實驗動物研究精選(九篇)

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第1篇：實驗動物研究范文

[關(guān)鍵詞] 模型；實驗動物；脾臟；

脾臟是機體最大的淋巴器官，脾臟在生理學上具有造血，儲血，濾血和破壞衰老細胞的作用，同時脾臟具有特異性和非特異性免疫功能。已知脾臟有廣泛的抗感染和抗腫瘤的作用[1]。脾臟疾病動物模型就是指醫(yī)學研究中建立的具有人類外傷性和病理性脾臟疾病模擬表現(xiàn)的動物實驗對象和相關(guān)材料，為臨床開展脾臟手術(shù)以及相關(guān)脾臟疾病的深入研究提供前提[2]。本文就目前主要開展的幾種脾臟疾病動物模型加以綜述。

1 保留脾臟功能手術(shù)的實驗動物模型

1.1 犬部分脾切除模型

犬的脾臟血管分布有明顯的規(guī)律性，脾動脈距脾門稍遠處分為上下兩支：脾上葉動脈和脾下葉動脈，分別分布于脾上、下葉，每葉動脈又分為兩個分支，即脾上段動脈和脾中上段動脈及脾中下段動脈和脾下段動脈，分別營養(yǎng)各個脾段。這種脾葉段血液供應的特點為脾葉段切除提供了解剖學依據(jù)。

選用健康成年犬，雌雄不限。按常規(guī)術(shù)前準備。用3%戊巴比妥鈉（30 mg/kg）靜脈麻醉。仰臥固定于手術(shù)臺，腹部皮膚常規(guī)消毒鋪單。行剖腹術(shù)后先探查肝、膽、脾。并測量脾臟長度（正常15.5~21.5 cm，平均18.23 cm），觀察脾臟血管主干、分支及其與脾葉的關(guān)系。預實驗時可先用無損傷血管鉗夾預切除脾臟部分的供應血管如上葉動脈，該部分脾臟缺血后與正常供血部分脾臟出現(xiàn)明顯分界，以判斷是否達到按實驗設(shè)計要求預切除脾臟的范圍。測量正常供血部分脾臟長度以確定切除部分脾臟所占比例。然后游離脾臟上極，切開脾腎韌帶和脾胃韌帶，雙重結(jié)扎脾動脈上葉分支，在脾缺血線處切斷脾上葉，使脾切斷端呈凹陷的魚口狀以便于縫合脾斷端，結(jié)扎脾斷端創(chuàng)面的中央動脈和其它血管分支。用4號絲線水平褥式縫合脾斷端，再用大網(wǎng)膜覆蓋縫合于脾創(chuàng)面。檢查確無出血后即可關(guān)腹。切除的脾臟按實驗要求處理后即可用于研究的自身對照。手術(shù)后靜脈注射50%葡萄糖60 ml，根據(jù)實驗目的選用適當抗生素。動物按一般術(shù)后處理，喂養(yǎng)普通飼料，觀察至傷口愈合。

1．2 大鼠脾臟部分或次全切除模型

實驗性大部分脾臟切除術(shù)亦可根據(jù)實驗設(shè)計選用較小型動物，如雜交系大鼠。手術(shù)方法與大型動物模型類似。大鼠實驗性脾臟部分切除或次全切除術(shù)模型制作較方便，實驗者可一人完成手術(shù)。復制的模型亦較穩(wěn)定，且費用較低，有較多優(yōu)點。

唯小型動物對手術(shù)耐受性差，制作模型中動物有一定死亡率，在實驗設(shè)計時應予考慮。

Wistar大鼠，雌雄不限。1%戊巴比妥鈉腹腔內(nèi)注射麻醉，劑量為15 mg/kg；或開放式乙醚吸入麻醉。麻醉成功后，用帶有橡皮筋的塑料夾夾住大鼠四肢，將其固定于手術(shù)臺板上，消毒后左上腹肋緣下1.5 cm處作斜切口入腹，游離脾臟，在脾門處結(jié)扎切斷脾臟下極血管，然后行脾臟部分切除或次全切除，脾臟斷端徹底縫合止血，關(guān)閉腹腔完成手術(shù)。術(shù)后予分籠喂養(yǎng)。

1．3 脾切除自體脾組織大網(wǎng)膜移植模型

臨床上當外傷后脾臟損傷嚴重，傷及脾門或為脾臟碎裂性傷，無法行脾修補或保留部分脾臟時需行全脾切除術(shù)。全脾切除術(shù)后為保留脾臟功能則需行脾移植術(shù)。目前，自體脾組織大網(wǎng)膜內(nèi)移植術(shù)是較常用的方法。具有手術(shù)操作簡單，脾組織成活率較高和可恢復部分脾臟功能的優(yōu)點。脾切除自體脾組織大網(wǎng)膜內(nèi)移植模型對于研究術(shù)后機體的病理生理變化，移植脾的組織再生形態(tài)、脾功能恢復的程度、時間及其抗感染能力等均具有重要價值。

此模型大、中、小型動物均可選用。按上述模型的操作步驟進腹后，常規(guī)方法行脾切除術(shù)，切脾時注意保持脾包膜完整。如有副脾則同時切除。立即將切除的脾切成小塊狀：如犬等大型動物，則將脾切成1 cm×1 cm×0.5 cm小脾塊。取50~70個小脾塊，以0.5 cm的間距平均置于展平的大網(wǎng)膜上；如鼠等小型動物，則將脾切成1 mm×1 mm×1 mm的脾碎塊置于展平的大網(wǎng)膜上。然后將大網(wǎng)膜游離端翻起覆蓋脾塊，使移植脾組織上下面均有網(wǎng)膜覆蓋，適當縫合大網(wǎng)膜固定脾組織，把置入脾組織的網(wǎng)膜袋固定于脾窩處，關(guān)腹。術(shù)后處理同上。注意移植的脾組織總量不得少于正常脾臟的1/3，否則移植成功后可能顯示脾功能低下。保留脾臟功能手術(shù)的實驗動物模型制作前后和模型成功后可根據(jù)實驗設(shè)計檢測各種生理和病理指標。

2 門脈高壓癥疾病動物模型

門靜脈系統(tǒng)血流受阻和血流量增加，導致門靜脈及其屬支血管內(nèi)壓力升高，稱為門靜脈高壓癥。門靜脈高壓癥手術(shù)中脾臟具有重要的角色。門靜脈通常有腸系膜上靜脈和脾靜脈匯合而成。門靜脈系沒有靜脈瓣，因此門靜脈壓力過高時，其所屬系統(tǒng)內(nèi)血流可以形成逆流，從而形成脾腫大與脾功能亢進。研究發(fā)現(xiàn)，門靜脈高壓癥可引起脾大和脾功能亢進，反之脾臟也參與肝硬化的形成[1，3]。

四氯化碳肝硬化動物模型[2]：Wistar或SD大鼠，體重180~200 g，皮下注射40%~50%四氯化碳油溶液（0.3 ml/100g），每周2次，第二周開始，隔日以20%~30%酒精1 ml灌胃（或作為唯一飲料），飼以單純玉米面（混以0.5 %膽固醇），10周后形成肝硬化，造成門靜脈高壓。該模型為目前國內(nèi)外常采用的動物模型，可靠且復制時間短，肝纖維化進展穩(wěn)定，適合于肝硬化發(fā)生發(fā)展過程的動態(tài)研究。

管洪庚[4]選取雄性體重為200～220 gWistar大鼠，將硫代乙酰胺(Thioacetamide，TAA)加蒸餾水配制成3%溶液，對大鼠腹腔內(nèi)注射60 mg/kg (即2 ml/kg)，每日1次，8周后形成肝硬變，并繼續(xù)維持給藥，分別于0、8、10、12、14、16、18周取動物用于實驗。

3 脾細胞移植動物模型

脾細胞移植又稱脾細胞輸注，是利用脾的造血，抗感染、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)和合成產(chǎn)生VIII:C因子等方面的功能，將脾制備成細胞懸液，通過各種途徑輸注給異體來研究機體免疫功能和治療臨床上某些難治性疾病的一種新方法。臨床上脾細胞移植的途徑有3個： 經(jīng)腹腔內(nèi)注射，這是1963年Woodruff采用的途徑，目的是治療腹腔內(nèi)轉(zhuǎn)移性癌腫和腹水，并取得了初步療效。 經(jīng)淺表靜脈輸注，類同于一般的輸液，只是速度上放慢，這是目前最常用的移植途徑，主要特點是簡單易行，可反復多次輸注。 肝內(nèi)移植法，又分B型超聲波引導下門靜脈插管輸注法和用Seldinger技術(shù)經(jīng)肝動脈插管輸注法。這種方法是基于肝是免疫器官，肝門靜脈血供類同脾內(nèi)環(huán)境，將脾細胞移植到肝內(nèi)期望能獲得免疫耐受和長期存活。此外，采用這種方法治療晚期肝癌，可以將脾細胞直接輸注到癌腫所在地，利用脾細胞的免疫功能（脾細胞本身包含大量的免疫活性細胞，如NK細胞，以及能產(chǎn)生釋放多種淋巴因子），殺傷癌細胞[1]。

陳知水[5]用犬作了兩種途徑同種脾細胞移植的實驗研究。健康雜種犬，重11~18 Kg，雌雄不拘。將動物分為三組，I組為單純脾切除；II組為脾切除+經(jīng)淺表靜脈移植同種脾細胞；III組為脾切除+經(jīng)門脈輸注同種脾細胞。II組與III組動物進行配對研究，脾臟互為供受。將切下的脾臟用MSE組織搗碎機制得脾細胞懸液，作常規(guī)計數(shù)和活力測定。然后將III組動物的脾細胞懸液經(jīng)淺表靜脈輸注給II組，同時又將II組動物的脾細胞懸液從脾靜脈插管至門脈主干輸注給III組動物肝內(nèi)。兩組動物輸注的脾細胞懸液為60~130 ml，計有活力的細胞數(shù)15~40億個。術(shù)中用琥珀酰氫考100 mg沖擊，術(shù)后3 d氫考100 mg/d，自第四天起改口服免疫抑制藥物硫唑嘌呤2 mg?kg-1?d-1，強的松1 mg?kg-1?d-1，維持至1個月。術(shù)后每天觀察犬的一般情況（包括飲食、精神活動、大小便等）以及作實驗指標測定。

4 脾臟腫瘤動物模型

臨床上脾臟的原發(fā)腫瘤十分少見。國外報道脾臟原發(fā)性腫瘤占全部腫瘤的0.64%，而脾臟的惡性腫瘤僅占0.13%[6]。雖然如此，脾臟原發(fā)性惡性淋巴瘤仍然是脾臟原發(fā)性惡性腫瘤中最高者，約占脾臟惡性腫瘤的2/3以上，原發(fā)于脾臟淋巴組織。目前有關(guān)脾原發(fā)性惡性淋巴瘤的病因和發(fā)病機制尚不清楚，與其他腫瘤相比基礎(chǔ)和臨床研究深度仍受限，為了深入研究此病，張寧等[7-9]成功建立了人脾原發(fā)性惡性淋巴瘤裸鼠原位移植模型和皮下移植模型。該模型完整的模擬了人脾原發(fā)性惡性淋巴瘤的臨床過程。用鼠齡3~5周的BALB/C-nu/nuSPF(specific patnogen free)裸小鼠，體重17~20 g，雌雄兼用。無菌切取的活體人原發(fā)性惡性淋巴瘤組織置入PRM1-1640培養(yǎng)液中，清除非瘤組織，將其剪切成1 mm3組織小塊，供移植用。皮下移植：用2.5%的碘酊和75%的酒精消毒裸鼠背部皮膚，用無菌套管針抽吸已剪碎的瘤組織小塊行四肢皮下種植。原位移植：裸鼠在0.5%巴比妥鈉（5 mg/kg）腹腔注射麻醉下取左側(cè)腹切口、暴露脾臟，在脾臟上極被膜處做2 mm長切口，經(jīng)切口將2粒2 mm3瘤塊植入脾實質(zhì)內(nèi)，75 %酒精紗布壓迫止血，10/0無損傷縫線縫合脾被膜，將脾放回原處，關(guān)腹。術(shù)后逐日觀察腫瘤生長情況，傳代或作有關(guān)指標檢測。

