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爺爺?shù)拇竽⒐骄x(九篇)

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爺爺?shù)拇竽⒐? /></p> <h2>第1篇:爺爺?shù)拇竽⒐椒段?/h2> <p> 就業(yè)導向</p> <p> 競爭能力培養(yǎng)</p> <p> 論文摘要:當今的高等教育已經(jīng)逐漸演變?yōu)橐环N大眾教育。招生數(shù)量的逐年增加,給高校帶來機遇和挑戰(zhàn)的同時,隨之而來的還有沉重的就業(yè)壓力。為應對這種嚴峻的態(tài)勢,內(nèi)蒙古工業(yè)大學國際商學院以就業(yè)為導向,把畢業(yè)實習與就業(yè)相結合,嘗試探索出一條新出路。而參與企業(yè)生產(chǎn)實習本身就是培養(yǎng)大學生綜合能力的一種行之有效的實踐教學方式?;诰蜆I(yè)導向的畢業(yè)實習創(chuàng)新模式具有校企合作緊,學生受益大的Y,K贏特點,在推進學校內(nèi)涵建設,提高畢業(yè)生就業(yè)質(zhì)量等方面具有重要意義。</p> <p> 一、引言</p> <p> 當今的高等教育已經(jīng)逐漸演變?yōu)橐环N大眾教育。尤其是招生數(shù)量逐年增加,在給高校帶來機遇和挑戰(zhàn)的同時,隨之而來的還有沉重的就業(yè)壓力。當前的國際國內(nèi)的經(jīng)濟形勢更為大學畢業(yè)生就業(yè)工作雪上加霜,為積極應對當前的嚴峻態(tài)勢,各院校無不在思考,嘗試創(chuàng)新出一條行之有效的新出路。</p> <p> 企業(yè)要發(fā)展,有一種觀點是必須和大學院校建立一種共生的關系。同時,大學要適應社會發(fā)展的需求,就必須走產(chǎn)學研相結合的發(fā)展道路,和企業(yè)結為平等的合作伙伴。畢業(yè)實習是學生就業(yè)前將理論知識運用于實踐,深人企業(yè)第一線的寶貴的實踐機會,是培養(yǎng)適合市場需求,滿足企業(yè)需要,解決學生動手能力不強的關鍵性環(huán)節(jié),是提高畢業(yè)生綜合素質(zhì)和綜合職業(yè)能力的重要實踐教學手段。</p> <p> 二、傳統(tǒng)畢業(yè)實習模式及其存在的問題</p> <p> 目前,傳統(tǒng)的畢業(yè)實習一般采用集中實習或分散實習的方式進行。</p> <p> 1.集中實習</p> <p> 集中實習一般是幾十個人一組,在專業(yè)老師的帶領下去同一實習基地實習,實習結束后,實習企業(yè)出具實習證明,實習學生離開實習企業(yè)。</p> <p> 這種傳統(tǒng)的由學校組織學生集體進行畢業(yè)實習的做法,許多學生由于實習和求職經(jīng)常發(fā)生時間沖突,傾向于把畢業(yè)實習時間用來求職,進而無暇進行系統(tǒng)實習情況比較常見。許多高校把本科生畢業(yè)實習環(huán)節(jié)安排在大學四年級第二學期,而這期間又是畢業(yè)生求職、應聘的時問。一些大學生把本該用來實習的時間,卻不得不忙著應聘和復習,頻頻請假,根本顧不上安心到實習單位去實習。導致帶隊老師難以管理實習過程,企業(yè)的實習安排也無法兼顧到個別學生,導致這種實習方式企業(yè)和學生的關系松散,實習的效果很難如人意。</p> <p> 2.分散實習</p> <p> 分散實習一般是學生自己選擇實習單位進行實習,采用這種模式進行畢業(yè)實習,學生獨立工作的鍛煉機會較多。</p> <p> 受經(jīng)費緊張和學生求職的制約,很多學校部分采用了分散實習模式。由學生自己尋找實習單位、安排實習時間、自覺進行實習。學校通過評審實習報告和評閱實習單位意見等方式,評價學生畢業(yè)實習的質(zhì)量,但是,由于缺乏對實習過程和內(nèi)容的管理,使得畢業(yè)實習質(zhì)量基本失去了控制。這種放任自流的實習方式,使得一些社會關系少且自身溝通能力較弱的學生,找不到實習單位;一些學生雖然找到了實習單位,但由于沒有全身心投人到實習中,得不到實踐鍛煉;還有一些學生雖然在一定時間里能夠投人實習,但由于缺乏教師指導,沒有加深對所學知識的理解。這也使教師失去了接觸實際工作、在指導學生實習中教學相長的良好機會,一些教師特別是年輕教師的教學和理論研究更加脫離實際。由于學校只能通過定期或不定期的電話聯(lián)系和巡視來考察,難以隨時掌握實習生的實習動態(tài),無法客觀地評價實習生的職業(yè)能力和實習成績,使得實習效果也很難盡如人意。</p> <p> 以上兩種傳統(tǒng)的畢業(yè)實習模式,由于高校對畢業(yè)實習缺乏有效的質(zhì)量控制,流于形式的現(xiàn)象比較普遍,用人單位看重的學生畢業(yè)實習經(jīng)歷和實踐經(jīng)驗積累,看重的學生實際操作能力等均難以在畢業(yè)實習中得到提高,結果造成畢業(yè)實習與實踐經(jīng)驗的缺乏成為學生求職就業(yè)的蜘勸。</p> <p> 三、畢業(yè)實習創(chuàng)新模式及其特點</p> <p> 基于就業(yè)導向的畢業(yè)實習創(chuàng)新模式,就是將畢業(yè)實習與學生就業(yè)有機結合,學校利用結合自身優(yōu)勢,自主能動地為學生就業(yè)工作建立實習與就業(yè)基地,把學生的畢業(yè)實習安排在實習與就業(yè)基地進行。</p> <p> 這種畢業(yè)實習創(chuàng)新模式既可以替代企業(yè)采用招聘的形式招聘新員工,也可以提高大學一年一度的為畢業(yè)生舉辦的求職招聘會的效度。企業(yè)可以充分觀察到在崗實習的學生真實表現(xiàn)和實際能力,通過雙向選擇,企業(yè)可以留用適合自己的學生。學生在充分了解實習企業(yè)的基礎上根據(jù)自己的意愿選擇留在企業(yè),用人單位擇優(yōu)錄取實習學生。這種建立在用人意向上的畢業(yè)實習創(chuàng)新模式,能夠調(diào)動實習企業(yè)和實習學生的積極性,充分挖掘用人單位的培訓資源,極大的促進實習的順利完成,有利于為大學培養(yǎng)出綜合素質(zhì)更高的畢業(yè)生,同時實習學生也為用人單位的工作注人活力,促進企業(yè)發(fā)展;同時使用人單位對畢業(yè)生的能力有了更深的了解,提前對擬招收的畢業(yè)生進行了業(yè)務培訓,保障了用人單位招聘員工的質(zhì)量;畢業(yè)生也能夠較早的了解實習單位的文化和環(huán)境,有利于將來盡快地融人到工作中去,對學校、畢業(yè)生和用人單位來說是一種”一舉多得”的多贏局面。