuán)在意大利境外投資成立的游艇銷(xiāo)售及售后服務(wù)公司（不包括投資新建的碼頭和造船工廠(chǎng)）。阿茲慕（上海）貿(mào)易有限公司將立足于進(jìn)一步提升阿茲慕游艇在中國(guó)市場(chǎng)的品牌形象及認(rèn)知度，開(kāi)拓發(fā)展中國(guó)經(jīng)銷(xiāo)商網(wǎng)絡(luò)，支持和配合中國(guó)的經(jīng)銷(xiāo)商做好游艇銷(xiāo)售及售后服務(wù)工作。
同時(shí)，位于香港的阿茲慕游艇亞洲售后服務(wù)中心也正在籌備中，預(yù)計(jì)2013年前即可為亞洲，特別是中國(guó)的經(jīng)銷(xiāo)商及船東，提供專(zhuān)業(yè)和高效的零配件配送服務(wù)。
阿茲慕游艇系列及產(chǎn)品介紹
2012年，阿茲慕游艇為中國(guó)的消費(fèi)者推出三大系列共計(jì)20種不同型號(hào)的產(chǎn)品，其中多款產(chǎn)品因創(chuàng)新、舒適等優(yōu)勢(shì)，在國(guó)際上屢獲殊榮。
一、飛橋系列（Flybridge Collection）
阿茲慕游艇飛橋系列，稱(chēng)得上是目前世界上包含尺寸范圍最廣的游艇系列，從40英尺到100英尺不等。此系列代表了阿茲慕游艇的發(fā)展歷史和特色，也見(jiàn)證了品牌成立至今銷(xiāo)量數(shù)以千計(jì)的輝煌。
此系列游艇的飛橋空間，在同級(jí)別游艇中最大；配備日光浴墊，餐桌和酒吧臺(tái)，讓船主可以在大海、空氣和陽(yáng)光的包圍下，盡情放松和娛樂(lè)；
主甲板上，阿茲慕標(biāo)志性的大舷窗設(shè)計(jì)，保證室內(nèi)充足的采光；根據(jù)一天中不同的使用需求，主甲板層被劃分為多個(gè)獨(dú)立的區(qū)域，在確保活動(dòng)私密性的同時(shí)，也滿(mǎn)足區(qū)域間功能的組合；
下層甲板上，每個(gè)艙室內(nèi)，通過(guò)巧妙的儲(chǔ)物空間設(shè)計(jì)、精致的材料的使用、優(yōu)雅低調(diào)的設(shè)計(jì)風(fēng)格和巧思實(shí)用的細(xì)節(jié)處理，來(lái)增加艙內(nèi)生活的舒適度。所以無(wú)論是短途巡航還是長(zhǎng)途航行，乘客都可以體驗(yàn)到真正的海上舒適樂(lè)趣。
二、運(yùn)動(dòng)系列（S Collection）
阿茲慕游艇運(yùn)動(dòng)系列，通過(guò)船體的線(xiàn)條和顏色，彰顯阿茲慕游艇充滿(mǎn)個(gè)性和激情的特質(zhì)。它是運(yùn)動(dòng)與奢華的結(jié)合：一方面通過(guò)卓越的設(shè)計(jì)，創(chuàng)造速度和靈活，滿(mǎn)足船主對(duì)于船的性能的高要求；另一方面，通過(guò)極致的細(xì)節(jié)，帶來(lái)奢華與舒適，超乎船東對(duì)于一款運(yùn)動(dòng)型游艇的所有想象。
將“空間轉(zhuǎn)變”概念引入運(yùn)動(dòng)型游艇設(shè)計(jì)，意味著甲板上各個(gè)空間之間可以進(jìn)行無(wú)障礙的鏈接，比如想享受大海和陽(yáng)光的時(shí)候，可以在尾阱活動(dòng)，而天氣不好時(shí)，尾阱和沙發(fā)可合為一體，提供更加安全舒適的空間；
阿茲慕最吸引眼球的巨型炫窗設(shè)計(jì)，首次應(yīng)用就是在運(yùn)動(dòng)系列的首批船型68S和86S上，并從此引發(fā)了整個(gè)造船業(yè)的全新設(shè)計(jì)風(fēng)潮，并成為阿茲慕游艇的重要標(biāo)志之一；
主甲板船體材料選擇碳纖維，不僅可以減輕船體重量，使船速達(dá)到40節(jié)，并大大提升了船的舒適度。獨(dú)特的可開(kāi)式全玻璃硬頂，消除了主甲板與大海的空間界限；
全新推進(jìn)系統(tǒng)的應(yīng)用，提高了不同型號(hào)的游艇在不同狀況和耗能下的操控性。
三、麥哲倫系列（Magellano Collection）
阿茲慕麥哲倫系列，是阿茲慕游艇最新推出的半排水型可用于遠(yuǎn)航的游艇。
麥哲倫系列打破傳統(tǒng)，選擇半排水船身，具有卓越的遠(yuǎn)航性能。第一款產(chǎn)品Magellano 74已順利完成2000海里的試航，并通過(guò)A級(jí)安全認(rèn)證，確?？梢栽谌魏魏Ｑ蠹帮L(fēng)力狀況下安全航行。同時(shí)它也是將環(huán)保游艇概念帶入全球航海業(yè)的領(lǐng)軍者，致力于通過(guò)自主研發(fā)的技術(shù)手段，配合多項(xiàng)環(huán)保標(biāo)準(zhǔn)，最大程度地提高游艇對(duì)環(huán)境的保護(hù)能力。第二款產(chǎn)品Magellano 50，已獲得RINA GREEN PLUS認(rèn)證，這也是同尺寸船型中首個(gè)通過(guò)如此嚴(yán)格認(rèn)證的船型。
斧形船首，雙模式運(yùn)行船體(Dual Mode Hull),在低速和中速行駛時(shí)實(shí)現(xiàn)低油耗；
第5篇：人生低谷范文
創(chuàng)造這個(gè)銷(xiāo)售神話(huà)的是惠普電腦專(zhuān)賣(mài)店揚(yáng)中總商――江蘇省揚(yáng)中中等專(zhuān)業(yè)學(xué)校優(yōu)秀畢業(yè)生郭月琴。
別樣人生
與同齡人比較起來(lái)，郭月琴的人生起步就比別人多了一份艱辛，初二那年，母親去世，為母親治病，家境困窘不已，所以，考入揚(yáng)中中專(zhuān)后，別的同學(xué)學(xué)習(xí)之余可以放松、休閑，郭月琴卻必須為微薄的勤工儉學(xué)費(fèi)在學(xué)校圖書(shū)館打工。
