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關(guān)鍵詞:霧霾;全民行動(dòng);持久戰(zhàn)
目前,空氣質(zhì)量不斷降低,產(chǎn)生霧霾頻率增高,是很嚴(yán)重的環(huán)境問題。我國許多氣象臺(tái)也會(huì)為大家預(yù)報(bào)霧霾天氣。因其有2大安全隱患:(1)霧霾導(dǎo)致空氣壓強(qiáng)降低,不斷變濕,致使人體不易排汗,長期待在霧霾環(huán)境下,容易誘發(fā)一系列疾病,如:心血管疾病、排氣系統(tǒng)疾病、心臟疾病、腦部疾病、傳染病等。(2)因?yàn)榭梢姸鹊?,?jīng)常產(chǎn)生交通問題,如車輛追尾,危及生活交通運(yùn)行。除此之外,霧霾會(huì)導(dǎo)致空氣質(zhì)量不斷降低,破壞大自然生態(tài)系統(tǒng),極大地影響了交通運(yùn)輸、電力、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等方面。
1霧霾天氣產(chǎn)生的原因
一是氣候,二是人類活動(dòng)。城市人口高度集中,生產(chǎn)生活密度加大,大量排放可吸入顆粒,一旦大自然無法處理過多的可吸入顆粒時(shí),可吸入顆粒會(huì)累積,此時(shí),再結(jié)合氣候條件的影響,便會(huì)產(chǎn)生霧霾。
2霧霾天氣的影響因素分析
以云南和東北的冬天對(duì)人民生活影響為例,可直觀地看出加強(qiáng)環(huán)境保護(hù)對(duì)霧霾的重要性。目前的東北地區(qū),沙漠化嚴(yán)重,大面積草原退化,森林因砍伐過度數(shù)量急減,大氣污染程度高。霧霾天,出行的市民都戴上了口罩,腳步匆忙,不愿在室外多加停留。在城區(qū)主干道,大部分車輛都亮起了急行燈,由于霧霾天氣道路可見度很低,此外,高速路上交通事故也頻頻發(fā)生。大多數(shù)的中小學(xué)和幼兒園都因天氣惡劣放假。一層灰色霧霾籠罩著整個(gè)城市,阻擋了太陽的光線,只能見到方圓500m的人和建筑物。對(duì)比同一時(shí)期的云南,仍然能看到色彩分明的藍(lán)天白云,陽光溫暖可人,正風(fēng)和日麗美如畫。人們生活與夏天無異,由于重視保護(hù)旅游環(huán)境,輕工業(yè)發(fā)展,PM2.5年均值為30,優(yōu)于國家水平,昆明離霧霾還很遠(yuǎn)。希望城市在發(fā)展經(jīng)濟(jì)的同時(shí),要兼顧環(huán)境保護(hù),不能只專注于眼前利益,卻失去了最核心的競爭力。
3應(yīng)對(duì)霧霾天氣的策略分析
3.1“以人為本”的思想理念
保護(hù)環(huán)境,每個(gè)人都應(yīng)該負(fù)起責(zé)任。大力倡導(dǎo)科學(xué)發(fā)展觀,貫徹落實(shí)國家環(huán)境保護(hù)的基本國策,實(shí)施可持續(xù)發(fā)展戰(zhàn)略。首先全民建立環(huán)保意識(shí),從每一件小事開始。如城市盡可能少開私家車,乘坐公共交通工具,少用一次性物品等,盡可能地減少人為產(chǎn)生霧霾的因素。
3.2加強(qiáng)保護(hù)環(huán)境
隨著我國不斷加快的城市化進(jìn)程,不斷增長的城市人口,對(duì)城市自然資源的消耗也加快增長,雖然城市的經(jīng)濟(jì)文化生產(chǎn)也得到了很大的發(fā)展,但是大自然自我循環(huán)的能力有限,過快地城市化發(fā)展會(huì)對(duì)其產(chǎn)生極大的挑戰(zhàn)和沖擊,對(duì)人類的生產(chǎn)生活產(chǎn)生很大的影響。城市生態(tài)建設(shè)與城市經(jīng)濟(jì)競爭力相互作用、相互影響,共同促進(jìn)城市的和諧發(fā)展,不能犧牲有限的資源與自然環(huán)境來推動(dòng)城市化。
3.3可持續(xù)發(fā)展的戰(zhàn)略
如果要犧牲生態(tài)環(huán)境來提高經(jīng)濟(jì)的發(fā)展,就是在走令大自然毀滅的不歸路。所以,要結(jié)合城市化建設(shè)和環(huán)境保護(hù)共同發(fā)展。好的環(huán)境資源才能吸引投資和提高生產(chǎn)力,保護(hù)環(huán)境資源才能可持續(xù)發(fā)展,保持長遠(yuǎn)的競爭力。
3.4加強(qiáng)環(huán)境保護(hù)力度
政府工作是否安排得當(dāng)是治理霧霾行動(dòng)的關(guān)鍵,之所以會(huì)產(chǎn)生霧霾,很大程度上是因?yàn)檎难酃獠粔蜷L遠(yuǎn),不夠重視保護(hù)環(huán)境。所以應(yīng)盡快建立完善的治理工作,如開展實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)空氣質(zhì)量,做好空氣污染預(yù)報(bào)工作和防護(hù),及時(shí)處理和反思嚴(yán)重霧霾情況。
3.5開展PM2.5監(jiān)測(cè)和監(jiān)督
目前,最直接、方便的監(jiān)測(cè)PM2.5含量的工具是PM2.5空氣質(zhì)量檢測(cè)儀,還可直接讀出粉塵質(zhì)量濃度。通過建設(shè)監(jiān)測(cè)網(wǎng)來分析霧霾天氣誘發(fā)附近民眾相關(guān)疾病的影響、身體健康狀況的影響,掌握霧霾天氣高發(fā)期,并制定相關(guān)防護(hù)措施。
4結(jié)語
霧霾天氣在很大程度上影響了人們的生產(chǎn)生活、經(jīng)濟(jì)發(fā)展,霧霾的治理應(yīng)該全社會(huì)共同努力,環(huán)境保護(hù)的工作利及全世界和子孫后代,不僅要發(fā)展全民行動(dòng),在這個(gè)漫長的過程中,政府和環(huán)保機(jī)構(gòu)如何堅(jiān)持進(jìn)行工作是重中之重。重視高GDP的城市建設(shè)方式已是過去式,政府工作的重心更應(yīng)轉(zhuǎn)移到如何做好環(huán)境保護(hù)工作。
作者:楊志宏 單位:云南省景東縣大朝山林業(yè)服務(wù)中心
參考文獻(xiàn):
1張秋蘭,馬回,鄭穎.國外霧霾治理的經(jīng)驗(yàn)及其對(duì)我國的啟示[J].鄱陽湖學(xué)刊,2014(2)
1 材料與方法
1.1 材料
健康清潔雄性SD大鼠40只,8~12周齡,體質(zhì)量250~300 g,由南方醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。實(shí)驗(yàn)前分籠飼養(yǎng)2周,自由攝取食水。鹽酸戊乙奎醚(長托寧,批號(hào)100302,成都力思特制藥股份有限公司),一抗試劑HMGB1、細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(ERK1/2)、應(yīng)激活化蛋白激酶(JNK/SAPK)和p38 MAPK、磷酸化ERK1/2 (p-ERK1/2)、p-JNK1/2、p-p38和二抗試劑辣根過氧化物酶標(biāo)記物(美國Santa Cruz公司),ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒(美國Amersham公司),Oligo(dT)12-18、M-mlV逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq DNA聚合酶(美國Promega公司),RNA提取試劑(德國Boehringer Mannhein公司),髓過氧化物酶(MPO)試劑盒、考馬斯亮藍(lán)(南京建成生物工程研究所究),PCR引物由上海生工生物工程公司合成。
1.2 大鼠VILI模型復(fù)制與分組
40只SD大鼠隨機(jī)(隨機(jī)數(shù)字法)分為5組(n=8),分別為對(duì)照組、機(jī)械通氣組、機(jī)械通氣+PHC 1.0 mg/kg、機(jī)械通氣+PHC 0.5 mg/kg和機(jī)械通氣+PHC 0.1 mg/kg組。麻醉大鼠,起效后行備皮、消毒,進(jìn)行氣管切開,將16G靜脈穿刺留置導(dǎo)管插入氣管以作氣管導(dǎo)管用,接小動(dòng)物呼吸機(jī)(型號(hào)683,美國Harvard Apparatus公司)行機(jī)械通氣。機(jī)械通氣參數(shù)設(shè)置為潮氣量Vt=30 ml/kg、PEEP=0 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)、吸呼比1∶1,調(diào)節(jié)呼吸頻率(RR)在40~70之間,使PETCO2維持在35~45 mm Hg,通氣時(shí)間為4 h。右頸總動(dòng)脈置管測(cè)定動(dòng)脈壓,左股靜脈置管用于輸液和給藥。監(jiān)測(cè)動(dòng)物血壓、心率和心電圖在正常范圍內(nèi),用氣體檢測(cè)儀(美國Datex公司)監(jiān)測(cè)PETCO2。對(duì)照組動(dòng)物除不行機(jī)械通氣外,其余操作同機(jī)械通氣組。到預(yù)定時(shí)間后,放血處死。
1.3 觀察指標(biāo)與測(cè)定方法
1.3.1 肺組織病理學(xué)改變 右上葉肺組織用10 %甲醛固定,經(jīng)石蠟包埋切片、蘇木精-伊紅染色后,光鏡觀察病理學(xué)改變。
1.3.2 肺組織濕/干質(zhì)量比值(W/D) 取大鼠右肺中葉組織,稱濕質(zhì)量(W)后于干燥箱中80 ℃烤至恒質(zhì)量并稱干質(zhì)量(D),計(jì)算肺W/D比值。
1.3.3 支氣管肺泡灌洗液(BALF)中WBC計(jì)數(shù)和總蛋白含量測(cè)定 左肺行肺灌洗,回收后800 r/min離心10 min,沉淀物用PBS稀釋后行瑞氏染色,光鏡下行白細(xì)胞計(jì)數(shù)。BALF中總蛋白的測(cè)定采用考馬斯亮藍(lán)染色法。
1.3.4 肺組織MPO活性測(cè)定 肺組織MPO活性測(cè)定采用MPO試劑盒。