畢業(yè)實習創(chuàng)新模式有如下特點:</p> <p> 1.就業(yè)導向,企業(yè)受益大</p> <p> 畢業(yè)實習創(chuàng)新模式,是校企雙方基于共同利益而建立起來的一種合作方式,是在企業(yè)確立用人意向的基礎上建立的實習模式,對于企業(yè)來說,這種實習模式不僅保證它能夠優(yōu)先選擇優(yōu)秀學生,而且能夠保證員工質(zhì)量。</p> <p> 首先,通過雙向選擇,吸引大批優(yōu)秀學生到單位參加生產(chǎn)實習,等于占有了大量的人才資源,通過幾個月的上崗實習的接觸和交流,單位對擬錄用畢業(yè)生的綜合素質(zhì)有了全面的了解,與傳統(tǒng)的筆試、面試等選拔人才的簡短流程相比,不僅擁有更多機會獲得優(yōu)秀的畢業(yè)生,更能保證所選擇畢業(yè)生的質(zhì)量。</p> <p> 其次,采用這種實習模式等于是提前進行員工培訓,目前,許多企業(yè)只是在需要人的時候才招聘畢業(yè)生,然后進行簡單的培訓就參與企業(yè)生產(chǎn),由于對用人單位的工作環(huán)境和工作氛圍的不了解往往成為畢業(yè)生工作表現(xiàn)的絆腳石,甚至導致不能適應環(huán)境而離開工作單位,給企業(yè)的工作造成困難。畢業(yè)實習創(chuàng)新模式使得用人單位可以有意識的培養(yǎng)適合自己企業(yè)標準的員工,通過實習的培養(yǎng)增加學生對單位工作生活環(huán)境和文化氛圍的了解,使學生在畢業(yè)后能夠盡快融人單位的工作環(huán)境。</p> <p> 2.雙向選擇,學生收獲多</p> <p> 用人單位通過雙向選擇得到選擇優(yōu)秀學生的優(yōu)先權,可以挑選最好的學生,同時可以及早地對將來要選擇的學生進行培訓和考核。實習學生通過雙向選擇有機會盡早地了解用人單位的工作氛圍和文化特色,有利于盡快融人用人單位。雙方通過雙向選擇才獲得的機會,都會比較珍惜這難得的機會,用人單位和實習學生通過雙向選擇能夠優(yōu)先選擇寶貴資源,從而達到雙贏。</p> <p> 第一,學生在校期間能夠進人企業(yè)上崗實習,畢業(yè)后能夠與企業(yè)簽訂勞動用工協(xié)議,實現(xiàn)零距離就業(yè),避免了因自主擇業(yè)失誤或盲目就業(yè)給自己帶來的經(jīng)濟損失和風險。</p> <p> 第二,學生的實習既是將知識、理論轉化為實踐的過程,同時也是在與老員工共同工作中,應用知識獨立解決問題的過程,在這一角色變換中,學生密切了與社會的聯(lián)系,加深了對所從事聊業(yè)崗位的理解,便于找準自己的位置,容易樹立正確的就業(yè)觀和成才觀。</p> <p> 第三,學生在校期間就接受社會的鍛煉,提早接觸就業(yè),為畢業(yè)時的就業(yè)積累經(jīng)驗,提高了自己的就業(yè)能力和社會適應能力。實習生為了得到更好的工作必然要付出最大的努力,用人單位為了獲得更優(yōu)秀的員工,培訓工作和考核就抓得更好,有利于調(diào)動雙方的積極性,促進實習工作的圓滿完成。</p> <p> 第四,學生實習期間有經(jīng)濟收人,生活有保障。根據(jù)校企合作協(xié)議,學生上崗實習期間,享受實習工資和加班補貼,能使實習期間的生活有較好的保障。</p> <p> 3.結合緊密,實習效果佳</p> <p> 在畢業(yè)實習創(chuàng)新模式下,企業(yè)、學生、學校三者之間利益相關。因為實習生是企業(yè)未來的員工,所以企業(yè)對學生的培養(yǎng)會完全按照企業(yè)員工一樣嚴格要求,提供各種機會,讓學生頂崗實習、盡快掌握應有的專業(yè)技能;充分讓學生參與到企業(yè)的生產(chǎn)、經(jīng)營、管理中去,完全感受企業(yè)的文化熏陶。而學生則希望通過實習留在企業(yè)工作,學習起來自然格外努力,且目的明確,效果自然不一樣。在這種既能完成教學任務又能促進就業(yè)的實踐教學機制下,學校運作起來自然是不遺余力。</p> <p> 四、實例分析</p> <p> 為積極應對當前嚴峻的就業(yè)態(tài)勢,內(nèi)蒙古工業(yè)大學國際商學院嘗試創(chuàng)新出一條行之有效的新出路:即將畢業(yè)實習與學生就業(yè)有機結合起來,有力地推動了學生就業(yè)工作高效開展。</p> <p> 2007年下學期,我院和深圳某IT企業(yè)進行了校企合作,達成了校企合作的意向,在該企業(yè)設立了學生實習與就業(yè)基地。同年底我院即根據(jù)協(xié)議約定向企業(yè)輸送了一批即將畢業(yè)的學生上崗實習,熟悉生產(chǎn)線的各個流程。兩個月后,經(jīng)過與企業(yè)的雙向選擇,大部分學生分別進人了該公司的財務、商務、客服、物流等崗位,其余的學生因不適應南方氣候或另外找到了工作而離開企業(yè)返校。在實習的兩個月期間,學生熟悉了工作流程,積累了經(jīng)驗,并取得了兩個月的實習工資,收獲頗豐。經(jīng)過近兩年的跟蹤調(diào)查,這批留下的學生表現(xiàn)出了良好的職業(yè)素質(zhì),在去年的金融危機中,沿海一帶大批企業(yè)大量裁員的背景之下,這些學生無一人被裁掉,反而走上了更加重要的部門任職,被總部分別派往成都、重慶、南京、杭州、大連等地從事財務、商務等崗位。</p> <p> 根據(jù)近兩年對我院07屆電子商務專業(yè)學生的跟蹤調(diào)查數(shù)據(jù)顯示,在深圳某企業(yè)實習期間表現(xiàn)突出的,有意愿留下的學生全部被接收,并且大多數(shù)直接被晉升為管理崗。由于他們在兩年內(nèi)工作狀態(tài)穩(wěn)定,表現(xiàn)突出,一部分已經(jīng)在給地區(qū)分公司擔任領導職務,全面負責業(yè)務的開展,而沒有參加深圳實習的同學大部分還沒有相對穩(wěn)定的職業(yè),有了工作的同學在工作中也較少有所建樹。</p> <p> 兩相比較,我們感覺對于大學來說,這種創(chuàng)新實習模式可以充分利用企業(yè)現(xiàn)有的資源和條件,建立相對穩(wěn)定的實習和就業(yè)基地,迅速獲取行業(yè)的用人信息,貼近社會需求辦學,加強和企業(yè)的合作,尤其對于學生來說,能使他們迅速進人狀態(tài),減少摩擦失業(yè)的比例。</p> <p> 五、畢業(yè)實習創(chuàng)新模式的結果與效應</p> <p> 好的實習模式能夠成為企業(yè)和學校良性互動的橋梁,幫助學校和企業(yè)建立長期的合作的關系。事實表明,基于就業(yè)導向的畢業(yè)實習創(chuàng)新是切實可行的,是卓有成效的,將實習與就業(yè)相結合的探索是有益的,效果顯著的。