應(yīng)該是這別樣的人生，練就了郭月琴不屈的個(gè)性，所以，走出學(xué)校大門(mén)之后，雖然順風(fēng)順?biāo)卦趲准移髽I(yè)技術(shù)部門(mén)、質(zhì)檢部門(mén)做過(guò)，甚至在華彤企業(yè)已經(jīng)做到商務(wù)部部長(zhǎng)，做著與自己所學(xué)專(zhuān)業(yè)計(jì)算機(jī)應(yīng)用有著聯(lián)系的標(biāo)書(shū)工作。
但到2006年，看著已經(jīng)開(kāi)始創(chuàng)業(yè)的丈夫艱難地開(kāi)拓著業(yè)務(wù)，郭月琴毅然辭去了華彤的工作，雖然企業(yè)一再挽留，郭月琴?zèng)]有回頭。
要做營(yíng)銷(xiāo)，經(jīng)營(yíng)場(chǎng)所的選擇很重要，當(dāng)時(shí)，正好揚(yáng)中最大的家電城――五星家電城旁有一間門(mén)面房，跟丈夫商量后，他們果斷地拿了下來(lái)，年租金3萬(wàn)元，接受這個(gè)房租價(jià)格在當(dāng)時(shí)是需要勇氣和膽識(shí)的，更何況創(chuàng)業(yè)的初始階段，需要投入的地方還很多，但郭月琴?zèng)]有猶豫。
2008年，就在事業(yè)蒸蒸日上的時(shí)候，一年之內(nèi)，她連續(xù)遭遇兩起重創(chuàng)：
先是慈父在車(chē)禍中喪身，從此，在這個(gè)世界上，郭月琴就成了真正意義上的孤兒，沒(méi)有了父母的呵護(hù)，什么風(fēng)浪都得自己來(lái)頂著，自己必須堅(jiān)強(qiáng)得如一座山，必須有著足夠的厚重，才能為孩子撐起一片天空，也才能慰藉父母的在天之靈。所以，處理完了父親的后事后，郭月琴抹干眼淚，和丈夫一起，繼續(xù)已有的事業(yè)。
可上蒼似乎唯獨(dú)對(duì)郭月琴不公，對(duì)剛剛緩過(guò)神來(lái)的她，又給予一次沉重的打擊：店鋪失竊，一夜之間，店內(nèi)的所有大件全部被盜，損失慘重。
第6篇：人生低谷范文
關(guān)鍵詞：大學(xué)生；人際信任；總體幸福感
一、問(wèn)題的提出
2011年6月20日，一位名叫“郭美美Baby”的網(wǎng)友在微博上公然炫耀其奢華生活，炫富的背后因其認(rèn)證身份是“中國(guó)紅十字會(huì)商業(yè)總經(jīng)理”而引起軒然大波，此舉不但將中國(guó)紅十字會(huì)推向了風(fēng)口浪尖，同時(shí)也在全社會(huì)范圍再一次的掀起了“信任危機(jī)”這一熱點(diǎn)話(huà)題。其實(shí)，現(xiàn)在擺在公眾面前的，不僅是中國(guó)紅十字會(huì)的信任危機(jī)，在當(dāng)代社會(huì)中它已經(jīng)不知不覺(jué)的成為一個(gè)普遍的難題。大學(xué)生是祖國(guó)的未來(lái)，是將來(lái)社會(huì)主義的建設(shè)者和接班人，這個(gè)群體是否也存在信任危機(jī)，其人際信任特點(diǎn)如何，人際信任對(duì)其總體幸福感是否造成相應(yīng)的影響，是積極地還是消極的，本研究就是試圖對(duì)這一系列問(wèn)題展開(kāi)探討，目的是了解內(nèi)蒙古地區(qū)大學(xué)生人際信任的現(xiàn)狀、特點(diǎn)、以及總體幸福感的程度。
二、概念的界定
人際信任是指?jìng)€(gè)體在長(zhǎng)期人際交往過(guò)程中建立起來(lái)的對(duì)他人的言詞、信譽(yù)以及書(shū)面或口頭陳述問(wèn)題可靠程度的判斷，是一種對(duì)實(shí)際問(wèn)題基本的期望。大學(xué)階段是信任感形成和發(fā)展的重要階段，大學(xué)生對(duì)他人是否信任對(duì)其是否具有協(xié)同合作精神，是否具有良好的人際關(guān)系，是否具有高水平的幸福感都有著重要的影響。
總體幸福感是指主體根據(jù)自己的標(biāo)準(zhǔn)認(rèn)為自己現(xiàn)有的生活狀況正是自己心目中所想的理想生活狀態(tài)，從而產(chǎn)生一種肯定的態(tài)度和感受。它有三個(gè)特點(diǎn)：主觀(guān)性、整體性和相對(duì)穩(wěn)定性。隨著積極心理學(xué)的發(fā)展，主觀(guān)幸福感作為一種最綜合、最復(fù)雜也是最核心的積極情緒體驗(yàn)越來(lái)越多的引起了人們的關(guān)注。作為衡量大學(xué)生學(xué)習(xí)、生活質(zhì)量的一重要指標(biāo)，總體幸福感能反應(yīng)出大學(xué)生在情感體驗(yàn)和認(rèn)知評(píng)價(jià)上的基本狀況。了解大學(xué)生的總體幸福感水平有助于把握大學(xué)生的思想發(fā)展動(dòng)態(tài)，為促進(jìn)大學(xué)生的心理健康以及素質(zhì)的全面提高提供理論上的依據(jù)。
三、對(duì)象與方法
（一）對(duì)象
采用分層隨機(jī)抽樣法，選取內(nèi)蒙古電子信息職業(yè)技術(shù)學(xué)院不同專(zhuān)業(yè)學(xué)生共103人作為調(diào)查對(duì)象，剔除無(wú)效問(wèn)卷，有效被試為100人，有效問(wèn)卷率為97%。其中男生30人，女生70人；文科70人，理科30人；城鎮(zhèn)學(xué)生62人，鄉(xiāng)村學(xué)生38人；獨(dú)生子女60人，非獨(dú)生子女40人。
（二）方法
1.人際信任量表
人際信任量表是用于測(cè)試受試者對(duì)他人行為、承諾或陳述之可靠性的估計(jì)。共25個(gè)項(xiàng)目，其內(nèi)容涉及各種處境下的人際信任，涉及不同社會(huì)角色。多數(shù)項(xiàng)目于社會(huì)角色的可信賴(lài)信有關(guān)，但有些項(xiàng)目與對(duì)未來(lái)的社會(huì)的樂(lè)觀(guān)程度有關(guān)。
2.總體幸福感量表