1.3.5 HMGB1 mRNA表達(dá)的測(cè)定 按Trizol一步法提取總RNA,逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA。取逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物進(jìn)行PCR反應(yīng)(94 ℃變性1 min,54 ℃復(fù)性1 min,72 ℃延伸1 min,30個(gè)循環(huán))。HMGB1的擴(kuò)增引物為:5’-ATG GGC AAA GGA GAT CCT A -3’和5’-ATT CAT CAT CAT CAT TCT TCT-3’;內(nèi)對(duì)照GAPDH的擴(kuò)增引物為:5’-CCC ATC ACC ATC TTC CAG GA-3’和5’-TGC TTC ACC ACC TTC TTG AT-3’。2 %瓊脂糖凝膠電泳,采用凝膠成像系統(tǒng)(美國Kodak公司)采集圖像并進(jìn)行半定量分析,以HMGB1/GAPDH灰度比值表示各組HMGB1 mRNA的水平,各組實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。
1.3.6 HMGB1蛋白表達(dá)和MAPK活性的測(cè)定 肺組織加入細(xì)胞裂解液后冰上勻漿,蛋白質(zhì)定量采用Bradford法,樣品加入2×SDS加樣緩沖液,行SDS-PAGE凝膠分離,蛋白條帶半干電轉(zhuǎn)移到PVDF膜上。室溫下用TTBS(100 mmol/L Tris-HCl,0.9% NaCl,0.1% 吐溫-20)阻斷1 h,先后分別用HMGB1、ERK1/2、p38、JNK1/2、p-ERK1/2、p-p38、p-JNK1/2的一抗和辣根過氧化物酶標(biāo)記的二抗孵育,最后用增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光法(ECL)檢測(cè)陽性信號(hào)。采用凝膠成像分析系統(tǒng)進(jìn)行半定量分析,以灰度比值表示各組HMGB1蛋白和MAPK磷酸化水平。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
所得數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,應(yīng)用SPSS 13.0軟件處理。采用單因素方差分析進(jìn)行不同組別間的比較,方差齊者組間比較用LSD-t檢驗(yàn),方差不齊者用Tamhane’s T2檢驗(yàn),以P
2 結(jié)果
2.1 肺組織病理學(xué)改變
對(duì)照組大鼠肺組織結(jié)構(gòu)完整、清晰,未見中性粒細(xì)胞滲出;機(jī)械通氣組肺泡結(jié)構(gòu)破壞明顯、肺泡腔內(nèi)大量炎性細(xì)胞浸潤;與機(jī)械通氣組比較,1.0 mg/kg PHC組肺組織病理改變明顯減輕,肺泡結(jié)構(gòu)較完整,肺泡腔內(nèi)少量炎性細(xì)胞浸潤,而0.5 mg/kg和0.1 mg/kg PHC組改變不顯著,仍可見較為明顯的炎性病理改變,見圖1。
2.2 總蛋白、W/D、白細(xì)胞計(jì)數(shù)和MPO
與對(duì)照組比較,機(jī)械通氣組肺組織W/D、MPO和BALF中總蛋白、白細(xì)胞計(jì)數(shù)等均顯著增加(P
2.3 肺組織HMGB1蛋白表達(dá)的變化
與對(duì)照組比較,機(jī)械通氣組HMGB1蛋白的表達(dá)量顯著增加(P
2.4 肺組織HMGB1 mRNA表達(dá)的變化
圖3顯示,與對(duì)照組比較,機(jī)械通氣組HMGB1 mRNA的表達(dá)量顯著增加(P
2.5 肺組織MAPK活性的變化
由于1.0 mg/kg PHC可明顯抑制HMGB1蛋白和mRNA的表達(dá),筆者選擇該劑量的PHC觀察對(duì)MAPK激酶活性的影響。對(duì)照組未見ERK1/2、JNK1/2和p38 MAPK的激活,機(jī)械通氣組各激酶均明顯激活,表現(xiàn)為ERK1/2、JNK1/2和p38 MAPK的磷酸化水平顯著增加(P
3 討論
VILI是機(jī)械通氣治療常見而嚴(yán)重的并發(fā)癥,作為一種炎癥刺激,機(jī)械通氣時(shí)產(chǎn)生的牽張應(yīng)力通過激活多種效應(yīng)細(xì)胞釋放大量炎癥介質(zhì),引起肺損傷[6-7]。本研究中,與對(duì)照組相比,大潮氣量通氣4 h后大鼠肺組織病理損傷嚴(yán)重,反映肺滲出增多和肺水腫程度的指標(biāo)肺W/D比、總蛋白含量以及反映肺組織白細(xì)胞浸潤的MPO活性和白細(xì)胞計(jì)數(shù)均明顯增加,提示大鼠VILI模型復(fù)制成功。
PHC是新型選擇性莨菪類藥物,抗膽堿作用強(qiáng)而全面、不良反應(yīng)少,在危重患者救治中有諸多優(yōu)勢(shì),如改善微循環(huán)、調(diào)節(jié)自主神經(jīng)功能、調(diào)整有效循環(huán)血量、提高細(xì)胞對(duì)缺血缺氧的耐受能力等[8]。目前,除用于有機(jī)磷農(nóng)藥中毒外,PHC的研究主要集中在感染性休克和內(nèi)毒素性肺損傷的救治等方面,但國內(nèi)外尚未見用于VILI防治的報(bào)道。本研究結(jié)果顯示,PHC能降低肺組織水腫程度,減輕肺組織病理損傷,且顯著改善了肺組織MPO活性、白細(xì)胞數(shù)量、肺W/D比和BALF中總蛋白含量等指標(biāo),說明PHC有效抑制了機(jī)械通氣引起的肺通透性增強(qiáng)、肺水腫形成和白細(xì)胞浸潤,對(duì)VILI具有一定的保護(hù)作用。
HMGB1是高遷移率族蛋白超家族成員,是廣泛存在于真核細(xì)胞核中最重要的非組蛋白之一,其相對(duì)分子質(zhì)量小,含量豐富,序列高度保守[9]。近年研究發(fā)現(xiàn),HMGB1作為“晚期”炎癥介質(zhì)參與膿毒癥和急性肺損傷的發(fā)病過程[10-11]。脂多糖和炎性因子可促進(jìn)HMGB1的釋放,釋放入血的HMGB1則進(jìn)一步誘生炎性介質(zhì)和HMGB1自身的釋放,引發(fā)炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng),提示HMGB1在炎癥網(wǎng)絡(luò)中可能是一個(gè)中心環(huán)節(jié)。筆者前期通過建立體外肺泡巨噬細(xì)胞牽張模型,發(fā)現(xiàn)機(jī)械牽張可以顯著增加HMGB1蛋白的表達(dá)[12]。本研究應(yīng)用RT-PCR和Western blot技術(shù),進(jìn)一步證實(shí)大潮氣量機(jī)械通氣(Vt=30 ml/kg)可以在基因和蛋白水平誘導(dǎo)大鼠肺組織HMGB1的表達(dá)。有研究報(bào)道PHC可抑制腫瘤壞死因子-α(TNF-α )等炎癥因子的表達(dá)與釋放,但其對(duì)HMGB1的作用尚未闡明[13]。本研究首次觀察到PHC可以抑制機(jī)械牽張誘導(dǎo)的HMGB1表達(dá)增加,提示PHC的肺保護(hù)機(jī)制可能與其減少HMGB1的表達(dá)有關(guān)。
己證實(shí)MAPK信號(hào)通路在介導(dǎo)細(xì)胞外應(yīng)激引起的細(xì)胞反應(yīng)中起重要作用[14]。MAPK家族主要包括ERK1/2、JNK/SAPK和p38 MAPK。不同的MAPK級(jí)聯(lián)通路之間存在著交叉和整合作用,構(gòu)成復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng),ERK、JNK/SAPK和P38 MAPK三者的動(dòng)態(tài)平衡決定了細(xì)胞的存活或凋亡。本研究顯示,機(jī)械通氣時(shí)ERK1/2、JNK1/2和p38 MAPK均被激活,而應(yīng)用PHC可不同程度地抑制ERK1/2、JNK1/2和p38 MAPK的激活。提示PHC對(duì)VILI時(shí)HMGB1表達(dá)的拮抗效應(yīng)可能與其抑制ERK1/2、JNK/SAPK和p38 MAPK通路的活化有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)中1.0 mg/kg PHC可抑制HMGB1表達(dá)及MAPK信號(hào)通路的激活,提示較大劑量PHC可能通過抑制MAPK信號(hào)通路而減少HMGB1表達(dá),進(jìn)而減輕中性粒細(xì)胞的浸潤,發(fā)揮抗炎作用。綜上所述,本實(shí)驗(yàn)證實(shí)PHC可有效減輕VILI,對(duì)肺組織具有一定的保護(hù)作用,這種效應(yīng)可能與其抑制MAPK通路激活并下調(diào)HMGB1的表達(dá)有關(guān)。
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(收稿日期:2012-11-19)
DOI:10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2013.04.013
基金項(xiàng)目:國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(81272136);廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2010B031600011);廣州市科技計(jì)劃重點(diǎn)項(xiàng)目(2012J4100034);廣州市醫(yī)藥衛(wèi)生科技重點(diǎn)項(xiàng)目(20121A021001)
作者單位:510180 廣州,廣州市第一人民醫(yī)院麻醉科
【關(guān)鍵詞】 圖書館;非物質(zhì)文化遺產(chǎn);保護(hù)
總理在我國第二個(gè)文化遺產(chǎn)日參觀中國非物質(zhì)文化遺產(chǎn)專題展時(shí)所說:“非物質(zhì)文化遺產(chǎn)也有物質(zhì)性,要把非物質(zhì)文化遺產(chǎn)的非物質(zhì)性和物質(zhì)性結(jié)合在一起。物質(zhì)性就是文象,非物質(zhì)性就是文脈。人之文明,無文象不生,無文脈不傳。無文象無體,無文脈無魂。文化文化,文而化之,化而文之,兩者要很好地結(jié)合起來?!痹诼?lián)合國教科文組織認(rèn)為的圖書館四項(xiàng)社會(huì)職能中,保存人類文化遺產(chǎn)位居第一。而其《公共圖書館宣言(1994)》所賦予的公共圖書館若干主要使命中,也包括:提高對(duì)文化遺產(chǎn)的認(rèn)識(shí),促進(jìn)對(duì)藝術(shù)鑒賞、科學(xué)成就和創(chuàng)新的了解;提供各種表演藝術(shù)的文化表現(xiàn)途徑;促進(jìn)不同文化之間的對(duì)話和文化多樣性的發(fā)展;支持口頭傳統(tǒng)文化。這些表述都確認(rèn)了現(xiàn)代圖書館保護(hù)非物質(zhì)文化遺產(chǎn)的職能和地位。