5寄生蟲感染脾臟動物模型

目前在寄生蟲感染脾臟方面的研究較少，國內(nèi)主要在瘧原蟲病和血吸蟲病方面的研究。國內(nèi)第三軍醫(yī)大學曾用瘧原蟲感染小鼠脾臟研究自體脾組織移植[10]。即動物于脾切除自體脾組織移植術(shù)后3個月經(jīng)腹腔接種0.2 ml含3×105個感染約氏瘧原蟲的紅細胞混懸液，造成小鼠急性非致死性瘧原蟲感染。然后各組動物于脾手術(shù)后1周、1、2、3個月和瘧原蟲感染后第6、10、14、18、24、30 天處死取脾進行各項指標檢測。模擬血吸蟲自然感染肝脾動物模型主要集中在寄生蟲學方面的研究[2]。

總之，隨著對脾臟的深入研究，相應的更多脾臟實驗動物模型將建立或更完善。同時，實驗動物模型也將推動著脾臟研究的向前發(fā)展。

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第2篇：實驗動物研究范文

關(guān)鍵詞：醫(yī)學實驗動物學；教學內(nèi)容；教學方法；考核評價機制

中圖分類號：G424文獻標識碼：A文章編號：1674-9324（2018）02-0272-02

高等醫(yī)學院校《醫(yī)學實驗動物學》是碩士研究生必修課程之一，它是進行基礎(chǔ)醫(yī)學研究的基本課程。據(jù)相關(guān)調(diào)查顯示，生物學和醫(yī)學中60—70%的課題要選用合適的實驗動物進行相關(guān)研究；而藥理學、生理學、病理學實驗和外科學實驗等超過70%科研研究領(lǐng)域需要實驗動物參與實驗[1-2]；此外，實驗動物廣泛應用于教學培訓、醫(yī)學研究、藥品、生物制品、食品等功能及安全性評價領(lǐng)域[3-4]。實驗動物學作為一門獨特的學科對生命科學領(lǐng)域研究起著越來越重要的作用。

《醫(yī)學實驗動物學》課程如此重要，因此，如何做好這門課程的教學工作給授課教師提出了更高的要求。結(jié)合近年來實驗動物在使用過程中出現(xiàn)的一些問題，我們對動物實驗課教學從調(diào)整教學內(nèi)容、改進教學方法、改革考核方式等方面做出相應的改革。經(jīng)過兩輪的教學改革取得了良好的教學效果，充分調(diào)動了學生學習的積極性和求知欲，培養(yǎng)了學生嚴謹、科學的學習態(tài)度，切實提高了學生的基本操作技能，激發(fā)了學生學習的主動性，培養(yǎng)了從發(fā)現(xiàn)問題、分析問題到解決問題的科學研究思路，增強了團隊協(xié)作意識及能力，全面調(diào)高了研究生教學質(zhì)量。在此，我們結(jié)合近2年對碩士研究生《醫(yī)學實驗動物學》的教學改革情況，對我校遵義醫(yī)學院珠海校區(qū)本門課程的教學進行相關(guān)教學總結(jié)，希望進一步促進醫(yī)學實驗動物學教學改革。

一、優(yōu)化教學內(nèi)容，理論與實驗整合優(yōu)化

摒棄“灌輸式”教育模式，將20學時的理論教學降至16學時。我們充分利用學校研究生網(wǎng)絡(luò)教學平臺、理論課程其他相關(guān)教學內(nèi)容課件以“學習筆記”形式進行網(wǎng)絡(luò)教學。我們將教材中所列10個章節(jié)理論教學分為五大專題進行教學：專題一，實驗動物在生命科學領(lǐng)域重要作用；專題二，動物福利與動物倫理；專題三，實驗動物基本操作技術(shù)；專題四，人類疾病動物模型；專題五，基因工程動物與轉(zhuǎn)基因動物的建立。這五大模塊從不同的角度展示了作為醫(yī)學生應具備的基本知識。而實驗教學內(nèi)容，則由16學時增為32學時，實驗教學將分為基礎(chǔ)性實驗、綜合性實驗和設(shè)計性實驗這種“三步法”教學來與理論相呼應，進一步將理論融入到實踐中，在嚴格遵循“3R”原則的前提下提高學生的動手操作能力。我們本著“不放棄教材，但不局限于教材”的原則，根據(jù)專題實驗的需要，精選教材中相關(guān)的章節(jié)進行講述；對于教材中沒有及時更新或沒有詳細闡述的部分，借助互聯(lián)網(wǎng)資源進行適當補充，做到有的放矢。

二、采用多元化教學方法

我們采用視頻教學、PBL教學和網(wǎng)絡(luò)教學平臺相結(jié)合的多元教學方法。首先，在實驗教學過程中貫徹實驗動物福利“3R”原則和動物倫理觀，規(guī)范實驗操作。實驗課中倡導和強化實驗動物福利倫理觀念是實驗動物學教學改革必不可少的環(huán)節(jié)之一，將動物福利觀落實到具體實驗操作如抓取、保定、給藥、采血、處死等各環(huán)節(jié)中，善待動物，及時制止并糾正學生不規(guī)范操作，對于虐待動物者給予批評警告并納入期末成績考核。

其次，我們在教學中部分專題還引入“PBL”教學模式，以學生為主體，以問題為中心，在教師的整體把握和指導下，強調(diào)學生的主動參與[5-6]。比如，在動物福利這個專題中，我們引入“如何理解動物福利”、“動物解放表現(xiàn)在哪些方面”、“道德進步與動物福利的關(guān)系”、“我們在實驗中應該如何合理對待動物”以及“動物應激反應與實驗結(jié)果關(guān)系”等問題，通過實驗操作及實驗體會分組進行相關(guān)討論，并寫出相關(guān)匯報，以加深對動物福利的理解與認識，通過“問題式探討”激發(fā)學生學習興趣，增強其自主查閱文獻、收集資料等能力。學生是教學中的主體，是教學最終成果的體現(xiàn)者，只有保證學生成為這樣的角色，才能實現(xiàn)最終的教學目的。教師角色也發(fā)生了轉(zhuǎn)變，由知識的傳授者、灌輸者、知識權(quán)威、教學中心，轉(zhuǎn)變?yōu)榻虒W活動的組織者、引導者、參與者和研究者，這樣，在教與學的矛盾中，才能促使教師成為創(chuàng)新教學的主要方面，使其正確地把握創(chuàng)新教學的方向。

此外，我們還利用網(wǎng)絡(luò)資源及購買的實驗教學視頻進行直觀教學，參考資料有武漢大學實驗動物中心錄制的“實驗動物”；國外動物福利組織提供的“共享世界”；國家衛(wèi)生部錄制的“動物基本操作技術(shù)”、“動物模型基本病理過程”、“顯微注射法建立轉(zhuǎn)基因動物”；錢永祥與梁文道關(guān)于“動物倫理與道德進步”的學習視頻等。多元化教學方法的應用使教學過程形象化、直觀化，達到了文字語言描述難以達到的效果，便于學生進行觀察和思考，利于學生分析問題和解決問題。

三、構(gòu)建合理的考核評價機制

我們根據(jù)學生實際情況，制定評價考核表，從規(guī)范操作動手能力評價、創(chuàng)新能力評價、團隊合作能力評價、科研寫作能力評價等方面進行考核[7]（參考表1）。通過實驗考核評價體系綜合評定學生學習能力，符合大部分學生的意愿，同時培養(yǎng)了學生獨立思考問題的能力。其次，請專家組老師深入課堂進行教學評估。最后在課程結(jié)束后進行相關(guān)問卷調(diào)查（表2）。調(diào)查結(jié)果顯示：98%的同學認為教學改革有助于提高其實驗操作技能和科研能力，能提高其分析問題和解決問題的能力；95%的同學認為可以激發(fā)其興趣和主動性，增強其團隊協(xié)作能力；94%的同學認為教學改革拓寬了他們的知識面；100%的同學對教學方法滿意，認可教學改革。改革也仍有需要改進的方面，比如，鍛煉學生的表達能力和寫作能力，以及增強師生間互動這三方面體現(xiàn)得不是很好。今后將尋求可行的方法提高以上幾個方面的效果。

四、結(jié)語

通過對《醫(yī)學實驗動物學》課程中理論與實驗學時的整合優(yōu)化，使理論知識與實驗內(nèi)容更加緊密地結(jié)合，有助于學生對知識理解的融會貫通，學生也更能從動物的角度考慮它們應享有的權(quán)益，從心里油然而生一種敬畏之情；通過對實驗內(nèi)容的適當擴充，形成相對完整的專題，增加了動手操作機會，培養(yǎng)學生整體的科研思維觀和全面的實驗操作協(xié)調(diào)能力，掌握基本科研思路從發(fā)現(xiàn)問題、提出問題到設(shè)計實驗、解決問題四步法著手去構(gòu)建科研課題研究框架；通過多元化教學方法激發(fā)學生學習興趣和提高其自主學習能力，興趣和主動性是科研的開始；通過完善的考核方式更合理地從學習態(tài)度、創(chuàng)新思維、動手操作、團隊協(xié)作及自主學習5大方面衡量學生的綜合能力，促進學生個性化發(fā)展，同時有利于充分提高該課程研究生教學效果。另外，通過解決和應對專題實驗教學中出現(xiàn)的新問題，提高任課教師的整體素質(zhì)，促進實驗動物學課程的建設(shè)和完善。我們也希望能在不斷進行教學革新基礎(chǔ)上，申請教改項目來引入更多實踐教學，構(gòu)建合理的課程體系，在更大程度上促進實驗動物學的課程建設(shè)和發(fā)展，進一步推進產(chǎn)學研一體化，培養(yǎng)出真正合格的研究生。

作者：張青峰

    參考文獻： 

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第3篇：實驗動物研究范文

糖尿病是由多種病因引起以慢性高血糖為特征的代謝紊亂。糖尿病的病因尚未被完全闡明。目前公認糖尿病不是唯一病因所致的單一疾病，而是復合病因的綜合征，與遺傳、自身免疫及環(huán)境因素有關(guān)。近年來，由于糖尿病的發(fā)病率上升，防治糖尿病已成為科學工作者的一個重要課題。故合適的糖尿病模型是人類研究糖尿病的重要手段。

1 糖尿病研究中動物模型的使用現(xiàn)狀

由于糖尿病的病因不明，誘發(fā)因素較多，因此糖尿病研究所涉及范圍較廣，而且使用的實驗動物種類也較多。主要以哺乳動物為主，如靈長類動物獼猴，主要用于病因?qū)W、遺傳學、神經(jīng)系統(tǒng)、細胞生化及藥物鑒定等方面研究，這樣的動物模型，研究人類糖尿病會更接近自然，結(jié)果也比較理想［1］，但因價格昂貴，難以得到，國內(nèi)較少使用。嚙齒類動物用量最大，如大鼠、小鼠、地鼠、豚鼠等，以藥物篩選和血液生化、病理改變等方面的使用為主。家兔主要用于糖尿病高脂血癥和藥物研究，但由于膽固醇沉積所致的家兔動脈硬化病變與人類動脈硬化機制不盡相同，因此，用家兔作這方面的研究應該有所考慮。近年來人們對進化程度及器官功能更接近于人類且具有自發(fā)性糖尿病傾向的小型豬產(chǎn)生興趣，其為研究糖尿病的病因?qū)W及并發(fā)癥帶來了方便［2］。Rulifson等［3］認為，果蠅的IPC和哺乳單位的胰島β細胞可能來源于一種共同的可以產(chǎn)生胰島素的祖先神經(jīng)元。還認為，遺傳是容易控制的無脊椎動物果蠅，可作為研究人類依賴于胰島素的糖尿病的有用模型。