總體幸福感量（GWB）表是為美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生統(tǒng)計(jì)中心制訂的一種定式型測(cè)查工具，用來(lái)評(píng)價(jià)受試對(duì)幸福的陳述。本量表共有33項(xiàng)。得分越高，幸福度越高，該量表內(nèi)部一致性系數(shù)為0.91。
3.具體施測(cè)方法
問(wèn)卷施測(cè)采用團(tuán)體測(cè)試的方式，主試由學(xué)生干部擔(dān)任，調(diào)查問(wèn)卷具有統(tǒng)一的指導(dǎo)語(yǔ)。采用SPSS15.0建立數(shù)據(jù)庫(kù)，并進(jìn)行相應(yīng)的統(tǒng)計(jì)分析。
四、結(jié)論與討論
（一）不同維度大學(xué)生的人際信任和總體幸福感差異討論
大學(xué)生總體幸福感當(dāng)中的對(duì)生活的滿(mǎn)足和興趣在性別維度上存在顯著差異，女大學(xué)生對(duì)生活的滿(mǎn)足和興趣程度顯著高于男大學(xué)生，這與女大學(xué)生對(duì)周?chē)澜绲恼愿惺苄詮?qiáng)，同時(shí)社會(huì)對(duì)女性的要求低于男性，女性壓力相對(duì)較小有一定的關(guān)系；不同學(xué)科類(lèi)別與生源地的大學(xué)生，人際信任與總體幸福感不存在差異，這與張鶴、彭志啟、劉海珍在《大學(xué)生主觀(guān)幸福感與人際信任的關(guān)系研究》中所持觀(guān)點(diǎn)“不同生源地的大學(xué)生在生活滿(mǎn)意度上存在顯著性差異，城市學(xué)生的生活滿(mǎn)意度平均得分要高于鄉(xiāng)鎮(zhèn)學(xué)生的生活滿(mǎn)意度平均得分”，本次研究與張鶴等的研究（2009）在時(shí)間距離上相對(duì)較遠(yuǎn)，由于近幾年城鄉(xiāng)差距逐漸縮小，尤其對(duì)于學(xué)生來(lái)說(shuō)更為明顯，很多鄉(xiāng)鎮(zhèn)學(xué)生從小就進(jìn)入城市讀書(shū)，城市的大環(huán)境已經(jīng)深入影響到了每一個(gè)學(xué)生的內(nèi)心，使得這一研究中在生源地維度上不存在差異；總體幸福感當(dāng)中的對(duì)情感和行為的控制在獨(dú)生子女與非獨(dú)生子女維度上存在顯著差異，這與周正懷在《少數(shù)民族師范生人際關(guān)系與總體幸福感特點(diǎn)的相關(guān)性》研究中所持觀(guān)點(diǎn)“農(nóng)村大學(xué)生比城鎮(zhèn)大學(xué)生對(duì)情感和行為的控制好，非獨(dú)生子女大學(xué)生比獨(dú)生子女大學(xué)生對(duì)情感和行為的控制好”一致，這可能是由于非獨(dú)生子女在很小的時(shí)候就學(xué)會(huì)了分享和注意他人（兄弟姐妹）的感受，懂得適度的控制自己的情感和行為，以達(dá)到與他人快樂(lè)相處的目的，而獨(dú)生子女一直在父母無(wú)限的愛(ài)、無(wú)限的妥協(xié)之中成長(zhǎng)，只有在進(jìn)入幼兒園之后才開(kāi)始全面的與其他小朋友接觸，才開(kāi)始慢慢學(xué)習(xí)與同齡人分享快樂(lè)，所以對(duì)自己情感和行為的控制的相對(duì)較晚也較少。
（二）人際信任與總體幸福感相關(guān)討論
從總體來(lái)看，人際信任與總體幸福感存在顯著的相關(guān)性。但是通過(guò)本研究還不能說(shuō)明是由于人際信任得分高使得總體幸福感得分高，還是總體幸福感得分高使得人際信任得分高。
人際交往是大學(xué)生在大學(xué)期間除了學(xué)業(yè)外需要習(xí)得的另一項(xiàng)重要知識(shí)，而人際交往恰恰又是建立在人際信任之上的，社會(huì)上普遍存在的信任危機(jī)對(duì)大學(xué)生人際信任的影響不可小覷。大學(xué)生的人際信任感高，大學(xué)生在交友、人際關(guān)系處理、異往方面就不會(huì)產(chǎn)生太大的困惑，在情緒、情感方面也就會(huì)更多的產(chǎn)生積極的情感體驗(yàn)，因此培養(yǎng)大學(xué)生積極、向上的心態(tài)，提高其對(duì)生活各個(gè)方面的滿(mǎn)意度，令其體驗(yàn)到更多的人際信任感，這對(duì)提高大學(xué)生的心理素質(zhì)，提升其校園生活質(zhì)量，培養(yǎng)其積極地社會(huì)適應(yīng)能力。同時(shí)應(yīng)鼓勵(lì)大學(xué)生在學(xué)習(xí)、生活中多結(jié)交朋友，更多的去體驗(yàn)一些正面的情緒，避免負(fù)面情緒帶來(lái)長(zhǎng)期的消極影響，以此來(lái)提高大學(xué)生的總體幸福感。
五、結(jié)論
（一）人際信任與總體幸福感在各維度上的差異
在性別維度上，對(duì)總體幸福感中的生活的滿(mǎn)足和興趣因子、精力因子存在顯著的差異；在學(xué)科類(lèi)別維度上總體幸福感中的對(duì)健康的擔(dān)心因子存在顯著的差異；在不同生源地維度上總體幸福感中的生活的滿(mǎn)足和興趣因子、精力因子存在顯著的差異；在是否是獨(dú)生子女維度上，總體幸福感中的對(duì)情感和行為的控制因子存在顯著的差異。
（二）人際信任與總體幸福感的相關(guān)性
人際信任與總體幸福感的總分存在顯著相關(guān)，同時(shí)人際信任與總體幸福感中的對(duì)生活的滿(mǎn)足和興趣也存在顯著的正相關(guān)。
【參考文獻(xiàn)】
[1]張鶴，彭志啟，劉海珍.大學(xué)生主觀(guān)幸福感與人際信任的關(guān)系研究[J].中國(guó)科教創(chuàng)新導(dǎo)刊，2009（07）：128―129.
第7篇：人生低谷范文
文/王偉
