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摘要:在水質(zhì)環(huán)境的監(jiān)測中,微生物檢測是一項(xiàng)重要內(nèi)容。與化學(xué)檢驗(yàn)不同,水質(zhì)微生物檢驗(yàn)是一個(gè)不斷變化的生物體。在微生物檢驗(yàn)中由于檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性受多方面因素的影響,因此,只有加強(qiáng)對微生物檢驗(yàn)質(zhì)量的控制,才能確保檢測結(jié)果準(zhǔn)確無誤。
關(guān)鍵詞:水質(zhì)微生物檢測;影響因素;質(zhì)量控制
引言
本文從人員、環(huán)境、儀器設(shè)備、培養(yǎng)基、樣品的采集這五個(gè)方面闡述了影響水質(zhì)微生物檢驗(yàn)的相關(guān)因素,并從各個(gè)環(huán)節(jié)著手,希望通過加強(qiáng)水質(zhì)微生物檢測的質(zhì)量控制來提高微生物檢驗(yàn)工作的質(zhì)量,進(jìn)而保證檢驗(yàn)檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠。
1常見水質(zhì)微生物檢測結(jié)果的影響因素
1.1人員
微生物檢驗(yàn)人員上崗前應(yīng)接受與其所承擔(dān)的工作任務(wù)相適應(yīng)的培訓(xùn),并對培訓(xùn)技能進(jìn)行資格確認(rèn)后取得上崗證。檢驗(yàn)人員需熟悉所承擔(dān)檢驗(yàn)項(xiàng)目的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)、規(guī)范和操作規(guī)程,能獨(dú)立負(fù)責(zé)并正確評價(jià)檢測結(jié)果;熟練掌握所用儀器設(shè)備的性能和使用方法,并嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行操作;還應(yīng)熟悉微生物檢驗(yàn)檢測安全操作知識(shí)和消毒知識(shí)。
1.2儀器設(shè)備
微生物實(shí)驗(yàn)室的儀器設(shè)備應(yīng)以一臺(tái)一檔的方式建立檔案,檔案則應(yīng)當(dāng)包含其基本信息。此外,每臺(tái)儀器應(yīng)安排保管人員負(fù)責(zé)儀器設(shè)備的保管和日常維護(hù)。目前,微生物實(shí)驗(yàn)室常用的儀器設(shè)備包括:冰箱、培養(yǎng)箱、高壓滅菌器、超凈工作臺(tái)、顯微鏡、溫度計(jì)、紫外燈等。使用儀器設(shè)備的人員必須熟悉和掌握操作規(guī)程,防止操作不當(dāng)造成事故。
1.3環(huán)境設(shè)施
水質(zhì)微生物檢測很大程度上會(huì)受環(huán)境影響,因此需要做到如下幾點(diǎn)。第一,保持實(shí)驗(yàn)室內(nèi)良好的通風(fēng)和無塵狀態(tài)——為減少灰塵、大氣流、溫度變化等因素產(chǎn)生的影響,安裝空調(diào)是解決這些影響因素的最佳方式之一。第二,每次接種前,需將無菌室用紫外燈消毒30分鐘,消毒完畢后關(guān)閉紫外燈,等待30分鐘后人員方可進(jìn)入無菌室;人員進(jìn)入無菌室后需打開超凈工作臺(tái)后方可工作;工作完畢后需再次將紫外燈打開殺菌。第三,微生物檢驗(yàn)室應(yīng)盡量避免外來人員出入,以減少空氣流動(dòng),避免不潔空氣的帶入。第四,在樣品移至無菌室前,須先將采樣瓶體外壁用酒精棉擦拭,然后換上無菌工作服和拖鞋,戴好手套、口罩等,再將其移至無菌室內(nèi),從而避免與實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部環(huán)境發(fā)生交叉污染。第五,無菌室應(yīng)定期進(jìn)行沉降菌的測試和環(huán)境的驗(yàn)證,環(huán)境合格后才能開展檢測工作。沉降菌的測試方法[1]為,采用大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基(TSA)配制的培養(yǎng)皿采樣后,置于30~35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),時(shí)間不少于2d。每批培養(yǎng)基均應(yīng)設(shè)置對照試驗(yàn),以檢驗(yàn)培養(yǎng)基本身是否被污染。
1.4樣品的采集和保存
1.4.1樣品的采集水樣應(yīng)使用121℃經(jīng)15min高壓滅菌處理的玻璃瓶采集。同一水源且同一時(shí)間采集幾類檢測指標(biāo)的水樣時(shí),應(yīng)先采集供檢測微生物指標(biāo)的水樣,且采樣時(shí)應(yīng)直接采集,不得用水樣涮洗已滅菌的采樣瓶,以避免手指和其他物品沾污瓶口[2]。
1.4.2樣品保存采集的水樣應(yīng)立即送檢,時(shí)間不得超過2小時(shí)。如無法及時(shí)送檢,應(yīng)將樣品置于冰箱中,但不得超過24小時(shí),否則會(huì)影響檢測結(jié)果[3]。
1.5培養(yǎng)基的制備
培養(yǎng)基是促使微生物生長繁殖、分離微生物純種,以及鑒別微生物的營養(yǎng)物質(zhì)。培養(yǎng)基的制備是微生物檢測工作中最為重要的環(huán)節(jié)之一。培養(yǎng)基經(jīng)過稱量-調(diào)整pH值-加熱煮沸-過濾-分裝容器-滅菌-備用等一系列制備過程后,應(yīng)能達(dá)到微生物生長所需的要求,如未能達(dá)到要求,微生物就不容易生長或不生長。由于培養(yǎng)基富含營養(yǎng)物質(zhì),易被污染或變質(zhì),故配好后不宜久置,最好現(xiàn)配現(xiàn)用。此外,培養(yǎng)基的質(zhì)量、配制過程及保存方式都會(huì)直接影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
