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——題記
只能欣賞花的綻放,是可悲的。只有發(fā)現(xiàn)她珍貴的經(jīng)歷:發(fā)芽,成長,綻放。才能真正體會到花的含義。
發(fā)芽吧,那希望的結(jié)晶
幼時,年幼無知的我背著書包走進理想的殿堂,在這鳥語花香的圣地里,我被某種品質(zhì)吸引住了,蹲下身子,驚嘆地望著,那一棵小苗在向我招手,你綠的出奇,仿佛間染綠了整個世界,我微微地伸出細膩的小手去觸碰你,那時的我叫不出你的名字——野花,只得依依呀呀地訴說我內(nèi)心的喜悅。
成長吧,那堅強的品質(zhì)
在這漫天暴雨中,我手中攥著一張卑微的試卷,我獨自在雨中,肉體與內(nèi)心都在遭受暴雨的鞭打。恍然間,我發(fā)現(xiàn)你在承受暴雨的折磨,任憑風(fēng)吹雨打,你依然不肯放棄。我默默地里去,心里惋惜著你,我百般無奈。天放晴,陽光在溫暖我殘缺的心靈,我再次來到你的身邊,只見你耀武揚威地向我示威。你似乎跟我說:“咬定青山不放松,立根原在破巖中。”你含苞待放,微笑地看著……
綻放吧,那美麗的花兒
因你而在,不易放棄。風(fēng)雨后,是絢麗的彩虹。在這2000米比賽,汗水與心血不斷融入跑道,雙眼早已模糊,只是一謂奔跑,黑暗早已吞噬了我的心靈?;腥?,來到你的身邊,我驚奇地望著你,你綻放了,那絢麗的花瓣,清香的花味,真是“寶劍鋒從磨礪出,梅花香自苦寒來”。我躺在草地上,與你共度這光輝的黑夜。我睜開眼睛,繼續(xù)在跑道上奔馳。最終,我沖向了那可望不可即的終點。
“莫道讒言如浪深,莫言遷客似沙沉。千淘萬漉雖辛苦,吹盡狂沙始到金?!?/p>
――題記
你從遙遠的巴蜀歸來,走在回東都洛陽的官道上,二十三年前,你從這里遠行。
你帶著一路風(fēng)塵、一身疲憊,但是你的心中有一朵永開不敗的花,那是用血淚澆灌的理想之花!
你目睹著眼前陌生的一切,恍如隔世。你回想著當(dāng)年,少年得意,滿懷豪情,你要用自己的才華,為這頹敗的江山增添一抹亮色,你要用自己的生命,來為百姓的命運疾呼吶喊。然而,你失敗了,你被無情地逐出了洛陽。今天,你遙望洛陽城外,王叔文等人的墳頭,已經(jīng)長滿了衰草,而你還在孤獨地回家,你是為自己慶幸呢,還是為自己悲哀?我想都不是,你只知道你還活著,活著就不能泯滅心中的理想,哪怕已是“沉舟”“病樹”。你還依稀記得,耳畔有風(fēng)鼓動帆的回響,那是千帆競發(fā)的壯觀,江水激蕩,海鳥翩飛,你在沉淪的水底,在黑暗的礁叢中,心中涌動著熱流,你的信念是不會湮滅的。你還依稀看見,那株枯寂的胡楊,在生命的創(chuàng)痕上,有一抹綠色在悄悄地綻放,那是希望的萌芽,那是信念的火焰在跳動,你硬是把磨難和挫折,變成了希望和光明孕育的搖籃重生的溫床,你用血淚澆灌心中的信念,讓這信念幻成一朵永不凋零的花,開放在每一個人的心頭,這就是你,一代詩豪劉禹錫,留給后世的偉岸身影和精神力量。
揚州,風(fēng)景如畫,人間天堂,更有好友白樂天知心暖懷,攜手相游,但這些都不能阻止你北歸的腳步。你不知道前行還有多少風(fēng)雨,你不知道洛陽城里還有多少艱險等待著你,但你知道洛陽曾是你的夢想家園,你在第二天的曙色中,向著洛陽,早早地趕去了。
你永遠是一個行者,懷揣一朵永開不敗的花朵。
鏈接中考
1.(2009年沈陽市中考卷)對《酬樂天揚州初逢席上見贈》(略)賞析有誤的一項是( )
A.首聯(lián)寫自己謫居在巴山楚水這荒涼的地區(qū),算來已經(jīng)二十三年了。
B.頷聯(lián)暗示了自己貶謫時間的長久,又表現(xiàn)了世態(tài)的變遷,以及回歸之后生疏而惆悵的心情,涵義十分豐富。