這種畢業(yè)實習創(chuàng)新模式的試行表現(xiàn)出如下積極的效應:</p> <p> 1.是實現(xiàn)產(chǎn)學結合的有效方法之一</p> <p> 第一,在這個模式下,企業(yè)通過實習不斷考察學生,塑造學生,培養(yǎng)符合自己企業(yè)標準的員工。學生以企業(yè)員工的身份直接參與企業(yè)的生產(chǎn)實踐,人才培養(yǎng)的目的性和針對性強。</p> <p> 第二,在這個模式下,學校根據(jù)企業(yè)的崗位需求,有針對性地加強專業(yè)和技能培養(yǎng),最終實現(xiàn)畢業(yè)生的充分有效就業(yè)。</p> <p> 第三,在這個模式下,學生實現(xiàn)了實習就業(yè)一體化,企業(yè)完成了新員工向老員工的培訓,使得學生一畢業(yè)就能上崗,避免了教育與生產(chǎn)中間環(huán)節(jié)的資源浪費。</p> <p> 第四,畢業(yè)生選擇職業(yè)不能脫離社會需要,通過畢業(yè)實習創(chuàng)新模式,學生學會了把社會需求作為出發(fā)點和歸宿,結合自己的專業(yè)和興趣來定未來取刊七發(fā)展方向,做出符合自己愿望與社會需求的理性就業(yè)選擇,實現(xiàn)與社會需求的融合,這對畢業(yè)生知識的資本化以及綜合能力的可持續(xù)開發(fā)具有深遠的意義,同時對社會經(jīng)濟增長又具有促進作用。</p> <p> 2.推進學校的內(nèi)涵建設</p> <p> 適用畢業(yè)實習創(chuàng)新模式的企業(yè)一般是用人量大、接納能力強、產(chǎn)品品種多,技術優(yōu)勢明顯的大中型企業(yè),它希望學校能成為它的后備人才庫。一旦潛在需求被激發(fā),他們愿意為學校的發(fā)展和專業(yè)的建設出謀劃策,乃至出錢出力出技術。這對于目前我國高等教育而言,無疑是雪中送炭。目前,大學和企業(yè)平等合作關系的建立并不是很樂觀,這樣的機制有利于雙方合作關系的建立。雙方良好的合作,不僅有利于解決大學的學生實習、就業(yè)等實際問題,也有助于推動專業(yè)的建設與發(fā)展。</p> <p> 3.提高畢業(yè)生就業(yè)質(zhì)量</p> <p> 畢業(yè)實習創(chuàng)新模式為學生、企業(yè)提供了一個相互考察,相互了解和選擇的平臺,對提高畢業(yè)生就業(yè)質(zhì)量非常有益。第一,學生到企業(yè)參加實習后,耳濡目染了企業(yè)的文化,熟悉了行業(yè)知識,了解了業(yè)界的行情,當他們面臨職業(yè)的選擇時,就不再會盲目和盲從。第二,畢業(yè)實習創(chuàng)新模式有利于學生快速完成專業(yè)知識向職業(yè)能力的轉化,縮短擇業(yè)周期。第三,畢業(yè)實習創(chuàng)新模式讓學生提前接觸與自己職業(yè)發(fā)展相關的實際工作。獲得職業(yè)崗位的感性認識及職業(yè)素質(zhì),培養(yǎng)出未來職業(yè)的適應能力,學會根據(jù)社會需求不斷充實和完善自己,順利完成角色定位。這都有利于提高就業(yè)穩(wěn)定率。</p> <h2>第2篇:爺爺?shù)拇竽⒐椒段?/h2> <p> [關鍵詞] 骨髓間充質(zhì)干細胞 視網(wǎng)膜細胞 大鼠</p> <p> 成體干細胞中的骨髓間充質(zhì)干細胞(mesenchymal stem cells, MSCs)具有多向分化的潛能,雖然其來源于中胚層,卻可以跨胚層分化為外胚層來源的組織細胞,而視網(wǎng)膜則來源于胚胎期神經(jīng)外胚層。MSC表達許多生長因子和細胞因子受體以及細胞與細胞黏附作用的受體,提示MSC的功能受自分泌和旁分泌循環(huán)的調(diào)控。這成為不同方法誘導MSCs定向分化的理論基礎。組織或細胞在受到損傷后會進行自身修復,視網(wǎng)膜是接受光能,形成視覺的重要組織結構,如果光照強度或光照時間超過了視網(wǎng)膜的承受力,將會造成視網(wǎng)膜光損傷。本研究旨在用光損傷視網(wǎng)膜片的培養(yǎng)上清液體外誘導MSCs,看其損傷時分泌的細胞因子和分化所需蛋白是否能誘導MSCs分化為視網(wǎng)膜光感受器樣細胞和視網(wǎng)膜神經(jīng)細胞。探索體外構建MSCs分化成視網(wǎng)膜細胞所需微環(huán)境的理論可能性。</p> <p> 1材料與方法</p> <p> 1.1 實驗動物</p> <p> 健康無眼病成年Sprague-Dawley(SD)大鼠,雌雄不限,體重120~150g(吳氏實驗動物中心)。</p> <p> 1.2 大鼠視網(wǎng)膜片的取材</p> <p> 10%水合氯醛按0.3mL/100g腹腔注射麻醉,無菌狀態(tài)下取出眼球。把眼球用10%FBS的LG-DMEM洗滌3次,去除球周筋膜組織,清洗干凈后移入另一盛有10% FBS的LG-DMEM培養(yǎng)皿中,在解剖顯微鏡下,在角鞏膜緣后1mm處剪開,用顯微剪取出角膜、晶狀體、玻璃體,留有外層覆蓋鞏膜的視網(wǎng)膜杯。把視網(wǎng)膜杯浸入培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)液里,由杯緣向杯底,用顯微鑷鈍性分離視網(wǎng)膜和鞏膜,在視神經(jīng)處剪斷,徹底分離視網(wǎng)膜色素上皮層與視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮層。</p> <p> 1.3 大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮層常規(guī)石蠟切片HE染色</p> <p> 將大鼠視網(wǎng)膜片(只包含神經(jīng)上皮層)常溫浸泡甲醛24h以固定,常規(guī)脫水、透明、包埋、切片,常規(guī)脫蠟,行蘇木素-伊紅(HE)染色,封片。用數(shù)字攝像系統(tǒng)觀察并采集照片。</p> <p> 1.4 視網(wǎng)膜片光損傷和條件培養(yǎng)液的制備</p> <p> 把分離好的4只眼球的視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮層移入另一盛有8mlNeurobasal+B27的小培養(yǎng)皿中(直徑60mm)。用眼科顯微剪把視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮層剪成1mm×1mm×1mm大小。