2水質(zhì)微生物檢測結(jié)果的質(zhì)量控制
2.1提高檢驗(yàn)人員的素質(zhì)水平
檢驗(yàn)人員自身素質(zhì)水平的高低會(huì)直接影響到微生物檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,因此可采取以下控制措施。①檢驗(yàn)人員要嚴(yán)格規(guī)范檢驗(yàn)操作流程,在實(shí)驗(yàn)中對每個(gè)操作步驟、每個(gè)檢測環(huán)境都做到嚴(yán)密監(jiān)控。②提高每位檢驗(yàn)人員的素質(zhì)和專業(yè)技能,經(jīng)常針對檢驗(yàn)人員進(jìn)行專業(yè)知識(shí)和操作技能的培訓(xùn),確保每位檢驗(yàn)人員以高度的責(zé)任心做好每個(gè)檢驗(yàn)環(huán)節(jié),從而提高微生物檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性。③采集樣品時(shí)要嚴(yán)格控制樣品質(zhì)量,因?yàn)闃悠焚|(zhì)量的好壞將直接影響最終檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此,在進(jìn)行檢驗(yàn)樣品的采集、處理、運(yùn)送及儲(chǔ)存時(shí),一定要按照操作流程嚴(yán)格操作,這樣才能夠有效提高檢驗(yàn)的質(zhì)量。
2.2做好培養(yǎng)基的質(zhì)量控制
①每一批新購進(jìn)的培養(yǎng)基一定要由專人仔細(xì)核對其名稱、規(guī)格、數(shù)量、成分、外觀特征、批號(hào)、保質(zhì)期等是否符合要求,并做好記錄[4]。②每次配制好的培養(yǎng)基應(yīng)填寫好《培養(yǎng)基配置記錄表》,且必須選取部分培養(yǎng)基放置于36±1℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24小時(shí),無雜菌生長即可待用。如發(fā)現(xiàn)破裂、水分侵入、色澤異常、有菌生長等,均應(yīng)挑出棄用。③已制備好的的培養(yǎng)基不宜保存過久,應(yīng)存放于4℃冰箱內(nèi)。同時(shí),每批培養(yǎng)基應(yīng)注明名稱及配置日期。
2.3加強(qiáng)檢測環(huán)境及儀器設(shè)備的管理
微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具備監(jiān)測和控制環(huán)境條件的能力——組織人員對環(huán)境進(jìn)行監(jiān)控,并保存好相應(yīng)的環(huán)境監(jiān)控記錄。同時(shí),應(yīng)保證工作環(huán)境滿足檢驗(yàn)檢測工作的要求——當(dāng)環(huán)境條件不利于檢驗(yàn)檢測工作的開展時(shí),應(yīng)停止檢驗(yàn)檢測活動(dòng),在進(jìn)行有效處置后方可恢復(fù)。在水質(zhì)微生物檢測工作中,工作環(huán)境要滿足相關(guān)檢驗(yàn)檢測標(biāo)準(zhǔn)或技術(shù)規(guī)范的要求,特別要對無菌室進(jìn)行定期消毒,確保檢驗(yàn)環(huán)境的無菌狀態(tài),從而保證檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠。凡對檢驗(yàn)檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性有顯著影響的儀器設(shè)備,在投入使用前必須經(jīng)過法定計(jì)量機(jī)構(gòu)的檢定或校準(zhǔn)。此外,使用中的儀器設(shè)備需按規(guī)定時(shí)間定期檢定并進(jìn)行日常維護(hù),確保其功能正常并防止性能退化,進(jìn)而保證檢驗(yàn)檢測結(jié)果的質(zhì)量。
2.4實(shí)驗(yàn)室間質(zhì)量控制
為了保證檢驗(yàn)檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,實(shí)驗(yàn)室除內(nèi)部質(zhì)量控制外,還需建立實(shí)驗(yàn)室間質(zhì)量控制制度。開展實(shí)驗(yàn)室間比對能不斷提高實(shí)驗(yàn)室的檢測能力,監(jiān)控實(shí)驗(yàn)室的持續(xù)能力,從而識(shí)別并縮小實(shí)驗(yàn)室之間檢測結(jié)果的差異,提高各實(shí)驗(yàn)室間的微生物檢驗(yàn)質(zhì)量,進(jìn)而獲得可比性較高的準(zhǔn)確檢驗(yàn)結(jié)果。
參考文獻(xiàn):
[1]GB/T16294-2010《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室(區(qū))沉降菌的測試方法》[S].
[2]GB5750.12-2006《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法水樣的采集與保存》[S].
[3]GB17378.7-2007《海洋監(jiān)測規(guī)范》第7部分:近海污染生態(tài)調(diào)查和生物監(jiān)測[S].
[4]劉榮華.微生物檢測中培養(yǎng)基的制備及注意事項(xiàng)[J].當(dāng)代臨床醫(yī)刊,2015,28(1):1236.
作者:熱比古麗 沙吾提 王甜 單位:新疆維吾爾自治區(qū)水產(chǎn)科學(xué)研究所