都說(shuō)老虎屁股摸不得，效仿皇帝，與皇帝爭(zhēng)風(fēng)雅，比摸老虎的屁股還危險(xiǎn)。乾隆年間就有這樣一位，拿人家乾隆占了的稱(chēng)號(hào)戴在自己的頭上，結(jié)果把自己的小命玩丟了。
乾隆四十六年（1781年）四月，乾隆西巡五臺(tái)山，返回京城時(shí)駐蹕保定。早已退休解職的原大理寺卿尹嘉銓得到了這一消息，虛榮心作祟，想?yún)⒓咏玉{盛典?？山玉{的名單中沒(méi)有他的份。這個(gè)尹嘉銓絞盡腦汁想要參加，思來(lái)想去，想到了自己的父親，道學(xué)家尹會(huì)一，自以為找到最高妙的理由，于是便草擬了兩份奏折：一是請(qǐng)謚號(hào)；二是從祀。他自以為是一箭雙雕，要是得到皇帝恩準(zhǔn)，不但自己撈得一個(gè)孝子名聲，還能風(fēng)光一把。寫(xiě)好這兩份奏折之后，他讓自己的兒子將折子向上呈送，在家里美美地做起了他的清秋大夢(mèng)。
乾隆皇帝看到了尹先生這兩份完全是從自己私利出發(fā)的折子，立時(shí)十分惱怒，提起朱筆，批上：“與謚乃國(guó)家定典，豈可妄求？此奏本當(dāng)交部治罪，念汝為父私情，姑免之。若再不安分家居，汝罪不可逭矣！”
乾隆圣喻說(shuō)得清清楚楚明明白白，警告這位尹先生叫他老老實(shí)實(shí)“安分家居”著，他為自己老父請(qǐng)求謚號(hào)“乃國(guó)家定典”，“豈可妄求”。再妄想就是“罪不可逭矣”。一般人到此，恐怕早已經(jīng)出一身冷汗，慶幸老虎沒(méi)有張開(kāi)血盆大口咬下來(lái)，那樣定已身首異處了，要做的事情就是連連禱告“阿彌陀佛”，趕緊夾著尾巴一邊躲著去吧。
可是這位尹先生也不知著了什么魔，偏偏不信這個(gè)邪。他以“古稀老人”自稱(chēng)，又給乾隆上了一道折子，請(qǐng)求“皇上恩準(zhǔn)他父親從祀文廟”。芝麻沒(méi)得到竟然要西瓜了。乾隆帝看到這樣的折子，估計(jì)臉色都得氣綠了，勃然大怒：“竟大肆狂吠，不可恕矣！”
圣喻下了，這就好辦了。承辦官員各盡所能絞盡腦汁羅織罪名，給尹嘉銓扣上“大不敬”、“假道學(xué)”、“偽君子”等等罪名，其中最不可饒恕的罪名是“古稀罪”。因?yàn)?，天子乾隆早就昭示天下，他是“古稀老人”。天子占了的稱(chēng)號(hào)，那是庶民百姓不能摸邊的，普天下無(wú)論人名、地名哪有不避諱的。這位尹先生真是吃了豹子膽，竟然冒天下之大不韙，也敢自稱(chēng)“古稀老人”，爭(zhēng)奪天子的風(fēng)雅，真是活得不耐煩了。
結(jié)局就不用說(shuō)了，對(duì)如此這般自私自利丟了腦袋的尹大人，只能送他倆字：活該！
唐朝怕老婆之風(fēng)盛行
唐太宗貞觀(guān)年間，房玄齡懼內(nèi)，不僅不敢娶妾，就是太宗賞賜的美女，老房也不敢接受。
太宗決定幫老房解決這個(gè)大難題。他先是讓皇后出面，找房夫人談心，講了一通男人三妻四妾的大道理，又說(shuō)皇帝憐惜梁國(guó)公年紀(jì)大了，想賞幾個(gè)美女給他享受。這一招，沒(méi)有奏效。
于是太宗親自出馬，對(duì)房夫人說(shuō)：“你是想活，還是想死？想活，就讓房玄齡娶妾；否則，就死?！狈糠蛉苏f(shuō)：“我寧愿死?！碧诰妥屓硕顺鰜?lái)一杯醋，說(shuō)：“喝了這杯毒酒吧。”房夫人接過(guò)醋，一飲而盡，無(wú)所畏懼。太宗這下沒(méi)轍了，說(shuō)：“這樣的女人我都怕，何況房玄齡呢？”
太宗賜給兵部長(zhǎng)官任瑰兩個(gè)絕色美女，任瑰的夫人不樂(lè)意了，在家里虐待兩位美女，把她們的頭發(fā)拔了個(gè)精光。太宗聽(tīng)說(shuō)后，派人送了壺酒來(lái)，對(duì)任夫人說(shuō)：“這是毒酒。任瑰堂堂三品官，娶妾是符合規(guī)定的。你今后好好對(duì)待這兩位，就不用喝；要是敢說(shuō)不，就馬上喝了它?！比畏蛉艘话?，說(shuō)：“我和任瑰是結(jié)發(fā)夫妻，以前他無(wú)官無(wú)職，我們互相鼓勵(lì)才有了今天的榮華富貴。他如果移情別的女人，我還不如死了！”說(shuō)完喝了酒，躺著等死。當(dāng)然，這也不是真的毒酒，任夫人睡到半夜就醒了。太宗沒(méi)辦法了，對(duì)任瑰說(shuō)：“你家夫人如此剛烈，我也害怕。”
第8篇：人生低谷范文
【摘要】 目的 觀(guān)察不同濃度地塞米松對(duì)體外培養(yǎng)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(hMSCs)成骨分化、增殖能力及凋亡率的影響。方法 以梯度密度分離法獲取人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)，以1×10-9、1×10-8、1×10-7、1×10-6mol/L 4種不同濃度地塞米松分別處理細(xì)胞。檢測(cè)各組細(xì)胞的堿性磷酸酶（ALP）活性；RTPCR法檢測(cè)骨橋蛋白(OPN)基因的表達(dá)；四甲基偶氮唑藍(lán)（MTT）比色法測(cè)定各組細(xì)胞的增殖率；流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞凋亡率。結(jié)果 低濃度(1×10-9mol/L)地塞米松對(duì)ALP的表達(dá)無(wú)顯著作用(P>0.05)，而1×10-8mol/L及以上濃度的地塞米松可明顯增加ALP的活性(P0.05)，1×10-8mol/L及以上濃度的地塞米松可明顯抑制細(xì)胞的增殖(P
【關(guān)鍵詞】 間充質(zhì)干細(xì)胞；地塞米松；堿性磷酸酶；骨橋蛋白；細(xì)胞增殖；凋亡
