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關(guān)鍵詞:自身抗體;自身免疫性疾??;實(shí)踐帶教
自身抗體是指針對(duì)自身組織、器官、細(xì)胞及細(xì)胞成分的抗體,可以是生理性的,也可以是病理性的。正常人體血液中可以有低滴度的自身抗體,可能參與衰老細(xì)胞或凋亡細(xì)胞以及自身免疫復(fù)合物的清除。病理性自身抗體與自身免疫性疾病關(guān)系密切,如果自身抗體的滴度超過(guò)某一水平,就可能對(duì)身體產(chǎn)生損傷,從而誘發(fā)疾病[1]。抗核抗體(ANA)是抗各種核成分的抗體的總稱,是一種廣泛存在的自身抗體,以真核細(xì)胞成分作為靶抗原,主要存在于血清中,也可存在于滑膜液、胸腔積液和尿液等其他體液中[2-3]。自身抗體的檢測(cè)在自身免疫性疾病(AID)的診斷、病程活動(dòng)程度預(yù)測(cè)、療效觀察、指導(dǎo)臨床用藥等各方面具有重要的臨床價(jià)值[3]。自身抗體檢測(cè)作為免疫學(xué)檢驗(yàn)中的重要分支,雖然實(shí)習(xí)生在臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)理論教學(xué)中已有學(xué)習(xí),但教材中相關(guān)部分內(nèi)容涉及不深,特別是抗核抗體熒光核型判讀及在自身免疫性疾病中的臨床應(yīng)用等較為復(fù)雜,最終導(dǎo)致大量實(shí)習(xí)生對(duì)該部分內(nèi)容無(wú)法熟練掌握及實(shí)踐操作相對(duì)較少[4]。現(xiàn)針對(duì)此現(xiàn)象,結(jié)合筆者在臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)多年帶教中的體會(huì),在自身抗體檢測(cè)實(shí)踐帶教中形成了自己獨(dú)有的一套思路和方法。從強(qiáng)化實(shí)習(xí)生自身抗體檢測(cè)相關(guān)理論知識(shí)以及加強(qiáng)理論聯(lián)系實(shí)踐技能的系統(tǒng)培訓(xùn)、加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果與臨床案例綜合分析、加強(qiáng)自身抗體檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制培訓(xùn)以及注重前沿知識(shí)的講授等方面,讓實(shí)習(xí)生的理論與實(shí)踐有機(jī)結(jié)合起來(lái),提高他們自身免疫性疾病檢驗(yàn)專業(yè)知識(shí),以更好地為臨床服務(wù)[5]?,F(xiàn)將實(shí)踐教學(xué)體會(huì)和需要重視的問(wèn)題總結(jié)如下。
1加強(qiáng)自身抗體檢測(cè)的理論學(xué)習(xí)
在臨床檢驗(yàn)相關(guān)學(xué)科中,免疫學(xué)檢驗(yàn)的理論與實(shí)踐聯(lián)系最為緊密,較好掌握免疫檢驗(yàn)理論知識(shí)是學(xué)好免疫學(xué)的重要前提[5]。自身抗體檢測(cè)作為免疫學(xué)檢驗(yàn)的重點(diǎn)、難點(diǎn),要求實(shí)習(xí)生有一定的理論基礎(chǔ)。在實(shí)習(xí)期間,多數(shù)實(shí)習(xí)生是按照帶教教師的指導(dǎo)進(jìn)行操作,他們并未真正掌握相關(guān)實(shí)驗(yàn)原理及實(shí)驗(yàn)?zāi)康模^知其然而不知其所以然[6]。所以在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始之前,帶教教師應(yīng)對(duì)實(shí)習(xí)生進(jìn)行自身抗體檢測(cè)總體概述及檢測(cè)方法介紹,并對(duì)目前主流的間接免疫熒光法、免疫印跡法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法、化學(xué)發(fā)光法等的實(shí)驗(yàn)原理、實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊约皩?shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng)等進(jìn)行系統(tǒng)培訓(xùn)[1]。經(jīng)過(guò)自身抗體檢測(cè)前期培訓(xùn)后,帶教教師有必要每周或每?jī)芍馨才胖辽僖淮斡心康摹⒂杏?jì)劃的自身抗體檢測(cè)相關(guān)理論課,便于實(shí)習(xí)生對(duì)自身抗體檢測(cè)理論知識(shí)的學(xué)習(xí)和梳理,也為接下來(lái)的實(shí)踐操作打下堅(jiān)實(shí)的理論基礎(chǔ)[7]。
2加強(qiáng)自身抗體檢測(cè)相關(guān)技能的提升
2.1自身抗體檢測(cè)操作技能提升
實(shí)習(xí)帶教期間,培養(yǎng)實(shí)習(xí)生理論與實(shí)踐相結(jié)合,在實(shí)際工作中加強(qiáng)其操作技能、分析和解決問(wèn)題的綜合能力至關(guān)重要[8]。免疫學(xué)檢驗(yàn)本身就是理論和實(shí)踐性很強(qiáng)的一門學(xué)科,然而實(shí)習(xí)生在校期間主要是理論學(xué)習(xí),實(shí)踐相對(duì)較少,從而導(dǎo)致實(shí)習(xí)生的實(shí)踐操作能力相對(duì)較差。因此,在帶教過(guò)程中帶教教師要盡可能多給實(shí)習(xí)生動(dòng)手操作機(jī)會(huì),讓其充分發(fā)揮自己的主觀能動(dòng)性[8]。帶教期間教師在旁監(jiān)督,時(shí)刻要求實(shí)習(xí)生按照檢測(cè)項(xiàng)目以及儀器的操作標(biāo)準(zhǔn)來(lái)執(zhí)行,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性以及培養(yǎng)實(shí)習(xí)生規(guī)范的操作手法[5]。
2.2自身抗體檢測(cè)閱片技能提升
自身抗體的檢測(cè)方法主要有間接免疫熒光法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法、免疫印跡法、化學(xué)發(fā)光法等[1]。其中,自身抗體熒光形態(tài)學(xué)內(nèi)容相對(duì)復(fù)雜,既是教學(xué)重點(diǎn)也是難點(diǎn),要求實(shí)習(xí)生多加練習(xí)。要求實(shí)習(xí)生厘清免疫熒光檢測(cè)原理,掌握熒光模型各時(shí)期形態(tài)[9-10]。日常工作中,帶教教師可收集自身抗體相關(guān)的熒光圖譜,定期對(duì)實(shí)習(xí)生進(jìn)行自身抗體熒光形態(tài)學(xué)培訓(xùn)和考核,對(duì)每次易錯(cuò)內(nèi)容進(jìn)行原因分析,通過(guò)將理論聯(lián)系實(shí)踐,結(jié)合實(shí)際,不斷積累經(jīng)驗(yàn),讓實(shí)習(xí)生對(duì)常見(jiàn)的自身免疫性疾病特定的熒光核型有個(gè)初步認(rèn)識(shí),養(yǎng)成良好的閱片習(xí)慣,以便他們今后走上工作崗位具備一定的基礎(chǔ)[4]。
3加強(qiáng)臨床案例與實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果的綜合分析
3.1案例式教學(xué)的意義
在臨床免疫學(xué)教學(xué)中,帶教教師可結(jié)合臨床案例開(kāi)展教學(xué),這種案例式教學(xué)通過(guò)將真實(shí)的臨床案例貫穿于教學(xué)中,激發(fā)了實(shí)習(xí)生對(duì)學(xué)習(xí)的熱情。實(shí)習(xí)生不僅可以積極討論,還可以鞏固所學(xué)免疫學(xué)知識(shí),在一定程度上提高了實(shí)習(xí)生理論與實(shí)踐相結(jié)合的能力[11]。
3.2典型案例分享
平時(shí)帶教教師可收集經(jīng)典的關(guān)于AID的臨床案例,包括系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、自身免疫性肝病、干燥綜合征等。帶教教師可將案例對(duì)實(shí)習(xí)生分享。通過(guò)真實(shí)、直觀的典型案例,不僅可以提高帶教效果,還易于實(shí)習(xí)生理解記憶,從而培養(yǎng)他們運(yùn)用臨床思維解決工作中遇到的實(shí)際問(wèn)題的綜合分析能力等[5]。
4加強(qiáng)自身抗體檢測(cè)方面的質(zhì)量控制培訓(xùn)
4.1構(gòu)建實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制體系
實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制體系是確保自身抗體檢測(cè)時(shí)能排除其影響因素的存在而得到準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果,確保實(shí)驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)量控制滿足臨床報(bào)告發(fā)放的要求[7]。檢驗(yàn)結(jié)果的真實(shí)準(zhǔn)確性直接關(guān)系到臨床的診斷及治療,與患者的生命息息相關(guān)。為保證實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制效果,必須對(duì)實(shí)習(xí)生進(jìn)行全面質(zhì)量控制培訓(xùn)。
4.2掌握自身抗體檢測(cè)質(zhì)量控制要點(diǎn)
目前國(guó)內(nèi)自身抗體檢測(cè)在AID臨床應(yīng)用中已普遍開(kāi)展,但自身抗體檢測(cè)自動(dòng)化程度相對(duì)較低,各個(gè)單位采用的檢測(cè)儀器不同、試劑不同,結(jié)果沒(méi)有可比性,導(dǎo)致檢驗(yàn)人員對(duì)檢測(cè)結(jié)果缺乏準(zhǔn)確把握,因此掌握自身抗體檢測(cè)質(zhì)量控制要點(diǎn)至關(guān)重要。自身抗體檢測(cè)質(zhì)量控制要點(diǎn)包括分析前(例如:項(xiàng)目編號(hào)、運(yùn)輸、接收離心預(yù)處理等)、分析中(例如:實(shí)驗(yàn)操作、主觀判斷等)和分析后(例如:結(jié)果判斷、檢驗(yàn)報(bào)告書(shū)寫、失控原因分析等)[12],這三部分質(zhì)量控制做不好都會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果,從而影響檢測(cè)數(shù)據(jù)的真實(shí)性。