在超凈臺內(nèi),50W,12V的鹵素燈作為光源,采取直落式照射上述的小培養(yǎng)皿,用TES-1330A照度計測定光照強度,調(diào)整光源與培養(yǎng)皿之間的距離(3.5cm),使被照細胞同一水平的光照強度為(1950 ±200) Lux ,光照時該水平溫度變化在0.5℃之內(nèi),持續(xù)光照45min,光照后將培養(yǎng)皿放入37℃、5%CO2飽和濕度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)1小時15min。用去針頭的針筒吸出小培養(yǎng)皿中的液體,離心后上清液用0.22um濾器過濾,以2:3的比例與10%FBS-LGDMEM混合,并吹打均勻,制成條件培養(yǎng)液Ⅰ。條件培養(yǎng)液Ⅱ制備方法同條件培養(yǎng)液Ⅰ,只是視網(wǎng)膜片未經(jīng)過光損傷處理,盛有Neurobasal+B27和視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮層的小培養(yǎng)皿直接放入37℃、5%CO2飽和濕度培養(yǎng)箱培養(yǎng)2小時。條件培養(yǎng)液Ⅲ為Neurobasal+B27和10%FBS-LGDMEM以2:3的比例混合,無視網(wǎng)膜片以及光損傷處理。三種條件培養(yǎng)液均放于-20℃保存。</p> <p> 1.5 視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮層光損傷后電鏡觀察</p> <p> 取材,3%戊二醛―1.5%多聚甲醛前固定,1%鋨酸―1.5%亞鐵氰化鉀后固定,酒精―丙酮脫水,環(huán)氧樹脂618包埋劑包埋;超薄切片,醋酸鈾、檸檬酸鉛染色,日立Hu-12A型(飛利浦208型)透射電鏡觀察、攝影。</p> <p> 1.6 大鼠MSC的分離和培養(yǎng)</p> <p> 取SD大鼠,麻醉后,無菌條件下取出雙側股骨和脛骨,剔除周圍肌肉組織。在超凈臺內(nèi),用PBS沖干凈,轉移到盛有20%FBS-LGDMEM的培養(yǎng)皿中,去除長骨2端骨骺,暴露骨髓腔。用培養(yǎng)液沖出骨髓腔內(nèi)的骨髓液,吹打。用200目篩網(wǎng)過濾后置于離心管中,1000rpm,10min,棄上清,用10%FBS-LGDMEM培養(yǎng)液重懸后以10×108/mL接種于塑料培養(yǎng)瓶中。37℃、5%二氧化碳培養(yǎng),24h換液,以后每3d換液一次,除去非貼壁細胞,12~15d后MSC達90%瓶底面積時傳代,P1后細胞融合至80%進行1:2傳代。</p> <p> 1.7 MSC的鑒定</p> <p> 當?shù)?代的BMSCs融合達90%,經(jīng)0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA消化、離心后用PBS制成2×106/mL的細胞懸液,將細胞懸液分裝至4只樣品管中,分別加入熒光標記的小鼠抗大鼠單抗CD34-FITC+小鼠抗大鼠單抗CD90-PE,小鼠抗大鼠單抗CD34-FITC+小鼠抗大鼠單抗CD44-PE及其對應的同型對照各10μL,混勻,37℃下避光反應20min。每管加入1mLPBS混勻,離心2000rpm,10min以洗去未標記上的抗體。棄上清液,每管再加入1mLPBS重新混懸細胞,用流式細胞儀檢測細胞表面抗原CD34、CD44和CD90的表達。對細胞純度進行鑒定。</p> <p> 1.8 MSC體外誘導成視網(wǎng)膜細胞</p> <p> 取第3代BMSCs細胞消化、離心后用10%FBS-LGDMEM重懸后以200ul/孔接種于6孔板,24h待BMSC貼壁后,棄培養(yǎng)液,將細胞分為3組:第1組換用條件培養(yǎng)液Ⅰ,第2組換用條件培養(yǎng)液Ⅱ,第三組換用條件培養(yǎng)液Ⅲ,3個組均在在37℃、5%CO2培養(yǎng)箱孵育。每天觀察記錄細胞生長分化情況,每2天換一次條件培養(yǎng)液,培養(yǎng)至第7~8天時停止。</p> <p> 1.9 誘導的BMSCs細胞免疫化學染色</p> <p> 采用Envision二步法,分別將3組誘導的MSC玻片取出,均與神經(jīng)元特異性標志小鼠抗大鼠醇化酶(NSE) (稀釋度1:50)(美國Fisher Scientific公司)、星形膠質(zhì)細胞特異性標志小鼠抗大鼠單克隆抗體神經(jīng)膠質(zhì)酸性蛋白(GFAP) (稀釋度1:50)(美國Fisher Scientific公司)、光感受器特異性標志小鼠抗大鼠單克隆抗體視紫質(zhì)(Rhodopsin) (稀釋度1:50)(美國Fisher Scientific公司)和二抗(生物素標記的羊抗鼠IgG抗體)作用,二氨基聯(lián)苯胺(diaminobenzidin,DAB)顯色后,蘇木素復染,室溫干燥后封片,光鏡下觀察是否表達視紫紅質(zhì)、NSE、GFAP。選取至少10個隨機視野,每個視野在200倍物鏡下統(tǒng)計陽性細胞數(shù)和整個視野細胞總數(shù),計算陽性細胞率,測量值均以x±s表示,來對三種誘導條件下所表達的陽性細胞進行分析。</p> <p> 1.10 數(shù)據(jù)分析方法</p> <p> 所有數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差表示,并進行雙因素方差分析。</p> <p> 2 結果</p> <p> 2.1 大鼠視網(wǎng)膜片光損傷電鏡觀察所見:光損傷后視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮層,可見光感受器外段腫脹成圓形,盤膜結構紊亂,疊狀結構解離,膜間隙增大。內(nèi)節(jié)線粒體固縮和腫脹,空泡變性。染色質(zhì)濃染,核膜皺縮內(nèi)陷。</p> <p> 2.2 大鼠MSC細胞的鑒定(如圖1)</p> <p> 圖1 大鼠MSC細胞的鑒定</p> <p> BMSCs流式細胞術鑒定結果,培養(yǎng)的第三代BMSCs干細胞表面標志CD90陽性(CD90+/CD34-:92%),基質(zhì)細胞表面標志CD44陽性(CD44+/CD34-:93%)</p> <p> 2.3 誘導分化的細胞形態(tài)學觀察(如圖2)</p> <p> A:3天后原來梭形的BMSCs胞體發(fā)生收縮,呈圓形或橢圓形,細胞邊緣變得不規(guī)整,有零星的細胞突起×300;B:4天后BMSCs有較多突起×300;</p> <p> C、D:7天后,細胞發(fā)生遷移并相互之間建立突觸聯(lián)系×200;E:對照組BMSs分化細胞明顯減少,也少有建立突觸聯(lián)系的細胞×300。