Abstract： Objective To observe the effect of dexamethasone on the biological characteristics of human mesenchymal stem cells (hMSCs) derived from bone marrow in vitro.Methods The primary hMSCs were isolated and cultured in vitro．In subcultures，hMSCs were respectively treated with four different concentrations of dexamethasone(1×10-9，1×10-8，1×10-7 and 1×10-6mo1/L)．The alkaline phosphatase(ALP) activity was measured；mRNA of osteopontin was observed by reverse transcriptase polymerase chain reaction(RTPCR);the proliferation of hMSCs was evaluated by MTT assay；apoptosis was examined with flow cytometer.Results Treatment of cells with high concentration of dexamethasone(1×10-8，1×10-7 and 1×10-6mo1/L) for 8 days led to a significant increase in ALP activity(P
Key words：mesenchymal stem cells；dexamethasone；alkaline phosphatase；osteopontin；cell proliferation；apoptosis
骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(human mesenchymal stem cells，hMSCs)是近年來(lái)骨組織工程和干細(xì)胞研究的熱點(diǎn)種子細(xì)胞之一。目前已知，地塞米松可以誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞方向分化，但是地塞米松對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞影響的系統(tǒng)性研究較為鮮見(jiàn)。本文探討不同濃度地塞米松對(duì)體外培養(yǎng)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化、增殖能力及凋亡率等方面的作用，旨在更深入地了解地塞米松對(duì)hMSCs生物學(xué)特性的影響。
材料與方法
1 主要試劑
DMEM培養(yǎng)基（Hyclone公司）、地塞米松（Sigma公司）、堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）定量檢測(cè)試劑盒（Sigma公司）、Annexin V凋亡檢測(cè)試劑盒（Bender公司）、TRIzol（Sigma公司）。
2 人hMSCs的體外培養(yǎng)與觀(guān)察
骨髓標(biāo)本均取自無(wú)血液疾病或骨病的成年人，事先征得所有獻(xiàn)髓者的同意。將抽取的紅骨髓以磷酸緩沖液（Phosphate Buffered Saline，PBS）稀釋制成懸液，小心疊加至淋巴細(xì)胞分離液之上，離心，收集呈云霧狀的有核細(xì)胞層，接種于10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液中，置于37℃，5%CO2及飽和濕度條件下孵育定期換液，待細(xì)胞生長(zhǎng)至90%融合時(shí)，消化傳代。隨機(jī)抽取生長(zhǎng)良好的細(xì)胞分5組：1×10-9 、1×10-8、1×10-7、1×10-6mol/L地塞米松組和不含地塞米松的對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組分別稱(chēng)為1×10-9 、1×10-8、1×10-7、1×10-6mol/L組。利用倒置相差顯微鏡逐日觀(guān)察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)情況。
3 四甲基偶氮唑藍(lán)（MTT）比色法測(cè)定hMSCs的增殖率
取hMSCs以2000/孔接種于96孔板培養(yǎng)，隨機(jī)分組后加入指定濃度的地塞米松，對(duì)照組則不加地塞米松。6天后加無(wú)血清DMEM培養(yǎng)液100μl，MTT 10μl，置37℃孵育4小時(shí)，加入十二烷基磺酸鈉（SDS）100μl，37℃放置2小時(shí)，經(jīng)酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度OD。依次測(cè)定各實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組細(xì)胞的相對(duì)增殖率ODMTT，每組測(cè)定14孔。
4 ALP活性的測(cè)定
hMSCs以2000/孔接種于96孔板培養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)組加入不同濃度的地塞米松。培養(yǎng)8天后加入100μl二已胺醇，50μl 3mmol/L PNPP，37℃孵育30分鐘，加入50μl 0.2 mmol/L NaOH終止反應(yīng)，經(jīng)酶標(biāo)儀405nm波長(zhǎng)測(cè)ODALP值。每組樣本量為14孔，分別除以對(duì)應(yīng)的ODMTT均數(shù)，得出ALP相對(duì)活性比值。
5 hMSCs凋亡率的檢測(cè)
將hMSCs以5×103/cm2的密度接種于培養(yǎng)皿，分組用地塞米松處理，每組6皿細(xì)胞。地塞米松干預(yù)8天后，采用Annexin V/PI雙染色法對(duì)hMSCs進(jìn)行凋亡率檢測(cè)。取沉淀細(xì)胞490μl，先后加入Annexin V和PI工作液，暗處冰浴10分鐘上機(jī)檢測(cè)。每組樣本量為6個(gè)，每個(gè)樣本至少檢測(cè)10000個(gè)細(xì)胞。