2 糖尿病動物模型

從Minkowski 和Von Mehring用切除狗胰腺的方法建立DM動物模型以來，已有100多年的歷史。迄今為止，已建立了多種建立DM動物模型的方法，主要有：（1）手術(shù)切除胰腺；（2）化學藥物誘導；（3）自發(fā)性DM；（4）轉(zhuǎn)基因動物等［4］。下面就這幾種常見的動物模型做簡要的綜述。

2.1 手術(shù)切除胰腺［3］

將實驗單位的胰腺全部或大部分切除后，β細胞缺如而產(chǎn)生永久性DM。自100多年前，Minkowski和Von Mehring首創(chuàng)用切除狗胰腺的方法建立DM動物模型以來，國內(nèi)外學者對此法作了改良并得到了成功，均成功制作了穩(wěn)定的1型糖尿病模型。

2.2 化學物質(zhì)損傷

2.2.1 鏈脲佐菌素（streptoxolocin，STZ）

STZ是一種廣譜抗菌素，具有抗菌、抗腫瘤的性能和致糖尿病的副作用，對實驗動物的胰島β細胞具有高度選擇性的毒性作用［5］。STZ誘導的糖尿病因給藥方式不同，其成模效果也有所差別，如采用小劑量分次給藥的方法，則建立與人類1型糖尿病表現(xiàn)相似的大鼠模型，如采用較大劑量一次性注射的給藥方法，則建立與人類2型糖尿病表現(xiàn)相似的大鼠模型，其原理可能與胰島的損傷程度有關(guān)［6］。

1型糖尿病模型（IDDM模型）：靜脈或腹腔一次大劑量注射STZ所制得的速發(fā)型糖尿病系胰島β細胞直接受損害所致：按55mg/kg給大鼠腹腔內(nèi)注射STZ，由于STZ對胰島β細胞的直接損害，胰島的分泌減少而致血糖升高，出現(xiàn)糖尿病的各種表現(xiàn)［6］。多次小劑量注射所制得的遲發(fā)型糖尿病模型則與T淋巴細胞介導的β細胞不斷破壞有關(guān)：應用30mg/kg多次注射STZ誘導大鼠DM，逐漸加重胰島功能損傷，終達失代償，可有效模擬糖尿病病程及發(fā)病機理，并降低動物模型的死亡率7］。這樣建立的動物模型與人類IDDM更接近。

2型糖尿病模型（NIDDM模型）：用STZ處理的新生大鼠成年后將呈典型的NIDDM模型：先以高脂飼料喂養(yǎng)，再加小劑量一次腹腔注射鏈脲佐菌素制作的大鼠模型，表現(xiàn)出肥胖、高血糖伴有高血脂、高胰島素血癥及胰島素抵抗，與2型糖尿病的特征一致［8］。通過高糖高脂飲食誘發(fā)出高胰島素血癥和胰島素抵抗，再通過注射低劑量的STZ打擊胰腺功能，導致胰腺代償性分泌胰島素的功能障礙，最后誘發(fā)出高血糖癥［9］。自發(fā)性高血壓鼠（SHR）在新生期予以STZ處理，成年可獲得2型糖尿病合并原發(fā)性高血壓模型［10］。國外Simionesce等［10］給雄性Syrian金黃地鼠注射STZ，同時予高脂飲食而誘發(fā)糖尿病合并血癥模型，有助于觀察研究糖尿病慢性血管并發(fā)癥。

2.2.2 四氧嘧啶（Alloxan）

四氧嘧啶致動物血糖升高主要是通過破壞胰島細胞導致體內(nèi)胰島素分泌絕對不足［11］。使用四氧嘧啶制備糖尿病模型是一種經(jīng)濟可靠的實驗方法，但實驗條件要求較為苛刻：選取雄性Wistar大鼠，體重190～240 g，在日照時間10 h以上，且陽光充足的條件下飼養(yǎng)，給藥方式采取兩步給藥法，劑量為120 mg/kg（第1天），100 mg/kg（第2天），其成模率最高［11］。也有報道［12］，使用ALX制作糖尿病模型所需的最適合的劑量為200 mg/kg，但注射前須禁食12 h，在注射后4h灌胃50%葡萄糖（5 ml/100 g體重），造模成功率可達到98.1%。

2.2.3 STZ和Alloxan聯(lián)合使用聯(lián)合使用SIz+ALX ，減少了每種試劑的劑量，降低了毒性，增加了動物模型的成功率，同時，因STZ用量的減少而降低了成本。用此法復制模型與臨床I型的糖尿病有很多相似之處，所建立的大鼠DM模型可代表1型糖尿病模型［13］。

2.2.4 烏克坦(Yucatan)［14］小型豬(亦稱墨西哥無毛豬)也是糖尿病研究中一個很好的動物模型，只需一次靜脈注射水合阿脲(alloxan monohydrate)200 mg/kg體重，就可以產(chǎn)生典型的急性糖尿病。其臨床體征包括高血糖、劇渴、多尿和酮尿等。

2.2.5 環(huán)丙庚哌(cyrpoheptadine)［14］大鼠連續(xù)給藥4周后，可見高血糖癥狀，并出現(xiàn)胰島素β細胞的分泌顆粒逐漸消失，胰島素分泌在安靜時呈正常值，當補充葡萄糖過量時，則不能引起胰島素的補充分泌。這與人類糖尿病患者的胰島素動態(tài)極其相似。

2.2.6 注射激素［14］給動物注射糖皮質(zhì)激素、生長激素、甲狀腺素、胰高血糖素拮抗胰島素的作用，可制備內(nèi)分泌性糖尿病動物模型。但激素類藥物制造動物糖尿病模型有共同的缺點：需時長，停藥后緩慢恢復至正常，一般較少應用。

2.2.7 注射生物及生物制品注射生物及生物制品可引起β細胞的破壞，如鼠腦炎病毒、心肌炎病毒（M型變異）可誘發(fā)若干品系的成年小鼠形成糖尿病［14］。靜脈注射卡介苗可造成穩(wěn)定的胰島素抵抗模型［15］，白介素1（IL1）在一定劑量范圍內(nèi)對β細胞有選擇性細胞毒作用，這種由NO介導的細胞毒效應可得到IDDM［2］。

2.2.8 催肥選擇性破壞下丘腦腹內(nèi)側(cè)核的飽食中樞，使動物產(chǎn)生貪食，或用特殊的實驗室飲食催肥，使動物肥胖，繼而產(chǎn)生高血糖、高胰島素血癥和胰島素抵抗［14］。用含37%蔗糖+10%豬油的飼料喂養(yǎng)貴州小香豬，可使其產(chǎn)生嚴重的高血糖癥，空腹血糖均值為（7.45±3.10） mmol/L，可建立較理想的2型糖尿病動物模型［16］。

2.3 自發(fā)性DM［4］是指動物未經(jīng)過任何有意識的人工處置，在自然情況下發(fā)生的DM。包括BB（Bio Breeding）鼠、db(diabetes)鼠和NOD(nonobesiw diabetes)鼠等常用的1型DM 自發(fā)性動物模型，以BB鼠尤為理想。常用的2型DM 自發(fā)性動物模型有中國地鼠(Chinese hamster)，GK(CotoKakisaki Wistar rats)大鼠和NSY鼠(NagoyaShibataYasuda)。而肥胖Zucker大鼠(obese Zucker rat)則是研究2型DM伴高血壓的理想的動物模型［17］，嗜沙肥鼠(psammomys obesus)，PO則適用于LADA的研究。SHHF肥胖大鼠有較強胰島索抗性，可能是胰島素分泌過多導致更多的有賴于脂肪和性別的危險效應［18］。OLETF（OtsukaLong-EvansTokushimaFaty）大鼠［19］是1984年由日本制藥公司開發(fā)的自發(fā)性2型糖尿病鼠種。該鼠膽囊收縮素（CCK）A受體mRNA的表達完全缺失，其攜帶的ODB1和ODB2基因與糖尿病的發(fā)病有關(guān)。該鼠貪食，不好運動，體形肥胖，逐漸出現(xiàn)糖尿病的臨床表現(xiàn)。早期以胰島素抵抗、糖脂代謝紊亂為主，以后逐漸出現(xiàn)胰腺功能減退，晚期合并糖尿病腎臟病變，與人類2型糖尿病極為相似。自發(fā)糖尿病模型是在自然發(fā)生糖尿病的個體和糖負荷發(fā)生異常的個體中實施遺學控制(近交系、突變系等)獲得的。如果糖尿病的病態(tài)能夠作為系統(tǒng)特征表現(xiàn)出來或突變基因能被固定下來的話，則能夠作為病態(tài)模型分類的。但這一階段的病因依然是不清楚的。另一方面，制作病因模型必須制作出轉(zhuǎn)糖尿病基因的動物來用于分析糖尿病的特性。首先要考慮的問題是，在動物體中無論是導人或是敲除和人相同的糖尿病基因，都不能肯定會顯示出和人完全相同的病態(tài)。自發(fā)性糖尿病模型只有在各個變異基因被弄清之后，并發(fā)現(xiàn)了相對應的人的致病基因才有可能說有了病因模型［20］。目前國內(nèi)外不少部門可供應這些動物模型，但價格十分昂貴，且對飼養(yǎng)和繁殖此類動物的條件要求較高，在近交系中常出現(xiàn)變異，繁殖后代的個體差異大，需要專用的動物房及專人管理。

2.4 轉(zhuǎn)基因模型［4］研究者按照自己的意愿，借助于實驗手段來控制實驗動物的特定基因組分及其表達等，而使動物表現(xiàn)特有的遺傳性狀，此稱為轉(zhuǎn)基因技術(shù)，運用此技術(shù)干預的動物稱為轉(zhuǎn)基因動物。有關(guān)l型 、2型糖尿病和MODY 的轉(zhuǎn)基因糖尿病動物均有報道。隨著對糖尿病研究的逐步深入，相應的糖尿病動物模型發(fā)展勢在必然。越接近于人類的動物模型將越受歡迎。轉(zhuǎn)基因動物的建立將為糖尿病研究提供更科學有效的工具。日本的研究者曾報道［21］轉(zhuǎn)錄因子ICER通過競爭性抑制其他的轉(zhuǎn)錄激活因子直接與胰島素基因相結(jié)合，有效地抑制胰島素基因轉(zhuǎn)錄，同時，在糖尿病狀態(tài)下，胰島內(nèi)ICER同分異構(gòu)體的表達增強，因此培育了ICER轉(zhuǎn)基因鼠，發(fā)現(xiàn)該鼠可表現(xiàn)嚴重的高血糖，ICER可強有力地抑制體內(nèi)胰島素基因的轉(zhuǎn)錄，引起嚴重的胰島素缺乏性糖尿病。

3 討論

了解糖尿病實驗動物模型的研究發(fā)展概況可為此疾病發(fā)病機理、遺傳因素及其治療的研究提供必要的依據(jù)。由于實驗動物與人類之間有較多的偏差，所以至今還沒有一種動物模型與人類疾病特征完全吻合。為了深入對疾病的探討，我們必須依賴于實驗動物及模型，這需要我們繼續(xù)對該方面進行進一步的研究。同時在選擇糖尿病動物模型時，需根據(jù)研究目的和實驗條件，合理地培養(yǎng)和利用實驗動物。

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第4篇：實驗動物研究范文

【摘要】 目的:探討菊泰軟膠囊（EST）抗腫瘤作用。方法:將昆明種小鼠右側(cè)腋部皮下移植肝癌（HepA.22）細胞后，分別灌胃給予EST3.0g.kg、1.5g.kg、0.75g.kg3個劑量及CTX（7.5mg.kg）+EST（0.75g.kg）合用劑量，給藥7d后，觀察菊泰軟膠囊對荷瘤小鼠體重、實體瘤重量及抑瘤率的影響。結(jié)果:EST3.0g.kg給藥組的腫瘤平均重量比對照組明顯減?。≒