4.3提高實(shí)習(xí)生質(zhì)量控制意識(shí)
檢驗(yàn)實(shí)習(xí)生對(duì)質(zhì)量控制意識(shí)不強(qiáng),帶教教師應(yīng)讓實(shí)習(xí)生學(xué)習(xí)并掌握自身抗體檢測(cè)質(zhì)量控制理念和方法,嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)室SOP文件操作,控制自身抗體檢測(cè)的檢測(cè)條件和過(guò)程[5]。相關(guān)質(zhì)量負(fù)責(zé)人必須加強(qiáng)對(duì)實(shí)習(xí)生自身抗體檢測(cè)質(zhì)量控制培訓(xùn),培養(yǎng)實(shí)習(xí)生從一開(kāi)始實(shí)習(xí)就意識(shí)到質(zhì)量控制在檢驗(yàn)科工作中的重要性[12]。
5加強(qiáng)檢驗(yàn)醫(yī)師和臨床醫(yī)師的溝通
免疫學(xué)檢驗(yàn)與臨床緊密結(jié)合。日常工作中檢驗(yàn)醫(yī)師與臨床醫(yī)師要相互交流學(xué)習(xí),特別當(dāng)遇到疑難案例時(shí)。如發(fā)現(xiàn)某種自身抗體檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室結(jié)果與臨床情況不符時(shí),臨床醫(yī)生和檢驗(yàn)醫(yī)生應(yīng)對(duì)患者的臨床癥狀及實(shí)驗(yàn)室相關(guān)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行充分交流溝通,必要時(shí)會(huì)診,需要結(jié)合患者臨床癥狀、病史、性別、年齡及其他實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)等進(jìn)行綜合評(píng)價(jià),探討患者下一步更好的治療方案[10-13]。此外,在臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)教師與風(fēng)濕免疫科醫(yī)師進(jìn)行臨床案例溝通時(shí),應(yīng)盡可能使實(shí)習(xí)生參與進(jìn)來(lái),進(jìn)一步培養(yǎng)實(shí)習(xí)生自身抗體檢測(cè)結(jié)果在臨床自身免疫性疾病診斷中的應(yīng)用分析能力等,讓實(shí)習(xí)生知道,檢驗(yàn)與臨床息息相關(guān)以及與臨床溝通的重要性。
6注重前沿知識(shí)的講授
俗話說(shuō):“授人以魚(yú),不如授人以漁?!睅Ы探處熆赏ㄟ^(guò)前沿知識(shí)的講授,教會(huì)實(shí)習(xí)生如何獲取專業(yè)相關(guān)最新知識(shí)并運(yùn)用這些新知識(shí)來(lái)解決工作中遇到的疑難問(wèn)題[8]。帶教期間定期為實(shí)習(xí)生舉辦專題講座至關(guān)重要,如自身抗體及自身免疫性疾?。ˋID)檢測(cè)及研究新進(jìn)展等。帶教教師可向?qū)嵙?xí)生介紹最新文獻(xiàn)及相關(guān)專家共識(shí),但自身免疫性疾病(AID)研究?jī)?nèi)容復(fù)雜,實(shí)習(xí)生理解困難,帶教教師在講課時(shí),要采用合適的教學(xué)策略及方法,準(zhǔn)確把握教學(xué)的重點(diǎn)及難點(diǎn),循序漸進(jìn),由淺入深,方便實(shí)習(xí)生理解掌握。帶教教師可在每次課后布置相應(yīng)作業(yè)或安排某實(shí)習(xí)生下次上臺(tái)講課,使教師和實(shí)習(xí)生進(jìn)行角色互換,讓實(shí)習(xí)生自己查閱相關(guān)書(shū)籍或文獻(xiàn)完成作業(yè),這樣不僅可以讓實(shí)習(xí)生養(yǎng)成主動(dòng)學(xué)習(xí)、獨(dú)立分析問(wèn)題的好習(xí)慣,還可以不斷提升其專業(yè)水平以及激發(fā)他們?cè)诮窈蟮墓ぷ鲗W(xué)習(xí)中時(shí)刻保持積極向上的實(shí)踐動(dòng)力[5-6]。
7加強(qiáng)本科生畢業(yè)論文帶教
根據(jù)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)的學(xué)科特點(diǎn)、課程性質(zhì)和學(xué)生素質(zhì)培養(yǎng)要求,將醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)的所有課程劃分為六大類課程群:通識(shí)課程、專業(yè)基礎(chǔ)課程、臨床醫(yī)學(xué)課程、專業(yè)課程、選修課程和實(shí)訓(xùn)課程。通識(shí)課程包括高教部規(guī)定的所有基本課程。專業(yè)基礎(chǔ)課程又稱基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)課。是醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)的主干學(xué)科,包括無(wú)機(jī)化學(xué)、有機(jī)化學(xué)、分析化學(xué)、正常人體解剖學(xué)、組織胚胎學(xué)、生理學(xué)、生物化學(xué)、醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)、病理學(xué)、病理生理學(xué)、醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)學(xué)等。臨床醫(yī)學(xué)課是醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)的主要學(xué)科,它包括內(nèi)科學(xué)、外科學(xué)、婦科學(xué)、兒科學(xué)、診斷學(xué)。專業(yè)課是醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)的主干學(xué)科,包括臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)、衛(wèi)生檢驗(yàn)概論、臨床生化檢驗(yàn)、分子診斷學(xué)、臨床檢驗(yàn)儀器學(xué)、臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)、臨床寄生蟲(chóng)學(xué)檢驗(yàn)、臨床血液學(xué)檢驗(yàn)、臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)、臨床輸血學(xué)等。選修課程,除了學(xué)校目前已經(jīng)存在的公共選修課和醫(yī)藥類選修課以外,還建議開(kāi)設(shè)醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)檢索、治療藥物監(jiān)測(cè)、專業(yè)外語(yǔ)、醫(yī)學(xué)科研設(shè)計(jì)、細(xì)胞病理學(xué)檢驗(yàn)、床旁檢測(cè)、實(shí)驗(yàn)室信息系統(tǒng)、試劑盒研發(fā)、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)、檢驗(yàn)核醫(yī)學(xué)等選修課,從而拓展學(xué)生的專業(yè)素質(zhì)、突出檢驗(yàn)專業(yè)的特色,同時(shí)還要嚴(yán)格要求專業(yè)選修課的最低學(xué)分。實(shí)訓(xùn)課程即實(shí)習(xí)課,應(yīng)統(tǒng)計(jì)出學(xué)分,包括軍事訓(xùn)練、社會(huì)實(shí)踐、臨床見(jiàn)習(xí)、畢業(yè)實(shí)習(xí)、畢業(yè)論文(設(shè)計(jì))等。
2課程設(shè)置
2.1課程的調(diào)整與整合
將生理學(xué)、病理學(xué)、病生學(xué)的實(shí)驗(yàn)等基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)課程整合成《機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)》;將無(wú)機(jī)化學(xué)、有機(jī)化學(xué)和分析化學(xué)實(shí)驗(yàn)整合為《醫(yī)用化學(xué)綜合實(shí)驗(yàn)》;將內(nèi)、外、婦、兒等臨床課程整合成《臨床醫(yī)學(xué)概要》。這樣既減輕了繁重的教學(xué)任務(wù),也減輕了學(xué)生的學(xué)習(xí)負(fù)擔(dān)。醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)專業(yè)的專業(yè)課包括《臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)》《臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)》《臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)》專業(yè)基礎(chǔ)課包括《醫(yī)學(xué)免疫學(xué)》《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)》《生物化學(xué)》等,這些課程之間存在著部分內(nèi)容重復(fù)以及內(nèi)容銜接不當(dāng)?shù)膯?wèn)題,以至于學(xué)生在學(xué)習(xí)專業(yè)課程時(shí)常會(huì)遺忘了之前基礎(chǔ)課中所學(xué)過(guò)的相關(guān)知識(shí)。為此,老師授課時(shí)不得不重復(fù)基礎(chǔ)課的內(nèi)容。因此,建議將專業(yè)基礎(chǔ)課與專業(yè)課程合并在一起,使學(xué)生在學(xué)習(xí)完專業(yè)基礎(chǔ)知識(shí)后更好地繼續(xù)學(xué)習(xí)臨床技能?!斗治龌瘜W(xué)》包括化學(xué)分析和儀器分析,學(xué)時(shí)較多,針對(duì)現(xiàn)代檢驗(yàn)技術(shù)專業(yè)的特點(diǎn),即已進(jìn)入儀器檢驗(yàn)的時(shí)代,因此該門課應(yīng)側(cè)重儀器分析的講解,減少化學(xué)分析授課的比重。