《中國非物質(zhì)文化遺產(chǎn)普查手冊(cè)》一書中關(guān)于非物質(zhì)文化遺產(chǎn)保護(hù)的內(nèi)容主要有:現(xiàn)狀調(diào)查與全面普查、實(shí)行分級(jí)保護(hù)制度、利用現(xiàn)代科技手段建立檔案和數(shù)據(jù)庫、建立傳承人認(rèn)定與培訓(xùn)機(jī)制、合理開發(fā)傳統(tǒng)文化資源、普及保護(hù)知識(shí)、建立保護(hù)工作機(jī)制,等等。圖書館在非物質(zhì)文化遺產(chǎn)保護(hù)的作用主要有幾次幾個(gè)方面:
一、 圖書館地方文獻(xiàn)在非物質(zhì)文化遺產(chǎn)普查和申報(bào)中的作用
地方文獻(xiàn)既是對(duì)獨(dú)具特色的地域文化的記錄,也是該地區(qū)社會(huì)歷史沿革的歷史見證。我國近代著名圖書館學(xué)家杜定友先生曾說:“地方文獻(xiàn)是地方文化之寶藏?!狈采婕暗胤轿幕乃形墨I(xiàn)載體、形式都應(yīng)該是圖書館地方文獻(xiàn)的收集內(nèi)容。人們?cè)谏鐣?huì)活動(dòng)中積累起來的經(jīng)驗(yàn)和技藝如民間工藝、傳統(tǒng)習(xí)俗等,在很大程度上有賴于口傳心授的傳統(tǒng)文化,這些在圖書館的地方文獻(xiàn)中大都有詳實(shí)的記載。因此,從某種意義上來說,非遺實(shí)際上是地方文獻(xiàn)的一種表現(xiàn)形式。在對(duì)非物質(zhì)文化遺產(chǎn)的調(diào)查與申報(bào)過程中,弄清楚非物質(zhì)文化遺產(chǎn)的傳承譜系必須以詳實(shí)的地方文獻(xiàn)作為依據(jù),討論遺產(chǎn)的歷史淵源、文化價(jià)值理應(yīng)有圖書館人的共同參與,探討和論證。有了圖書館在地方文獻(xiàn)實(shí)證方面的大力支持,非物質(zhì)文化遺產(chǎn)的普查與申報(bào)工作才能得以順利進(jìn)行。因此,圖書館在加強(qiáng)和重視地方文獻(xiàn)工作的基礎(chǔ)上,積極投身到非物質(zhì)文化遺產(chǎn)的搶救和保護(hù)的工作中,同時(shí)也能據(jù)此搜集一批載體形式多樣化、內(nèi)容更加豐富、研究價(jià)值更高的地方文獻(xiàn),以促進(jìn)圖書館地方文獻(xiàn)工作的更快更好的發(fā)展。
二、圖書館的信息技術(shù)在建立非物質(zhì)文化遺產(chǎn)數(shù)據(jù)庫中的作用
圖書館擁有加工和分析各種信息資源的專門人才、較先進(jìn)的現(xiàn)代化設(shè)備與豐富的信息資源保護(hù)經(jīng)驗(yàn),在資料搶救工作和后續(xù)的資料整理、數(shù)字化以及保存和保護(hù)等方面,有其他保護(hù)單位所不具備的優(yōu)勢(shì)。因此,圖書館在非物質(zhì)文化遺產(chǎn)保護(hù)工作中最主要的工作之一便是做好非物質(zhì)文化遺產(chǎn)信息資料的保護(hù)工作。我們知道非物質(zhì)文化遺產(chǎn)是一種難以記錄的 “無形的”文化遺產(chǎn),它的存在形式的特殊性決定了其難以長期保存的這一缺陷。要達(dá)到更好的長久的保存效果,就要求圖書館發(fā)揮信息保護(hù)技術(shù)的特長,致力于將非物質(zhì)文化遺產(chǎn)載體形式物質(zhì)化、信息內(nèi)容體系化。比如將口頭傳說等非物質(zhì)文化遺產(chǎn)采取錄音的方式作為語音資料記錄并保存下來;將傳統(tǒng)表演藝術(shù)等非物質(zhì)文化遺產(chǎn)采用走訪調(diào)查的方法,用攝像、口述訪談等技術(shù)手段將原始資料全面系統(tǒng)的記錄下來。然后通過整理、加工、存儲(chǔ)等一系列技術(shù)處理,形成非物質(zhì)文化遺產(chǎn)資料數(shù)據(jù)庫,使人們可以方便立體地從文字、圖片和錄音錄像中看到那些已經(jīng)消失了的或者存在消失危險(xiǎn)的非物質(zhì)文化遺產(chǎn)。全國文化信息資源共享工程的其中一項(xiàng)工作就是將一些瀕臨滅絕的文化藝術(shù)珍品以數(shù)字化的方式永久保存,并得以廣泛傳播。而通過互聯(lián)網(wǎng)技術(shù)建設(shè)非物質(zhì)文化遺產(chǎn)網(wǎng)站則更加有助于非物質(zhì)文化遺產(chǎn)的宣傳保護(hù)和深入研究。
三、圖書館員在非物質(zhì)文化遺產(chǎn)的理論研究中的作用
隨著社會(huì)的發(fā)展,非物質(zhì)文化遺產(chǎn)的傳承正發(fā)生著巨大的變化,許多珍貴的遺產(chǎn)正在面臨著快速消失的危險(xiǎn),這就需要研究者通過深入研究和大量宣傳,使人們對(duì)非遺的文化價(jià)值和傳承變化情況有全面的了解,給非物質(zhì)文化遺產(chǎn)的保護(hù)和傳承工作提供大力支持?!秶鴦?wù)院辦公廳關(guān)于加強(qiáng)我國非物質(zhì)文化遺產(chǎn)保護(hù)工作的意見》中要求:“加強(qiáng)非物質(zhì)文化遺產(chǎn)的研究、認(rèn)定、保存和傳播?!薄俺浞职l(fā)揮各級(jí)圖書館、文化館、博物館、科技館等公共文化機(jī)構(gòu)的作用,有條件的地方可設(shè)立專題博物館或展示中心?!毕鄬?duì)于文化系統(tǒng)的其它部門和單位而言,圖書館在文化遺產(chǎn)的學(xué)術(shù)研究中有較大的優(yōu)勢(shì),能在非物質(zhì)文化遺產(chǎn)的保護(hù)中發(fā)揮更大的作用。圖書館的地方文獻(xiàn)部門大都擁有專門從事地方文獻(xiàn)研究的專業(yè)人員,可以經(jīng)常組織相關(guān)專家學(xué)者對(duì)非物質(zhì)文化遺產(chǎn)的理論和實(shí)踐問題進(jìn)行研究,可以對(duì)相關(guān)的非物質(zhì)文化遺產(chǎn)保護(hù)起指導(dǎo)作用,使保護(hù)工作能統(tǒng)籌安排、科學(xué)有序地進(jìn)行。比如鄂爾多斯市圖書館,工作人員絕大多數(shù)都是對(duì)本地區(qū)民間文化較為熟悉的館員,尤其是地方文獻(xiàn)部門,收藏有大量的地方特色文獻(xiàn),完全有條件組織其它有關(guān)機(jī)構(gòu)進(jìn)行合作研究或者協(xié)助有關(guān)部門對(duì)本地區(qū)的非物質(zhì)文化遺產(chǎn)進(jìn)行確認(rèn)、記錄、整理。這樣做既壯大了非物質(zhì)文化遺產(chǎn)的研究力量,同時(shí)還可以提高了圖書館員的學(xué)術(shù)研究能力。
四、圖書館在非物質(zhì)文化遺產(chǎn)知識(shí)的普及推廣中的作用
《國務(wù)院辦公廳關(guān)于加強(qiáng)我國非物質(zhì)文化遺產(chǎn)保護(hù)工作的意見》提出:“要充分發(fā)揮非物質(zhì)文化遺產(chǎn)對(duì)廣大未成年人進(jìn)行傳統(tǒng)文化教育和愛國主義教育的重要作用。各級(jí)圖書
館、文化館、博物館、科技館等公共文化機(jī)構(gòu)要積極開展對(duì)非物質(zhì)文化遺產(chǎn)的傳播和展示。”非物質(zhì)文化遺產(chǎn)的保存是其得到有效利用的前提和保障,有效利用是非遺保存的主要目的之一。非物質(zhì)文化遺產(chǎn)要想得到傳承發(fā)展,就必須得到廣泛的社會(huì)認(rèn)知,需要得到廣泛的社會(huì)認(rèn)知也就必須在社會(huì)范圍內(nèi)被有效利用。在非物質(zhì)文化遺產(chǎn)的有效利用問題上,圖書館的作用是不可忽視的。一項(xiàng)文化遺產(chǎn)需要被社會(huì)有效利用,首先要向社會(huì)廣泛推廣傳播。圖書館作為一個(gè)公共文化機(jī)構(gòu),舉辦展覽展示,開展社會(huì)教育是其本身所固有的教育職能。而圖書館的展覽展示和社會(huì)教育恰恰又可以成為向全社會(huì)開展非遺主題教育的重要手段。這種服務(wù)形式不僅可以借助圖書館的公眾影響力來促進(jìn)非物質(zhì)文化遺產(chǎn)的弘揚(yáng)與傳播,而且反過來也可以為圖書館文化底蘊(yùn)的提升起到積極的促進(jìn)作用。非物質(zhì)文化遺產(chǎn)保護(hù)的豐富內(nèi)涵決定了其工作體系的開放性,只有進(jìn)行各種橫向、縱向的合作,取長補(bǔ)短,才能在共建共知共享中使工作體系獲得提升。因此,各地在制定非物質(zhì)文化遺產(chǎn)保護(hù)計(jì)劃,成立保護(hù)領(lǐng)導(dǎo)組織機(jī)構(gòu)時(shí),應(yīng)有圖書館員的參與,使非物質(zhì)文化遺產(chǎn)保護(hù)體系能夠更為科學(xué)、完整。
圖書館自誕生之日起就把文獻(xiàn)資源作為自己搜集、整理、開發(fā)乃至服務(wù)讀者的對(duì)象。不難想象,歷史上倘若沒有圖書館這一公共文化機(jī)構(gòu),不知有多少珍貴文獻(xiàn)資料會(huì)失傳于世??梢哉f,人類文化遺產(chǎn)的許多重要成果正是經(jīng)過圖書館的不懈努力而保存下來。圖書館在非物質(zhì)文化遺產(chǎn)保護(hù)的工作體系中理應(yīng)占有重要的地位,理應(yīng)成為非物質(zhì)文化遺產(chǎn)保護(hù)工作的一支重要力量。
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【摘要】 目的探討五味子水提液對(duì)D-半乳糖所致衰老神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用。方法將原代培養(yǎng)的大鼠乳鼠大腦神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)7 d后,分為正常對(duì)照組、模型組(D-gal組);實(shí)驗(yàn)組(8 g/L D-gal+750 μg/ml五味子水提液,8 g/L D-gal + 500 μg/ml五味子水提液,8 g/L D-gal + 250 μg/ml五味子水提液);藥物對(duì)照組(8 g/L D-gal + 500 μg/ml人參皂苷),作用24 h后,電鏡觀察各組細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化,細(xì)胞化學(xué)染色觀察各組培養(yǎng)細(xì)胞內(nèi)Nissl體和脂褐素(LPF)、琥珀酸脫氫酶(SDH)、酸性磷酸酶(ACP)的活性變化。結(jié)果五味子水提液能恢復(fù)D-半乳糖所致?lián)p傷的乳鼠大腦培養(yǎng)神經(jīng)的超微結(jié)構(gòu),抑制Nissl體的減少和LPF的沉積,提高神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)SDH活性及降低ACP活性。結(jié)論五味子水提液對(duì)D-半乳糖所致衰老神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】 五味子;D-半乳糖;神經(jīng)細(xì)胞