6 逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RTPCR）法檢測(cè)細(xì)胞骨橋蛋白(osteopontin，OPN)基因表達(dá)
6.1 逆轉(zhuǎn)錄（RT）反應(yīng) 取hMSCs，分組用不同濃度的地塞米松干預(yù)12天，TRIzol法抽提細(xì)胞總RNA，反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)合成cDNA。將配制好的反應(yīng)混合物加滅菌純水至20μl，37℃水浴60分鐘，進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)；97℃水浴5分鐘，然后迅速置于冰上。
6.2 聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）擴(kuò)增 引物由上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司合成。OPN引物的上游序列為：5'CTAGGCATCACCTGTGCCATACC3'，下游序列：5'CTACTTAGACTACTTGACCAGTGAC3'，擴(kuò)增片段長(zhǎng)度為330bp。以βactin作為內(nèi)參照，上游序列為：5'TGACGGGGTCACCCACACTGTGCCCATCTA3'，下游序列：5'CTAGAAGCATTTGCGGTGGACGATGGAGGG3' ，擴(kuò)增片段長(zhǎng)度為660bp。PCR條件設(shè)置如下：94℃預(yù)變性5分鐘，94℃變性45秒，57℃退火60秒，72℃延伸90秒，共循環(huán)28次，最后72℃延伸10分鐘，終止反應(yīng)。
6.3 RTPCR產(chǎn)物電泳 取PCR產(chǎn)物5μl，置于1.5%瓊脂糖上，80V電壓下電泳1小時(shí)，觀(guān)察并拍照。
7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
采用完全隨機(jī)方差分析，均數(shù)間比較采用LSD法。處理軟件：SPSS v11.00。
結(jié) 果
1 hMSCs的形態(tài)學(xué)觀(guān)察
原代接種24小時(shí)后即可觀(guān)察到部分細(xì)胞貼壁，大多呈圓形或橢圓形；48～72小時(shí)后大多數(shù)細(xì)胞貼壁，呈現(xiàn)梭形、紡錘形。傳代培養(yǎng)時(shí)hMSCs貼壁速度快，絕大部分可在24小時(shí)之內(nèi)貼壁，為成纖維細(xì)胞狀，伴有突起，核較大，呈橢圓形，核仁清晰(圖1)。在早期培養(yǎng)，以5×103/cm2接種的hMSCs培養(yǎng)5天可達(dá)90%匯合。
hMSCs經(jīng)地塞米松誘導(dǎo)后，形態(tài)上由長(zhǎng)梭形逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)榱⒎叫?、多角型，胞漿色深，含粗大顆粒，胞核明顯(圖2)。觀(guān)察發(fā)現(xiàn)，10-8mol/L及以上濃度地塞米松處理的hMSCs增殖速度比對(duì)照組慢。
2 不同濃度地塞米松對(duì)hMSCs增殖的影響
MTT法顯示，10-9mol/L地塞米松組ODMTT與對(duì)照組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。10-8、10-7和10-6mol/L組的ODMTT值分別為0.994±0.073、0.725±0.085和0.503±0.056，與對(duì)照組相比均有顯著下降，降幅分別達(dá)30.1%、49.0%和64.6%，說(shuō)明這些濃度的地塞米松可明顯抑制體外培養(yǎng)hMSCs的增殖(P
3 地塞米松對(duì)hMSCs ALP活性的影響
hMSCs用不同濃度地塞米松分別處理8天，然后檢測(cè)各組細(xì)胞的ALP活性，結(jié)果如圖4所示。與對(duì)照組相比，低濃度(10-9mol/L)地塞米松對(duì)ALP表達(dá)的影響無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，而10-8mol/L及以上的濃度地塞米松可明顯增強(qiáng)ALP的活性(P
4 地塞米松作用下hMSCs凋亡情況的檢測(cè)
凋亡檢測(cè)結(jié)果顯示（如圖5），體外常規(guī)培養(yǎng)8天的hMSCs凋亡率（%）為3.68±0.21，實(shí)驗(yàn)組的凋亡率（%）分別為5.71±0.10（10-9mol/L組）、7.7±0.09（10-8mol/L組）、8.33±0.21（10-7mol/L組）和12.24±0.19（10-6mol/L組）。由此可見(jiàn)，體外培養(yǎng)的hMSCs凋亡率隨地塞米松濃度的增加而升高。與對(duì)照組相比，各種濃度地塞米松實(shí)驗(yàn)組凋亡率的增加均有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P
5 地塞米松對(duì)hMSCs OPN基因表達(dá)的影響
hMSCs經(jīng)10-9、10-8、10-7、10-6mol/L地塞米松作用12天后，均有OPN mRNA表達(dá)，其表達(dá)強(qiáng)度隨著地塞米松濃度增加而增強(qiáng)，對(duì)照組則無(wú)相應(yīng)的條帶出現(xiàn)（圖6）。
討 論