</p> <p> 圖2 誘導分化的BMSCs形態(tài)學觀察</p> <p> 2.4 誘導分化的視網(wǎng)膜樣細胞不同誘導條件下免疫細胞化</p> <p> 學染色表達指標陽性率</p> <p> 表1 不同誘導條件下免疫細胞化學染色表達指標陽性率</p> <p> 注:均方比F值為7.6054,F(xiàn)0.05=6.944,可見視網(wǎng)膜片三組間兩兩比較差異有顯著性(P <0.05)。</p> <p> 3 討論</p> <p> 3.1視網(wǎng)膜光損傷</p> <p> 視網(wǎng)膜是接受光能,形成視覺的重要組織結構,但也是眼組織中最易受到光損傷的部位。如果光照強度或光照時間超過了視網(wǎng)膜的承受能力,將會造成視網(wǎng)膜光損傷。</p> <p> 本實驗采用(50W,12V的鹵素燈作為光源,采取直落式照射上述的小培養(yǎng)皿,1950 ±200Lux)主要是考慮到以下幾點:①視網(wǎng)膜光損傷受諸多因素影響,內(nèi)在因素包括視網(wǎng)膜部位、體溫、膚色、年齡、種屬、營養(yǎng)狀態(tài)及晶體狀況,外在因素包括視網(wǎng)膜暗適應狀態(tài)、光照射方式、光強度、波長和光照時間。因此本實驗選擇單純照射細胞而不是照射活體動物來盡量排除內(nèi)在因素的干擾,選擇成年SD白鼠是考慮到有研究表明白種人較黑種人容易損傷,大白鼠視網(wǎng)膜對光的敏感性隨著年齡的增加而增高。②視網(wǎng)膜光化學損傷的敏感性隨著光波長的縮短而呈對數(shù)上升,因此短波長更易引起視網(wǎng)膜光損傷,角膜可吸收</p> <p> 3.2 MSC細胞分離、培養(yǎng)、鑒定</p> <p> 用組織工程技術體外分離和培養(yǎng)所需靶細胞,用于體內(nèi)相關疾病的細胞替代治療為多種疾病帶來了新的治療思路。因此有關此類的研究受到廣泛關注。胚胎干細胞具有發(fā)育全能性,但涉及倫理學問題,以往受到很大限制,發(fā)展緩慢。應用眼色素上皮緣的視網(wǎng)膜干細胞[3]及鼠腦神經(jīng)先祖細胞移植[4]也由于供體組織有限性及安全性問題,不利于治療視網(wǎng)膜疾病的開展。于是有人把目光投向成體干細胞中的MSCs,因其來源于中胚層,可以跨系統(tǒng)甚至跨胚層分化為3個胚層來源的細胞,特別是中胚層和神經(jīng)外胚層來源組織的細胞(視網(wǎng)膜來源于胚胎期神經(jīng)外胚層),并且經(jīng)過20~30次細胞分裂后,這種分化特性也不會消失[5]。且分離培養(yǎng)方便。MSC存在于體內(nèi)多處如胎血、胎肝、胎脾、胎兒的骨髓以及成人骨髓[6], 臍血、脂肪組織和成人的外周血中亦含有數(shù)量極少的間質(zhì)干細胞[7],現(xiàn)多從骨髓中分離獲得。MSC的純化方法有貼壁篩選法,流式細胞儀分選法,密度梯度離心法,免疫磁珠法。較常采用的方法為貼壁篩選法和密度梯度離心法,或兩者聯(lián)合。MSCs的表面標志具有非單一性,表達了間質(zhì)細胞、內(nèi)皮細胞和表皮細胞的表面標志,一般認為CD29、CD44、CD71、CD90、CD105、CD120a、CD124、CD166以及STRO-1、SH2、SH3是其重要的標志物,流式細胞術發(fā)現(xiàn)不表達造血細胞表面抗原如CD34、CD45、CD11a、CD14。如果能找到更特異性標記物,就可以獲得更純的MSCs,這對后續(xù)的實驗步驟所得的實驗數(shù)據(jù)有重要影響。前2種方法分離所獲得的細胞純度較低,但具有良好的細胞分化能力。應用流式細胞儀技術和磁性分選技術針對細胞表面標志進行富集和分離,分選效率和純度均較高[8-9]。</p> <p> 3.3 MSC體外誘導成視網(wǎng)膜細胞</p> <p> 目前國內(nèi)外主要用生長因子誘導MSCs分化為視網(wǎng)膜細胞。Anthony K等[8]發(fā)現(xiàn)EGF、taurine或activinA體外誘導大鼠MSCs,有20%~32%表達視網(wǎng)膜光感受器細胞的表面抗原視紫紅質(zhì)。Anthony K等[8]應用activinA(活化蛋白A),?;撬岷虴GF對成人CD90+MSCs體外誘導分化后,20%-32%的細胞表達感光細胞特異標志―視紫紅質(zhì),視蛋白,recoverin。非視網(wǎng)膜來源的,可替代視網(wǎng)膜細胞功能的自體細胞是細胞移植治療視網(wǎng)膜變性疾病和視神經(jīng)損傷的理想種子細胞,目前國外有少量研究發(fā)現(xiàn)MSCs視網(wǎng)膜下移植可誘導分化為視網(wǎng)膜細胞,但由于體內(nèi)局部微環(huán)境復雜,影響因素繁多,移植細胞的分化方向不確定,往往無法定向分化成所需細胞,存在表達增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變的潛在危險。而體外誘導MSCs定向分化為視網(wǎng)膜細胞仍是當前研究的難點。國內(nèi)外僅數(shù)篇文獻報道用視網(wǎng)膜片培養(yǎng)上清液體外誘導MSCs分化為視網(wǎng)膜樣細胞,但均未對培養(yǎng)上清液成分進行具體分析檢測,分析其有效成分。本實驗探索體外誘導MSCs定向分化的新途徑,可進一步進行蛋白質(zhì)組學技術檢測不同誘導微環(huán)境的蛋白差異,為構建MSC體外誘導分化為視網(wǎng)膜細胞的微環(huán)境提供理論支持。這不僅解決了直接將MSCs體內(nèi)移植分化方向不確定的問題,以及應用異體的人視網(wǎng)膜片誘導時可能引發(fā)排斥反應等問題。</p> <p> 參考文獻:</p> <p> [1]Noell WK.Possible mechanisms of photo receptor damage by light in mammalian eyes[J]. Vision Res,1989,20(12):1163-1171.</p> <p> [2] 宋憶淑,賀 冰,費向東,等. 可見光照射致培養(yǎng)的視網(wǎng)膜色素上皮細胞凋亡的超微結構觀察[J].中國老年學雜志,2001,25(1):69-70.</p> <p> [3] Tropepe K, Brenda LK,Bernard JC, et al. Retinal stem cells in themammalian eye[J].Science, 2000,287:2032-2036.</p> <p> [4] Van Hoffelen, Samantha J. Young, Michael J.Shatos, et al. Incorporation of murine brain progenitor cells into the developing mammalian retina[J].Invest.Ophthalmol.Vis.sci,2003,44:426.