五味子為木蘭科植物五味子Schisandra chinensis(TurcZ)Bail 的干燥成熟果實(shí),其果實(shí)入藥,味酸性溫,入肺、腎經(jīng),有斂肺、滋腎、止汗、生津、止瀉、澀精之功效[1]。中醫(yī)臨床常用于神經(jīng)衰弱等證,具有興奮中樞神經(jīng)系統(tǒng)、興奮脊髓、提高大腦皮層的調(diào)節(jié)作用[2~4],本實(shí)驗(yàn)探討了五味子水提液對(duì)大腦神經(jīng)細(xì)胞的抗衰老作用,為五味子的進(jìn)一步開發(fā)應(yīng)用提供了實(shí)驗(yàn)和理論依據(jù)。
1材料與儀器
1.1動(dòng)物SD大鼠乳鼠(8 d齡)雙側(cè)大腦半球,動(dòng)物由延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科提供。
1.2藥物五味子水提液(由延邊大學(xué)藥學(xué)院提取制成),用RPMI-1640培養(yǎng)基配成750,500,250 μg /ml;人參皂苷(吉林省靖宇縣黃封參藥業(yè)公司產(chǎn)品),用RPMI-1640培養(yǎng)基配成500 μg/ml。RPMI-1640培養(yǎng)基(GIBAO產(chǎn)品);胰蛋白酶(美國DIFCO產(chǎn)品);D-半乳糖(上海試劑二廠產(chǎn)品)。
1.3儀器OLYMPUS倒置顯微鏡購自日本;JEM-1200EX型透射電子顯微鏡購自日本;PD-2000真彩色病理細(xì)胞圖像分析儀購自北京天地百年科技公司。
2方法
2.1原代單層神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)與分組無菌條件下取SD大鼠乳鼠(8 d齡)雙側(cè)大腦半球,用含20%小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)基制成細(xì)胞懸液,以1×106/ml的密度接種。放置37℃ CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),培養(yǎng)至第7天,選生長良好的細(xì)胞隨機(jī)分為6組。正常組、模型組(加入8g/L D-gal)、實(shí)驗(yàn)組(8 g/L D-gal+750 五味子水提液,8 g/L D-gal+500 μg/ml五味子水提液,8 g/L D-gal+250 μg/ml五味子水提液);藥物對(duì)照組(8 g/L D-gal+500 μg/ml人參皂苷);作用24 h后,進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察。
2.2透射電鏡觀察取生長良好的細(xì)胞,用0.25%胰蛋白酶消化,以2 000 r/min離心15 min,收集細(xì)胞用3%戊二醛和1%鋨酸雙重固定,梯度丙酮脫水,Epon815、812混合樹酯包埋,超薄切片,電子染色,JEM-1200EX型透射電子顯微鏡觀察,拍照。
2.3細(xì)胞化學(xué)染色[5,6]Nissl體染色:采用甲苯胺藍(lán)染色法;LPF:采用Glenner氏聯(lián)合反應(yīng)法;SDH:采用亞鐵氰化鉀法;ACP:采用Gomori法進(jìn)行染色。
3結(jié)果
3.1透射電鏡觀察模型組細(xì)胞膜被破壞,核膜膜褶增多,各種細(xì)胞器均有減少:粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)脫顆粒;高爾基體結(jié)構(gòu)被破壞;線粒體膨脹呈空泡狀,嵴斷裂,胞質(zhì)內(nèi)可見大量脂滴沉積;實(shí)驗(yàn)組和藥物對(duì)照組的各種細(xì)胞器超微形態(tài)結(jié)構(gòu)均得到明顯恢復(fù)。結(jié)果見圖1~2。
3.2細(xì)胞化學(xué)染色
3.2.1Nissl體染色模型組胞質(zhì)內(nèi)藍(lán)紫色Nissl體顆粒減少。藥物組和藥物對(duì)照組的Nissl體與模型組比較,均有明顯變化。結(jié)果見圖3~4。
3.2.2LPF染色模型組LPF明顯增多,藥物組和藥物對(duì)照組的LPF含量均明顯減少。結(jié)果見圖5~6。圖1模型組圖2實(shí)驗(yàn)組(750 μg/ml)圖3模型組(400×)圖4實(shí)驗(yàn)組(750 μg/ml,400×)圖5模型組(400×)圖6實(shí)驗(yàn)組(750 μg/ml,400×)
3.2.3SDH染色模型組SDH酶活性呈弱陽性,二甲臜沉淀顆粒染色淺,顆粒減少。實(shí)驗(yàn)組和藥物對(duì)照組的SDH酶活性均呈強(qiáng)陽性,染色深。結(jié)果見圖7~8。圖7模型組(400×)圖8實(shí)驗(yàn)組(750 μg/ml,400×)
3.2.4ACP染色模型組ACP活性呈強(qiáng)陽性、酶顆粒常聚集成團(tuán)塊狀,染色深。實(shí)驗(yàn)組和藥物對(duì)照組的ACP活性均呈弱陽性,酶顆粒染色較淺。結(jié)果見圖9~10。
4討論
現(xiàn)代自由基醫(yī)學(xué)研究表明,生物體的衰老與自由基代謝失衡有關(guān)。機(jī)體通過酶系統(tǒng)或非酶系統(tǒng)產(chǎn)生氧自由基,后者能攻擊生物膜中的多不飽和脂肪酸,引起脂質(zhì)過氧化作用,并因此形成脂質(zhì)過氧化物。圖9模型組(400×)圖10實(shí)驗(yàn)組(750 μg/ml,400×)本實(shí)驗(yàn)中D-gal作用于培養(yǎng)神經(jīng)細(xì)胞后,在脂質(zhì)過氧化過程中產(chǎn)生多種活潑自由基,攻擊細(xì)胞中的蛋白質(zhì)、酶和其它成分,使其發(fā)生自由基反應(yīng)而抑制蛋白質(zhì)的功能,降低酶的活性。結(jié)果導(dǎo)致細(xì)胞膜正常結(jié)構(gòu)和完整性的破壞,胞質(zhì)內(nèi)各種細(xì)胞器受損。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,實(shí)驗(yàn)組神經(jīng)細(xì)胞均生長良好,細(xì)胞存活率明顯高于D-gal組;細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)損傷輕;細(xì)胞內(nèi)Nissl體含量高,LPF沉積少;SDH活性呈強(qiáng)陽性,ACPase活性呈弱陽性。提示五味子可較好地阻礙自由基對(duì)細(xì)胞膜性結(jié)構(gòu)的作用,抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng)而抑制LPF的沉積;可較好地穩(wěn)定細(xì)胞的膜性結(jié)構(gòu),降低溶酶體膜的通透性,阻止ACP水解酶釋放,將細(xì)胞內(nèi)環(huán)境趨于穩(wěn)定,減少神經(jīng)元的破壞損傷;可較好地保護(hù)線粒體的結(jié)構(gòu)和功能,增強(qiáng)SDH的活性而增加細(xì)胞的能量供應(yīng),提高細(xì)胞的活力。本實(shí)驗(yàn)為研究五味子的抗衰老作用機(jī)理提供了實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
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關(guān)鍵詞:非物質(zhì)文化遺產(chǎn) 地理標(biāo)志 知識(shí)產(chǎn)權(quán) 作用
一、非物質(zhì)文化遺產(chǎn)保護(hù):傳統(tǒng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)難以承受之重
(一)著作權(quán)保護(hù)
非物質(zhì)文化遺產(chǎn)中的一部分,如“口頭傳說和表述”、“表演藝術(shù)”等,與著作權(quán)客體具有共通性,因此運(yùn)用著作權(quán)法保護(hù)這部分非物質(zhì)文化遺產(chǎn)具有一定的合理性。然而其缺陷也是顯而易見的,具體表現(xiàn)在:
1、重保護(hù)輕開發(fā)。兼具人身屬性和財(cái)產(chǎn)屬性是著作權(quán)有別于工業(yè)產(chǎn)權(quán)的典型特征,在權(quán)利內(nèi)容上表現(xiàn)為較強(qiáng)的人身依附性;在權(quán)利行使上則側(cè)重強(qiáng)調(diào)諸如署名權(quán)、修改權(quán)及保護(hù)作品完整權(quán)等精神利益的保護(hù)。顯然,這種保護(hù)模式在實(shí)際操作中難以切合國家知識(shí)產(chǎn)權(quán)戰(zhàn)略中關(guān)于“開發(fā)文化資源,實(shí)現(xiàn)經(jīng)濟(jì)效益”的理念。
2、保護(hù)對(duì)象的有限性。適于著作權(quán)法保護(hù)的對(duì)象必須是那些能夠承載于固定的載體之上為我們所感知的作品形式,例如根據(jù)民間音樂、民間文學(xué)、民間美術(shù)等演繹而成的作品。然而,對(duì)于諸如安塞腰鼓、寶雞社火這些陜西傳統(tǒng)的活表演形式則無能為力。
(二)專利權(quán)保護(hù)
在非物質(zhì)文化遺產(chǎn)的大家族中,一些成員基于原材料的產(chǎn)地限制而具有得天獨(dú)厚的優(yōu)勢(shì),另有一些成員則憑借別具一格的制作技藝而大放異彩。對(duì)于這些非物質(zhì)文化遺產(chǎn),可以適用專利或商業(yè)秘密等方式。