hMSCs是一種源自骨髓基質(zhì)的干細(xì)胞，具有多向分化潛能，經(jīng)不同條件誘導(dǎo)，可以分化為包括骨、軟骨、脂肪和神經(jīng)等多種組織細(xì)胞。hMSCs經(jīng)地塞米松誘導(dǎo)后可以分化為成骨系細(xì)胞，外形呈立方形，細(xì)胞器豐富，合成并分泌特異性ALP、Ⅰ型膠原、骨鈣素和OPN等［1］。筆者的前期研究亦證實(shí)，MSCs經(jīng)10-8mol/L地塞米松誘導(dǎo)后，細(xì)胞形態(tài)由成纖維細(xì)胞狀轉(zhuǎn)化為立方形或多角形，ALP染色、Ⅰ型膠原和骨鈣素的免疫組化染色及鈣化結(jié)節(jié)Von Kossa染色呈陽(yáng)性，具備了成骨細(xì)胞的特性［2］。本文在此基礎(chǔ)之上，深入研究10-9、10-8、10-7和10-6mol/L 4種不同濃度地塞米松對(duì)MSCs成骨能力、增殖能力和凋亡率的影響。
本研究選取ALP活性和OPN mRNA的表達(dá)分別作為評(píng)價(jià)細(xì)胞成骨能力的早、晚期指標(biāo)。ALP是成骨細(xì)胞及其分化的早期標(biāo)志性酶，能水解有機(jī)磷酸鹽釋放出無(wú)機(jī)磷，并啟動(dòng)鈣化進(jìn)程。ALP的活性在一定程度上反映了細(xì)胞的成骨能力。本研究數(shù)據(jù)顯示，高濃度（≥10-8mol/L）地塞米松可顯著增強(qiáng)hMSCs的ALP活性，且活性隨著地塞米松濃度的升高而增強(qiáng)，可達(dá)到對(duì)照組的2～ 3.5倍，但10-7與10-6mol/L濃度組之間無(wú)顯著差異，提示10-8mol/L及以上濃度的地塞米松可促進(jìn)hMSCs成骨分化，但過(guò)高的濃度（10-6mol/L）并不能提供更強(qiáng)的成骨誘導(dǎo)功效，即存在“天花板效應(yīng)”。OPN是由成骨細(xì)胞分泌的一種高度磷酸化的糖蛋白，在類(lèi)骨質(zhì)的礦化過(guò)程起重要作用［3，4］。在成骨細(xì)胞分化晚期(基質(zhì)礦化期)，OPN與骨鈣素等一起分泌至細(xì)胞外基質(zhì)中，與鈣、磷及膠原分子結(jié)合，形成羥基磷灰石結(jié)晶。本研究的RTPCR結(jié)果顯示，不同濃度的地塞米松組均有OPN mRNA表達(dá)，其表達(dá)強(qiáng)度隨著地塞米松濃度增加而增強(qiáng)。本研究結(jié)果證實(shí)地塞米松可促進(jìn)體外hMSCs的成骨分化［5-7］，并提示地塞米松對(duì)hMSCs的成骨誘導(dǎo)能力上，10-7、10-6mol/L濃度較10-8mol/L更強(qiáng)。
有研究表明，地塞米松在促進(jìn)hMSCs成骨分化的同時(shí)，抑制細(xì)胞的增殖［1，8］。本研究進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，在10-9至10-6mol/L的濃度范圍內(nèi)，地塞米松對(duì)hMSCs增殖的抑制作用呈劑量相關(guān)性，地塞米松濃度越高抑制作用越明顯。但Walsh等［9］的實(shí)驗(yàn)表明10-8mol/L地塞米松對(duì)MSCs增殖影響存在不確定因素，促進(jìn)、抑制或無(wú)影響都有可能。本文的凋亡檢測(cè)結(jié)果顯示，4種濃度的地塞米松均可增加體外培養(yǎng)hMSCs的凋亡率，且凋亡率隨地塞米松濃度的升高而增高。Oshina等［10］研究亦證實(shí)地塞米松能有選擇性地促進(jìn)分化能力差的hMSCs凋亡。
在以MSCs為種子細(xì)胞的骨組織工程中，應(yīng)處理好地塞米松促進(jìn)成骨分化與抑制增殖和增加凋亡之間的關(guān)系。地塞米松的工作濃度以10-8mol/L為佳，此濃度可顯著增強(qiáng)MSCs的ALP活性，同時(shí)對(duì)細(xì)胞增殖的抑制作用較小，凋亡率也不高，可以獲得代謝活躍、分化功能良好的有活力的種子細(xì)胞。
此外我們認(rèn)為，高濃度的地塞米松雖能促進(jìn)MSCs的成骨分化，但明顯地抑制細(xì)胞增殖，并導(dǎo)致細(xì)胞凋亡的增加，從而使得具有成骨分化能力的有效骨祖細(xì)胞數(shù)量大量減少，最終對(duì)成骨作用在總體水平上起負(fù)面效應(yīng)。另有研究表明，地塞米松可以促進(jìn)MSCs成脂分化［11，12］。這兩方面因素協(xié)同作用，使得成骨與破骨作用之間的動(dòng)態(tài)平衡遭到破壞，處于負(fù)平衡狀態(tài)，骨量不斷丟失，最終導(dǎo)致骨質(zhì)疏松。這可能是臨床上大量應(yīng)用糖皮質(zhì)激素導(dǎo)致骨質(zhì)疏松和（或）股骨頭無(wú)菌性壞死的發(fā)病機(jī)制之一［13-15 ］。
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第9篇：人生低谷范文
【關(guān)鍵詞】 絞股藍(lán)；人參皂苷Rb1；高效液相色譜法
文章編號(hào)：1004-7484（2013）-02-0557-02
絞股藍(lán)[1-3]（Gynostemma pentaphyllum）為葫蘆科多年生草質(zhì)藤本植物，有“南方人參”和“第二人參”的美譽(yù)，別名小苦藥、公羅鍋底、五葉藤、遍地生根、甘茶蔓等。20世紀(jì)70年代末至80年代初期，日本著名的絞股藍(lán)研究專(zhuān)家永井正博等[4]先后在絞股藍(lán)中發(fā)現(xiàn)了人參皂苷，并分離得到了80多種皂苷類(lèi)物質(zhì)，確定其為四環(huán)三萜達(dá)瑪烷型結(jié)構(gòu)，其中4種皂苷與4種人參皂苷同物異名。已證明絞股藍(lán)具有減肥、降血脂、調(diào)血壓、延緩衰老、預(yù)防冠心病、抑制癌細(xì)胞、調(diào)節(jié)人體生理機(jī)能、增強(qiáng)機(jī)體免疫力等功能。2002年衛(wèi)生部將絞股藍(lán)列為新資源藥食同源保健品。絞股藍(lán)的黃酮、多糖、微量元素等都具有很好的保健功效，但其主要藥效成分是絞股藍(lán)皂苷。本文采用高效液相色譜法對(duì)絞股藍(lán)中人參皂苷Rb1的含量進(jìn)行了測(cè)定，以期為絞股藍(lán)的應(yīng)用提供一些依據(jù)。