C.頸聯(lián)以“沉舟”“病樹”作為反襯,描繪出千帆競發(fā)、萬木爭春的富于生機的景象,表現(xiàn)了詩人對仕宦升沉、世遷的無奈、惆悵與嘆息。
D.尾聯(lián)寫劉禹錫在朋友的熱情關(guān)懷下,表示要振作起來,重新投入到生活中去。表現(xiàn)出詩人堅忍不拔的意志。
2.(2010年河北省中考卷)閱讀《酬樂天揚州初逢席上見贈》(略),完成問題。(5分)
(1)這首詩的作者是 ,標(biāo)題中的“樂天”是指詩人 。
(2)用“”劃分下面詩句的朗讀節(jié)奏。(每句一處)
巴 山 楚 水 凄 涼 地,二 十 三 年 棄 置 身。
(3)這首詩的頸聯(lián)蘊涵了什么道理?
【參考答案】
關(guān)鍵詞:信息化技術(shù);初中語文;優(yōu)勢
隨著新課改的實施,教師在教學(xué)中一直努力尋找如何提高課堂教學(xué)效果的方法。初中語文作為教育教學(xué)學(xué)科中的一門基礎(chǔ)學(xué)科,重在培養(yǎng)學(xué)生的綜合能力,從而為終身學(xué)習(xí)奠定良好的基礎(chǔ)。隨著信息化技術(shù)的發(fā)展,初中語文教育工作者在教學(xué)過程中積極倡導(dǎo)新課改的教育理念,將多媒體技術(shù)引入教學(xué)中,以此來提高課堂教學(xué)活力,擴充課堂教學(xué)容量,開拓學(xué)生的視野,從而促進學(xué)生學(xué)習(xí)的積極性,提高課堂學(xué)習(xí)效率,進而提升初中語文教學(xué)質(zhì)量。
一、多媒體信息化技術(shù)教學(xué)的優(yōu)勢
傳統(tǒng)的教學(xué)模式是“一言堂”,教師是課堂教學(xué)的主體,學(xué)生處于被動地位。這樣的教學(xué)模式存在重知識、輕教育;重課堂、輕實踐;重群體、輕個體等教學(xué)弊端。因此,新課改要求改變這種教學(xué)模式,使教學(xué)模式適應(yīng)時展。教師在教學(xué)過程中應(yīng)該改變靜態(tài)的板書和課本教學(xué),豐富教學(xué)手段,善于利用多媒體信息化技術(shù)進行教學(xué),從而激發(fā)學(xué)生對教學(xué)內(nèi)容的興趣,使學(xué)生更加直觀地看到知識內(nèi)容間的聯(lián)系,進而有效提高課堂教學(xué)效率。
興趣是最好的老師。當(dāng)學(xué)生對內(nèi)容感興趣時,學(xué)生就會積極主動地去探知。在語文教學(xué)過程中,將語文教學(xué)與多媒體信息化技術(shù)相結(jié)合,不僅豐富了語文教學(xué)的教學(xué)手段,為課堂教學(xué)注入了新活力,而且使教學(xué)具有情景交融、聲情并茂的效果,從而優(yōu)化教學(xué)效果。
采用多媒體技術(shù)進行教學(xué)可以使課堂教學(xué)從靜到動、從無聲到有聲,并打破空間和時間上的局限,將情景生動、真實的展現(xiàn)給學(xué)生,從而使學(xué)生的感性認(rèn)識得以豐富并使其理解能力得到提高。教師在教學(xué)中采用多媒體教學(xué)可以激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣,使學(xué)生對教學(xué)內(nèi)容產(chǎn)生強烈的求知欲和好奇心,從而積極主動地去探知。教師在教學(xué)過程中根據(jù)教學(xué)內(nèi)容選擇相關(guān)的教學(xué)音頻、視頻、圖片等,從而豐富教學(xué)內(nèi)容,通過這些感觀材料吸引學(xué)生的注意力,調(diào)動學(xué)生的積極性。例如,人教版七年級上冊第三單元朱自清的《春》,教師在講解這一課時,通過多媒體向?qū)W生展示關(guān)于春的視頻資料,讓學(xué)生一邊朗讀課文一邊欣賞春天的美景,使學(xué)生感覺身臨其境,感知春的美景帶給人的生機和活力。接著教師對課文進行講解,讓學(xué)生進一步了解文章的內(nèi)容。然后教師讓學(xué)生暢談對春的感受。