【關(guān)鍵詞】 菊泰軟膠囊;HepA.22;抗腫瘤

菊泰軟膠囊是以紫錐菊、西洋參為主要原料，采用生物提取工藝，開發(fā)研制出的保健食品。本品內(nèi)含E.P.A.G蛋白、菊多糖、紫錐菊酰胺、西洋參皂甙等多種氨基酸和多種生物活性成分，具有抗疲勞和免疫調(diào)節(jié)作用。本文對其抗腫瘤作用進行實驗研究。

1 材料與方法

1.1 動物 ICR小鼠，雌性，體重18～22g，合格證號:10～1023，由吉林大學實驗動物中心提供。

1.2 藥品 菊泰軟膠囊（EST）原料藥，規(guī)格:0.277g藥粉相當于1粒膠囊，由吉林本草堂制藥有限公司提供;環(huán)磷酰胺（CTX），規(guī)格:200mg.瓶，批號:040123，上海華聯(lián)制藥有限公司產(chǎn)品。

1.3 腫瘤細胞株 小鼠肝癌（HepA.22）傳代小鼠，引自吉林省腫瘤研究所。

1.4 實驗方法 選取傳代7d，腹部膨隆明顯的小鼠，在超凈工作臺中，腹部皮膚消毒，用一次性無菌采血器經(jīng)腹壁刺入腹腔，抽取腹水，放入無菌燒杯中，以生理鹽水稀釋成1:3的癌細胞混懸液，鏡下觀察計數(shù)瘤細胞濃度為3.3×10 7 .ml。于小鼠右側(cè)腋部皮下接種0.2ml.只。接瘤次日，將實驗小鼠隨機分為對照組（蒸餾水20ml.kg）;CTX組（15mg.kg）;菊泰軟膠囊3.0g.kg、1.5g.kg和0.75g.kg3個給藥劑量組;CTX（7.5mg.kg）+EST（0.75g.kg）合用組。共6組，每組12只。每天灌胃給藥1次，隔日稱重體重1次。連續(xù)給藥7d。停藥次日，將動物稱重后脫臼處死，剝離出皮下腫塊稱重，比較各組間腫瘤重量的差異性。并計算出腫瘤抑制百分率。統(tǒng)計學處理方法采用組間t檢驗。

2 結(jié)果

給藥期間，各組動物體重變化、給藥結(jié)束后腫瘤重量及腫瘤生長抑瘤率分別見表1、表2。

表1 對HepA.22荷瘤小鼠腫瘤重量及腫瘤抑制率的影響（略）

注:與對照組比較，* P

表2 對HepA.22荷瘤小鼠體重的影響（略）

注:與對照組比較，均為P>0.05

3 討論

本研究在整體動物身上觀察了EST對ICR小鼠皮下移植小鼠肝癌（HepA.22）腫瘤生長的抑制作用。從表1所顯示的實驗結(jié)果可以看出，EST3.0g.kg、1.5g.kg和0.75g.kg3個給藥組的腫瘤平均重量分別為（1.07±0.42）g、（1.37±0.35）g和（1.33±0.47）g。其中，EST3.0g.kg給藥組的腫瘤平均重量比對照組（1.48±0.41）g明顯減少（P0.05），但仍可看出一些減小的作用趨勢。而且，CTX在單獨應用劑量減半（7.5mg.kg）和EST在單獨應用無效劑量（0.75g.kg）下聯(lián)合使用，對腫瘤細胞的生長也具有明顯的抑制作用（P

參考文獻

第5篇：實驗動物研究范文

關(guān)鍵詞：溶栓治療；肺血栓栓塞；動物模型；超微結(jié)構(gòu)

中圖分類號：R332文獻標識碼：A文章編號：1673-7717(2012)03-0576-04

Experimental Study of Thrombolytic Therapy in Acute Pulmonary Thromboembolism

JIANG Qinhua1, XU Wen1, LI Guoping1, CHEN Yanfan2, WANG Liangxing2, CHEN Shaoxian2

(1.Tongde Hospital of Zhejiang Province,Hangzhou 310012,Zhejiang,China;

2.The First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical College, Wenzhou 325000,Zhejiang,China)

Abstract:Objective：To establish an animal model of acute pulmonary thromboembolism that may be used for thrombolyitc therapy study. Methods：Twentyfour Japanese rabbits were randomly divided into Urokinase group(group UK),control group(group C) and sham operation group (group S).Acute pulmonary embolism models of rabbits were established with injection of autologous blood clots through the right heart catheters.Haemodynamic monitoring were performed by introducing heart catheter through right jugular vein.The ultrastructures of lung tissue were observed by electronic microscope. Results: (1)Radionuclide lung perfusion scan showed radio activity defect or attenuation after embolization and radioactivity filling after thromblysis. (2)PAMP was increased after embolization in both group UK and group C(P

Key words:thrombolytic therapy; pulmonary thromboembolism; animal model; ultrastructure

收稿日期：2011-10-20

基金項目：浙江省中醫(yī)藥科技計劃資助項目(2004C125)

作者簡介：姜琴華（1975-），女，浙江江山人，主治醫(yī)師，碩士，研究方向：中西醫(yī)結(jié)合防治血栓栓塞性疾病。

通訊作者：陳少賢（1946-），男，教授，碩士研究生導師。肺栓塞(pulmonary embolism, PE)是指內(nèi)源性或外源性栓子栓塞肺動脈或其分支引起肺循環(huán)障礙的臨床和病理生理綜合征。肺血栓栓塞（pulmonary thromboembolism, PTE）是PE中最常見的一種類型。肺栓塞溶栓治療為一類肺缺血后再灌注，其溶栓后血運重建是否發(fā)生缺血后再灌注損傷已越來越受到人們的重視。因此通過建立肺栓塞實驗動物模型，對肺栓塞溶栓治療后的病理、病理生理研究具有重要意義。本研究采用自體血栓注入法，建立兔急性肺栓塞實驗模型，通過放射性核素肺灌注掃描顯像明確肺栓塞面積和部位，并在血流動力學基礎(chǔ)上觀察溶栓療效，探討肺栓塞溶栓治療的病理及病理生理變化。

1材料與方法

1.1實驗動物

健康日本大耳白兔(溫州醫(yī)學院實驗動物中心提供)24只，雌雄不拘，體重2.0~2.5kg。隨機分成3組：（1）尿激酶溶栓組（Urokinase，UK組）8只，在注栓后2h予尿激酶（麗珠集團麗寶生物化學制藥有限公司，粵衛(wèi)藥準字1996第006024號）20000U/kg，20mL生理鹽水稀釋后30min輸入。（2）對照組（Control，C組）8只，注栓后同期輸入等量生理鹽水。（3）假手術(shù)組（Sham operation，S組）8只，接受手術(shù)，但未注栓。

1.2肺栓塞動物模型的制備

1.2.1麻醉動物3%異戊巴比妥鈉30mg/kg兔耳緣靜脈麻醉后，仰臥位水平固定兔于動物操作臺上。行氣管插管，連接DW-2000動物人工呼吸機（上海嘉鵬科技有限公司）輔助通氣。吸入空氣、呼吸頻率30次/min、潮氣量15mL/kg。

1.2.2置入導管游離左頸動脈和右頸外靜脈，經(jīng)左頸動脈穿刺插入聚乙烯導管留置。經(jīng)右頸外靜脈置入深靜脈穿刺管（美國ARROW公司）至肺動脈，導管另一端通過YL-4型壓力傳感器與SJ-42型四道生理記錄儀相連，記錄肺動脈壓力波。為避免凝血，各管路均間斷使用滅菌生理鹽水封管。

1.2.3自體血栓制備從頸動脈抽血0.5mL，注入含凝血酶10U的聚乙烯管（直徑為1mm）中，放置37℃水浴箱水浴20min。將血栓置于消毒平皿上切成長約3~4mm柱行血栓，用滅菌生理鹽水反復沖洗后，記數(shù)50個備用。

1.2.4輸入自體血栓經(jīng)深靜脈導管注入柱形自體血栓（直徑1mm，長度3~4mm），反復注入使肺動脈收縮壓（PASP）維持于40~50mmHg左右，共30min，其后穩(wěn)定1h。S組輸入10mL生理鹽水。

1.3觀察指標

1.3.1肺動脈平均壓（PAMP）測定分別在注栓前、注栓即刻、注栓后2h、溶后1h、2h、4h根據(jù)肺動脈壓力波計算PAMP。

1.3.2放射性核素肺灌注掃描顯像（ECT）分別在注栓后1h及動物處死前由頸外靜脈注入99m 锝大分子聚合蛋白（99mTC-MMA），經(jīng)肺掃描觀察肺部顯像。

1.3.3電鏡標本制作及觀察每組3例，取新鮮肺組織1mm×1mm×1mm2~3塊，2.5%戊二醛和1%鋨酸常規(guī)固定，Epon812包埋，LKB-V型切片機切片，H-600型透射電鏡觀察。

1.4統(tǒng)計學處理

采用SPSS 17.0軟件處理，所有數(shù)據(jù)均用±s表示，各組間及同組內(nèi)不同階段均數(shù)的比較用方差分析。

2結(jié)果

2.1各實驗組溶栓前后的PAMP變化

實驗顯示注入栓子后C組及UK組的肺動脈平均壓（PAMP）與注栓前比較均有明顯升高(P

表1各實驗組溶栓前后的PAMP變化(mmHg, ±s)

組別n注栓前注栓后2h溶栓后1h2h4hC組611.0±2.829.0±3.7*27.1±4.0*25.8±3.6*25.3±3.8*UK組610.5±2.329.1±3.4*22.9±3.3*19.0±3.2*16.7±2.4*S組810.4±1.611.1±1.610.9±1.810.6±1.710.5±1.8注：*與注栓前比較P

2.2放射性核素肺灌注顯像

C組：注栓后可見兩肺野放射性分布不均勻，有放射性缺損和放射性稀疏現(xiàn)象。UK組：注栓后可見兩肺野放射性分布不均勻，左肺中部外側(cè)見放射性缺損，左肺下部、右肺下部見明顯放射性稀疏（圖1），溶栓后可見左肺中部、下部及右肺下部明顯放射性充填（圖2）。S組：右肺面積較左側(cè)稍大，兩肺放射性呈生理性分布，肺外帶邊緣及肺尖部放射性分布稍稀疏，但輪廓完整（圖3）。

2.3各實驗組肺組織超微結(jié)構(gòu)

S組兔肺組織超微結(jié)構(gòu)正常，肺泡Ⅱ型上皮細胞表面微絨毛豐富，細胞內(nèi)板層小體較多，毛細血管內(nèi)皮細胞結(jié)構(gòu)正常（圖4）。C組可見肺泡Ⅱ型上皮細胞微絨毛減少，細胞內(nèi)板層小體數(shù)量較多（圖5），血管內(nèi)皮細胞結(jié)構(gòu)較正常未見明顯改變。UK組可見肺泡Ⅱ型上皮細胞脫落，數(shù)量較C組明顯減少，上皮細胞內(nèi)板層小體減少，表面平坦，微絨毛極少，線粒體有空泡變性（圖6），內(nèi)皮細胞可見空泡變性，部分內(nèi)皮細胞線粒體腫脹，并可見核固縮現(xiàn)象。

3討論

3.1急性PTE的動物模型

本實驗在許俊堂等[1]和梁心平等[2]急性PTE模型建立的基礎(chǔ)上加以改進，采用肺動脈內(nèi)注入凝血酶處理的自體血栓建立兔急性PTE模型。PE動物模型的制備方法可分為兩種,即體內(nèi)血栓形成法和體外栓子注入法。體內(nèi)血栓形成由于模擬了PTE發(fā)病時的血液高凝狀態(tài),所以能準確反映機體狀況,但PTE形成后血管的復通率、模型的持久性等問題有待進一步研究探討。體外栓子注入法是將栓子注入體內(nèi)形成PE模型。文獻表明，可用來制作PE模型的栓子很多，包括：血凝塊、微粒子、玻璃體、球狀物、α-凝血酶、明膠海綿等。最客觀、真實、理想的栓子仍是自體血凝塊。因為血液在試管內(nèi)凝固與靜脈血栓形成過程相似，即與最易脫落的血栓―紅色凝血血栓類似，且PTE的“母血栓”85%來自下肢靜脈[3]。然而，由于實驗模型缺乏相應的血栓形成的易患因素，自體血凝塊的極易溶解和碎裂使其應用受到一定限制。在體外使用凝血酶處理的血凝塊，因其很快失活，對體內(nèi)凝血無影響，形成的血栓接近體內(nèi)自然形成者，是理想的制備PTE模型的栓子。目前國內(nèi)外對PTE溶栓前后病理、病理生理變化的研究主要通過結(jié)扎或鉗夾肺動脈、氣囊堵塞肺動脈以及經(jīng)導管用異物封堵肺動脈的方法制作肺血管缺血再灌注動物模型[4-7]，這些模型雖可明確再灌注時間點，但不能很好反映血栓栓塞時機體的應答狀態(tài)。