1 儀器、試劑與藥材
LC-10A高效液相色譜儀（日本島津）；島津SPD-10A檢測(cè)器；N2000色譜工作站；HX-06型超聲波清洗器（武漢恒信世紀(jì)科技有限公司）；AE-240型電子天平（梅特勒-托利多（上海）有限公司）。人參皂苷Rb1購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定研究院，批號(hào)：704-200114。甲醇、乙腈（色譜純?cè)噭?，天津科密歐化學(xué)試劑有限公司），水為重蒸餾水，其它試劑均為分析純（均為湖南匯虹試劑有限公司提供）。藥材采自湖南綏寧、桑植、瀏陽(yáng)、平江，經(jīng)湖南省中醫(yī)藥研究院中藥研究所生藥研究室鑒定為為葫蘆科多年生草質(zhì)藤本植物。
2 方法與結(jié)果
2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-0.5%磷酸（20：80）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm；理論板數(shù)按人參皂苷Rb1峰計(jì)算不得低于5000。
2.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱(chēng)取人參皂苷Rb15.15mg，置10ml量瓶中，加甲醇使溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。
2.3 供試品溶液的制備 取產(chǎn)自湖南綏寧絞股藍(lán)藥材粉末（過(guò)三號(hào)篩）約0.5g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱(chēng)定重量，加熱回流1小時(shí)，放冷，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。
2.4 線(xiàn)性關(guān)系考察 精密吸取人參皂苷Rb1（C=0.515mg/ml）對(duì)照品溶液1、3、5、7、9、11μl進(jìn)樣，測(cè)定其峰面積積分值，以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，峰面積積分值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，其回歸方程為：Y=45300x-652.28，r=0.9996。結(jié)果表明人參皂苷Rb1在0.515-5.665μg范圍內(nèi)具有良好的線(xiàn)性關(guān)系。
2.5 精密度試驗(yàn) 取絞股藍(lán)藥材按供試品溶液的制備方法制成供試品溶液。精密吸取10μl，連續(xù)進(jìn)樣6次，測(cè)定其峰面積，計(jì)算RSD為1.2%。
2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取2.5項(xiàng)下的供試品溶液，精密吸取10μl，于0、4、8、12、24小時(shí)進(jìn)樣，測(cè)定其峰面積。計(jì)算，RSD為1.6%，說(shuō)明24h內(nèi)供試液穩(wěn)定性良好。
2.7 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批藥材制成供試品溶液6份，測(cè)定含量。結(jié)果RSD1.6%，說(shuō)明方法重復(fù)性好。
2.8 回收率試驗(yàn) 精密稱(chēng)取6份已知含量的本品0.3g，每份加入人參皂苷Rb1約1mg，按供試品測(cè)定項(xiàng)下測(cè)定。人參皂苷Rb1平均回收率為97.56%，RSD為1.05%。結(jié)果見(jiàn)表1。
2.9 樣品含量測(cè)定 取采自湖南綏寧、桑植、瀏陽(yáng)、平江的絞股藍(lán)藥材，按供試品溶液的制備方法制備成供試液，分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入高效液相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算，即得，結(jié)果見(jiàn)表2、圖1、圖2。
3 討論
3.1 絞股藍(lán)具有減肥、降血脂、調(diào)血壓、延緩衰老、預(yù)防冠心病、抑制癌細(xì)胞、調(diào)節(jié)人體生理機(jī)能、增強(qiáng)機(jī)體免疫力等功能，其中絞股藍(lán)皂苷是其主要藥效成分。目前對(duì)絞股藍(lán)的研究多數(shù)集中在絞股藍(lán)總皂苷上，其中人參皂苷Rb1是皂苷的主要成分之一，文獻(xiàn)報(bào)道，主要采用紫外分光光度法測(cè)定絞股藍(lán)總皂苷。我們選擇了人參皂苷Rb1作為絞股藍(lán)藥材含量控制指標(biāo)，采用高效液相色譜法，經(jīng)方法學(xué)考察和湖南省4個(gè)不同產(chǎn)地絞股藍(lán)的測(cè)定，表明該方法可靠、便捷，可以作為控制絞股藍(lán)藥材的質(zhì)量方法。
3.2 絞股藍(lán)皂苷的含量與品種、產(chǎn)地氣候、土壤條件、采收時(shí)間、采樣部位等有很大關(guān)系，對(duì)湖南省4個(gè)不同產(chǎn)地的絞股藍(lán)全草進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明不同地區(qū)絞股藍(lán)的人參皂苷Rb1含量有較大差異，其中以湖南綏寧縣產(chǎn)質(zhì)量好。
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