二、運用多媒體信息化技術(shù)優(yōu)化初中語文課堂教學(xué)
輕松、愉悅、和諧的學(xué)習(xí)環(huán)境能夠激發(fā)學(xué)生的創(chuàng)新意識。而運用多媒體技術(shù)能夠有效利用音頻、視頻、圖片等內(nèi)容不斷優(yōu)化學(xué)習(xí)環(huán)境,從而為學(xué)生創(chuàng)造一個良好的學(xué)習(xí)環(huán)境。
1.用優(yōu)美的音樂優(yōu)化課堂教學(xué)
學(xué)生在學(xué)習(xí)過程中,思維總是在緊張和松弛間不斷循環(huán),而如果在課堂教學(xué)中,學(xué)生的思維一弛一張就會對學(xué)生的創(chuàng)新意識造成影響。例如,人教版八年級上冊第一單元孫犁的《蘆花蕩》,在文章中并不是講述蘆花蕩,而是以抗日老英雄的活動地點為題目,刻畫了滿腔愛國熱血和老當(dāng)益壯的抗日傳奇老英雄的形象。學(xué)生在初次接觸這篇文章時并不會深入思考,教師在教學(xué)中通過播放影音資料,讓學(xué)生從葦塘歌聲中感受人民英雄的樂觀豪情和昂揚斗志,從而加深對課文的理解,激發(fā)學(xué)生的愛國主義精神。
2.利用視頻動畫豐富學(xué)生的學(xué)習(xí)環(huán)境
教師在教學(xué)過程中將教學(xué)內(nèi)容制作成視頻動畫,然后讓學(xué)生通過觀看視頻討論教學(xué)內(nèi)容,在討論過程中,學(xué)生會積極思考、大膽發(fā)言,從而訓(xùn)練學(xué)生的創(chuàng)新意識。例如人教版八年級上冊第四單元談家楨的《奇妙的克隆》,教師在講解時通過播放克隆影片,讓學(xué)生直觀感受克隆的過程,從而激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣,并深入地理解課文內(nèi)容,深思科技對社會的影響。
3.利用圖片美化學(xué)習(xí)環(huán)境
圖片能夠給人們直觀的感受,并能夠引起人們情緒的變化。初中語文教師在教學(xué)中要充分發(fā)揮圖片的作用,通過向?qū)W生展示與課文內(nèi)容相關(guān)的圖片,讓學(xué)生通過觀察圖片,發(fā)現(xiàn)問題并解決問題,從而培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新意識。
課堂教學(xué)是學(xué)生學(xué)習(xí)知識、施展才能的舞臺,教師應(yīng)該通過采用多種教學(xué)手段培養(yǎng)學(xué)生達到創(chuàng)新思維。將多媒體信息化技術(shù)應(yīng)用于初中語文教學(xué),不僅給初中語文課堂教學(xué)注入了新的活力,培養(yǎng)了學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣,而且改變了傳統(tǒng)教學(xué)模式,拓寬了教學(xué)空間,豐富了教學(xué)內(nèi)容。教師在教學(xué)中要結(jié)合教學(xué)內(nèi)容采用相應(yīng)的多媒體教學(xué)課件,不斷優(yōu)化課堂教學(xué)效果,使初中語文課堂教學(xué)獲得最佳的教學(xué)效益。
參考文獻:
[1]高曉云.多媒體技術(shù)優(yōu)化初中語文課堂策略談[J].中國教育技術(shù)裝備,2013(10).