2.2設(shè)置臨床見(jiàn)習(xí)期
現(xiàn)有的課程設(shè)置與臨床實(shí)踐結(jié)合的還不夠密切,由于未能很好地讓學(xué)生早期接觸臨床,致使部分學(xué)生并不知道臨床檢驗(yàn)報(bào)告是什么,不知道檢驗(yàn)報(bào)告上各項(xiàng)指標(biāo)代表何意,也就更談不上有專業(yè)感情。因此,建議在對(duì)學(xué)生進(jìn)行專業(yè)課教學(xué)之前應(yīng)安排學(xué)生在醫(yī)院的檢驗(yàn)科臨床見(jiàn)習(xí)一段時(shí)間,具體了解檢驗(yàn)工作的流程,培養(yǎng)學(xué)生的感性認(rèn)識(shí),加深對(duì)檢驗(yàn)知識(shí)的印象,達(dá)到百聞不如一見(jiàn)的效果。醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)的課程教學(xué)應(yīng)該針對(duì)檢驗(yàn)技師的培養(yǎng)目標(biāo),強(qiáng)化檢驗(yàn)專業(yè)的特色,突出檢驗(yàn)技師崗位的基本能力和基本素質(zhì)培養(yǎng),具體表現(xiàn)在檢驗(yàn)方法學(xué)、實(shí)驗(yàn)種類、檢驗(yàn)項(xiàng)目、技術(shù)種類等教學(xué)內(nèi)容的特色和優(yōu)勢(shì)。
2.3增設(shè)一些有特色的選修課
以加強(qiáng)學(xué)生對(duì)當(dāng)前最新技術(shù)的了解和應(yīng)用。如針對(duì)檢驗(yàn)科的大型儀器設(shè)備,檢驗(yàn)人員只需了解儀器性能及常見(jiàn)故障排除。因此,可以將《檢驗(yàn)儀器維修》這門課程改為選修課或以專題講座形式開(kāi)出。也可將幾門臨床主干課程中的臨床檢驗(yàn)儀器集中為臨床檢驗(yàn)儀器學(xué)課程,避免重復(fù)講授。為加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制,開(kāi)設(shè)《臨床實(shí)驗(yàn)室管理》課程,可以將生化、免疫、細(xì)胞等質(zhì)量管理的內(nèi)容集中起來(lái),不必在多門專業(yè)課中重復(fù)講授;而針對(duì)《臨床實(shí)驗(yàn)室管理》內(nèi)容比較抽象,可以組織學(xué)生在臨床實(shí)習(xí)期間邊實(shí)踐邊學(xué)習(xí),其教學(xué)效果會(huì)更好。
3課程開(kāi)設(shè)順序
課程開(kāi)設(shè)順序總體要求是通識(shí)課程、專業(yè)基礎(chǔ)課程、臨床醫(yī)學(xué)課程、專業(yè)課程、選修課,這樣依照學(xué)科的發(fā)展、知識(shí)的關(guān)聯(lián)與銜接來(lái)設(shè)置。有平行課程時(shí)要平衡開(kāi)課實(shí)驗(yàn)室和教研室的學(xué)年工作量。實(shí)訓(xùn)課中的軍事訓(xùn)練建議在新生入學(xué)時(shí)安排,以規(guī)范學(xué)生的行為習(xí)慣,養(yǎng)成良好的時(shí)間觀念、組織紀(jì)律觀念、集體觀念和講求規(guī)范及雷厲風(fēng)行的工作作風(fēng),促進(jìn)校風(fēng)校紀(jì)建設(shè);社會(huì)實(shí)踐課應(yīng)安排在每年的寒假和暑假進(jìn)行;臨床見(jiàn)習(xí)時(shí)間宜安排在進(jìn)入專業(yè)課之前;畢業(yè)實(shí)習(xí)安排在最后一學(xué)年。
4課程學(xué)時(shí)的設(shè)置和教學(xué)內(nèi)容的要求
英文名稱:Journal of Medical Molecular Biology
主管單位:中華人民共和國(guó)教育部
主辦單位:華中科技大學(xué)同濟(jì)學(xué)院
出版周期:雙月刊
出版地址:湖北省武漢市
語(yǔ)
種:中文
開(kāi)
本:大16開(kāi)
國(guó)際刊號(hào):1672-8009
國(guó)內(nèi)刊號(hào):42-1720/R
郵發(fā)代號(hào):38-35
發(fā)行范圍:國(guó)內(nèi)外統(tǒng)一發(fā)行
創(chuàng)刊時(shí)間:1978
期刊收錄:
CA 化學(xué)文摘(美)(2009)
Pж(AJ) 文摘雜志(俄)(2009)
中國(guó)科學(xué)引文數(shù)據(jù)庫(kù)(CSCD―2008)
核心期刊:
中文核心期刊(1992)
期刊榮譽(yù):
聯(lián)系方式
基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)專業(yè)發(fā)展現(xiàn)狀及人才培養(yǎng)的思考
訪問(wèn)辛辛那提兒童醫(yī)院醫(yī)療中心見(jiàn)聞與啟示
全科醫(yī)師實(shí)踐技能培訓(xùn)短期效果評(píng)價(jià)
醫(yī)學(xué)研究生導(dǎo)師評(píng)價(jià)指標(biāo)體系的構(gòu)建
中華醫(yī)學(xué)會(huì)系列雜志關(guān)于論文題名的規(guī)定
協(xié)同創(chuàng)新,構(gòu)建校校聯(lián)合培養(yǎng)模式的探索
關(guān)于論文中統(tǒng)計(jì)結(jié)果的解釋和表達(dá)
EPOS在耳鼻咽喉科研究生臨床教學(xué)中的應(yīng)用
園區(qū)化管理在某高校的實(shí)踐與探索
醫(yī)藥衛(wèi)生類高職教育課程標(biāo)準(zhǔn)制定的思考
留學(xué)生婦產(chǎn)科學(xué)全英語(yǔ)教學(xué)的問(wèn)題與思考
臨床醫(yī)學(xué)八年制學(xué)生科研能力培養(yǎng)實(shí)踐
臨床醫(yī)學(xué)科學(xué)學(xué)位研究生培養(yǎng)模式探索
中華醫(yī)學(xué)會(huì)系列雜志關(guān)于漢字?jǐn)?shù)字用法的規(guī)定
醫(yī)學(xué)生溝通能力評(píng)價(jià)方式存在的問(wèn)題及對(duì)策
試論衛(wèi)生事業(yè)管理專業(yè)開(kāi)設(shè)領(lǐng)導(dǎo)力課程的必要性
醫(yī)學(xué)微生物學(xué)創(chuàng)新教育的實(shí)踐與思考
以問(wèn)題為基礎(chǔ)的學(xué)習(xí)在中醫(yī)教育中的應(yīng)用
醫(yī)學(xué)研究生科研實(shí)踐中的問(wèn)題及對(duì)策
醫(yī)學(xué)碩士研究生課程體系的改革與實(shí)踐
醫(yī)學(xué)院校實(shí)習(xí)權(quán)利的研究與對(duì)策分析
全球背景下的中國(guó)醫(yī)學(xué)教育改革
藥物分析課程體系與教學(xué)模式改革的探討
重慶市急診急救??谱o(hù)士培訓(xùn)現(xiàn)狀調(diào)查分析
獨(dú)立學(xué)院人才培養(yǎng)方案的特色構(gòu)建研究
醫(yī)學(xué)研究生實(shí)驗(yàn)室生物安全教育狀況實(shí)證研究
建設(shè)高水平大學(xué)的緣由、實(shí)踐與比較
博士學(xué)位論文雙盲評(píng)審的實(shí)踐與思考
淺談如何提高青年教師生物化學(xué)教學(xué)質(zhì)量
醫(yī)科獨(dú)立學(xué)院創(chuàng)新人才培養(yǎng)模式探析
參加農(nóng)村衛(wèi)生適宜技術(shù)項(xiàng)目培訓(xùn)有感
英語(yǔ)專業(yè)(醫(yī)學(xué)方向)人才培養(yǎng)模式研究
將科研創(chuàng)新引入本科人才培養(yǎng)的模式探索
博洛尼亞進(jìn)程中的俄羅斯高等醫(yī)學(xué)教育
知識(shí)產(chǎn)權(quán)制度對(duì)科技獎(jiǎng)勵(lì)制度影響的初步探討
中美醫(yī)學(xué)教育差異對(duì)八年制教學(xué)的啟示
生物醫(yī)學(xué)工程碩士專業(yè)學(xué)位研究生教學(xué)探索
臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)學(xué)位碩士研究生循證素質(zhì)培養(yǎng)
KPI考核在附屬醫(yī)院教學(xué)管理部門的實(shí)踐
基于GMER理念的生物化學(xué)與分子生物學(xué)教學(xué)
臨床技能培訓(xùn)課程與醫(yī)學(xué)生培養(yǎng)的關(guān)系研究
研究生學(xué)位論文答辯工作存在的問(wèn)題與對(duì)策
關(guān)于中醫(yī)本科教育的幾點(diǎn)思考
我國(guó)民辦高等醫(yī)學(xué)院校發(fā)展前景研究
獨(dú)立設(shè)置醫(yī)科大學(xué)學(xué)科融合的重要意義
對(duì)免疫學(xué)理論模塊教學(xué)目標(biāo)的思考
PBL教學(xué)法在局部解剖學(xué)教學(xué)中的應(yīng)用
關(guān)鍵詞:食品,快速檢驗(yàn)技術(shù),應(yīng)用,發(fā)展
中圖分類號(hào):F416文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼: A
前言:隨著人們生活水平的提高,各種食品安全問(wèn)題層出不窮,加強(qiáng)對(duì)食品安全的檢測(cè)成為有關(guān)部門的重中之重。與此同時(shí),食品快速檢驗(yàn)技術(shù)得到了進(jìn)一步的應(yīng)用和發(fā)展。
1.食品快速檢驗(yàn)技術(shù)的應(yīng)用的重要性