然而,由于非物質(zhì)文化遺產(chǎn)往往是某一族群在世世代代的生產(chǎn)、生活過程中不斷積淀的結(jié)果,且仍將繼續(xù)傳承、繁衍下去,故無論是采用著作權(quán)還是專利權(quán)保護(hù),均無法解決非物質(zhì)文化遺產(chǎn)的保護(hù)期限問題。此外,若某一產(chǎn)品的制作技藝被授予專利權(quán),這意味著除在法定期限內(nèi)享有壟斷專有權(quán)外,權(quán)利人須承擔(dān)的一項(xiàng)義務(wù)即是按期繳納專利年費(fèi),加之前期申請(qǐng)、審查以及獲得權(quán)利所付出的成本,顯然是不經(jīng)濟(jì)的。
(三)普通商標(biāo)權(quán)保護(hù)
普通商標(biāo)所表征的商品或服務(wù)往往旨在實(shí)現(xiàn)商業(yè)化和產(chǎn)業(yè)化,這與目前非物質(zhì)文化遺產(chǎn)保護(hù)中關(guān)于“開發(fā)文化資源,實(shí)現(xiàn)經(jīng)濟(jì)效益”的理念庶幾相同。然而,普通商標(biāo)權(quán)的主體具有排他性,即商標(biāo)權(quán)人有權(quán)禁止他人在未經(jīng)其許可的情況下對(duì)該商標(biāo)進(jìn)行商業(yè)性使用,而非物質(zhì)文化遺產(chǎn)往往由一個(gè)甚至若干個(gè)族群經(jīng)歷世代繁衍共同創(chuàng)作而成,體現(xiàn)整個(gè)族群的共同意志,每個(gè)個(gè)體在創(chuàng)作的過程中所做出的貢獻(xiàn)都不可或缺,因而其權(quán)利主體具有群體性的特點(diǎn)。兩者在主體上的不和諧音注定了普通商標(biāo)難當(dāng)保護(hù)非物質(zhì)文化遺產(chǎn)的重任。
二、契合:地理標(biāo)志保護(hù)非物質(zhì)文化遺產(chǎn)的妥適性
(一)自然因素與人文因素的結(jié)合
非物質(zhì)文化遺產(chǎn)往往由特定族群在其生活的地域范圍內(nèi)世代繁衍而成,其所體現(xiàn)的風(fēng)格無不深深地打上了所處地域的烙印。地理標(biāo)志目前在我國《商標(biāo)法》中主要受到集體商標(biāo)和證明商標(biāo)的保護(hù),它一方面用于表征商品或服務(wù)的產(chǎn)地,同時(shí)向世人昭示來自該地區(qū)的特定商品或服務(wù)與同類其他商品或服務(wù)相比,有著得天獨(dú)厚的優(yōu)勢(shì),而這一優(yōu)勢(shì)恰恰取決于該地特有的自然因素和人文因素。
因此,具有強(qiáng)烈地域色彩的非物質(zhì)文化遺產(chǎn)一旦與地理標(biāo)志親密接觸,必然會(huì)喚醒潛在的巨大商機(jī)。由于地理標(biāo)志在原材料、生產(chǎn)地域、生產(chǎn)工藝等方面有特定的量化標(biāo)準(zhǔn),這就客觀上防止了粗制濫造的出現(xiàn),反過來又進(jìn)一步提升非物質(zhì)文化遺產(chǎn)的知名度和美譽(yù)度。
(二)主體的群體性
非物質(zhì)文化遺產(chǎn)作為經(jīng)年積淀而成的集體智慧的結(jié)晶,反映了整個(gè)族群共同的生活方式、心理特征與審美取向。個(gè)體在世代繁衍的過程中相互影響,最終形成整個(gè)族群的共有特征。從這個(gè)意義上說,每個(gè)個(gè)體所做出的貢獻(xiàn)都不可或缺。目前保護(hù)地理標(biāo)志的集體商標(biāo)和證明商標(biāo),其主體往往為某一地域所屬行業(yè)的行業(yè)協(xié)會(huì)或?qū)Ξa(chǎn)品具有監(jiān)督能力的組織。兩者在主體上的趨同性為地理標(biāo)志保護(hù)非物質(zhì)文化遺產(chǎn)提供了有效的保障。
(三)保護(hù)期限的永久性
非物質(zhì)文化遺產(chǎn)的創(chuàng)作須在人類發(fā)展的漫漫長路中不斷沉淀、積累而成,并將隨著時(shí)代的變遷而生生不息,演進(jìn)不止。我國《商標(biāo)法》雖規(guī)定注冊(cè)商標(biāo)的保護(hù)期為自核準(zhǔn)注冊(cè)之日起10年,但是通過履行法定的續(xù)展程序,可以變相地實(shí)現(xiàn)無限期保護(hù)。從這一點(diǎn)來看,地理標(biāo)志滿足了非物質(zhì)文化遺產(chǎn)永久保護(hù)的需求。
三、掣肘:地理標(biāo)志保護(hù)非物質(zhì)文化遺產(chǎn)的有限性
(一)對(duì)非物質(zhì)文化遺產(chǎn)的非商業(yè)性使用難盡其能
作為商業(yè)標(biāo)志,地理標(biāo)志主要作用于商業(yè)領(lǐng)域,其首要功能在于防止混淆商品或服務(wù)的來源,遏制他人以營利為目的,假冒商品的原產(chǎn)地。而當(dāng)?shù)乩順?biāo)志遭遇非物質(zhì)文化遺產(chǎn)的非商業(yè)性使用,其保護(hù)就顯得捉襟現(xiàn)肘。有鑒于此,對(duì)于那些不適于商業(yè)化的非物質(zhì)文化遺產(chǎn),須采用其他模式進(jìn)行保護(hù)。具言之,對(duì)于那些能夠固定于特定載體的口頭傳說與表述,因其符合作品的構(gòu)成要件,宜適用著作權(quán)保護(hù),而這一點(diǎn)在前述《著作權(quán)法》第6條的規(guī)定中已得到印證。
(二)難以解決非物質(zhì)文化遺產(chǎn)的技術(shù)竊取問題
前已述及,地理標(biāo)志對(duì)非物質(zhì)文化遺產(chǎn)的保護(hù)主要體現(xiàn)在商業(yè)化使用過程中的防止來源假冒方面,而對(duì)于他人通過不正當(dāng)途徑獲取非物質(zhì)文化遺產(chǎn)的制作技藝等技術(shù)領(lǐng)域則難當(dāng)其任。這一現(xiàn)象如不遏制,隨之而來將是非物質(zhì)文化遺產(chǎn)瀕臨失傳的境地。此時(shí),運(yùn)用專利權(quán)以及商業(yè)秘密權(quán)等其他知識(shí)產(chǎn)權(quán)予以保護(hù)不失為一劑有效的良方。具言之,對(duì)于那些包含有獨(dú)特制作技藝的非物質(zhì)文化遺產(chǎn),其方法可申請(qǐng)發(fā)明專利或視為商業(yè)秘密保護(hù),依該技藝生成的產(chǎn)品可申請(qǐng)專利。
四、展望:非物質(zhì)文化遺產(chǎn)地理標(biāo)志保護(hù)制度的構(gòu)建
【摘要】
目的觀察拳參正丁醇提取物對(duì)異丙腎上腺素所致大鼠心肌肥厚的保護(hù)作用及探索其相關(guān)作用機(jī)制。方法采用ISO 1 mg·kg-1·d-1,背部皮下注射,連續(xù)10 d,建立大鼠心肌肥厚模型。造模第2天開始給大鼠灌胃不同濃度的拳參正丁醇提取物或NS,連續(xù)14 d,末次給藥后禁食12 h,稱重,麻醉后斷頭取血,取心臟稱重后計(jì)算全心重量指數(shù)及左心重量參數(shù);采用試劑盒測(cè)定心肌組織NOS活性及MDA含量。結(jié)果ISO模型組大鼠心臟重量參數(shù)及左心室重量指數(shù)明顯提高,左心室NOS含量降低,MDA 含量升高;與模型組相比,拳參正丁醇提取物治療組左心室重量指數(shù)下降,心臟重量指數(shù)有下降趨勢(shì)(無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義),心肌組織NOS活性顯著升高及MDA 含量降低。結(jié)論拳參正丁醇提取物對(duì)異丙腎上腺素所致大鼠心肌肥厚具有保護(hù)作用,其作用機(jī)制與清除OFR和提高NO水平有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】 拳參正丁醇提取物; 異丙腎上腺素; 心肌肥厚
Abstract:ObjectiveTo observe the protective effect of Polygonum bistorla L. n-Butyl Alcohol Extract (PBNA) on myocardial hypertrophy caused by isopropylarterenol (Iso) in rats and explore its possible mechanism. MethodsThe myocardial hypertrophy model was established through hypodermic injection for 10 consecutive days at back skin with Iso, 1 mg/(kg·d).Once the model was formed, the rats were administrated with various concentrations of PBNA or NS in intragastric way from the second day for 14 days. 12 h after the last administration,blood and heart were taken under anesthesia, the indexes of whole heart and left ventricle were calculated and NOS activity and MDA level of myocardial tissue were determined with kits. ResultsThere was obvious difference between Iso group and Ns group. Indexes of whole heart and left ventrical in Iso group were much higher than those in control one, NOS activity was decreased while MDA concentration was increased in left ventricle. However, both indexes of whole heart and left ventricle were decreased in BAEB group, furthermore, NOS activity was strikingly enhanced and MDA concentration was reduced in PBNA group. ConclusionBAEB has a protective effect on myocardial hypertrophy caused by Iso, and its mechanism may be related with clearance of OFR and NO concentration promotion.