對于具有一定規(guī)模的呼叫中心來說,每日的呼入量數(shù)據(jù)都是一個不小的數(shù)目,如何保障呼入接通率以及各項指標(biāo)的完成呢?座席權(quán)限的加設(shè)可以有效解決這些問題。如同建造一艘巨輪,必然有人在搭建甲板、有人在架構(gòu)蒸汽機,無論規(guī)劃的是艘多么龐大的輪船,只要擰緊每個螺絲、各自完成手下的工作,都會讓巨輪早日出海。
一、二線座席做支撐,快速化解客戶投訴
用戶致電客戶服務(wù)中心的需求大體分為兩類:咨詢、投訴。從心理角度來講一旦遇到了和預(yù)想不符以及傷害到自身利益的問題,客戶的第一反應(yīng)便是自我保護以及通過投訴來滿足自我補償。用戶致電客服的心情也一定不會是平常心態(tài),帶著火氣打進呼叫中心是正常的,一線座席在受理此類用戶過程中必須要先安撫用戶情緒并針對用戶所提出的問題找出最快的解決方法,但如果用戶所提出的問題超出一線座席的權(quán)限范圍,在受理過程中遇到瓶頸時,為了不再次打破和降低用戶的期望值,就需要轉(zhuǎn)接到更高級別座席繼續(xù)為用戶受理。
二線支撐座席的設(shè)立恰恰滿足了用戶的需求,站在用戶的角度來看,由于接受了更高級別負(fù)責(zé)人的接待,瞬間降低了怒氣。我們在回顧聽取客服代表受理的錄音時往往會聽到客戶對一線客服人員暴跳如雷地呵斥,而當(dāng)一線座席引導(dǎo)用戶轉(zhuǎn)接至負(fù)責(zé)人繼續(xù)受理時,我們會發(fā)現(xiàn)用戶的態(tài)度以及情緒都得到了快速好轉(zhuǎn),會從起初的情緒宣泄轉(zhuǎn)而冷靜地敘述問題,聽到了更多這樣的聲音“您好,負(fù)責(zé)人,您看看我的這個問題怎么解決比較好?我的情況是……”。在用戶能夠清楚地陳述問題后二線座席可以更有效地為用戶解決問題從而獲得用戶認(rèn)可。心理學(xué)理論認(rèn)為,人性中最為本質(zhì)的需求之一就是渴望被他人重視,在用戶所投訴的問題中絕大多數(shù)的問題一線座席與二線座席所提供的解決方法其實無異,但是經(jīng)二線支撐座席告知用戶就會得到認(rèn)可,也驗證了用戶希望被重視的心理,最終提升了用戶的服務(wù)感知。
二、設(shè)立技術(shù)支撐座席,快速解決用戶技術(shù)難題
在信息技術(shù)飛速發(fā)展的今天,幾乎每天早晨一睜眼就有一款新型3G產(chǎn)品誕生,尤其在通信行業(yè)的客戶服務(wù)中心僅僅設(shè)立普通的咨詢座席已經(jīng)遠遠滿足不了用戶的需求,所以建立技術(shù)支撐座席成為了運營商提升用戶服務(wù)感知的必要手段。目前三大運營商的客戶服務(wù)中心都各自建立了技術(shù)類專席,在中國電信北京分公司的客服中心,從2010年開始隨著CDMA 2000 3G網(wǎng)絡(luò)的迅速普及,即創(chuàng)建了專門受理3G應(yīng)用技術(shù)的3G專席,在用戶使用手機終端或者無線網(wǎng)卡過程中遇到了操作類的問題致電客服中心,需求即快速被解決。
3G時代,我們與競爭對手之間不光要拼產(chǎn)品、拼價格、更要拼服務(wù)。在幾年前電信運營商的客服給用戶的概念就是查查話費、辦理套餐,而在今日,當(dāng)您擠在地鐵里想使用手機上網(wǎng)看場電影打發(fā)時間,發(fā)現(xiàn)手機上不了網(wǎng)不想就此作罷時,打通客服就可以給您解決問題;當(dāng)您急需給領(lǐng)導(dǎo)發(fā)個郵件,發(fā)現(xiàn)電腦上不了網(wǎng)了,打通客服教您怎么通過手機讓電腦聯(lián)網(wǎng);當(dāng)您每天依賴的無線網(wǎng)卡鬧脾氣用不了,不用著急搬著電腦去維修點,您在只需在家里打通電話給客服就可以解決。當(dāng)您預(yù)感到眼下的問題解決起來會非常麻煩棘手時,您發(fā)現(xiàn)客服人員卻為您輕松解決了,您一定會感到意外的欣喜,技術(shù)支撐座席的創(chuàng)建讓用戶更加信賴自己所選擇的產(chǎn)品。