快速檢驗(yàn)法的應(yīng)用有效地提高了食品安全工作者對(duì)食品質(zhì)量的評(píng)判能力。這種方法主要針對(duì)食品的部分理化指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè),在對(duì)食品質(zhì)量進(jìn)行定性的時(shí)候相較于以往的感官判斷更準(zhǔn)確、合理。借助快速檢驗(yàn)法,食品安全監(jiān)督工作者可以準(zhǔn)確理性的對(duì)食品的安全性進(jìn)行判斷。如此,避免了感官判斷準(zhǔn)確率低的問(wèn)題,是食品安全監(jiān)督朝著優(yōu)質(zhì)、高效目標(biāo)發(fā)展的重要表現(xiàn)。隨著快速檢驗(yàn)方法的廣泛使用,食品安全監(jiān)管體系逐步完善,市場(chǎng)上的不合格的食品可以快速準(zhǔn)確的被食品藥品監(jiān)督管理局的工作者準(zhǔn)確識(shí)別,為消費(fèi)者創(chuàng)造了一個(gè)安全的食品環(huán)境。該方法的實(shí)施也對(duì)那些非法食品經(jīng)營(yíng)者形成了強(qiáng)大的威懾力。檢測(cè)箱只是一個(gè)小小的箱子,但是它給社會(huì)帶來(lái)的影響卻是巨大的,它有效地降低了市場(chǎng)上食品的危險(xiǎn)性,維護(hù)了社會(huì)的穩(wěn)定。
2 食品快速檢驗(yàn)方法的形式及應(yīng)用
2.1 試管法
試管法可用速測(cè)管顯色半定量或定性對(duì)樣品進(jìn)行快速檢測(cè),可用于亞硝酸鹽、二氧化硫、鼠藥、甲醇等的測(cè)定。目前試劑盒也被廣泛應(yīng)用于現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)中。如酶聯(lián)免疫(ELISA)快速檢測(cè)試劑盒應(yīng)用于食品農(nóng)藥殘留免疫檢測(cè), 將會(huì)成為食品農(nóng)藥殘留和食品安全質(zhì)量控制的有效快速檢測(cè)手段。目前大多物質(zhì)的檢測(cè)方法都可以試劑盒形式存在,如慢抗試劑盒(如β內(nèi)酰胺酶檢測(cè)試劑盒和總抗生素檢測(cè)試劑盒)以及環(huán)丙沙星等藥物試劑盒的產(chǎn)品已被廣泛應(yīng)用于市場(chǎng)中。
2.2 便攜式儀器法
便攜式檢測(cè)儀在食品檢驗(yàn)工作中被廣泛應(yīng)用,適用于農(nóng)產(chǎn)品監(jiān)測(cè)站、田間地頭果蔬的檢驗(yàn)以及商貿(mào)批發(fā)市場(chǎng)、酒店等處果蔬的檢測(cè)。以李培武研究員為首的研究組在國(guó)內(nèi)外首創(chuàng)了黃曲霉毒素B1親和微球快速檢測(cè)技術(shù),研制開(kāi)發(fā)出黃曲霉毒素B1專用定量熒光避測(cè)儀,該測(cè)試儀測(cè)試靈敏度和準(zhǔn)確度高,最低檢測(cè)限達(dá)到0.3μg/kg。便攜式儀器具有體積小、重量輕、精度高、快速檢測(cè)等優(yōu)點(diǎn),也是當(dāng)前被廣泛應(yīng)用的快速檢測(cè)方法之一,可結(jié)合不同技術(shù)制備得到檢測(cè)儀,應(yīng)用于各種食品檢測(cè)中。
3 生物檢測(cè)技術(shù)在食品快速檢驗(yàn)方法中的應(yīng)用
3.1 免疫學(xué)技術(shù)
免疫學(xué)技術(shù)是指抗原與抗體之間的特異性免疫反應(yīng),即在體內(nèi)發(fā)生,也可以在體外發(fā)生。不同的微生物具有特異的抗原,輔以免疫放大技術(shù)制備相應(yīng)的多克隆抗體或單克隆抗體,就可以鑒別目的微生物存在與否,并較準(zhǔn)確地檢測(cè)出其含量。目前用于食品安全檢測(cè)中的免疫技術(shù)主要有酶聯(lián)免疫法(ELISA)、免疫磁珠分離技術(shù)、免疫力檢測(cè)試劑條、免疫乳膠試劑、免疫深沉法或免疫色譜法等。1989年美國(guó)食品安全檢驗(yàn)局就已將免疫技術(shù)應(yīng)用于肉類及家禽的檢驗(yàn)中,并制定了相關(guān)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。免疫學(xué)技術(shù)具有靈敏度高、特異性高、可定量分析、簡(jiǎn)便安全等優(yōu)點(diǎn),廣泛應(yīng)用于細(xì)菌、霉菌、及細(xì)菌和真菌毒素等的檢測(cè)中。
3.2 分子生物學(xué)技術(shù)
3.2.1 DNA探針技術(shù)DNA探針技術(shù)又稱核酸探針技術(shù)和分子雜交技術(shù),是指能與特定核苷酸序列發(fā)生特異互補(bǔ)雜交,雜交后又能被特殊方法檢測(cè)的已知被標(biāo)記(同位素或非同位素標(biāo)記)的核苷酸鏈。廣泛用于食品中致病菌和病原體檢驗(yàn)等方面。基因探針?lè)ň哂袦?zhǔn)確性和靈敏度高,針對(duì)性強(qiáng),檢測(cè)快速等特點(diǎn)。
3.2.2 PCR技術(shù)
聚 合 酶 鏈 式 反 應(yīng) 技 術(shù) 簡(jiǎn) 稱 P C R(Polymerase Chain Reaetion)技術(shù),是一種能夠在生物體外快速擴(kuò)增特定基因或DNA序列的方法,早期應(yīng)用于基因克隆和轉(zhuǎn)基因檢測(cè),后來(lái)被廣泛應(yīng)用于食品快速檢驗(yàn)中,并且被認(rèn)為是食源性致病菌快速和準(zhǔn)確的檢測(cè)方法。PCR技術(shù)可用于大腸桿菌、單核細(xì)胞增生李斯特菌及其他食品中致病菌的檢測(cè)。PCR技術(shù)結(jié)合其他技術(shù)形成一種穩(wěn)定、靈敏、易操作且成本低廉的技術(shù)。
3.2.3 基因芯片技術(shù)
基因芯片又稱生物芯片技術(shù),是指將大量DN段(即探針?lè)肿?固定于支持物上后與標(biāo)記的樣品分子進(jìn)行雜交,通過(guò)探針?lè)肿由想s交信號(hào)的強(qiáng)度檢測(cè)出樣品分子數(shù)量及序列信息。主要用于基因檢測(cè)工作,可用于食品中常見(jiàn)致病菌的檢測(cè)。
3.3 生物傳感器技術(shù)
生物傳感器技術(shù)是由生物識(shí)別系統(tǒng)和信號(hào)轉(zhuǎn)換器組成,通過(guò)酶、抗原、抗體、微生物、核酸等生物活性物質(zhì)作為識(shí)別元件,電化學(xué)、信號(hào)放大裝置或場(chǎng)效應(yīng)管、壓電晶體等傳感器把待測(cè)物濃度轉(zhuǎn)為電信號(hào),再根據(jù)電信號(hào)測(cè)出待測(cè)物濃度。該檢測(cè)方法經(jīng)濟(jì)、簡(jiǎn)便,不需要預(yù)處理;具有專一性強(qiáng)、靈敏度高、選擇性及抗干擾能力強(qiáng);體積小,方便攜帶,可實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)和連續(xù)在線監(jiān)測(cè);操作系統(tǒng)簡(jiǎn)單、容易實(shí)現(xiàn)自動(dòng)分析,準(zhǔn)確度高;樣品用量小,響應(yīng)快,敏感材料可反復(fù)使用;此外生物傳感器可得到的信息量大。生物傳感器可用于食品中蛋白質(zhì)、糖、氨基酸以及食品添加劑等多方面領(lǐng)域。
3.4 代謝學(xué)技術(shù)
代謝學(xué)技術(shù)是指利用微生物代謝的理論,通過(guò)對(duì)其生長(zhǎng)過(guò)程中相關(guān)底物和代謝產(chǎn)物和電阻抗的變化特性進(jìn)行檢測(cè),從而達(dá)到微生物檢測(cè)目的的方法。
3.4.1 電阻抗技術(shù)
生物電阻抗測(cè)量,簡(jiǎn)稱阻抗技術(shù),是通過(guò)測(cè)量微生物代謝引起的培養(yǎng)基電特性變化來(lái)測(cè)定樣品微生物含量的一種快速檢測(cè)方法。微生物在培養(yǎng)過(guò)程中,生理代謝作用使培養(yǎng)基中的電惰性物質(zhì),如碳水化合物、類脂、蛋白質(zhì)等轉(zhuǎn)化為電活性物質(zhì),如乳酸鹽、醋酸鹽等,使培養(yǎng)基的電阻發(fā)生變化,電阻性增強(qiáng),電阻抗降低,由此可判定微生物在培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)繁殖情況。陳廣全等人采用該法檢測(cè)食品中沙門氏菌。
3.4.2 微熱量計(jì)
技術(shù)微熱量計(jì)技術(shù)是通過(guò)測(cè)定微生物生長(zhǎng)時(shí)產(chǎn)生熱量的變化檢出和鑒別微生物。微熱量計(jì)具有恒溫精度高、檢測(cè)靈敏、操作簡(jiǎn)單等特點(diǎn),特別適用于熱效應(yīng)小和緩慢的生物過(guò)程的研究和檢測(cè)。
3.4.3 放射測(cè)量技術(shù)
放射測(cè)量技術(shù)是用14C標(biāo)記微生物生食品快速檢驗(yàn)技術(shù)的應(yīng)用及研究進(jìn)展長(zhǎng)繁殖過(guò)程中所利用的碳水化合物等代謝底物,并測(cè)量微生物代謝產(chǎn)生的14CO2含量,從而判斷微生物的量。該方法用于檢測(cè)細(xì)菌,具有快速、準(zhǔn)確等特點(diǎn)。
4 總結(jié)
綜上所述,食品快速檢驗(yàn)方法種類繁多,具有較好的特異性、高效性和準(zhǔn)確性,且檢測(cè)快速等優(yōu)點(diǎn),但是不管是哪一種檢測(cè)方法都具有一定的局限性,非生物檢測(cè)方法,不具有特異性操作相對(duì)生物檢測(cè)法復(fù)雜等缺點(diǎn);生物檢測(cè)法雖然生物特異性高,操作方便簡(jiǎn)單,但其成本相對(duì)較高,且當(dāng)待測(cè)物中含有與目標(biāo)菌競(jìng)爭(zhēng)性物質(zhì)時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性等缺陷。因此,若要達(dá)到食品快速檢驗(yàn)技術(shù)的完善,就必須在發(fā)展新技術(shù)的同時(shí),也要加強(qiáng)對(duì)現(xiàn)有的技術(shù)綜合利用的研究,以使食品檢測(cè)技術(shù)達(dá)到理想的效果。
參考文獻(xiàn)
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[2] 李培武.特大喜訊:飼料查毒添“金睛”動(dòng)物安全有保障:農(nóng)產(chǎn)品黃曲霉毒素親和微球速測(cè)技術(shù)及速測(cè)儀誕生[N].中國(guó)畜牧獸醫(yī)報(bào),安全飼料專刊,2005年8月21日.