Key words:Polygonum bistorla L. n-Butyl alcohol extact; Isopropylarterenol; Myocardial hypertrophy
中藥拳參具有清熱、鎮(zhèn)驚、利濕等功效,主要成分為沒食子酸、丁二酸、槲皮素、槲皮素-5-O-β-D-葡萄糖苷、原兒茶酸等[1,2]。有實(shí)驗(yàn)表明,其正丁醇提取物(Polygonum bistorla L. n-Butyl Alcohol Extract)具有鎮(zhèn)痛[3]、中樞抑制[4]、心肌缺血保護(hù)等[5]作用。心肌肥厚是以心肌細(xì)胞體積增大和蛋白含量增多為主要特征的代償反應(yīng),是對(duì)各種心血管刺激因子的適應(yīng)反應(yīng),但持續(xù)的心肌肥厚會(huì)導(dǎo)致死亡。資料表明,連續(xù)用ISO刺激可誘導(dǎo)大鼠心肌肥厚[6],本實(shí)驗(yàn)利用ISO背部皮下注射構(gòu)造大鼠心肌肥厚模型,研究拳參正丁醇提取物對(duì)ISO所致大鼠心肌肥厚的保護(hù)作用及其可能機(jī)制。
1 器材和方法
1.1 藥品和試劑
拳參正丁醇提取物(由沈陽藥科大學(xué)提供);鹽酸異丙腎上腺素注射針劑(上海禾豐制藥有限公司,批號(hào)H31021344),一氧化氮合酶(NOS)、丙二醛(MDA)測(cè)定試劑盒(南京建成生物工程研究所)。
1.2 儀器
722N可見光分光光度計(jì)(上海精密科學(xué)儀器有限公司);賽多利斯BS224S型電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司),7600-020+ISE全自動(dòng)生化分析儀(日本日立)。
1.3 動(dòng)物
SD大鼠,雄性,體重200~250 g,購自江西中醫(yī)學(xué)院〔動(dòng)物合格證號(hào):SCXK(贛)2005-0001〕。
1.4 方法
1.4.1 分組及給藥
雄性SD大鼠24只,隨機(jī)分成4組:① 正常對(duì)照組;②心肌肥厚模型組;③心肌肥厚模型+1mg/kg PBNA組;④心肌肥厚模型+0.5 mg/kg PBNA組。②③④組大鼠背部皮下注射ISO 1 mg·kg-1·d-1,連續(xù)10 d,制作心肌肥厚模型,正常對(duì)照組給予等體積生理鹽水。于造模后第2天開始③④組分別灌胃給以PBNA 1,0.5 mg/kg,連續(xù)14 d,NS對(duì)照組和ISO模型組大鼠每日灌胃給予相同體積的生理鹽水。
1.4.2 心臟重量指數(shù)和左心室重量參數(shù)的測(cè)定
末次給藥后禁食12 h,稱重后麻醉斷頭取血后,取出心臟,去除結(jié)締組織,用生理鹽水洗凈,吸干后稱全心重量,剪除心房和右心室,稱左心室重量,計(jì)算心臟重量指數(shù)和左心室重量參數(shù):心臟重量指數(shù)=全心重(mg)/體重(g), 左心室重量參數(shù)(LHWW/BW)=左心室重(mg)/體重(g)。
1.4.3 測(cè)定左心室NOS活性及MDA含量
取約500~600 mg左心室心肌組織冰浴下配制10%勻漿,3 500 r/min,離心10 min,取上清液按試劑盒說明測(cè)定NOS活性及MDA含量。
1.4.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Graphpad prism 4.0軟件進(jìn)行單因素方差分析,結(jié)果以柱狀圖表示,P<0.05,認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié)果
2.1 PBNA對(duì)心肌肥厚大鼠心臟重量指數(shù)和左心室重量參數(shù)的影響
ISO模型組大鼠心臟重量指數(shù)及左心室重量參數(shù)值較正常對(duì)照組明顯增加(P
2.2 PBNA對(duì)心肌肥厚大鼠左心肌組織NOS活性的影響
與正常對(duì)照組比較,ISO模型組NOS有一定下降趨勢(shì),但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;與ISO模型組相比,PBNA低濃度及高濃度組NOS均有顯著提高(P
2.3 PBNA對(duì)心肌肥厚大鼠心肌組織MDA含量的影響
與正常對(duì)照組比較,ISO模型組MDA有明顯升高(P
3 討論
本實(shí)驗(yàn)研究了PBNA對(duì)ISO所致大鼠心肌肥厚的保護(hù)作用,結(jié)果表明 PBNA能有效減輕ISO所致大鼠心肌肥厚。異丙腎上腺素為β腎上腺素受體激動(dòng)藥,對(duì)β受體有很強(qiáng)的激動(dòng)作用,可加快心率、加速傳導(dǎo),心肌耗氧量明顯增加,環(huán)磷酸腺苷(cAMP)生成和糖原合成增加,從而促進(jìn)心肌細(xì)胞總蛋白和非收縮蛋白合成,心肌細(xì)胞肥大。另外,循環(huán)和心臟局部兒茶酚胺含量增加,可引起脂質(zhì)代謝異常及引起體內(nèi)氧自由基(OFR)生成增加[7]。OFR可進(jìn)攻生物膜的類脂分子,引起類脂分子中多不飽和脂肪酸(PUFA)的脂質(zhì)過氧化,從而損傷生物膜,產(chǎn)生大量的脂質(zhì)自由基。OFR可致線粒體結(jié)構(gòu)破壞和功能障礙,抑制ATP合成體系中的酶,使ATP合成減少,心肌能量缺乏,導(dǎo)致心肌肥厚的發(fā)生發(fā)展[7,8]。
過多的OFR可使細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)-脂質(zhì)過氧化,MDA為過氧化脂質(zhì)的降解產(chǎn)物,實(shí)驗(yàn)中觀察到,在注射ISO的同時(shí)給予 PBNA,可呈劑量依賴性地降低MDA含量,表明PBNA具有清除OFR的作用,并能奪取過氧化過程中產(chǎn)生的脂質(zhì)過氧化自由基,生成活性較低的多酚自由基,打斷自由基氧化鏈反應(yīng),有效清除體內(nèi)有害自由基[8,9],從而對(duì)心肌起保護(hù)作用。
NO作為體內(nèi)重要的生理因子,大量研究證實(shí),NO可以通過舒張血管,減少心臟的前后負(fù)荷,降低心肌氧耗,直接滅活氧自由基等途徑,抑制心肌和血管增殖,抑制心肌肥厚,產(chǎn)生心肌保護(hù)作用。NO是NOS催化L-Arg和分子氧反應(yīng)產(chǎn)生的。本實(shí)驗(yàn)證明拳參正丁醇提取物可提高心肌肥厚大鼠心肌組織NOS的活性,并呈劑量依賴性。這可能是PBNA抑制心肌肥厚的機(jī)制之一 [10,11]。
本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,PBNA能抑制ISO連續(xù)注射引起的心肌肥厚,具有保護(hù)心肌的結(jié)構(gòu)和功能的作用,其作用與清除OFR和提高NO水平有關(guān)。
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【關(guān)鍵詞】 五淋丸;心肌缺血;異丙腎上腺素;血流動(dòng)力學(xué)
五淋丸是由海金沙、關(guān)木通、梔子、黃連、石韋、茯苓、琥珀、地黃、白芍、川芎、當(dāng)歸、甘草十二味中藥配伍而成,具有清熱利濕,分清止淋之功效[1]。以往相關(guān)文獻(xiàn)均為報(bào)道其對(duì)泌尿系統(tǒng)疾病的治療作用 [2],對(duì)其他系統(tǒng)的作用尚未見報(bào)道。因其成分中黃連[3]、茯苓[4]、琥珀[5]、地黃、白芍、川芎[6]、當(dāng)歸[7]、甘草[8]均對(duì)心血管系統(tǒng)有一定作用,故通過建立大鼠心肌缺血模型,觀察它對(duì)大鼠心肌損傷的作用,并探討其與血流動(dòng)力學(xué)的關(guān)系,為揭示五淋丸抗心肌缺血的作用機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)依據(jù),以期擴(kuò)大其臨床應(yīng)用范圍。
1 實(shí)驗(yàn)部分
1.1藥物,試劑,動(dòng)物與儀器
五淋丸(廣東國醫(yī)堂制藥有限公司)為棕色顆粒狀,使用時(shí)用蒸餾水碾磨攪勻,配成80 mg·ml-1、40 mg·ml-1及20 mg·ml-1的混懸液; 戊巴比妥鈉(中國醫(yī)藥集團(tuán)上?;瘜W(xué)試劑公司)為白色粉末,用前以蒸餾水配成1.5%備用;Iso注射液((上海禾豐制藥有限公司,每支0.5 mg,批號(hào):3E2005);心得安(山西三普藥業(yè)有限公司,每片10 mg,批號(hào):20050619)。SD大鼠(四川大學(xué)華西醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心),200±20 g,兼用。BL420生物信號(hào)采集與處理系統(tǒng)(成都泰盟科技有限公司), BECKMAN全自動(dòng)生化分析儀(美國貝克曼庫爾克公司)。
1.2方法與結(jié)果
1.2.1 分組與給藥及動(dòng)物模型的制備選用心電圖正常大鼠五十只,隨機(jī)分為五組,每組十只。分別為模型組,陽性對(duì)照組,五淋丸大、中、小劑量組,分別相當(dāng)于臨床劑量的8倍、4倍、2倍,即1.6、0.8、0.4 g· kg-1。五淋丸大、中、小劑量組分別ig 80 mg·ml-1、40 mg· ml-1及20mg· ml-1的混懸液(0.02 ml/g·d).模型組及陽性對(duì)照組均給予等體積生理鹽水,連續(xù)五天。于第六天五淋丸大、中、小劑量組給藥同前三天,陽性對(duì)照組ig心得安0.02 g·kg-1,模型組給予等體積生理鹽水,30 min后各組大鼠ip Iso 5 mg·kg-1。第七天操作同第六天。以標(biāo)準(zhǔn)肢體Ⅱ?qū)?lián)J點(diǎn)向下偏移≥0.1 mV作為判斷造模成功的依據(jù)[9],納入大鼠50只,均進(jìn)入結(jié)果分析,無脫失值。
1.2.2心電圖指標(biāo)的測(cè)定于第七天ip Iso后用戊巴比妥鈉30 mg·kg-1(1. 5% , 2 ml·kg-1)ip 麻醉大鼠,將多導(dǎo)生理記錄儀的針狀電極分別插入四肢皮下,分別記錄各組ip Iso后5、15、30min標(biāo)準(zhǔn)肢體Ⅱ?qū)?lián)心電圖J點(diǎn)的位移[9]。
由表1可見,注射Iso后5 min,各組動(dòng)物心電圖J點(diǎn)均有所偏移,其中模型組呈現(xiàn)J點(diǎn)明顯移位,說明給Iso后誘發(fā)心肌缺血。而五淋丸大、中、小劑量組的J點(diǎn)位移明顯小于模型組(P