</p> <p> [5] Friedenstein AJ,ChailakhyanRK,GerasimonUV.Bone marrow osteogenic stem cells:in vitro cultivation and transplantation in diffu-sion chamber[J].Cell Tissue Kinet,1987,20(3):263-272.</p> <p> [6] Campagnoli C,Roboerts AG,Kumar S,et al.Identification of mesenchymal stem progenitor cells in human first-trimester fetal blood,liver,and bone marrow[J].Blood,2001,98(8):1396-1402.</p> <p> [7] EricesA,Conget P,Minguell JJ.Mesenchymal progenitor cells in human umbilical cord blood[J].Br J Haematol,2000,109(1):235-242.</p> <h2>第3篇:爺爺?shù)拇竽⒐椒段?/h2> <p> 小豬嘟嘟今天打扮的十分的帥氣,原來嘟嘟是要去參加小兔貝貝的生日party。嘟嘟可沒去過貝貝家呀!</p> <p> 嘟嘟走到一個十字路口迷了路,正著急呢!忽然看見一只烏龜正慢悠悠的走了過來,嘟嘟連忙上前非常有禮貌的說:“烏龜?shù)艿?,你知道去蘑菇村怎么走嗎?……”“你叫我什么,我?80歲了,太沒禮貌了?!边€沒等嘟嘟把話說完呢,這位烏龜爺爺便生氣的走開了</p> <p> 嘟嘟納悶的看著還沒走遠的烏龜爺爺“有事需要幫忙嗎?” 哦,是一條長著胡須,但看上去很紳士的牧羊犬,嘟嘟還是很有禮貌的說:“狗爺爺,您知道去蘑菇村怎么走嗎?”“不,我看上去有那么老嗎?我今年可只有10歲??!真是豈有此理?!彼瓷先ケ葹觚敔敔敻由鷼狻?/p> <p> 嘟嘟無可奈何的繼續(xù)往前走,迎面走來一頭大象,嘟嘟想:這龐然大物的家伙年紀一定不小了,肯定得叫爺爺。嘟嘟仍然非常有禮貌的問:“象爺爺,你知道去蘑菇村怎么走嗎?”小象先是一楞,馬上又哈哈大笑起來:“你叫我爺爺,可我才兩歲呢!”嘟嘟的臉刷的紅了,摸著頭非常難為情的說:“對不起,小象弟弟你知道去蘑菇村怎么走嗎?”“我?guī)闳グ?!”小象愉快的說?!?/p> <h2>第4篇:爺爺?shù)拇竽⒐椒段?/h2> <p>在哈木果爾森林中住著各種動物,動物們相處融洽,不管是獅子與兔子還是鳥類與蝗蟲他們之間都從未爆發(fā)戰(zhàn)爭,動物們常說這是一棵古樹所賜,這棵古樹取日月之精華,天地之靈氣具與其身。</p> <p> 有善良的小狗一家,一家人勤勤懇懇,他們有兩個孩子,老大叫京京,老二叫童童。災難偏偏降臨到他們家,無情的病魔奪去了京京父母的生命。</p> <p> 一年后,京京五歲,弟弟童童三歲。昨天家里儲藏的蘑菇吃光了,為了不讓弟弟和自己挨餓,京京一大早挎著籃子出來了。京京走在大自然的懷抱里,太陽公公把自己幾綹金色的胡須向大地拋去,可京京已無心觀賞春景,只想快點找到蘑菇,好填飽肚子。京京走呀走,胳膊被壓紅了,就換另一只,頭上的汗已順著面頰流了下來。京京實在頂不住了便歇了下來。他看到了那棵古樹便好奇的走了過去,摸摸這兒,碰碰那兒,突然古樹開口說話了:“京京,乖孩子,告訴樹爺爺遇到什么難事了?”京京并沒有感到很驚訝,把事情原原本本地告訴了古樹。聽過京京的話,樹爺爺笑了笑,煞時,天空下起了小雨,聰明的京京用籃子遮住自己的身子沒有被雨淋到。</p> <p> 雨停了,天邊出現(xiàn)了一道長長的彩虹,小狗京京的身邊神奇的長出了許多蘑菇,大的、小的、漫山遍野的都是。京京臉上露出了久違的笑容,樹爺爺又說話了:“京京,蘑菇是生長在陰暗潮濕的地方,以后有什么不懂的問題盡管來找我,哈哈……”古樹又變成原來的樣子。京京盡情的采著蘑菇,享受著陽光。幽幽群山笑了,顯得更綠了;清凌凌的小河笑了,泛起層層晶瑩的浪花;小樹們笑了,擺動著柔軟的嫩枝;小狗京京也笑了,笑的那么燦爛,那么幸福……</p> <p></p> <h2>第5篇:爺爺?shù)拇竽⒐椒段?/h2> <p>從前,有一只小兔叫小蘭。因為她是從城里來的,所以經(jīng)常對森林的伙伴們看不起。</p> <p> 有一天,天下起了大雨,小蘭躲在她的小蘑菇屋子里,吃著胡蘿卜,舒服極了。這時,跑來了一只小雞。小雞用它那濕透了的翅膀敲著門,說:“里面有人嗎,里面有人嗎?我是小雞,我迷路了!外面下著大雨,好冷??!里面的人行行好,開開門吧!”小蘭聽了,打開了門,看見渾身濕透的小雞,卻立即把門關上了。還送了小雞一句話:“小雞啊小雞,不是我說你,都渾身是水了還敢來我家?也不怕糟蹋了我家的地板?”聽了這話,小雞失望地走了。</p> <p> 有一次,一只小灰兔來找小蘭。她說:“小蘭姐姐,我想用2個胡蘿卜換你的一個蘑菇好不好?”“哼,你那胡蘿卜肯定是不干不凈的東西!我小蘭可不是好糊弄的!”說著把門一關。小灰兔傷心的走了……</p> <p> 種種類似的事情在發(fā)生,小伙伴們都討厭起了小蘭。小蘭有些奇怪:怎么最近大家都不理我了?她找到了最有學問的龜爺爺。龜爺爺捋了捋胡子笑瞇瞇地對她說:“小蘭,你應該改一改你的性格。你的性格有些驕傲,所以會瞧不起人。你回去再想想你的那些行為吧!”</p> <p> 不久,小蘭果然變得平易近人了。她有了很多朋友。她再次去開心地線龜爺爺匯報時,龜爺爺笑著說:“這就是玉不鑿,不成器?。 ?/p> <p></p> <h2>第6篇:爺爺?shù)拇竽⒐椒段?/h2> <p> 那時候,爺爺在部隊當參謀,年輕干練的他得到了女兵們的青睞。但是爺爺卻滿腦袋頑固的思想,一心要找個同鄉(xiāng)當媳婦。</p> <p> 家鄉(xiāng)人給爺爺物色了一個女子,她身材不高,但是長相好看,還是個文化人。</p> <p> 第一次見面,爺爺帶她去城里最好的飯館吃飯,并點了一條價格不菲的魚。他們沒怎么說話,爺爺一直喝著小酒。一頓飯吃完,她成了我的奶奶。</p> <p> 若干年后,我好奇地追問起爺爺奶奶的愛情,爺爺指著桌上的魚一本正經(jīng)地說:“第一次見面我就發(fā)現(xiàn),這個女人特別能吃,一個人就把魚吃光了。”奶奶嚷道:“誰讓你點那么貴的魚?不吃都浪費了!”爺爺看著我,狡黠地笑了。</p> <p> 也許就是從那個時候起,爺爺愛上了吃魚,特別是奶奶做的魚。紅燒魚、糖醋魚、清燉魚、炸小魚……每一條魚都是美味,連魚刺都透著誘人的香。