【關(guān)鍵詞】多媒體信息技術(shù) 初中化學(xué)課堂 優(yōu)化
【中圖分類號】G633.8 【文獻標(biāo)識碼】A 【文章編號】2095-3089(2012)11-0103-01
一、多媒體信息技術(shù)在初中化學(xué)課堂教學(xué)中的應(yīng)用分析
多媒體技術(shù)最為主要的特點就是在應(yīng)用的過程當(dāng)中集圖像、聲音、動畫以及文字圖片等多方面的教學(xué)信息為一體,在初中化學(xué)課堂的教學(xué)過程中不僅能夠?qū)⒊橄蟮膯栴}具體化,也能夠?qū)⒁幌盗徐o止的化學(xué)知識動態(tài)化,由此就不難看到,在教學(xué)的過程當(dāng)中充分的利用多媒體技術(shù)是能夠充分調(diào)動學(xué)生的多重感官的,能夠有效地將學(xué)生的注意力集中到課堂學(xué)生上來。在應(yīng)用多媒體信息技術(shù)的過程當(dāng)中,教師能夠?qū)⒁恍┫鄬Χ员容^抽象的問題通過一些親切的情景和言簡意賅的解說逼真的表現(xiàn)出來,究其本質(zhì)而言,這樣一種方式對于教學(xué)過程的優(yōu)化以及教學(xué)效率的提高都是有著非常良好的作用的。
作為現(xiàn)代教育重要的手段之一,在應(yīng)用的過程當(dāng)中如果能夠良好的把握好教師、學(xué)生以及教學(xué)環(huán)境這樣三者之間的關(guān)系的話,是能夠最終形成非常良好的教學(xué)結(jié)構(gòu)環(huán)境的,而通過這樣一種形式就能夠最終實現(xiàn)教學(xué)結(jié)構(gòu)的優(yōu)化,這對于教學(xué)質(zhì)量的優(yōu)化和提高都有非常重要的作用和意義。
二、多媒體信息技術(shù)在初中化學(xué)課堂教學(xué)中的優(yōu)化
2.1利用多媒體信息技術(shù)創(chuàng)設(shè)情景
在新課程中對于教學(xué)活動的開展有著非常明確的要求,要求必須要從學(xué)生的實際生活經(jīng)驗出發(fā)來進行,必須建立在學(xué)生既有的知識體系和生活經(jīng)驗之上。因此我們在利用多媒體信息技術(shù)創(chuàng)設(shè)課堂情境的時候無疑也需要認(rèn)識和考慮到這一點。例如在進行《水的組成》內(nèi)容的學(xué)習(xí)時,我們就可以通過多媒體畫面來展示自然界中多種多樣的水的形態(tài),讓學(xué)生在欣賞的同時予以思考,在這樣一種狀況下,學(xué)生的思考狀況相對而言就要活躍得多。在進行二氧化碳性質(zhì)的學(xué)習(xí)時,我們同樣可以通過多媒體信息技術(shù)來對二氧化碳在自然界中的三態(tài)循環(huán)進行展示和表現(xiàn),并對其在冷藏以及人工降雨中的應(yīng)用予以展示。在動畫圖像、文字注釋以及聲音的多重展現(xiàn)下,基本上就能夠有效的調(diào)動學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣。
2.2利用多媒體技術(shù)化靜為動
在初中化學(xué)教學(xué)過程當(dāng)中,往往有比較多的難點很難被學(xué)生所理解和接受,或者是在理解和接受的過程當(dāng)中產(chǎn)生錯誤的理解,這樣一種狀況如果在學(xué)習(xí)的過程當(dāng)中不加以處理和解決的話,甚至對于學(xué)生后續(xù)的學(xué)習(xí)產(chǎn)生不良的影響,針對于這樣一種狀況,我們同樣可以利用多媒體信息技術(shù)來將教學(xué)過程中的難點予以動態(tài)的模擬和顯示,化靜為動,讓學(xué)生從事物的本質(zhì)上來看待這樣一些問題,針對于學(xué)生知識點的理解和應(yīng)用都是非常有幫助的。