1.2.3 血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)的測(cè)定將麻醉好的大鼠頸部常規(guī)消毒后依次剪開頸前皮膚、皮下組織,分離出右頸總動(dòng)脈,結(jié)扎遠(yuǎn)心端。從右頸總動(dòng)脈插入動(dòng)脈導(dǎo)管至左心室描記心室內(nèi)壓[10]。通過換能器連接于BL420生物信號(hào)采集處理系統(tǒng),實(shí)時(shí)記錄血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo):LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax、LVEDP,結(jié)果見表2。從表2可見,五淋丸大、中、小劑量的+dp/dtmax和LVSP均高于模型組(P<0.05或P<0.01),提示五淋丸能改善Iso所致心肌缺血大鼠心臟收縮功能。五淋丸大、中、小劑量的一dp/dtmax、LVEDP(絕對(duì)值)均高于模型組(P<0.05或P<0.01),提示五淋丸能改善Iso致心肌缺血大鼠心臟的舒張功能。表2五淋丸對(duì)Iso致心肌缺血大鼠+dp/dtmax、LVSP、一dp/dtmax和LVEDP的影響
1.2.4 血清肌酸液酶(CK),乳酸脫氫酶(LDH)的測(cè)定各組動(dòng)物均于測(cè)定血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)后,采頸動(dòng)脈血3-5 ml,用自動(dòng)生化分析儀測(cè)定CK及LDH含量。表3顯示:模型組與其它各組相比LDH、CK均明顯升高(P<0.01)。五淋丸大、中、小劑量組LDH、CK的水平明顯降低,與陽性對(duì)照組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。 表3五淋丸對(duì)Iso致心肌缺血大鼠血清LDH、CK含量的影響
2討論
Iso為β受體激動(dòng)劑,通過興奮心臟,加快心率,增強(qiáng)心肌收縮力等,使心肌耗氧量劇增,心臟負(fù)荷加重,大劑量應(yīng)用可誘發(fā)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物心肌缺血樣損傷。標(biāo)準(zhǔn)肢體Ⅱ?qū)?lián)心電圖J點(diǎn)位移的變化幅度可基本反映心肌缺血的嚴(yán)重程度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:Iso引起模型組大鼠心電圖J點(diǎn)移位,出現(xiàn)心肌缺血性改變,表現(xiàn)在J點(diǎn)下移≥0.1 mV,但陽性對(duì)照組和五淋丸大、中、小劑量組的大鼠J點(diǎn)下移不明顯。說明五淋丸可以同心得安一樣發(fā)揮抗心肌缺血的作用。血清LDH、CK能反映心肌細(xì)胞的損傷程度,五淋丸大、中、小劑量組LDH、CK水平均有明顯降低(P
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目的觀察不同極性溶劑的系列提取物、總蒽醌中的游離型和結(jié)合型蒽醌(蒽醌苷)及不同的炮制品的保肝作用。方法將KM小鼠隨機(jī)分組,分成正常組、模型組、聯(lián)苯雙酯組(0.1 g/kg)、各決明子組(11 g生藥/kg),連續(xù)給藥9 d,末次給藥后約10 h,除正常組外,其它各組均腹腔注射0.15%四氯化碳溶液10 ml/kg。16 h后采用比色法測(cè)定血清中轉(zhuǎn)氨酶ALT,AST的含量。結(jié)果以不同極性溶劑提取的5種決明子提取物中,除石油醚部分外,其余各組均有顯著降低轉(zhuǎn)氨酶活性的作用;游離型和結(jié)合型蒽醌均有顯著的降低轉(zhuǎn)氨酶活性作用;決明子的生、炒兩類炮制品也同樣有顯著的降酶作用,但生品略優(yōu)。結(jié)論 總蒽醌類成分是保肝降酶的主要活性成分;除總蒽醌外尚有其他多種保肝降酶的活性成分,有待于對(duì)不同提取物作進(jìn)一步的活性成分追蹤研究;決明子的生、炒兩類炮制品在用于保肝降酶活性時(shí)以生品為佳。
【關(guān)鍵詞】 決明子 決明子提取物 蒽醌類 炒決明子 保肝作用
Abstract:ObjectiveTo investigate the protective effects of different extracts and processed products of Semen Cassiae on the acute liver injury induced by CCl4. MethodsKM mice were pided into normal group, control group, biphenyl dimethylester group (0.1 g/kg) and Semen Cassiae group (11g crude drug/kg), which were processed by intragastric administration for 9 days. 0.15%CCl4 oil solution (10 ml/kg, diluted with plant oil) was injected into the mice of all groups but normal group by intraperitoneal injection 10hr after last administration. The contents of ALT and AST in the serum were determined by chromatometry 16hr after administration of CCl4. ResultsThe five kinds of extracts extracted by different heteropolarity dissolvents but ligarine extract, the free and conjugated anthraquinones significantly decreased the activities of aminopherase. The processed products of Semen Cassiae, the crude and the parched, significantly decreased the activities of aminopherase too. The effect of the crude on the decrease of aminopherase activities was prior to the parched slightly. ConclusionAll of the anthraquinones in Semen Cassiae was the primary active component at the protective effects on liver and decrease of the aminopherase activities and there would be other active components besides all anthraquinones. The follow-up of active components in other extracts but ligarine extract would be urgent at protective effects on liver in the future. The crude may be optimal between two processed products of semen cassiae if Semen Cassiae is used for the protective aim on liver and decrease of aminopherase activities.
Key words:Semen cassiae; Extract of semen cassiae; Anthraquinones; Parched semen cassiae; Protective effect on liver
決明子為豆科草本植物決明或小決明的干燥成熟的種子,為常用中藥材,其性味甘、苦、咸、微寒,歸肝、腎、大腸經(jīng)。具有清肝明目和潤腸通便的功效[1]。現(xiàn)代研究認(rèn)為,決明子中的化學(xué)成分主要有蒽醌類、多糖類、萘并吡酮類、氨基酸類等[2,3],藥理作用主要有降血脂、降血壓、潤腸通便等[3,4],在保肝方面主要對(duì)總蒽醌類、多糖類、醇提物、水提物進(jìn)行了研究[5~7],但對(duì)不同極性溶劑的系列提取物、總蒽醌中的游離型和結(jié)合型蒽醌(蒽醌苷)及不同的炮制品的保肝作用卻未見報(bào)道,本文就上述目前文獻(xiàn)未及內(nèi)容,以CCl4肝損傷為模型進(jìn)行了保肝作用研究,為豐富和完善決明子的保肝作用提供科學(xué)的理論依據(jù)。
1 器材
1.1 藥品與試劑
決明子藥材購自江蘇江浦,經(jīng)鑒定為豆科植物決明Cassia Obtusifolia L.的干燥成熟種子。
聯(lián)苯雙酯由浙藥集團(tuán)新昌制藥廠生產(chǎn),臨用前用蒸餾水于研缽中研磨制成5 mg/ml的混懸液。
丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)試劑盒購自南京建成生物科技有限公司;四氯化碳、石油醚、二氯甲烷、正丁醇、乙醇、氯仿均為分析純(市購);食用油(市購)。
1.2 動(dòng)物KM小鼠,體重18~22 g,雄性,由南京中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。
1.3 儀器2401型紫外可見分光光度計(jì)(SHIMADZU)。
2 方法與結(jié)果
2.1 決明子各提取部位對(duì)四氯化碳致急性肝損傷的保護(hù)作用
2.1.1 決明子各提取部位的分離對(duì)決明子飲片進(jìn)行系統(tǒng)溶劑分離,分為四個(gè)部位,即石油醚部位、二氯甲烷部位,正丁醇部位、乙醇部位。均用淀粉配成混懸液,備用。
2.1.2 決明子水煎液的制備取生決明子粉(過20目篩)27.5 g,以8倍量水煎煮兩次,離心,過濾,濾液減壓濃縮至50 ml。
取KM小鼠70只,體重18~22 g,雄性,隨機(jī)分為7組,分別為正常組;聯(lián)苯雙酯組(0.1 g/kg);四氯化碳模型組(11g生藥/kg);石油醚提取物組(11 g生藥/kg);二氯甲烷提取物組(11 g生藥/kg);正丁醇提取物組(11 g生藥/kg);乙醇提取物組(11 g生藥/kg);水煎液組(11 g生藥/kg)。各組每天每鼠按0.2 ml/10 g灌胃給藥1次,正常組和四氯化碳模型組給予等體積生理鹽水,連續(xù)9 d。末次給藥后約10 h,除正常組外,其它各組均腹腔注射0.15%四氯化碳油溶液10 ml/kg,同時(shí)禁食、自由飲水。16 h后由眼眶靜脈叢取血,分離血清,按試劑盒說明書采用比色法測(cè)定血清中ALT,AST的含量。結(jié)果見表1。表1 決明子各提取部位對(duì)四氯化碳致急性肝損傷的保護(hù)作用(略)
結(jié)果表明,決明子的二氯甲烷提取物、正丁醇提取物、乙醇提取物及水煎液能顯著降低小鼠血清中的升高的ALT值;正丁醇提取物、乙醇提取物及水煎液能顯著降低小鼠血清中升高的AST值,其中正丁醇部位對(duì)四氯化碳致急性肝損傷的保護(hù)作用最為顯著。