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馬弋,1977年12月生于浙江省金華市。華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院碩士?,F(xiàn)任職于湖北省疾病預(yù)防控制中心衛(wèi)檢所,湖北省衛(wèi)生檢驗(yàn)專業(yè)委員會(huì)秘書(shū)。研究方向?yàn)槭称钒踩L(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)及微生物學(xué)檢驗(yàn)。曾在SCI及國(guó)內(nèi)核心期刊上公開(kāi)發(fā)表專業(yè)論文20余篇,參編著作1本,參與起草國(guó)家食品安全標(biāo)準(zhǔn)3個(gè),獲湖北省及武漢市科技成果獎(jiǎng)各1次。
近年來(lái),食品安全事件的頻繁出現(xiàn)給廣大消費(fèi)者的生命安全與健康,不斷帶來(lái)風(fēng)險(xiǎn)和精神恐慌,食品安全現(xiàn)已成為不可忽視的重要公共衛(wèi)生問(wèn)題。2009年頒布的《中華人民共和國(guó)食品安全法》明確規(guī)定了各級(jí)檢測(cè)機(jī)構(gòu)在食品安全事件處理中的重要職責(zé),這就要求相關(guān)人員不僅必須具食品安全保障的基本能力,還應(yīng)具應(yīng)對(duì)各類食源性致病菌引起的突發(fā)公共衛(wèi)生事件的監(jiān)測(cè)、檢驗(yàn)?zāi)芰?,為食品安全預(yù)警提供科學(xué)的技術(shù)支持。與傳統(tǒng)的微生物檢測(cè)方法相比,一些更加快速,準(zhǔn)確的新方法正在逐步普及。特別是一些生化和分子生物學(xué)儀器的使用,既節(jié)省了人力成本和時(shí)間,也提高了檢測(cè)的靈敏度和準(zhǔn)確性。為了進(jìn)一步的了解食源性致病菌的流行病學(xué)特點(diǎn)及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),我們邀請(qǐng)到湖北省疾病預(yù)防控制中心的馬弋老師,請(qǐng)他與大家共同分享解決食源性致病菌檢測(cè)問(wèn)題的成功經(jīng)驗(yàn)。
記者:常見(jiàn)的食源性致病菌檢測(cè)項(xiàng)目有哪些?請(qǐng)舉例說(shuō)明一些常見(jiàn)食源性致病菌的特點(diǎn)及其致病機(jī)理?
馬弋:常見(jiàn)的食源性致病菌檢測(cè)項(xiàng)目主要分為定量檢測(cè)和定性檢測(cè),定量檢測(cè)主要是針對(duì)一些衛(wèi)生指標(biāo)菌,它能反映出食品受到污染的程度,例如細(xì)菌總數(shù)和大腸菌群的檢測(cè);而定性檢測(cè)的致病菌一般都是在某一類食品中不得檢出的,不同的食品容易受到污染的致病菌也有所不同,比如說(shuō)禽類食品容易受到沙門氏菌的污染,沙門氏菌是一種常見(jiàn)的腸道病原菌,全世界已發(fā)現(xiàn)的血清型有2500多種,不產(chǎn)生外毒素,有較強(qiáng)的內(nèi)毒素,并有一定的侵襲力,個(gè)別菌還能產(chǎn)生腸毒素,其中傷寒沙門氏菌能夠引起腸熱癥為主的傷寒,副傷寒,是我國(guó)《傳染病防治法》中規(guī)定報(bào)告的乙類傳染病之一,而非傷寒沙門氏菌則會(huì)引起胃腸炎和敗血癥。與此同時(shí),嬰幼兒奶粉及米粉中的阪崎腸桿菌的安全性問(wèn)題,近年來(lái)已成為全球關(guān)注的焦點(diǎn),2008版的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T4789《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)》就把它作為新增菌納入進(jìn)去,它主要引起嬰兒患上腦膜炎,壞死性小腸結(jié)腸炎、菌血癥和嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥。此外,海產(chǎn)品中以副溶血性弧菌最為常見(jiàn),該菌進(jìn)入人體后會(huì)在消化道內(nèi)迅速繁殖生長(zhǎng),產(chǎn)生大量的腸毒素?;颊邥?huì)出現(xiàn)劇烈腹痛、腹瀉,嘔吐和發(fā)熱,大多數(shù)患者會(huì)中度脫水,如果搶救不及時(shí),患者會(huì)因?yàn)閲?yán)重脫水而有生命危險(xiǎn)。
記者:結(jié)合您多年來(lái)微生物檢驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)?zāi)X(jué)得微生物檢驗(yàn)的難點(diǎn)及核心要素主要體現(xiàn)在哪些方面?
馬弋:我個(gè)人覺(jué)得最大的難點(diǎn)及核心是對(duì)致病菌的定量檢測(cè),因?yàn)橹虏【L(zhǎng)期與人類共存,大部分致病菌都是我們腸道內(nèi)常見(jiàn)的菌群,大多都是條件致病菌,只有達(dá)到一定的量,超過(guò)了一定的發(fā)病閾值才引起發(fā)病,所以食物中檢出陽(yáng)性致病菌并不一定發(fā)病,而且食物的一些加工過(guò)程也可以殺滅致病菌,所以定量的概念很重要。由于細(xì)菌的生長(zhǎng)和環(huán)境密切相關(guān),數(shù)量是不斷在發(fā)生變化的,所以最難的還是定量。再一個(gè)就是細(xì)菌的耐藥性,現(xiàn)在由于抗生素的濫用,導(dǎo)致臨床醫(yī)生很難選擇合適的抗生素對(duì)病人進(jìn)行救治,所以在監(jiān)測(cè)致病菌的同時(shí)最好能對(duì)其耐藥譜進(jìn)行一個(gè)檢測(cè)。如果只做定性檢測(cè),難點(diǎn)在于檢測(cè)方法的靈敏度,這跟檢驗(yàn)人員的經(jīng)驗(yàn),培養(yǎng)基的質(zhì)量,儀器設(shè)的使用等因素相關(guān)。
記者:鑒于食源性致病菌的上述特性,其檢測(cè)技術(shù)也需要不斷更新以滿足檢測(cè)高要求,那么未來(lái)一段時(shí)間內(nèi),檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展方向是什么?
馬弋:與傳統(tǒng)的檢測(cè)方法相比較,新型的微生物檢測(cè)技術(shù)正向快速的分子生物學(xué)技術(shù),免疫學(xué)技術(shù),代謝技術(shù)、基因指紋圖譜技術(shù),自動(dòng)化儀器、生物傳感器等方向發(fā)展。
記者:在此您能否介紹幾種新的檢測(cè)方法?