圖1S組放射性核素肺灌注顯像：右肺面積較左側(cè)稍大，兩肺放射性呈生理性分布，肺外帶邊緣及肺尖部放射性分布稍稀疏，輪廓完整

圖2UK組放射性核素肺灌注顯像（前位）：注栓后可見兩肺野放射性分布不均勻，左肺中部外側(cè)見放射性缺損，左肺下部、右肺下部見明顯放射性稀疏。

圖3UK組放射性核素肺灌注顯像（前位）：溶栓后可見左肺中部、下部及右肺下部明顯放射性充填

圖4S組電鏡下見毛細血管內(nèi)皮細胞結(jié)構(gòu)正常（×10K）

圖5C組電鏡下見肺泡Ⅱ型上皮細胞微絨毛減少，細胞內(nèi)板層小體數(shù)量較多（×10K）

圖6UK組電鏡下見肺泡上皮細胞胞漿疏松，板層小體排空，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張，線粒體空泡變性（×17K）

本實驗利用肺動脈壓力控制栓子注入，使各模型組動物血流動力學參數(shù)相對保持一致，保證了實驗結(jié)果的可比性。實驗顯示，起始栓子注入引起的PAMP升高維持時間很短，很快降至正常，隨著栓子不斷注入，少量栓子即可引起壓力明顯升高，維持時間越來越長。實驗中UK組有2只兔于栓塞后1h及溶栓后2h死亡，C組有2只兔分別于栓塞后2h及溶栓后3h死亡。尸檢發(fā)現(xiàn)有肺水腫，氣管腔內(nèi)見大量分泌物，栓子堵塞一側(cè)或兩側(cè)肺動脈。這4只兔未納入統(tǒng)計數(shù)據(jù)。

3.2急性PTE模型制備成功和溶栓治療有效的標準

本實驗在血液動力學基礎(chǔ)上，利用放射性核素肺灌注掃描顯像明確PTE溶栓治療前、后栓塞的面積和部位，觀察溶栓療效。核素肺灌注顯像不僅是診斷PTE的重要方法，而且可以準確觀察急性PTE溶栓治療前后肺血流灌注的動態(tài)變化過程，其顯像方法簡便、無創(chuàng)，是評價療效的理想方法[8]。國外已有應用肺灌注顯像觀察PTE溶栓后早期血流灌注變化的研究，證實了溶栓后早期，肺血流灌注可以得到迅速改善[9]。我們的實驗結(jié)果表明，注栓后即刻可見PAMP明顯升高，UK組在溶栓后1h PAMP有明顯下降，與溶栓前比較下降了20%左右，而C組在栓子注入后的6h中PAMP均無顯著性變化。放射性核素肺灌注顯像結(jié)果顯示C組及UK組注栓后均可見兩肺野放射性分布不均，有放射性缺損和放射性稀疏現(xiàn)象，UK組在溶栓后可見放射性充填。由此表明，本實驗兔急性PTE模型制備成功，溶栓有效。

3.省略。顯的肺損傷。

本研究發(fā)現(xiàn)，UK組可見肺間質(zhì)及肺泡水腫、出血、炎性細胞浸潤、纖維蛋白滲出，肺毛細血管內(nèi)皮細胞和肺泡上皮細胞損傷明顯，II型上皮細胞脫落。而C組損傷程度較UK組明顯減輕。由此表明，急性PTE2h后予溶栓治療，可引起肺組織的再灌注損傷。

本實驗采用肺動脈內(nèi)注入凝血酶處理的自體血栓建立兔急性PTE模型，在血液動力學基礎(chǔ)上，利用放射性核素肺灌注掃描觀察溶栓療效。模型制備方法簡便，為肺栓塞溶栓治療的研究提供一種較好的動物模型。我們研究發(fā)現(xiàn)，急性PTE2h后予溶栓治療，可引起肺組織的再灌注損傷，其具體機制有待進一步研究。

參考文獻

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第6篇：實驗動物研究范文

【摘要】 目的研究術(shù)后腹腔粘連大鼠模型的制作及運用。方法用銼刀與干紗布、血管鉗、刀片在大鼠蚓突造模，進行大鼠腹腔粘連模型制作的優(yōu)選。將32只模型SD雄性大鼠隨機分為A組(紗布組) 、B組(血管鉗組) 、C組(銼刀組) 、D組(刀片組) ，每組8只，飼養(yǎng)6d，第7天處死，采用Phillips五級評分法對腹腔粘連進行統(tǒng)計分析。結(jié)果A，B兩組造模效果均為Phillips五級評分標準的Ⅰ級，C組為Ⅳ級，D組為Ⅲ級，C組與A，B，D組之間兩兩比較均有顯著性差異(P < 0.05)。B組病死率為10% ，D組達20% ，經(jīng)統(tǒng)計學處理4組間無明顯差異( P = 0. 276 4) 。結(jié)論以大鼠的蚓突制作術(shù)后病理性腹腔粘連動物模型，銼刀為最佳造模工具，其優(yōu)點是造模均勻，均達Ⅳ級。

【關(guān)鍵詞】 腹腔粘連； 大鼠； 模型； 銼刀法

Abstract：ObjectiveTo set up an animal model of intraabdominal adhesion after surgery. MethodsA new rat model of intraabdominal adhesion was made by using pincers， dry gauze， hemostatic clamps and razor blade. Rat appendix was used to produce intestinal adhesions. Thirty two male Sprague-Dawley rats were pided into 4 groups: group A ( gauze group) ， group B (hemostatic clamp group) ， group C (p incer group) ，group D ( razor blade group) ， 8 rats in each group. Animals were fed for 6 days before killed. The extent of adhesion was evaluated by Phillips scale and analyzed statistically.ResultsThe extents of adhesion in group A and B were gradeⅠby Phillips scale， grade IV in group C， grade Ⅲ in group D. The extent of adhesion in group C was different significantly from group A，B， and D (P

Key words：Abdominal cavity's adhesion; Rats; Model; File

筆者在進行通腑理氣方防治腹腔粘連作用機制實驗研究時發(fā)現(xiàn)，術(shù)后病理性腹腔粘連動物模型至今尚無金標準［1］，常見的造模方法較多［2］ ，可選用的造模工具有刀片、紗布、血管鉗等，造模部位可選擇升結(jié)腸、蚓突、小腸、胃等；動物可選用犬、兔、大鼠、小鼠等。本實驗采用SD 雄性大鼠，在大鼠蚓突，用銼刀與常用的干紗布［3］ 、血管鉗［4］ 、刀片［5］進行大鼠腹腔粘連模型制作的優(yōu)選，通過術(shù)后7 d大鼠造模Phillips［6］五級評分及病死率的統(tǒng)計，分析這4種造模的區(qū)別，探討術(shù)后病理性腹腔粘連大鼠模型的制作及運用。

1 材料

1.1

動物220～270g 4周齡清潔級SD雄性大鼠。購自華中科技大學同濟醫(yī)學院實驗動物中心，許可證號：CYX(鄂)2005-02。

1.2 工具什錦銼由江陰市盛達金剛制品廠生產(chǎn)，規(guī)格為3 mm×140 mm /10支；干紗布規(guī)格為40 mm×50 mm，高壓滅菌，恒溫箱37℃干燥；其他工具包括血管鉗、剪刀、持針器、0號無菌絲線等。

2 方法

2.1 動物分組及造模方法動物采用隨機分組：A組(紗布組) 、B 組(血管鉗組) 、C組(銼刀組) 、D組(刀片組) ，每組10 只。各組動物均禁食12 h后，用10%水合氯醛(250 mg/kg)腹腔注射麻醉；動物麻醉后仰臥位固定，消毒后，無菌操作下取前正中切口1.5 cm 進腹。各組造模方法：A組回盲部右側(cè)面用紗布反復摩擦漿膜層至表面出現(xiàn)針尖狀出血點，形成約5 cm×4 cm的受損創(chuàng)面后納入腹腔；B組用有齒血管鉗每隔0.5 cm 間距夾傷回盲部漿膜層，持續(xù)時間3 s，以局部出現(xiàn)針尖狀出血點為度，持續(xù)夾5處后納入腹腔；C組在回盲部右側(cè)面用什錦銼刀反復摩擦漿膜層至表面出現(xiàn)針尖狀出血點，形成約5 cm×4 cm的受損創(chuàng)面后納入腹腔；D組在回盲部右側(cè)面用刀片反復括擦漿膜層至表面出現(xiàn)針尖狀出血點，形成約5 cm×4 cm的受損創(chuàng)面后納入腹腔，各組均逐層關(guān)腹。

2.2 評分連續(xù)觀察7 d，各組存活大鼠于術(shù)后第8天采用頸椎脫臼法處死動物，劍突下“S ”型切口進腹，由1名未參與研究者根據(jù)Phillip s五分級標準(表1) 、觀察腹膜粘連情況，分別記錄得分。

2.3 統(tǒng)計學方法統(tǒng)計采用SPSS 12.0，各組之間比較用Kruskal-Wallis檢驗，兩組間差別用LSD兩兩比較檢驗，檢驗水準均設(shè)為α = 0.05。 表1 大鼠Phillips五級分類法及評分標準

3 結(jié)果

3.1 一般情況　術(shù)后24 h，各組動物一般狀態(tài)均差，不活動，進少量水和食物；2 d后各組一般狀態(tài)尚可，活動較以前增加，飲水和進食已基本接近正常；術(shù)后3 d后各組動物一般狀態(tài)、活動、飲水和進食已基本正常。大鼠切口愈合均良好，無一例發(fā)生切口疝；大鼠的病死率為7. 5% ( 3 /40， B組1只， D組2只) ，大鼠死亡的可能原因為腸瘀血壞死、出血、蚓突穿孔導致腹膜炎、絞窄性腸梗阻。各組大鼠病死率無統(tǒng)計學意義(χ2 = 3. 864 9， P = 0. 276 4) 。

3.2 大鼠腹腔粘連評價結(jié)果各組經(jīng)SASKruskal2Wallis檢驗提示4組間差異有統(tǒng)計學意義(χ2 = 14. 92，P

4 討論

以大鼠的蚓突制作術(shù)后病理性腹腔粘連動物模型，4組造模結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計學處理提示有顯著差異，其中銼刀組(C組)效果最好，刀片組(D 組)效果其次，紗布組與血管鉗組效果最差，4組造模效果排序為C >D >A =B。

紗布與血管鉗造模效果均為Phillips五級評分標準的Ⅰ級；銼刀造模效果達Ⅳ級，刀片組造模效果達Ⅲ級。紗布與血管鉗不適合用于造模，易造成藥物療效假陽性的嚴重結(jié)果，干擾實驗結(jié)果的真實性；刀片組造模效果良好，能達Ⅲ級標準，但病死率較高，易造成藥物不良反應的假象，但基本可用于判斷藥物的療效，但要考慮其死亡損失的樣本數(shù)量，在作實驗時應適當增加樣本例數(shù)。銼刀造模效果最好，造模均勻，平均達Ⅳ級標準，病死率為0。表2 大鼠術(shù)后腹膜粘連評分Wilcoxon秩和檢驗結(jié)果