初中化學(xué)知識無疑有其自身顯著的特點,也就是比較抽象,且很多的化學(xué)事實都是很難直接看到的,而應(yīng)用語言又很難將其徹底的解釋清楚,正是因為這樣,才容易使得學(xué)生在進行學(xué)習(xí)的過程中容易造成錯誤的認(rèn)識和理解。在傳統(tǒng)的教學(xué)方法中,教師往往就是照本宣科,或者是簡單的描述,實際上這樣一種狀況下學(xué)生是非常難以對其理解的。而多媒體信息技術(shù)則因其強大的模仿力而能夠應(yīng)用動畫、聲音以及圖片等多種方式來對上述難以表現(xiàn)的事實進行表現(xiàn)、放大和模擬,將一些微觀世界里的東西直觀而形象的表現(xiàn)在學(xué)生的面前,這樣一種形式既有利于學(xué)生對于知識的理解,也有助于學(xué)生學(xué)習(xí)積極性的良好調(diào)動。
如在對原子進行講解和描述時,原子就是一個比較抽象和模糊的概念,比較難以被學(xué)生所理解,在這樣一種狀況下就可以通過多媒體信息技術(shù)來對氧化汞進行分解變化的展現(xiàn)。甚至可以將原子制作成為一個非??蓯鄣娜蝿?wù)形象,這樣學(xué)生就能夠通過氧化汞的分解過程清晰而直觀的認(rèn)識到原子的概念以及本質(zhì)。
2.3利用多媒體信息技術(shù)模擬實
化學(xué)試驗在整個的化學(xué)教學(xué)過程當(dāng)中無疑是一個非常關(guān)鍵的環(huán)節(jié)和部分,這主要是因為化學(xué)試驗?zāi)軌蛄己玫呐囵B(yǎng)出學(xué)生的動手能力和科學(xué)態(tài)度,除此之外還能夠讓學(xué)生更好的掌握在教學(xué)過程當(dāng)中所學(xué)到的理論知識。但是部分化學(xué)試驗可見度是非常小的,包括分子的擴散或者是固體的溶解等,這就使得學(xué)生在進行試驗的過程中很難對其有客觀而準(zhǔn)確的認(rèn)識。但是在這樣一個過程中如果采用多媒體信息技術(shù)來進行放大、慢放、定格以及重播的話,就能夠非常清楚明白的讓學(xué)生看清楚化學(xué)變化的具體過程。
除此之外,就是考慮到在初中化學(xué)教學(xué)中還有一些危險性的試驗,這樣一些試驗有的是因為會發(fā)生爆炸,有的則是因為在學(xué)校實驗室環(huán)境下根本就不可能進行操作,這就會使得學(xué)生完全無法直觀的去認(rèn)識和了解這樣一些方面的知識和內(nèi)容。而這樣一種問題同樣可以通過多媒體信息技術(shù)的應(yīng)用來予以解決,以試驗的模擬來解決這樣一項硬性的不足。危險試驗如在進行將是碳酸銅的試管加熱時如果試管口向上的話就會使得加熱生成的水流回試管造成爆炸;稀釋硫酸的時候如果將水倒入濃硫酸中同樣會導(dǎo)致爆炸等??傊?,相類似的試驗都可以通過多媒體信息技術(shù)來進行試驗的模擬,讓學(xué)生在沒有危險的情況下同樣達到教學(xué)目的。當(dāng)然,這樣一種說明和分析也并不就意味著所有的試驗都可以通過多媒體來進行模擬,教師在教學(xué)的過程當(dāng)中應(yīng)當(dāng)根據(jù)實際的狀況來進行模擬實驗和動手試驗的結(jié)合。
結(jié)語:在教學(xué)過程中良好、靈活、合理的應(yīng)用多媒體信息技術(shù),不僅能夠較好的凸顯出教室和學(xué)生的雙主體性,還能夠真正有效的提高化學(xué)課堂教學(xué)質(zhì)量,針對于化學(xué)教學(xué)現(xiàn)狀的改變以及課堂教學(xué)的優(yōu)化都是有著非常重要的意義的。
參考文獻:
【關(guān)鍵詞】 急性肺損傷;基質(zhì)金屬蛋白酶?2;基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制劑?2;新生大鼠;脂多糖
expressions of mmp?2 and timp?2 in lipopolysaccharide?induced
acute lung injury of neonatal rats
yin jing1,yang li2(1.school of clinical medical science,southeast university,nanjing 210009,china;2.department of pediatrics,