馬弋:新型快速檢測(cè)技術(shù):
1、API手工生化鑒定系統(tǒng):最常見(jiàn)的有用于革蘭氏陰性桿菌鑒定的API20E。
2、以免疫學(xué)方法建立的快速檢測(cè)技術(shù):免疫測(cè)定法的代表技術(shù)是ELISA技術(shù),是抗原或抗體吸附到固相載體上作為一種試劑,來(lái)檢測(cè)標(biāo)本中有無(wú)相應(yīng)的抗體或抗原的一種方法。ELISA具有高度的特異性和敏感性,幾乎所有可溶性的抗原抗體反應(yīng)系統(tǒng)均可檢測(cè)。與免疫熒光技術(shù)相比,ELISA敏感性高,不需特殊設(shè),結(jié)果觀察簡(jiǎn)便。
3、分子生物學(xué)方法鑒定系統(tǒng):是從分子生物學(xué)水平上研究生物大分子特別是核酸結(jié)構(gòu)及其組成部分。在此基礎(chǔ)上建立的眾多檢測(cè)技術(shù)中,核酸探針和聚合酶鏈反應(yīng),以其敏感,特異,簡(jiǎn)便、快速的特點(diǎn)成為世人矚目的生物技術(shù)革命的新產(chǎn)物,除了可用于初篩檢測(cè),由于其具有高特異性和敏感性,也可直接用于微生物的鑒定。
4、自動(dòng)化儀器。
半自動(dòng)微生物鑒定系統(tǒng):是由微量生化檢測(cè)系統(tǒng)發(fā)展而來(lái)。其原理是將各種不同的生化反應(yīng)組成專一鑒定試劑條(或板)。經(jīng)培養(yǎng)后用光電讀數(shù)器自動(dòng)讀數(shù),將數(shù)據(jù)自動(dòng)傳送到計(jì)算機(jī),由計(jì)算機(jī)分析處理,并打印結(jié)果分析報(bào)告。這一類的鑒定系統(tǒng)主要有:ATB(法國(guó)梅里埃公司),BIOLOG(美國(guó)BIOLOG)等,半自動(dòng)微生物鑒定系統(tǒng)除了鑒定微生物外,也可進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。
Vitek全自動(dòng)細(xì)菌鑒定系統(tǒng):采用光電技術(shù),電腦技術(shù)和細(xì)菌八進(jìn)位制數(shù)碼鑒定相結(jié)合。對(duì)各反應(yīng)孔底物進(jìn)行光掃描,動(dòng)態(tài)觀察反應(yīng)變化,一旦試卡內(nèi)終點(diǎn)指示孔到達(dá)臨界值,指示反應(yīng)完成,系統(tǒng)將最后一次判讀的結(jié)果所得生物數(shù)碼與菌種庫(kù)標(biāo)準(zhǔn)菌生物模型相比較,經(jīng)矩陣分析得出鑒定值和鑒定結(jié)果,并自動(dòng)打印報(bào)告。
首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京天壇醫(yī)院實(shí)驗(yàn)診斷中心就是這樣一個(gè)從事健康評(píng)價(jià)、高危預(yù)測(cè)和個(gè)體化診斷的綜合平臺(tái)。健康評(píng)價(jià)即我們常說(shuō)的健康體檢,高危預(yù)測(cè)是指對(duì)基因檢測(cè)結(jié)果和家族史等信息進(jìn)行綜合分析后所提出的易發(fā)生疾病人群的提示。個(gè)體化診斷是綜合當(dāng)代科學(xué)理論及技術(shù)手段,結(jié)合中醫(yī)辨證的理論,對(duì)個(gè)體進(jìn)行全面分析后得出的針對(duì)個(gè)體的評(píng)價(jià)和診斷,從而指導(dǎo)個(gè)體化醫(yī)療建立實(shí)驗(yàn)室健康評(píng)估體系。
實(shí)驗(yàn)室在保障人類健康上的作用越來(lái)越重要,社會(huì)性、標(biāo)準(zhǔn)化國(guó)際性是對(duì)先進(jìn)實(shí)驗(yàn)室提出的要求。國(guó)際上對(duì)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室從技術(shù)能力、管理能力等不同的角度上進(jìn)行評(píng)價(jià)。近年來(lái),國(guó)際醫(yī)學(xué)界非常重視醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量管理國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織頒布了《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力專用要求》,即lS015189,以推動(dòng)全球?qū)嶒?yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化,規(guī)范化建設(shè),2004年中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可委員會(huì)將此標(biāo)準(zhǔn)引進(jìn)了國(guó)內(nèi),并把它作為一個(gè)與國(guó)際接軌的方法進(jìn)行執(zhí)行,幾年來(lái),我國(guó)僅有8個(gè)實(shí)驗(yàn)室通過(guò)認(rèn)可。北京天壇醫(yī)院實(shí)驗(yàn)診斷中心負(fù)責(zé)人康熙雄教授不但在專業(yè)領(lǐng)域是頂尖學(xué)者,而且具有很強(qiáng)的管理能力,他所領(lǐng)導(dǎo)的北京天壇醫(yī)院實(shí)驗(yàn)診斷中心是首批被認(rèn)證的實(shí)驗(yàn)室,這意味著北京天壇醫(yī)院實(shí)驗(yàn)診斷中心在臨床標(biāo)本檢測(cè),藥品評(píng)估等方面已經(jīng)實(shí)現(xiàn)國(guó)際互認(rèn),患者拿到此處出具的檢驗(yàn)報(bào)告單在國(guó)外也同樣有效。
為了發(fā)展和不斷提高,天壇醫(yī)院實(shí)驗(yàn)診斷中心堅(jiān)持發(fā)展科研,不斷探索,在與相關(guān)專家反復(fù)研討后,先后在健康評(píng)價(jià)體系和檢測(cè)方法的研究等方面承擔(dān)國(guó)家和地方的課題7項(xiàng),建立了新生兒,少年、青年、壯年、老年以及女性的生長(zhǎng)不同期所需要的評(píng)價(jià)體系,深入研究個(gè)體化診斷。
今年天壇醫(yī)院實(shí)驗(yàn)診斷中心承辦2007年全國(guó)現(xiàn)代免疫診斷方法暨高通量檢測(cè)技術(shù)臨床研究發(fā)展論壇,討論了在健康評(píng)價(jià)手段和檢測(cè)方法等方面的國(guó)內(nèi)外新進(jìn)展。來(lái)自全國(guó)21個(gè)省市自治區(qū)的近400名代表們歡聚一堂討論了世界本行業(yè)最新話題。會(huì)議中,通過(guò)互聯(lián)網(wǎng)實(shí)現(xiàn)了國(guó)內(nèi)專家與美國(guó)專家的實(shí)時(shí)在線討論,引進(jìn)美國(guó)同行的思路,引進(jìn)他們?cè)诩夹g(shù)和管理等方面的先進(jìn)經(jīng)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)診斷中心負(fù)責(zé)人康熙雄,現(xiàn)任首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京天壇醫(yī)院實(shí)驗(yàn)診斷中心主任、主任醫(yī)師、教授、博士生導(dǎo)師、首都醫(yī)科大學(xué)臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)系主任,中國(guó)檢驗(yàn)醫(yī)師協(xié)會(huì)副會(huì)長(zhǎng)、全國(guó)診斷學(xué)指導(dǎo)委員會(huì)主任委員、中國(guó)實(shí)驗(yàn)室管理協(xié)會(huì)常務(wù)委員、中國(guó)衛(wèi)生部標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)檢驗(yàn)分會(huì)委員。
“以前,我們只認(rèn)識(shí)到人體2000個(gè)功能基因,醫(yī)院檢驗(yàn)科只能提供幾十個(gè)到上百個(gè)檢驗(yàn)項(xiàng)目,進(jìn)入21世紀(jì),我們已經(jīng)認(rèn)識(shí)到人體的功能基因約有3萬(wàn)個(gè),這就對(duì)我們檢驗(yàn)科提出了一個(gè)問(wèn)題,我們到底要檢查幾項(xiàng)? 200個(gè)?還是2000個(gè)?還是兩萬(wàn)個(gè)?同時(shí),我們獲取到近萬(wàn)個(gè)參數(shù),又該如何處理這些信息,并通過(guò)這些信息來(lái)評(píng)價(jià)患者健康和疾病狀態(tài)呢?這些都是我們要討論和研究的?!?/p>
康熙雄教授多年從事臨床檢驗(yàn)診斷學(xué),臨床免疫病、腫瘤的診斷和治療等工作,曾在東京大學(xué)參加腫瘤基因治療,在神經(jīng)系統(tǒng)自身免疫性疾病,自身免疫性腎病等自身免疫病及腫瘤的臨床診治方面積累了豐富的經(jīng)驗(yàn),2002年康教授提出“個(gè)體化診斷系統(tǒng)的建立和臨床應(yīng)用”的研究方向,并利用分子生物學(xué)等各種前沿方法學(xué),進(jìn)行“藥物代謝基因組學(xué)、臨床蛋白組學(xué)、臨床代謝組學(xué)、功能蛋白相互作用疾病診斷模型”等多方位的實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)臨床應(yīng)用研究,主編出版了《臨床電泳》《臨床蛋白質(zhì)組學(xué)》《臨床免疫學(xué)》等多部專著,多篇論文被SCI收錄。目前,在他的積極籌劃下,以天壇醫(yī)院實(shí)驗(yàn)診斷中心為基地,搭建起包括多種先進(jìn)儀器設(shè)備蛋白質(zhì)飛行質(zhì)譜檢測(cè)儀、高效液相色譜、凝膠成像系統(tǒng)、基因芯片儀、懸浮微陣列檢測(cè)儀、熒光定量實(shí)時(shí)在線核酸擴(kuò)增儀、流式細(xì)胞儀、蛋白芯片檢測(cè)儀、芯片點(diǎn)樣儀、細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)等)的共享性的臨床蛋白質(zhì)組學(xué)檢測(cè)平臺(tái)、基因檢測(cè)平臺(tái)、細(xì)胞培養(yǎng)平臺(tái)、為開(kāi)展臨床科研工作提供了良好的條件,也具備了應(yīng)對(duì)嚴(yán)重生物性災(zāi)害的應(yīng)急能力。