銼刀最適合在大鼠的蚓突制作術(shù)后病理性腹腔粘連模型，分析其優(yōu)點有：①均勻程度:什錦銼為一鋼性平面，接觸的蚓突面雖不平整，但可用手指在蚓突背面頂住，故使摩面均勻；而干紗布為一柔性平面，雖可隨著接觸不平的蚓突面而自行調(diào)整，但摩擦力度卻不均勻。血管鉗鉗夾之間存在間隔，而刀片摩擦面之間同樣存在間隔，故這兩種造模方法都存在創(chuàng)傷面不均勻的問題。②定性指標：通過以上實驗可以看出，回盲部右側(cè)面用銼刀反復磨擦漿膜層至表面出現(xiàn)針尖狀出血點，形成約5 cm ×4 cm的受損創(chuàng)面，為一非?？陀^的定性指標。選擇大鼠作為術(shù)后病理性腹腔粘連動物模型，以銼刀造模為較好的工具。造模操作以1～3人為好，每人分工明確(切開腹腔1人、造模1人，關(guān)腹1 人或切開腹腔1 人、造模及縫合1人) ，這樣可使標準相對較固定，排除一些人為干擾因素，為實驗的成功打下良好的基礎(chǔ)。

參考文獻

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第7篇：實驗動物研究范文

北京愛牧技術(shù)開發(fā)有限公司與重慶市動物衛(wèi)生監(jiān)督所協(xié)作, 以重慶市歌樂山動物無害化處理場為試驗基地，對高溫與生物生物降解無害化處理工藝設(shè)備于2013-2014 年間開展并完成了相關(guān)指標檢測試驗，報告如下。

一、試驗內(nèi)容

1. 滅菌效果試驗；2. 設(shè)備最高溫度及工作溫度試驗測定；3. 設(shè)備最佳處理時間測定；4. 處理有機質(zhì)測定；5. 環(huán)保指標測定；6. 運行成本的測定。

二、試驗器材

1. 高溫生物降解器：一體機（北京愛牧技術(shù)開發(fā)有限公司提供）

2. 高溫生物降解器：分體機（北京愛牧技術(shù)開發(fā)有限公司提供）

3. 高溫高壓濕化機：內(nèi)江永勝化工機械公司生產(chǎn)（主機型號：NCH-2111-01）

4. 降解菌種: 北京愛牧技術(shù)開發(fā)有限公司提供

5. 鋸末：購自當?shù)剞r(nóng)戶

6. 枯草芽孢桿菌：購自中國獸醫(yī)藥品監(jiān)督所

7. 實驗動物：豬、牛、羊、禽類、實驗室動物若干（重慶市動物衛(wèi)生監(jiān)督所提供）

三、試驗方法

（一）滅菌效果試驗

1. 芽孢桿菌的準備。無菌打開菌種管口，加入無菌生理鹽水溶解，接種固體培養(yǎng)基（20 g 葡萄糖，15 g 蛋白胨，5 g 氯化鈉，0.5 g 牛肉膏，20 g 瓊脂，加蒸餾水至1 L，加熱溶解，將PH 調(diào)整為6.0 ～ 7.0，高壓滅菌后傾注平板。）37℃培養(yǎng)24 h，將菌苔接種到液體培養(yǎng)基（20 g 葡糖糖，15 g 蛋白胨，5 g 氯化鈉，0.5 g 牛肉膏，加蒸餾水至1 L，加熱溶解，將PH 調(diào)整為6.0 ～ 7.0.）37℃培養(yǎng)20 ～ 24 h，按2% 比例再擴大至液體培養(yǎng)基中，28℃培養(yǎng)72 h，涂片芽孢染色檢查，待80% 以上菌體出現(xiàn)芽孢，細菌計數(shù)，用無菌生理鹽水將菌液調(diào)整至1.0×109 ～ 1.5×109 cfu/m，備用。

2. 病死豬處理。分3 組，取病死豬25 頭，總重量4.0 t。用注射器給每頭死豬胸腔、腹腔內(nèi)各注射500 ml 芽孢菌液，顱腔內(nèi)注射100 ml 枯草芽孢菌，同時放入壓力蒸汽滅菌化學指標條。

3. 無害化處理動物。將上述實驗步驟中病死豬分別放入實驗處理罐內(nèi)。

（1）一體機：0.48 t，按處理重量15% 加入鋸末，關(guān)閉罐蓋，啟動處理設(shè)備。設(shè)備運行參數(shù)為：將溫度設(shè)定為120℃，轉(zhuǎn)速8 轉(zhuǎn)/min，連續(xù)工作12 h 后降溫，待物料溫度降至70℃以下，無菌采樣，備用，再加入菌種后續(xù)降解。

（2）分體機：放入1.494 t，關(guān)閉罐蓋，啟動處理設(shè)備。設(shè)備運行參數(shù)為：將溫度設(shè)定為160℃，壓力0.3 Pa，連續(xù)工作4 h 后降溫，待物料溫度降至70℃以下，無菌采樣并取出標識菌，備用，然后，將處理后的動物尸體移至一體機中添加約5% 鋸末（調(diào)整秸稈添加量，確保動物尸體與秸稈混合物的C/N 約為25，水份（按 GB/T8576 2010 測定）占混合物比例約為55％）加入5k 菌，進行生物降解，后熟。

（3）濕化機：放入2.07 t，關(guān)閉罐蓋，啟動處理設(shè)備。設(shè)備運行參數(shù)為：將溫度設(shè)定為135℃，壓力0.35 Pa,連續(xù)工作5 h 后降溫，待物料溫度降至70℃以下，無菌采樣，備用，產(chǎn)物進一步干濕分離，提取油脂。

4. 樣品采集。

（1）處理前樣品采集：枯草芽孢桿菌液注射死豬前無菌取2 ml 備用。

（2）處理后樣品采集：病死豬經(jīng)設(shè)備處理后，無菌取樣20 g，每次取2 份，備用。同時取出滅菌化學指標條。

5. 實驗室檢測。

（1） 處理前樣品：直接接種到固體培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)24 ～ 48 h，觀察枯草芽孢桿菌生長情況。

（2）處理后樣品：向每份樣品中無菌加入50 ml 滅菌生理鹽水，震蕩混勻，室溫靜置20 min，取上清液0.2 ml置固體培養(yǎng)基，涂布,37℃培養(yǎng)24 ～ 48 h ；每份樣品接種3 塊平板，觀察枯草芽孢桿菌和細菌總數(shù)生長情況。

（二）設(shè)備最高溫度及工作溫度試驗測定 將設(shè)備在空載和負載時運行，進行罐內(nèi)溫度測定。

（三）設(shè)備最處理時長和工作處理時間測定 將設(shè)備滿負荷運轉(zhuǎn)，分別記錄不同處理時間的物料情況。

（四）處理有機質(zhì)測定 將處理產(chǎn)物經(jīng)堆肥后熟，堆肥肥效按照NY 525-2011 規(guī)定方法檢測堆肥外觀、有機質(zhì)、氮、五氧化二磷、氧化鉀、水分、酸堿度、總砷、總汞、總鉛、總鉻、總鎘；采樣時間與腐熟度評價同步。由重慶市化肥商品質(zhì)量監(jiān)督監(jiān)測站進行檢測。

（五）環(huán)保指標測定 邀請重慶市合川區(qū)環(huán)境監(jiān)測站對現(xiàn)場進行環(huán)保指標監(jiān)測。通過參照國家（行業(yè)）標準檢測了設(shè)備運行時廢氣中SO2、NO2、H2S、NH3、臭氣濃度等污染物排放情況，廢水中BOD、COD、NH3-N、總磷、總氮、動植物油總量、硫化物等污染物排放情況；以廢渣經(jīng)發(fā)酵后對種子毒性、生長試驗為參考評價了廢棄物對環(huán)境的影響。

（六）運行成本的測算 詳細核算設(shè)備在運行過程水、電、氣等能耗評價了運行中的經(jīng)濟成本。

四、試驗結(jié)果

（一）滅菌效果試驗 枯草芽孢桿菌實驗：處理前樣品中有大量細菌生長，處理后全部樣品均無細菌生長；細菌總數(shù)檢測值＜ 10 cfu/g ；壓力蒸汽滅菌化學指示條顯示處理環(huán)境達到滅菌要求（如表1）。

（二）設(shè)備最高溫度及工作溫度試驗 一體機: 本設(shè)備空載時，處理罐內(nèi)最高溫度可達198℃。滿負荷運轉(zhuǎn)時，罐內(nèi)溫度最高可達140℃，最佳工作溫度60℃～ 120℃。分體機: 本設(shè)備空載時，處理罐內(nèi)最高溫度可達220℃。滿負荷運轉(zhuǎn)時，罐內(nèi)溫度最高可達200℃，最佳工作溫度160℃。

（三）設(shè)備最處理處理時間測定 一體機本設(shè)備滿負荷運轉(zhuǎn)時，最佳處理時間12 h，最短處理時間5 h ；分體機本設(shè)備滿負荷運轉(zhuǎn)時，最佳工作時間為12 h，最短處理時間8 h。

（四）處理有機質(zhì)測定 隨機抽檢2 批廢渣（經(jīng)微生物發(fā)酵后的動物殘渣與輔料混合物）總重量123 kg。廢渣對種子的毒性試驗顯示：經(jīng)5% 的未發(fā)酵的廢渣萃取液、5% 發(fā)酵后的廢渣萃取液、蒸餾水分別培養(yǎng)72 h 后發(fā)芽情況分別是7/10、10/10、10/10，總根長分別是2.1 cm、11.5 cm、25.4 cm， 總芽長分別為9.4 cm、30.2 cm、37.9 cm。對玉米種子的發(fā)芽和生長試驗顯示：渣/ 土體積比分別為10%、20%、30%，純土，純廢渣的環(huán)境下玉米的發(fā)芽率分別為100%、100%、100%、75%、0 ；15 d時植株均高分別為12.9 cm、13.6 cm、7.4 cm、7.8 cm。

（五）環(huán)保指標測定

1. 廢氣。

受試驗環(huán)境的影響，本試驗未按照《惡臭污染物排放標準》（GB14554-93）、《大氣污染物綜合排放標準》（16297-1996）布置檢測位點，而選用車間外( 即車間邊緣)為污染源參考點、車間外下風向20 m 處為假定廠界參考點采樣，以無組織排放標準為污控標準。檢測結(jié)果顯示（如表2）：

（1）3 套設(shè)備運行時均產(chǎn)生不同程度的空氣污染物，其中以惡臭濃度為主要污染物。

（2）車間外，惡臭氣體濃度以濕化機最大，車間外濃度高達730。臭氣濃度由低到高依次為：一體機＜分體機＜濕化機。車間外下風向20 m 處，濕化機臭氣濃度為95，嚴重超過規(guī)定標準的3.75 倍；分體機臭氣濃度為34，高于規(guī)定標準的0.7 倍；一體機臭氣濃度為20，未超過20 的排放標準（見表3）。其他空氣污染物無明顯差異，均低于《惡臭污染物排放標準》（GB14554-93）、《大氣污染物綜合排放標準》（16297-1996）規(guī)定標準。說明惡臭氣體為廢氣的主要污染物。

（3）在假定廠界即離處理車間20 m 的環(huán)境下，一體機能夠達標排放。單機廢氣排放情況依次為一體機＜分體機＜濕化機。

2. 廢水。

我國尚未對病害動物無害化處理場環(huán)境污染物排放指定專項標準，本試驗中采用《污水綜合排放標準》（GB2978-1996）之“其它一切排污單位二類排放標準”為參考。結(jié)果顯示：（1）一體機無廢水產(chǎn)生。分體機產(chǎn)生100 kg 蒸汽水（可作為后期降解水源補充，實際無廢水排放）。