</p> <p> 五十多年就這樣悄然滑過。爺爺轉業(yè)、退休,奶奶也成了老婆婆。可還是有些東西沒有變,那就是流溢在餐桌上的魚香。</p> <p> 然而,在流逝的歲月里,我們無法抵擋病痛和衰老。2005年,奶奶病重,醫(yī)院也準備放棄治療,但是在最后的關頭,奶奶挺了過來。大病初愈的奶奶十分虛弱,給爺爺做魚的任務就落在了舅舅們身上。幾個舅舅輪番上陣,十八般武藝全使了出來,可爺爺只嘗了一口就放下了筷子,說:“不是你媽做的味?!眿寢屩缓谜埬棠淘谂赃呏笓],每一步都按照奶奶的指令來進行。一盤紅燒魚上桌了,爺爺笑著夾了一塊魚皮。然后,他搖了搖頭。我們都想不通,用一樣的調(diào)料,一樣的工序,味道怎么會不同?可是爺爺再也沒有碰過這盤魚。</p> <p> 奶奶的身體慢慢好了起來,康復后的第一次下廚,奶奶就做了一條魚。那天,魚上桌的時候,爺爺?shù)难劬σ幌伦恿亮?說:“這條魚是老婆子做的!”</p> <p> 爺爺一天天老了,記憶力也在不斷減退。他開始忘記孫子們的年齡,忘記自己的往事,甚至忘記自己5分鐘前剛吃過飯。但是,有一點他卻怎么也忘不掉,那就是老婆子做的魚好吃。</p> <p> 早晨,爺爺出門散步,回來的時候,提著幾條鮮魚。“老婆子,中午做魚!”不一會兒,爺爺又出門了,回來的時候又提著一條魚。“早晨剛買了幾條魚!”奶奶在廚房里嚷嚷。“早晨你買魚了?”爺爺愣住了?!安皇悄阗I的嗎?”奶奶火更大了?!拔以绯烤蜎]出去!”爺爺?shù)幕鹨采蟻砹恕D棠汤_冰箱讓爺爺看。爺爺樂了:“這是你買的魚呀?我最喜歡吃魚了。”奶奶“砰”的一聲關上冰箱,氣呼呼地到廚房去了。</p> <p> 正午,奶奶在廚房里煎炒烹炸。爺爺端著酒杯,從門縫里探進頭來:“老婆子,中午有魚呀?”奶奶大吼一聲:“出去!”爺爺順從地帶上門,美滋滋地說:“有魚吃!老婆子做的魚好吃?!蹦棠探K于忍不住笑了。</p> <p> 我一直在想,為什么爺爺忘不了奶奶做的魚,甚至能從一樣的制作方法里嘗出不一樣的魚味?后來,我明白了。那魚的味道,大概就是他們五十多年來愛的味道吧。</p> <p> 紅燒魚的做法:</p> <p> 原料:鯉魚一條。熟雞肉半兩,切薄片。鮮蘑菇半兩,切片。筍子半兩,切成薄片后在沸水中煮五分鐘。蔥半兩,切段。老姜一小塊,切片。蒜兩瓣,切片。醬油兩大匙。淀粉一大匙,用水兌成芡汁。料酒一大匙。香油一匙。鹽、味精適量。</p> <p> 做法:</p> <p> 1.將整理好的魚抽筋后,在魚身兩面等距離各劃五六刀,抹上鹽和料酒,靜置半小時入味。</p> <p> 2.鍋中放油燒至七成熱,下魚炸呈微黃色撈出待用。</p> <p> 3.鍋中留約一兩余油,燒至四成熱,改小火下姜片、蒜片、蔥段炒出香味。</p> <p> 4.再倒入雞肉片、筍片、蘑菇片,改中火炒半分鐘。</p> <p> 5.加一斤湯或水,下魚、醬油、鹽燒約三分鐘,翻面再燒三分鐘。撈起裝盤待用。</p> <p> 6.將鍋中的湯汁勾芡后,淋入魚盤中即成。</p> <p> 豆腐皮炒青菜</p> <p> 原料:豆腐皮半張,青菜適量。</p> <p> 做法:</p> <p> 1.把豆腐皮切成菱形塊。</p> <p> 2.將青菜洗凈,切成段。</p> <h2>第7篇:爺爺?shù)拇竽⒐椒段?/h2> <p> 夜楓玲的扮演人出來~(???)/~啦是:冰封之蝶!撒花~撒花~</p> <p> 司徒茵的扮演人出來~(???)/~啦是:星星許諾!撒花~撒花~</p> <p> 沒有當上的荷葉們o(>?<)o不要灰心,以后還有機會滴!……</p> <p> 我估計,到第四章才會有新的人物(o)哦!可以先報名?。ㄅ?/p> <p> 第二章 楓玲和櫻玲的夢</p> <p> 上課了,老師還沒?(?_?)?有來。楓玲和櫻玲就一直在(ˇ&#717;ˇ) 想~茵茵說的話……</p> <p> 突然,她們看見坐在她們前一排的茵茵像凳子上長了刺一樣,不停地在扭動著身體。楓玲和櫻玲剛(ˇ&#717;ˇ) 想~叫住茵茵,突然,她們發(fā)現(xiàn),情況不對,茵茵她扭著扭著——竟然扭出了一條貓尾巴?。?!她們驚呆了!??!這是,櫻玲又發(fā)現(xiàn),茵茵的頭上又長出了一對貓耳朵……這實在是太不可思議了!楓玲和櫻玲的呼吸急促起來了,下意識的咽了一口唾沫,正在這是,茵茵居然變成了一只白色的小貓,一溜煙跑出了教室……</p> <p> 太不可思議了! 太不可思議了!她們打了一個寒顫,這時,她們的腳竟然不聽使喚了,像著了魔似的從座上站了起了,去追茵茵。這時,老師已經(jīng)來了,可老師和全班同學就像沒?(?_?)?看(o)見一樣……</p> <p> 楓玲和櫻玲一直在后面追茵茵,突然,她們看見,茵茵跑進了那個學校一直緊鎖著的一個老式的辦公室,奇怪的是今天,這個教室的門竟然是打開著的!她們也跟了上去……可是,當她們走進去的那一刻,頓時,發(fā)生了天旋地轉的變化——這里變成了一片幽深的森林!楓玲和櫻玲嚇的直起雞皮疙瘩。</p> <p> 還是楓玲的眼睛好,她發(fā)現(xiàn),在不遠處,站著一個女孩“( o )??!是茵茵!”楓玲拉著櫻玲跑了過去。</p> <p> 茵茵一看見楓玲和櫻玲就對她們說:“我?guī)銈內(nèi)ヒ粋€地方?!彼鴹髁岷蜋蚜峋拖蛞粋€大打的蘑菇房跑去。櫻玲把茵茵拉住,問她:“你把我們帶到(=@__@=)哪里去( o )?。俊薄叭ヒ娔Хㄍ鯂闹钦摺隊敔?。”“年爺爺?。俊睏髁岷蜋蚜岙惪谕暤?。“( o )是的?!薄笆裁答敔?,我還膠水奶奶呢(o)!茵茵,我的好(^o^)/~茵茵,你帶我們回去嘛!”櫻玲又開始撒嬌了。可是誰知茵茵不吃櫻玲這一套,硬是要拉她們?nèi)ヒ娛裁茨隊敔敗?/p> <p> 她們走進了那個蘑菇房,在里面坐著一個年邁的老爺爺?!澳隊敔敽?!”三個人 異口同聲道,不不不,應該是“三”口同聲,(*^__^*) 嘻嘻……“年爺爺,你把她們倆的DNA和兩位公主的DNA校(jiao)對一下吧!”“嗯,好?!薄皸髁帷蚜崮銈兎畔?000000000顆心,年爺爺是不會傷害你們的?!薄罢娴膯幔俊睓蚜崽煺娴膯??!拔蚁嘈拧!睏髁嵴f。“既然我姐姐相信,那我也相信?!睓蚜崮懬拥卣f?!澳菞髁?、櫻玲你們過來吧,我們開始驗證?!?/p> <p> {驗證后}</p> <p> “茵茵,你過來一下。”“(o)哦!”“茵茵你的任務完成,你的下一個任務是:教二位公主學會她們的魔法?!薄笆恰!?/p> <p> 楓玲和櫻玲出來了,茵茵和年爺爺就跪下說:“參見二位公主。”楓玲和櫻玲傻了不知的他們在說什么。“二位公主,一會兒讓茵茵告訴你們吧!”年爺爺說。</p> <p> “年爺爺那我們先走了?!睏髁嵴f。</p> <p> “年爺爺,再見!”</p> <p> “嗯,好。再見!”</p> <h2>第8篇:爺爺?shù)拇竽⒐椒段?/h2> <p>今天,森林里非常熱鬧,原來森林里要舉行第三屆運動會比賽。