2003年的SARS考驗(yàn)著每一個(gè)醫(yī)藥工作者,為保護(hù)人民大眾的健康,檢驗(yàn)工作更不能有任何閃失,在SARS過(guò)后更應(yīng)該如此,SARS期間,康教授領(lǐng)導(dǎo)天壇醫(yī)院實(shí)驗(yàn)診斷中心承擔(dān)了863子課題“傳染性非典型肺炎流行病學(xué)特征及其早期快速診斷技術(shù)應(yīng)用”的研究,并總結(jié)抗擊SARS過(guò)程中實(shí)驗(yàn)室診斷經(jīng)驗(yàn),先后主編出版了《SARS實(shí)驗(yàn)室診斷》(人民衛(wèi)生出版社)、《“非典”的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及診斷》(科技出版社),于2003年7月參加國(guó)際SARS研討會(huì)并作大會(huì)發(fā)言得到國(guó)際組織和專業(yè)團(tuán)體的關(guān)注,也得到總理的肯定和市政府的嘉獎(jiǎng)。
醫(yī)學(xué)研究生的培養(yǎng)是醫(yī)學(xué)人才培養(yǎng)體系的重要組成部分,隨著我國(guó)社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展,對(duì)醫(yī)學(xué)研究生的培養(yǎng)提出了新的要求。由于基礎(chǔ)研究與臨床實(shí)踐相結(jié)合是醫(yī)學(xué)發(fā)展的必然趨勢(shì),無(wú)論是臨床醫(yī)生還是基礎(chǔ)研究人員都認(rèn)識(shí)到加強(qiáng)臨床與基礎(chǔ)結(jié)合的重要性[2],因此,在醫(yī)學(xué)教育過(guò)程中采取基礎(chǔ)與臨床相結(jié)合的培養(yǎng)模式,為醫(yī)學(xué)人才培養(yǎng)體系的創(chuàng)新和改革提供了新的思路。
基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)是我校重點(diǎn)建設(shè)學(xué)科,和其他醫(yī)學(xué)院校相似,我校的基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究生在招生、培養(yǎng)和就業(yè)中存在生源欠佳、培養(yǎng)模式和課程設(shè)置不合理、學(xué)科發(fā)展薄弱、就業(yè)渠道不暢等問(wèn)題[M]。如果采取基礎(chǔ)與臨床相結(jié)合的模式進(jìn)行培養(yǎng),將有助于提高基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究生的綜合醫(yī)學(xué)研究素質(zhì),拓寬學(xué)術(shù)視野和就業(yè)途徑。
但是,在培養(yǎng)過(guò)程中如何做到臨床醫(yī)學(xué)與基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)有機(jī)融合,以及在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)各學(xué)科和專業(yè)中的具體操作措施,還是一個(gè)值得探討和研究的課題。近年來(lái),針對(duì)我?;A(chǔ)醫(yī)學(xué)研究生教育中曾存在的基礎(chǔ)研究與臨床實(shí)踐脫節(jié)等情況,我們?cè)趯?dǎo)師選拔、課程設(shè)置和學(xué)位論文課題等方面注重基礎(chǔ)與臨床的有機(jī)結(jié)合,積極探索基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究生培養(yǎng)模式的理論創(chuàng)新和實(shí)踐改革,并取得了初步成效,進(jìn)一步推動(dòng)和加強(qiáng)了我?;A(chǔ)醫(yī)學(xué)教師與臨床一線醫(yī)技人員的交流和融合,提高了基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究生的培養(yǎng)質(zhì)量。
1增強(qiáng)基礎(chǔ)研究人員與臨床醫(yī)技人員的交流,組建聯(lián)合導(dǎo)師組
為了保證基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究生解決臨床實(shí)際問(wèn)題的學(xué)術(shù)視野和科研技能,在師資力量配備上注重基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)教師和臨床醫(yī)技人員的交叉與融合。我們利用學(xué)校附屬醫(yī)院的資源組建了臨床與基礎(chǔ)相結(jié)合的師資隊(duì)伍,根據(jù)研究方向,由基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)教師和相關(guān)臨床醫(yī)技人員組建聯(lián)合導(dǎo)師組。
例如,聯(lián)合神經(jīng)外科、骨科和腦外科等臨床科室的教師組建人體解剖與組織胚胎學(xué)專業(yè)導(dǎo)師組,聯(lián)合醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科、感染科等科室的教師組建病原生物學(xué)和免疫學(xué)專業(yè)導(dǎo)師組,聯(lián)合病理科、腫瘤科和ICU等科室的教師組建病理學(xué)與病理生理學(xué)專業(yè)導(dǎo)師組,聯(lián)合放射科、核醫(yī)學(xué)等臨床科室的教師組建放射醫(yī)學(xué)專業(yè)導(dǎo)師組。導(dǎo)師組根據(jù)學(xué)生人學(xué)前的專業(yè)基礎(chǔ)、研究方向及學(xué)生的研究興趣,制定基于臨床實(shí)踐與基礎(chǔ)研究相結(jié)合的個(gè)性化培養(yǎng)方案,在基礎(chǔ)導(dǎo)師和臨床導(dǎo)師的共同指導(dǎo)下,完成學(xué)位論文選題、課題設(shè)計(jì)及實(shí)施,并且保證每個(gè)研究生可以在與研究方向相關(guān)的臨床科室調(diào)研、實(shí)習(xí)或?qū)嵺`,充分依托臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)資源為基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)人才培養(yǎng)服務(wù)。
2調(diào)整課程設(shè)置
為了適應(yīng)社會(huì)發(fā)展趨勢(shì),近年來(lái)我們?cè)谘芯可n程設(shè)置方面進(jìn)行了優(yōu)化調(diào)整。首先,調(diào)整了公共課考試方式和授課學(xué)時(shí),在對(duì)中國(guó)特色社會(huì)主義理論與實(shí)踐研究和自然辯證法等課程的考試方式進(jìn)行改革的基礎(chǔ)上,減少了英語(yǔ)和計(jì)算機(jī)應(yīng)用課程的授課學(xué)時(shí)(分別從〗〇8學(xué)時(shí)和54學(xué)時(shí)縮減為72學(xué)時(shí)和36學(xué)時(shí))。
基于網(wǎng)絡(luò)信息環(huán)境中的文獻(xiàn)檢索教學(xué)內(nèi)容和方式的新變化,醫(yī)學(xué)信息檢索與應(yīng)用課程由25學(xué)時(shí)縮減為18學(xué)時(shí)。公共課的調(diào)整為學(xué)生提供了更多專業(yè)實(shí)踐的學(xué)習(xí)時(shí)間。專業(yè)基礎(chǔ)課的設(shè)置方面,僅保留了高級(jí)生物化學(xué)、高級(jí)免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、醫(yī)學(xué)科研方法學(xué)等共同基礎(chǔ)課程,其他課程由學(xué)生和導(dǎo)師組根據(jù)學(xué)生入學(xué)前所學(xué)專業(yè)及課程、研究方向等因素共同商定,實(shí)現(xiàn)了基于學(xué)生個(gè)人基礎(chǔ)和不同專業(yè)、方向培養(yǎng)目標(biāo)的個(gè)性化培養(yǎng)。
在基礎(chǔ)課程的教學(xué)實(shí)踐中,我們注重加強(qiáng)科研實(shí)驗(yàn)技能的訓(xùn)練以及基礎(chǔ)課程與臨床課程的整合,多開(kāi)設(shè)臨床問(wèn)題相關(guān)的專題實(shí)驗(yàn),傳授更多的技術(shù)方法,以提高學(xué)生解決臨床問(wèn)題的基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)科研能力。
3加強(qiáng)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床實(shí)踐的學(xué)術(shù)交流,鼓勵(lì)基于臨床問(wèn)題的選題研究
醫(yī)學(xué)研究的深人發(fā)展離不開(kāi)基礎(chǔ)研究人員與臨床醫(yī)生的溝通。我們既鼓勵(lì)基礎(chǔ)研究人員深人臨床實(shí)踐一線尋找有意義的研究課題,也重視臨床一線醫(yī)技人員通過(guò)自己的臨床實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)為基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)教學(xué)和研究提供豐富的素材。為此,我們定期組織基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)教學(xué)和研究人員、臨床醫(yī)技人員、研究生進(jìn)行學(xué)術(shù)交流會(huì),就肝炎、腫瘤、心血管疾病、代謝性疾病、神經(jīng)退行性疾病、糖尿病、衰老、感染與免疫等重大疾病及基礎(chǔ)與臨床研究專題展開(kāi)經(jīng)驗(yàn)交流并探討相關(guān)問(wèn)題,最終實(shí)現(xiàn)以發(fā)現(xiàn)和解決臨床問(wèn)題為導(dǎo)向的有效溝通和共同攻關(guān)。