3. 廢渣。

（1）一體機和分體機處理病害動物，產(chǎn)生的廢渣約為初始物重量的50%。

（2）廢渣發(fā)酵腐熟后能顯著降低對種子的毒性并能促進植物生長。與未發(fā)酵的廢渣相比：發(fā)酵后種子發(fā)芽率從70% 提高到100%，達到種子在蒸餾水中的發(fā)芽率；根長從2.1 cm 提高到11.5 cm; 芽長從9.4 cm 提高到30.2 cm，接近了蒸餾水環(huán)境下的芽長，說明經(jīng)過發(fā)酵能有效降低病害動物殘渣對種子的毒性。

（3）從GI 值分析看，經(jīng)過發(fā)酵GI 值從5.7 上升到45.3，仍低于業(yè)界認為最低50% 的標準，說明完全腐熟需要發(fā)酵更長的時間或需要改良發(fā)酵條件。

（4）添加不同比例的腐熟物對玉米種子的生長試驗發(fā)現(xiàn)：添加體積比為10%、20% 的腐熟廢渣能有效促進玉米的生長，其發(fā)芽率均高于純土培養(yǎng)25% ；15 d時，植株平均長度為12.9 cm、13.6 cm，分別高于純土65.3% 和74.4% ；而添加量達到30% 時，均高為7.4 cm，低于純土培養(yǎng)5% ；純廢渣培養(yǎng)的玉米種子未見發(fā)芽，說明該廢棄物經(jīng)適當比例還耕后能促進植物生長，過高添加該廢渣對植物會產(chǎn)生不利影響。

（5）有機肥效檢測顯示：降解廢渣總肥效、重金屬均符合《有機肥》（NY 525-2011）標準。

（6）綜合判定：經(jīng)發(fā)酵腐熟后的廢渣可以作為促進植物生長的添加物使用，具有可持續(xù)循環(huán)使用的價值。

（三）處理成本及處理能力

以批次計算，處理成本（如表3）由低到高依次為一體機（222 元）、分體機（601 元）、濕化機（4 624 元）；以單位處理量計（每噸），處理成本由低到高依次為分體機（402 元）、一體機（462 元）、濕化機（2 234 元）。處理能力由高到低依次為：濕化機（51 393 kg）、分體機（51 222 kg）、一體機（28 800 kg）。

五、結(jié)果分析

（一）生物安全 枯草芽孢桿菌為耐熱芽孢菌，通過回收植入枯草芽孢桿菌標識菌，細菌總數(shù)測定及利用壓力蒸汽滅菌化學指示條等方法測定高溫生物降解工藝的對微生物的殺滅效果（兩種設(shè)備）均顯示處理環(huán)境能達到滅菌要求。說明兩種設(shè)備均能有效殺滅微生物。

（二）運行成本 一體機，每噸處理成本460 元，分體機每噸處理成本402 元，濕化機每噸處理成本2 234 元。

（三）對環(huán)境的影響

1. 廢水。由于我國尚無對病害動物無害化處理場環(huán)境污染物排放的專門標準，本試驗中采用《污水綜合排放標準》（GB2978-1996）之“其它一切排污單位二類排放標準”為參考。生物降解工藝中一體機無廢水產(chǎn)程；分體機產(chǎn)生300 kg 廢水，經(jīng)生物發(fā)酵補充水源后降解，實際無廢水排放。高溫高壓濕化處理設(shè)備每一批次產(chǎn)生廢水3 t，合每噸動物尸體產(chǎn)生1.4 t 廢水；其BOD濃度為5.81×103 mg/L 超出標準（60 mg/L）95.8 倍，COD 濃度為1.29×104 mg/L 超出標準（150 mg/L）85倍，NH3-N 濃度為3.76×102 mg/L 超出標準（25 mg/L）14 倍， 總磷濃度為13.4 mg/L 超出標準（1 mg/L）12.4 倍， 動植物油總量2.92×102 mg/L 超出標準（20 mg/L）13.6 倍。

2. 廢氣。鑒于本試驗場場地較為寬敞，未按照《惡臭污染物排放標準》（GB14554-93）、《大氣污染物綜合排放標準》（16297-1996）布置檢測位點，而選用車間外( 即車間邊緣)、車間外下風20 m 處為參考點采樣。檢測結(jié)果顯示：三種設(shè)備在運行時均產(chǎn)生惡臭氣體，其中以濕化機尤其突出，車間外濃度高達730，排放濃度依次為一體機＜分體機＜高溫高壓濕化機（均為無組織排放）；車間外20 m 處，除一體機外，其余兩種設(shè)備臭氣排放濃度均高于規(guī)定廠界標準（20），其余各種受檢測的大氣污染物均符合規(guī)定排放標準。

3. 廢渣。生物降解工藝產(chǎn)生的廢渣約為初始物重量的50% ；廢渣發(fā)酵腐熟后能顯著降低對種子的毒性。與未發(fā)酵的廢渣相比：發(fā)酵后種子發(fā)芽率從70% 提高到100%，達到種子在蒸餾水中的發(fā)芽率；根長從2.1 cm 提高到11.5 cm; 芽長從9.4 cm 提高到30.2 cm，接近了蒸餾水環(huán)境下的芽長，說明經(jīng)過發(fā)酵能有效降低動物尸體殘渣對種子的毒性；不過從 GI 值分析看，即便經(jīng)過發(fā)酵GI 值從8% 上升到45%，仍低于研究認為的50% 的標準，說明完全腐熟需要發(fā)酵更長的時間或需要改良發(fā)酵條件。添加不同比例的腐熟物對玉米種子的生長試驗發(fā)現(xiàn)：添加體積比為10%、20% 的腐熟廢渣能有效促進玉米的生長，其發(fā)芽率均高于純土培養(yǎng)25% ；15 d 時，植株平均長度為12.9 cm、13.6 cm，分別高于純土65.3% 和74.4% ；而添加量達到30% 時，均高為7.4 cm，低于純土培養(yǎng)5%；純廢渣培養(yǎng)的玉米種子未見發(fā)芽。說明該廢棄物經(jīng)合當比例還耕后能促進植物生長，過高添加該廢渣對植物會產(chǎn)生不利影響。

六、結(jié)論

1. 供試的三臺設(shè)備均能對微生物起到有效的殺滅作用。

2. 受測試的設(shè)備運行成本在不同的工作環(huán)境其運行成本存在差異。處理量低于1 t 的，適合一體機，高于1 t 的，宜采用分體機。

3. 對環(huán)境的影響。兩款設(shè)備受檢廢氣項目中主要污染指標為臭氣濃度。在本試驗環(huán)境下，如以車間外下風向20 m 為參考廠界，濕化機嚴重超過規(guī)定標準，分體機略高于規(guī)定標準，一體機可達標排放。高溫生物降解工藝無廢水排放；高溫生物降解工藝產(chǎn)生的廢渣經(jīng)充分降解工藝后有望實現(xiàn)對動物無害化處理的同時達到廢棄物對環(huán)境的達標排放。

七、存在的問題及建議

1. 高溫降解后進一步生物發(fā)酵工藝需要深入研究。對動物尸體的生物降解菌種應當深入研究、篩選出具有針對性的降解菌群組合并找出最佳的發(fā)酵環(huán)境以期獲得對動物尸體的完全降解。

第8篇：實驗動物研究范文

近年來，有關(guān)鎮(zhèn)靜類中藥藥理研究的報道屢見不鮮，其中尤以安神藥和平肝息風藥的研究居多。安神藥和平肝息風藥均具有鎮(zhèn)靜作用，給藥后可使動物閉目、嗜睡、低頭、伏臥，抑制動物的自發(fā)活動[1-2]，具有對抗中樞神經(jīng)興奮藥的興奮作用。鎮(zhèn)靜試驗是測定動物自主活動的經(jīng)典實驗方法，此項實驗為觀察動物自主活動規(guī)律及研究中樞神經(jīng)系統(tǒng)的功能狀態(tài)和藥物作用奠定了堅實的基礎(chǔ)。傳統(tǒng)的實驗方法大都采用人為觀察動物自主活動的方式進行記錄，這種方法受人為干擾因素和外界環(huán)境（聲音、光線、動物所處空間）的影響較大，實驗結(jié)果存在較大誤差，特別是對功效相似的不同鎮(zhèn)靜藥的篩選工作有一定影響。隨著現(xiàn)代科學技術(shù)的發(fā)展，先進的傳感器技術(shù)不斷更新，諸如換能器技術(shù)、光電管技術(shù)、紅外光電探測技術(shù)、熱釋電效應探測技術(shù)等高性能、高精度的傳感器已經(jīng)融入到現(xiàn)代藥理研究之中，為觀測鎮(zhèn)靜安神藥對實驗動物自主活動的影響提供了更為方便準確的新方法[2]。

傳感器按國標GB7665-87定義為：感受規(guī)定的被測量信號，并按照一定的規(guī)律轉(zhuǎn)換成可輸出信號的器件或裝置[3]。該裝置通常由敏感元件和轉(zhuǎn)換元件組成。敏感元件是指傳感器中能直接感受（或響應）被測量的部分；轉(zhuǎn)換元件是指傳感器中將敏感元件感受（或響應）的信息按一定規(guī)律轉(zhuǎn)換成另一種信息的裝置。它獲取的信息，可以是各種物理量、化學量、生物量轉(zhuǎn)換后的信息，也有其它形式，大多數(shù)的傳感器將獲取的信息轉(zhuǎn)換為電信號。目前，在小動物自主活動檢測中所采用的一些傳感器技術(shù)有以下4類。

1 抖籠換能器法

換能器技術(shù)是傳感器的一個分支，它主要是感知生物體內(nèi)的各種非電量的信息（生理、生化和病理信息），把它們傳遞出來并轉(zhuǎn)換為易處理的電信號的裝置。針對小動物自主活動的特殊性，在鐵架臺上通過橡皮筋（或小彈簧）吊一抖籠，該籠底部圓心處用一帶線的掛鉤和拉力換能器相連?；\中小動物的活動通過換能器由動能轉(zhuǎn)換為電能之后輸入生理記錄儀或生物信號采集處理系統(tǒng)進行放大記錄，便能獲得動物的活動曲線和單位時間內(nèi)振動波的次數(shù)。近幾年的研究中采用的有抖籠滴水法、抖籠氣鼓法、光電抖籠法和浮動法。抖籠法的特點是能夠把小動物的細小活動（如修飾、搔抓等）描記下來，儀器簡單，操作容易。但此類方法不能達到精確的定量分析，只適用于鎮(zhèn)靜藥的粗略篩選[1-2]。

高雅玲等[4]采用二道生理記錄儀和50g拉力換能器測定50只小鼠的自主活動，通過分析小鼠的活動曲線得出養(yǎng)血清腦顆粒（當歸、川芎、白芍、熟地、珍珠母、元胡）的大劑量組(8.0g/kg)、中劑量組(4.0g/kg)對頭部血管舒縮功能障礙、大腦皮層功能失調(diào)或某些體液物質(zhì)暫時性改變所引起的血管性頭痛有明顯的鎮(zhèn)靜作用，為臨床治療血管性頭痛提供了實驗依據(jù)。

2 光電技術(shù)檢測法

在活動箱內(nèi)將一束或者幾束光線照射到對側(cè)的光電感應器（如光電管、光導管、光敏管）上，動物在箱內(nèi)活動時遮斷光線一次，則電流改變一次，經(jīng)過放大裝置使電脈沖驅(qū)使繼電器啟動，通過計數(shù)器記錄數(shù)值[2]。

第9篇：實驗動物研究范文

關(guān)鍵詞：任務驅(qū)動；高中化學；實驗教學

引言

化學，是高中理科教學中一門重要的學科，它的教學質(zhì)量的好壞會對學生的學習成果有很大的影響。在學習高中化學的過程中，實驗又是十分重要的部分?；瘜W實驗能夠幫助學生直觀且深入的學習化學知識，同時能夠?qū)邮趾蛣幽X相結(jié)合，并鍛煉學生在今后的學習和生活中發(fā)現(xiàn)問題和解決問題的能力。在當今社會，科學技術(shù)的進步日新月異，而學校如何保證學生能夠在今后的學習生活中適應日新月異的環(huán)境就成為了一個重要問題。在傳統(tǒng)的教學模式中，老師只是按照自己的思路和經(jīng)驗，將課本上的知識傳授給學生，并沒有考慮到學生之間的差異，以及學生自己的興趣所在。而在新型的符合時代需要的教學模式中，還應該保證學生擁有自己建立知識體系的能力。這樣，以任務驅(qū)動為特點的新型教學模式也就應運而生。在之前的教學研究中，任務驅(qū)動型教學也有一定的實踐，主要被應用在英語教學和計算機相關(guān)課程的教學中，而在高中化學實驗教學中的應用則是新的嘗試。