2.2 決明子中蒽醌類成分的保肝作用
2.2.1 游離蒽醌的制備
取生決明子粉末,過二號(hào)篩,加10倍量的70%乙醇回流提取2次,1.5 h/次。合并乙醇液,減壓回收至無醇味。將濃浸膏加氯仿回流提取,氯仿液加5%NaOH萃取,分離堿液,加濃HCl酸化至pH為2~3,生成黃色沉淀。靜置,抽濾,水洗至中性,干燥后即得,備用。
2.2.2 結(jié)合型蒽醌(蒽醌苷)的制備
取決明子粉末,過二號(hào)篩,加10倍量的70%乙醇回流提取2次,每次1.5h。合并乙醇液,減壓回收至無醇味。將濃浸膏加適量水溶解后加載于已預(yù)處理好的大孔吸附樹脂柱上,分別用水(30%,50%,70%,95%)乙醇洗脫,收集30%和50%乙醇洗脫液,減壓回收乙醇,即得決明子蒽醌苷提取物。
分組及給藥方法、造模方法基本同前。結(jié)果見表2。表2 決明子蒽醌類成分對(duì)四氯化碳致急性肝損傷的保護(hù)作用(略)
結(jié)果表明,決明子的游離蒽醌和蒽醌苷能顯著降低小鼠血清中的ALT值及AST值,對(duì)四氯化碳致急性肝損傷的保護(hù)作用較為顯著,提示決明子的總蒽醌為其保肝的重要有效活性成分。
2.3 生、炒決明子對(duì)四氯化碳致急性肝損傷的保護(hù)作用 決明子炮制品制備:取原藥材,除去雜質(zhì),洗凈,烘干即得生決明子。取凈決明子,照清炒法(2000版《中國藥典》附錄ⅡD)炒至微有香氣,即得炒決明子。
分組及給藥方法、造模方法基本同前。結(jié)果見表3。表3 決明子各炮制品對(duì)四氯化碳致急性肝損傷的保護(hù)作用(略)
結(jié)果表明,決明子的炒制后,其保肝作用有所下降。
3 討論
臨床引起肝損傷的原因有多種,但均以肝細(xì)胞損傷為最終結(jié)果。存在于肝細(xì)胞中的可溶性酶AST,ALT在肝細(xì)胞損傷后釋放入血,最終導(dǎo)致血清轉(zhuǎn)氨酶活性的升高,因此測(cè)定血清轉(zhuǎn)氨酶活性是反應(yīng)肝細(xì)胞損傷程度最為靈敏可靠、簡單實(shí)用的方法。本文采用的CCl4肝損傷模型是一種常用的、經(jīng)典的實(shí)驗(yàn)性病理模型[8],其主要機(jī)理是CCl4在肝臟細(xì)胞色素P-450酶作用下產(chǎn)生大量的自由基,自由基可損傷肝細(xì)胞膜,同時(shí)與肝細(xì)胞內(nèi)大分子發(fā)生共價(jià)結(jié)合,最終導(dǎo)致肝細(xì)胞腫脹壞死。
本文的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),以不同極性溶劑提取的決明子提取物中,除石油醚部分外,其余各組均有顯著降低轉(zhuǎn)氨酶活性的作用;游離型和結(jié)合型蒽醌均有顯著的降低轉(zhuǎn)氨酶活性作用。上述結(jié)果提示,總蒽醌類成分有顯著的保肝降酶活性作用,由于決明子中蒽醌類含量較高[8],因此可以認(rèn)為蒽醌類成分可作為決明子保肝降酶的主要活性成分,除總蒽醌外尚有其他多種保肝降酶的活性成分,有待于對(duì)其他不同溶劑的提取物(石油醚部分除外)進(jìn)一步分離研究。
決明子的生、炒兩類炮制品也同樣有顯著的降酶作用,但生品略優(yōu)。因此決明子的生、炒兩類炮制品在用于保肝降酶活性時(shí)以生品為佳。陳秋東等[8]的研究顯示,決明子經(jīng)炒制后其所含的蒽醌類成分顯著減少。因此基本認(rèn)為炒制品保肝作用的下降與炮制后蒽醌類成分顯著減少有直接關(guān)系。
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關(guān)鍵詞:植物保護(hù);現(xiàn)代科學(xué)技術(shù);應(yīng)用
中圖分類號(hào):S352 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A DOI:10.11974/nyyjs.20150501120
植物保護(hù)是一門具有多方面研究領(lǐng)域的學(xué)科,對(duì)于植物的保護(hù)需要許多學(xué)科領(lǐng)域的匯集。多方面的科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步都能夠?qū)χ参锏谋Wo(hù)有著十分重要的影響。自從我國的科學(xué)技術(shù)不斷地發(fā)展與進(jìn)步以來,國際范圍內(nèi)的許多新技術(shù)與新科技都引入到植物保護(hù)領(lǐng)域。目前已經(jīng)通過電子計(jì)算機(jī)技術(shù)對(duì)病蟲害進(jìn)行最佳的防治以及警戒與預(yù)測(cè)工作,通過繪制不同地區(qū)的害蟲組成路線圖以及防治等方面都取得了一定的成效。在科技的推動(dòng)作用下,對(duì)植物的保護(hù)必然會(huì)是以一個(gè)現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)為知識(shí)的全新產(chǎn)業(yè),一定會(huì)發(fā)生翻天覆地的變化。
1 生物技術(shù)成為現(xiàn)代植物保護(hù)的主流技術(shù)
現(xiàn)代生物技術(shù)應(yīng)用于植物保護(hù)中涉及到許多科技領(lǐng)域的內(nèi)容,可以有效地抵抗各種病蟲災(zāi)害、除草劑的研發(fā)、植物病原監(jiān)測(cè)與病害診斷技術(shù)等。生物技術(shù)應(yīng)用于植物保護(hù)中預(yù)防病蟲害最有效的手段,一定能夠成為新時(shí)期的植物保護(hù)的科學(xué)發(fā)展的最大動(dòng)力。
1.1 轉(zhuǎn)基因抗性作物地位顯著上升
經(jīng)過多年的科學(xué)實(shí)踐證明,控制好農(nóng)作物防止病蟲害最有效的方法就是不斷的培育出新型的植物品種。植物的轉(zhuǎn)基因工程技術(shù)為我們提供了培育農(nóng)作物抗性品種最有效果、目的性最強(qiáng)的途徑之一。
自從20世紀(jì)90年代以來,轉(zhuǎn)基因抗病蟲害作物的發(fā)展進(jìn)程明顯加快,全球的轉(zhuǎn)基因作物生產(chǎn)的面積不斷擴(kuò)大,數(shù)量不斷增多。轉(zhuǎn)基因抗病蟲害作物在預(yù)防植物的病蟲害的過程中起到了很明顯的效果,取得了很大的規(guī)模與經(jīng)濟(jì)效益。近幾年來,隨著科學(xué)技術(shù)發(fā)展速度的加快,國際上針對(duì)轉(zhuǎn)基因生物的安全性展開了激烈的探討。時(shí)至今日,轉(zhuǎn)基因生物對(duì)于生態(tài)環(huán)境的破壞作用仍沒有被發(fā)現(xiàn),轉(zhuǎn)基因食物也不會(huì)對(duì)人體造成任何的危害,所以,在新時(shí)期下,轉(zhuǎn)基因生物到時(shí)必然會(huì)對(duì)植物的保護(hù)起到重要的推動(dòng)作用,也一定會(huì)被全方面的推廣開來。
1.2 生物工程技術(shù)成為微生物農(nóng)藥創(chuàng)新的重點(diǎn)工作
隨著人類對(duì)于生存環(huán)境的重視,開始倡導(dǎo)實(shí)行“綠色生態(tài)”,人們開始重視自身的生活環(huán)境,其中作為農(nóng)作物生產(chǎn)最重要的輔助工具之一“農(nóng)藥”受到了人們的普遍關(guān)注,人們更期待“綠色食品”的普及,但是由于微生物農(nóng)藥的藥效慢、藥效期限短、作用也比較小。近幾年來,生物技術(shù)帶來了傳統(tǒng)的生產(chǎn)技術(shù)的重大突破,從而進(jìn)一步推動(dòng)了我國植物的保護(hù)。
2 根據(jù)不同的自然環(huán)境地理?xiàng)l件,因地制宜進(jìn)行園林規(guī)劃
由于我國的地理位置十分特殊,國土面積也十分廣闊,擁有著960萬km2的國土,這樣必然就會(huì)面臨著我國的城市分布的十分零散,不同的城市也就有著不同的自然地理?xiàng)l件的差異,每個(gè)城市的氣候條件、水文特征等都或多或少的存在著一定的差異。這樣,在針對(duì)不同的植物利用現(xiàn)代科學(xué)加以保護(hù)的過程中就要因地制宜的進(jìn)行植物的規(guī)劃與保護(hù)。例如:石家莊、北京、鄭州這幾個(gè)城市是典型的亞熱帶季風(fēng)氣候,其地理位置位于我國華北平原的北部,三面環(huán)山,春季氣溫回升速度十分迅速,氣候干旱,夏季時(shí)炎熱多雨,夏季正是全年降水最集中的階段,冬季時(shí),氣候寒冷干燥,年降水量達(dá)到了700mm以上。在這樣的地區(qū)進(jìn)行植物園林規(guī)劃時(shí)就應(yīng)該以針葉林為主,也可以適當(dāng)?shù)脑黾右恍┞淙~闊葉林,這樣就符合了根據(jù)地區(qū)的自然地理氣候條件的特點(diǎn),因地制宜地進(jìn)行了現(xiàn)代科學(xué)的植物保護(hù)規(guī)劃,達(dá)到了理想的植物保護(hù)的規(guī)劃,城市綠化的效果。
3 對(duì)植物保護(hù)的重要作用
植物保護(hù)的新工藝運(yùn)用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)可以在植物保護(hù)工程的建設(shè)過程中解決一些植物保護(hù)的常見問題,也可以推動(dòng)著城市的綠化,提高城市的植被覆蓋率。對(duì)于植物保護(hù)在城市生活中起到了重要的作用,滿足了城市居民對(duì)于居住環(huán)境的追求,在城市生活中發(fā)揮著重要的作用。然而利用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)對(duì)植物加以保護(hù)的施工過程中需要考慮到植物的特點(diǎn)與生長條件,更要考慮到植物的擺放位置與設(shè)計(jì)。在長期的植物保護(hù)的施工建設(shè)的過程中,由于施工技術(shù)水平低下,施工理念落后等一些原因,植物保護(hù)的問題矛盾突出。于是,開展了現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)植物保護(hù)新工藝的應(yīng)用到園林藝術(shù)工程中,新的植物保護(hù)工藝使得我國的園林景觀以及植物的多樣性得到了很好的發(fā)展,更起到了保護(hù)的作用。所以,對(duì)于植物保護(hù)利用現(xiàn)代科學(xué)新工藝進(jìn)行探討十分必要,有重要的作用。
對(duì)于植物保護(hù)利用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)是時(shí)展的必然趨勢(shì),在利用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)對(duì)我國植物進(jìn)行保護(hù)的過程中也應(yīng)該因地制宜的進(jìn)行發(fā)展,有利于加強(qiáng)我國植物的多樣性,對(duì)于保護(hù)我國的生物有著重要的意義。
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