在這種交流中,基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)教學(xué)和研究人員以及研究生可以敏銳地從臨床中發(fā)現(xiàn)自己所要研究的問(wèn)題,且可以得到臨床實(shí)踐人員的積極反饋,真正做到基礎(chǔ)研究與臨床實(shí)踐的協(xié)同發(fā)展,并促進(jìn)醫(yī)學(xué)研究逐漸深人,從而創(chuàng)新了研究生培養(yǎng)模式[5,6]。
4促進(jìn)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)各學(xué)科整合及與臨床醫(yī)學(xué)的融合,加強(qiáng)學(xué)科建設(shè)
基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)作為醫(yī)學(xué)各學(xué)科的重要支撐,加強(qiáng)其學(xué)科建設(shè)非常必要。為了充分實(shí)現(xiàn)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床醫(yī)學(xué)之間的交叉融合,我們首先在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)各學(xué)科之間進(jìn)行了整合:將原有的人體解剖學(xué)和組織胚胎學(xué)兩個(gè)學(xué)科合并,將生理學(xué)、病理生理學(xué)整合為人體機(jī)能學(xué),將微生物學(xué)、寄生蟲(chóng)學(xué)和免疫學(xué)整合為病原生物學(xué)與免疫學(xué)。此外,我們還建設(shè)了由人體解剖、組織胚胎、病理解剖及病原生物等標(biāo)本模塊組成的人體科學(xué)教育中心和生命科學(xué)教育中心,作為醫(yī)學(xué)人才培養(yǎng)、基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究與臨床實(shí)踐緊密結(jié)合的重要基地,有效實(shí)現(xiàn)了學(xué)科間科學(xué)研究和教學(xué)資源的整合,促進(jìn)了基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)內(nèi)部各學(xué)科和人才培養(yǎng)體系的協(xié)調(diào)發(fā)展。同時(shí),在學(xué)科群組建、教師申報(bào)科研課題和研究生培養(yǎng)過(guò)程中建立“以健康和疾病為基礎(chǔ),以解決實(shí)際臨床問(wèn)題為導(dǎo)向”的基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究和人才培養(yǎng)新模式,結(jié)合學(xué)校相關(guān)政策支持,注重基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)教師和研究生的個(gè)人發(fā)展,不斷提高自身專業(yè)知識(shí)和科研素質(zhì),提升基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)的學(xué)科整體發(fā)展水平。
資料與方法
實(shí)驗(yàn)對(duì)象:實(shí)驗(yàn)標(biāo)本來(lái)自天津市泰達(dá)醫(yī)院體檢中心、天津市第三中心醫(yī)院及天津市腫瘤醫(yī)院的被檢者。正常對(duì)照組100例,男53例,女47例,年齡29~56歲,為健康的體檢者;上消化道出血確診人群44例,男24例,女20例,年齡44~78歲;下消化道出血的確診人群56例,男26例,女30例,年齡54~91歲。
實(shí)驗(yàn)方法:各種檢測(cè)方法的操作按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。每1份標(biāo)本在相同條件下用3種方法檢測(cè),記錄測(cè)定結(jié)果,用于對(duì)比分析。
結(jié)果
用蒸餾水和抗凝的新鮮全血配制一定濃度的血紅蛋白溶液,用3種方法進(jìn)行靈敏度的檢測(cè)。見(jiàn)表1。
血紅蛋白膠體金法和轉(zhuǎn)鐵蛋白膠體金法靈敏度幾乎相同,而化學(xué)法敏感性相對(duì)較低。
構(gòu)建量化模型標(biāo)本。見(jiàn)表2。
血紅蛋白濃度0mg/L,結(jié)果均為陰性,說(shuō)明pH不對(duì)其產(chǎn)生影響。血紅蛋白濃度相同時(shí),pH不同時(shí)發(fā)生了變化,且pH越?。ㄋ岫仍酱螅┯绊懺酱?。
血紅蛋白膠體金法檢測(cè)結(jié)果。見(jiàn)表3。
血紅蛋白濃度14000和7000由于濃度太高產(chǎn)生后代現(xiàn)象,但酸度越大影響越小,說(shuō)明鹽酸破壞部分血紅蛋白。
轉(zhuǎn)鐵蛋白膠體金法檢測(cè)結(jié)果。見(jiàn)表4。
轉(zhuǎn)鐵蛋白在pH 1~5時(shí)與空白對(duì)照(蒸餾水)相比均受到影響,但與血紅蛋白膠體金法,影響有所減小。
健康體檢者和內(nèi)鏡確診的消化道出血患者糞便標(biāo)本結(jié)果。見(jiàn)表5。
試驗(yàn)結(jié)果與臨床診斷對(duì)比分析。見(jiàn)表6和表7。
討論
從以上結(jié)果可以看出,化學(xué)法對(duì)血紅蛋白的檢出最低濃度10mg/L,而血紅蛋白和轉(zhuǎn)鐵蛋白膠體金法靈敏度比化學(xué)法高得多,其檢出最低濃度為0.2mg/L,最高檢出濃度可達(dá)2000mg/L,當(dāng)人血紅蛋白濃度>2000mg/L時(shí),測(cè)試結(jié)果出現(xiàn)假陰性,與楊新原等1報(bào)道的膠體金法檢測(cè)便隱血的后帶現(xiàn)象相符。這種現(xiàn)象主要是由免疫學(xué)中抗原抗體反應(yīng)的原理引起的。其原理基于免疫學(xué)抗原抗體反應(yīng),亦遵循pH抗原抗體反應(yīng)特點(diǎn),抗原抗體比例合適反應(yīng)最充分。若抗原極度過(guò)剩則無(wú)反應(yīng)物形成,稱為后帶現(xiàn)象。過(guò)量大出血糞便中血紅蛋白濃度過(guò)高,致使反應(yīng)體系抗原過(guò)剩,便隱血試驗(yàn)出現(xiàn)假陰性
結(jié)果?;瘜W(xué)法試劑屬匹拉米洞法,利用匹拉米洞當(dāng)作呈色指示劑,在酸及過(guò)氧化氫(H2O2)的作用下,與血紅蛋白反應(yīng),產(chǎn)生經(jīng)鹽酸作用過(guò)的血紅蛋白對(duì)改良的匹拉米洞化學(xué)法、血紅蛋白膠體金法、轉(zhuǎn)鐵蛋白膠體金法與蒸餾水相比均受到影響。產(chǎn)生這種結(jié)果的原因有兩個(gè):pH紫藍(lán)紫紅的顏色。
的影響或(和)鹽酸本身的影響。鹽酸為酸性物質(zhì),對(duì)于抗原抗體的結(jié)合可能有一定的影響,將表中各管各取出一部分加入適量NaHCO3粉劑,調(diào)整各管至中
性(用pH值試紙測(cè)),再用3種方法進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果不發(fā)生改變。調(diào)整了pH值后結(jié)果仍與沒(méi)有調(diào)整pH值前的結(jié)果相同,說(shuō)明不是pH過(guò)低影響的,而是鹽酸破壞了的抗原結(jié)構(gòu)造成的,這種破壞是不可逆性的。通常所謂的胃酸即指鹽酸,其分泌濃度約150mmol/L,在胃液和食物等其他物質(zhì)混合后有所下降2。正常胃液的pH值0.9~1.8。所以檢測(cè)嘔吐物和胃液隱血時(shí),也應(yīng)考慮到胃液中酸性成分的影響,最好采用化學(xué)法測(cè)定。
健康人對(duì)照組在正常飲食情況下留取糞便標(biāo)本,血紅蛋白膠體金法、轉(zhuǎn)鐵蛋白膠體金法、Hb、Tf聯(lián)合檢測(cè)法陽(yáng)性均為1例,檢出率1%,而化學(xué)法檢出9例(含與其他3種方法重疊陽(yáng)性1例)。經(jīng)隨訪得知,該患者留取糞便前一天鼻出血,部分血液吞咽入胃。其他8例陽(yáng)性者,與正常入食的肉類、蔬菜相關(guān)聯(lián),屬于假陽(yáng)性。本組約有半數(shù)消化道出血患者糞便隱血未被檢出。其原因可能有:①糞便中血紅蛋白含量太高,出現(xiàn)“后帶現(xiàn)象”,造成假陰性結(jié)果;②出血后,紅細(xì)胞在腸道停留時(shí)間久,血紅蛋白被消化酶降解或被細(xì)菌充分分解消化,使其免疫原性喪失;③患者血紅蛋白的抗原與單克隆抗體不匹配的原因3。轉(zhuǎn)鐵蛋白膠體金法:44例上消化道出血患者糞便隱血34例陽(yáng)性,檢出率77.3%;56例下消化道出血患者糞便隱血檢出44例陽(yáng)性,檢出率78.6%。聯(lián)合檢測(cè)上、下消化道出血患者糞便檢出率分別為86.4%、89.3%。研究表明轉(zhuǎn)鐵蛋白與糞便混懸液在37℃孵育4小時(shí)后4,其抗原性無(wú)明顯改變,而血紅蛋白抗原活性已喪失65%,由此可見(jiàn)轉(zhuǎn)鐵蛋白在腸道內(nèi)抗菌能力強(qiáng),自身穩(wěn)定性高于血紅蛋白5,還可以克服被檢標(biāo)本中的血紅蛋白在胃腸道內(nèi)滯留時(shí)間過(guò)長(zhǎng)而被分解或破壞,使其失去原有的免疫原性而出現(xiàn)的“假陰性”結(jié)果,因此,轉(zhuǎn)鐵蛋白膠體金法是提高消化道出血檢出率的良好指標(biāo)。
由于糞便混有血液與檢測(cè)其他液體中的血紅蛋白有所不同,因此欲獲得高符合率結(jié)果,必須遵照操作規(guī)程和說(shuō)明書(shū)使用,在糞便樣本的多部位或多次取樣。從而提高消化道出血、消化道腫瘤病變及潰瘍出血的檢出率,為臨床提供其準(zhǔn)確可靠出血診斷依據(jù),但臨床仍需綜合相關(guān)檢查及患者的臨床癥狀對(duì)消化道的出血作出準(zhǔn)確判斷。
參考文獻(xiàn)
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