一、任務驅(qū)動教學模式簡介

在傳統(tǒng)的教學模式中，一般采用的是老師講和學生聽的模式。在這種教學方法下，學生只能被動地進行學習，而沒有主動去問為什么和怎么做。長此以往，不僅學習的效果會大大折扣，學生的發(fā)現(xiàn)問題并解決問題的能力也得不到鍛煉，學生也將會逐漸失去自主學習的能力。這不僅會對學生現(xiàn)階段的學習有不利影響，也會對學生將來的發(fā)展不利。任務驅(qū)動教學模式由構(gòu)建理論演變發(fā)展而來的。從具體上看，任務驅(qū)動教學模式是指：將學生所將要學到的知識融匯于問題當中，以問題問出發(fā)點，引導學生進行任務的構(gòu)建，使得學生圍繞著知識點，進行自主的學習，充分調(diào)動學生自主學習的主觀能動性，提高學生的學習效果，鍛煉學生發(fā)現(xiàn)并解決問題的能力以及學生的創(chuàng)新能力。任務驅(qū)動教學模式最初是被應用于英語教學和計算機相關(guān)科目中的，并取得了一定的效果。而在高中化學實驗的教學中則屬于新的嘗試。

二、任務驅(qū)動型教學模式的優(yōu)點

（一）任務驅(qū)動型教學模式能夠激發(fā)學生進行自主學習的興趣

在傳統(tǒng)的授課方式中，教師按照自己的經(jīng)驗和思路講，學生則被動的接受教師所教授的內(nèi)容。在這樣的教學模式，學生的學習熱情很難維持，同時也會壓抑學生的創(chuàng)造力和創(chuàng)新精神。而在任務驅(qū)動型教學中，學生將會轉(zhuǎn)變自身的角色，從被動接受知識轉(zhuǎn)變成為了學習過程的主人公，他們需要通過自己的努力來完成學習的任務。教師也不再只是知識的傳授者，而是成為了學生的引導者。在任務驅(qū)動的教學過程完成中，學生們能夠通過完成學習任務，深入了解所學知識，并能夠有很高的自豪感，因而任務驅(qū)動型教學模式能夠在很大程度上激發(fā)學生學習的熱情和興趣。

（二）任務驅(qū)動型教學模式能夠培養(yǎng)學生發(fā)現(xiàn)并解決問題的能力

在傳統(tǒng)的教學模式中，學生幾乎沒有機會在學習的過程中提出自己的疑問。而在任務驅(qū)動教學模式中，學生只有自己經(jīng)過深入的思考，才能夠發(fā)現(xiàn)問題，并通過問題的解決來完成學習任務。例如，學生在有機化學部分的學習中，在學習醛類知識時，他們可以通過課本上的知識了解到醛類物質(zhì)的各種性質(zhì)，那么在我們的日常生活中經(jīng)常會聽到家庭裝修帶來的甲醛污染，那么有哪些措施能夠針對甲醛的性質(zhì)來解決這一關(guān)乎我們身體健康的重要問題呢？學生們還可以聯(lián)想到在市場上有一些除甲醛的產(chǎn)品，那么哪些是有效的呢？在這些問題的驅(qū)動下，學生們可以經(jīng)過查閱資料進行學習，最終解決這些問題。而在此過程中，學生不僅對知識的掌握更加牢固，還鍛煉了他們發(fā)現(xiàn)問題和解決問題的能力。

（三）任務驅(qū)動型教學模式能夠激發(fā)學生的創(chuàng)新能力

隨著時代的發(fā)展和社會的進步，僅僅是書本上的知識已經(jīng)越來越難以滿足學生的發(fā)展需要，學生在其未來的發(fā)展當中，不僅僅需要從書本上學到的知識，更為需要的是學習的能力和創(chuàng)新能力。而任務驅(qū)動型教學能夠在很大程度上幫助學生培養(yǎng)創(chuàng)新能力。在學生進行任務驅(qū)動型學習的過程中，從任務的選擇和制定到任務的進行過程再到最終的完成，每一個環(huán)節(jié)都有著很大的靈活度和自由性，學生可以根據(jù)自身能力和喜好進行發(fā)揮。在任務進行的過程中，學生的創(chuàng)新能力也得到了很好的鍛煉。

（四）任務驅(qū)動型教學模式能夠保證因材施教

在教學過程中我們發(fā)現(xiàn)，每個學生對知識的理解能力、想象能力以及動手能力都存在著差異。有些學生只能保證聽懂老師所講的知識，有些學生只能完成老師硬性布置的任務，但是有一些學生則不僅能夠做到以上兩點，還能夠?qū)⑺鶎W知識進行拓展，完成更高層次的任務?？紤]到同學們的差異性，采用任務驅(qū)動型教學就顯得十分必要了。這樣能夠保證每個同學都能夠在自己力所能及的范圍內(nèi)進行最大程度的發(fā)展，做到因材施教。

（五）任務驅(qū)動型教學模式能夠培養(yǎng)學生的團隊精神

在任務驅(qū)動型教學過程中，活動主體往往不是個人，而是將同學們進行分組，進行小組學習。在此過程中，小組成員之間通過團隊合作完成共同的目標，達成學習任務。在這一過程中，小組成員之間會進行不斷的磨合，有可能成員之間意見會發(fā)生分歧，這就需要同學們具有團隊精神，學會傾聽他人的聲音，學會思考與接納。在任務驅(qū)動型教學的任務完成后，同學們都會擁有較強的團隊合作精神以及溝通與交流的能力。

三、在高中化學實驗教學中構(gòu)建任務驅(qū)動教學模式

在高中理科的學習中，化學學科十分重要?；瘜W所涉及到的知識內(nèi)容十分豐富，不僅繁雜抽象，而且較為瑣碎，學生理解起來有不小的難度。而在目前的化學教學中，大多學校課堂采用的都是傳統(tǒng)的教學模式，以老師傳授學生被動接受為主要的授課方式。在目前的高中化學教學中，化學實驗的教學占了一定得比重。教師通過化學實驗，能夠直觀的傳達化學知識，還能夠激發(fā)學生學習的興趣和提高學生的動手能力。但是在一般情況下，化學實驗的教學要么是教師演示，要么按照教材或講義的安排進行實驗。這種傳統(tǒng)的實驗教學模式不僅起不到應有的作用，更會給學生留下照本宣科的不良影響，長此以往會扼殺同學們的創(chuàng)新能力。那么任務驅(qū)動型教學在高中化學實驗教學中就可以起到很好的作用。但是，再好的教學方法都不能生搬硬套，要根據(jù)本學科的教學特點進行適當調(diào)整，以滿足當前的教學需求。那么如何在高中化學實驗教學中靈活運用任務驅(qū)動型教學模式以達到最佳教學效果則是我們接下來要探討的。

（一）學習任務的提出

目前，高中化學實驗教學目標是幫助學生理解化學，了解化學，對化學產(chǎn)生興趣?；瘜W實驗的進行以學生需要學到的知識為基礎(chǔ)，結(jié)合日常生活中常見的情景，積極引導學生在學習任務的驅(qū)動下進行自主學習與探究，親自動手進行試驗，從而完成學習任務，在歡快的學習氛圍中學到知識。學習的任務在提出時，要緊緊圍繞學生需要學到的知識，在學習任務提出之前，先幫助學生明確學習目標，這是任務驅(qū)動型教學模式的基礎(chǔ)。教師應該從課本知識出發(fā)，幫助學生在緊扣主題的基礎(chǔ)上進行適當?shù)陌l(fā)揮，提出相關(guān)的學習任務。任務驅(qū)動型教學模式與傳統(tǒng)教學模式相比具有很多優(yōu)勢，其中一點就是它能夠在很大程度上保證因材施教。而教師在任務的布置過程中更應該注意到這點。對化學學習基礎(chǔ)較好以及動手能力較強的同學，要給他們更高的自由度，鼓勵他們進行創(chuàng)新學習，完成更高層次的學習任務。而對于學習基礎(chǔ)較差的同學，則應該注意給他們布置一些難度較小且趣味性更強的學習任務，激發(fā)他們的學習興趣，引導他們進行自主學習，讓他們在不知不覺中循序漸進，逐漸提高學習成績，并掌握學習的方法。

（二）把學生作為學習的主體

在傳統(tǒng)的教學中，教師一直是學習的引導者。而在任務驅(qū)動型教學中，教師要完成觀念的轉(zhuǎn)變，認清自己在新型的教學模式中所處的位置已經(jīng)不再是主導，而更多的要起到引導的作用，引導學生積極思考，解決學生遇到的問題，而不是簡單的把任務布置給學生。以學生為主體，讓學生更多的參與到教學過程中，給他們更大的自由度，讓他們在以所學知識為主線的基礎(chǔ)上，充分發(fā)揮，自主學習，不僅學習知識，更要學習到學習的方法。

（三）學習任務的分析過程

當學生經(jīng)過思考和老師的幫助，提出學習任務后，就要由學生對任務進行分析。在高中化學實驗的教學中，實驗的最終結(jié)論往往是固定的，但是驗證這一結(jié)論的實驗可以是多種多樣的。例如，在食鹽是否加碘這一實驗中，學生既可以將自己的日常生活與化學學習聯(lián)系起來，還可以向家里的長輩請教生活中是否有相關(guān)的“小妙招”來驗證食鹽是否加碘，上網(wǎng)查閱相關(guān)資料或者根據(jù)自己所學知識來設(shè)計實驗。相類似的學習任務不僅增加了學習的趣味性，更能夠加深對知識的印象。而同學們之間也可以就不同的實驗設(shè)想進行交流與探討，選出最佳方案。而如果在學習的過程中，學生遇到難度較大的問題時，可以向老師求助，但是這時老師不能直接把問題的答案告訴學生，而是要對學生加以引導和點播，讓學生在自己的努力下解決問題。

（四）學習任務的執(zhí)行

當學生對學習任務進行深入的思考與分析后，就可以根據(jù)自己的設(shè)想進行實驗了。出于安全問題的考慮，在高中化學實驗教學中，要保證實驗始終在教師的監(jiān)督和指導下進行。同時教師首先要向同學們講解進行試驗的有關(guān)注意事項，保證實驗安全進行。然后教師要對實驗儀器進行講解，讓同學們盡快熟悉實驗儀器的用途和特性，盡快開始試驗。教師還要檢查學生的實驗方案是否存在問題，并進行相應的指導。在學生完成試驗后，引導學生得出相關(guān)結(jié)論，并和預先準備好的化學方程式進行比較，發(fā)現(xiàn)問題并引導學生尋找答案，完成學習的任務。

四、總結(jié)

任務驅(qū)動型教學模式作為一種新型的教學模式，在課堂上越來越受到老師們的歡迎。它一方面能夠激發(fā)學生主動進行自主學習的興趣，另外能夠提高學生發(fā)現(xiàn)問題和解決問題的能力，更能夠鍛煉學生的團隊協(xié)作精神以及溝通與交流的能力。對于老師來說，任務驅(qū)動型教學模式還能夠在很大程度上做到了“因材施教”，讓基礎(chǔ)好的學生能夠達到更高水平，也能夠激發(fā)基礎(chǔ)較差的學生的學習興趣，增強他們學習的信心。教師在進行任務驅(qū)動教學模式時，要轉(zhuǎn)變現(xiàn)有的思維方式，根據(jù)學生的知識掌握情況，合理設(shè)計教學方案，保證任務驅(qū)動教學模式在高中化學實驗教學中發(fā)揮最大的作用。參考文獻：

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