比賽的地方到處插著五彩的旗子,動物們都等待著好戲的開始,連平常不喜歡出門的笨狗熊也來助威。比賽的項目有很多:跳水、踢球、游泳等等,然而最引人注意的還是龜兔賽跑了。說到這兒,你可能還要問:“龜兔不是賽跑過兩次了,怎么還賽?“原來是這樣,在第二次賽跑時,烏龜用推進器贏了小白兔,可是小白兔不服氣,于是找鳥爺爺出主意,鳥爺爺對他說:“你可以約烏龜再跑一次呀!“小白兔聽了馬上來到烏龜家,再次向他挑戰(zhàn),烏龜二話沒說答應了。</p> <p> 比賽開始了,猴裁判提高聲音說:“現(xiàn)在各就各位,比賽開始!“只聽“砰“的一聲槍響,小白兔像離弦的箭,穿梭似的向前跑去,他望了望還停在綜點的烏龜,開心的笑了笑,心想:這次我這個“飛毛腿“絕對不能在慢悠悠的小烏龜面前丟臉了,他越想越得意,使出全身的力氣評命向前跑。而小烏龜卻不緊不慢的往自己殼上插上一對翅膀,在空中飛起來,比過了天上的神仙。小白兔見此狀況,急忙開上汽車,可怎么也趕不上烏龜,急的滿頭大汗。烏龜在空中邊飛邊說:“兔老弟,加油呀!“兔子聽了這話更不知如何是好,結果烏龜贏了兔子,動物們都像烏龜祝賀。</p> <p> 比賽結束了,小白兔舉著它的蘑菇傘不高興的走回家,忽然一會兒下起了大雨,小白兔趕緊跑回家,忽然看見烏龜和金黃的大獎杯,小白兔趕緊把蘑菇傘給他們大上,烏龜伸出頭問:“那你怎么辦?“小白兔說:“沒事,我回家換上黑制服就行了!“過了一會兒,雨停了,太陽出來了,望著他們開心的樣子,太陽笑了。</p> <p> 小朋友,聽了龜兔賽跑的故事,我們應該像他們學習什么呢?</p> <p></p> <h2>第9篇:爺爺?shù)拇竽⒐椒段?/h2> <p> 1、選擇加點字正確的讀音畫“√”。(4分)</p> <p> (1)爺爺正在睡覺(jué jiào),你不要大聲講話。</p> <p> (2)最近小明的學習成績有了較大的提高,我發(fā)覺(jué jiào)他的自信心也增強了。</p> <p> (3)我發(fā)(fā fà)現(xiàn)奶奶的頭上又增添了幾根白發(fā)(fā fà)。</p> <p> 2、我會拼,也會寫。(16分)</p> <p> 3、我會填。(6分)</p> <p> zuò ( )下 ( )位 ( )事</p> <p> fēng ( )雨 蜜( ) 山( )</p> <p> 4、我會認,也會組詞。(8分)</p> <p> 5、我會選,也會連。(6分)</p> <p> (1)下面的音序排列正確的一組是( )</p> <p> A. K N Q T X Z B. A C E G L I</p> <p> C. B D F K H J D. G M Q W U X</p> <p> (2)選詞填空</p> <p> 整潔 清潔 潔白</p> <p> ①姐姐的房間又( )又明亮。</p> <p> ②天鵝長著一身( )的羽毛。</p> <p> 鮮花 鮮艷 新鮮</p> <p> ③這里的空氣很( )。</p> <p> ④( )的五星紅旗,高高地飄揚在廣場上空。</p> <p> ⑤公園里( )盛開,美麗極了。</p> <p> (3)讀一讀,連一連。(6分)</p> <p> 坐 衣服 彎彎的 露珠 窄 熱</p> <p> 升 飛機 蒙蒙的 小路 冷 寬</p> <p> 聽 廣播 晶瑩的 春風 保護 破壞</p> <p> 穿 國旗 溫暖的 細雨 危險 安全</p> <p> 6.我會照樣子把括號中的詞語加到前邊的句子中去。(8分)</p> <p> 例:大熊貓真可愛。(胖乎乎的) 胖乎乎的大熊貓真可愛。</p> <p> (1)爸爸學習外語。(在燈下 認真地)</p> <p> (2)早晨,太陽升起來了。(火紅的 從東方)</p> <p> (3)河水倒映著樹。(清清的 綠綠的)</p> <p> (4)下課了,我們做游戲。(在操場上 高高興興地)</p> <p> 二、積累•閱讀。(36分)</p> <p> 1、我能把詞語補充完整。(8分)</p> <p> 燈光( )( ) 群山( )( ) 名勝( )( )</p> <p> ( )( )不息 ( )( )秀麗 金碧( )( )</p> <p> 我知道的四字詞語還有:________________、______________。</p> <p> 2、我會補充諺語、古詩。(6分)</p> <p> (1)“籬落疏疏一徑深,__________________?!边@句古詩摘自南宋詩人_____________寫的《宿新市徐公店》。</p> <p> (2)誠心____________________,實意_________________。</p> <p> 3、我能按課文內(nèi)容把詞語寶寶送回家。(3分)</p> <p> 年邁的大娘 灑下的汗滴 晶瑩的露珠</p> <p> 小路說:“昨天,他曾路過這里,背著_________________,踏著路上的荊</p> <p> 棘。瞧,那花瓣上______________就是他________________。</p> <p> 4、我會閱讀短文,回答問題。(14分)</p> <p> 小紅傘</p> <p> 有一天,小白兔挎(kuà)著一只籃子,帶著一把小紅傘出門采蘑菇</p> <p> (mó ɡu)去了。</p> <p> 小白兔來到果園里,看見小刺猬怎么也摘不到樹上的果子,她就用自己的小紅傘幫小刺猬把又鮮又嫩的果子鉤下來,小刺猬連聲道謝。</p> <p> 小白兔走到一片蘑菇地里,那兒的蘑菇鮮嫩誘(yòu)人,她剛想去采,忽然看見一只大灰狼正朝這邊走來,逃跑是來不及了,怎么辦呢?小白兔靈機一動,連忙撐(chēnɡ)開小紅傘,小紅傘成了一個可愛的小蘑菇。大灰狼沒看見小白兔,就走過去了。</p> <p> 小白兔舒了一口氣,心想,總算躲過了危險。她高興地采起了蘑菇。這</p> <p> 時天下起了小雨,小白兔打開小紅傘,高高興興地回家了。</p> <p> (1)這篇文章共有( )個自然段。(1分)</p> <p> (2)請照例子寫詞語。(4分)</p> <p> 又鮮又嫩 又___又____ 又____又____</p> <p> 高高興興(AABB) ____________ _____________</p> <p> (3)在括號里填上合適的詞。(4分)</p> <p> 一( )雨傘 一( )籃子</p> <p> 一( )兔子 一( )蘑菇地</p> <p> (4)小白兔的小紅傘用處可大了:它可以___________________,可以幫小白兔躲過大灰狼,還可以_____________________。(3分)</p> <p> (5)讀了短文,我覺得這是一只______________的小白兔。(2分)</p> </div>
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