zhongda hospital,southeast university,nanjing 210009,china)
abstract:objective to investigate the expressions of mmp?2 and timp?2 in neonatal rats with acute lung injury(ali) induced by lipopolysaccharide(lps).methods thirty neonatal rats of 7?days were randomly divided into saline control group(n=6) and acute lung injury group(n=24);the latter was randomly divided into one hour,two hours,four hours and six hours groups(n=6).the ali models of neonatal rats were establised by inject lps.the pathological changes of lung tissue were observed.the expressions of mmp?2 and timp?2 protein and mrna in the lung tissues were detected by using immunohistochemistry and reverse transcription polymerase chain reaction (rt?pcr).results pathological changes confirmed rat ali models induced by lps were reproducted pared with saline control group,the mmp?2 protein and mrna expressions were increased after lps injection,and reached the peak at 4?6h.meanwhile,the expression of timp?2 had weak increace in 6h after lps injection.conclusions mmp?2 and timp?2 expressions are imbalance in lps?induced ali of neonatal rats.it may be involved in the pathological process of acute lung injury through the basement membrane damage.
key words:acute lung injury;matrix metallo proteinase?2;tissue inhibitors of metallo proteinase?2;neonatal rats;lipopolysaccharide
(modern medical journal,2009,37:204?208)
急性肺損傷是由多種原因引起的肺部彌散性損害,以頑固性低氧血癥、呼吸窘迫、肺順應(yīng)性下降和彌散性滲出為主要特征。而與成人相比,新生兒急性肺損傷起病急,進展快,同時伴有肺動脈高壓和多臟器功能衰竭,病死率高。近年來研究表明,基底膜損傷是急性肺損傷過程中的重要事件?;|(zhì)金屬蛋白酶?2(mmp?2)是基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloporteinases,mmps)家族中成員,是降解基底膜主要成分ⅳ型膠原的重要酶系。作者通過腹腔注射脂多糖(lps)的方法復(fù)制大鼠急性肺損傷模型,觀察肺組織中mmp?2及其組織抑制劑(timp?2)的動態(tài)變化,探討兩者在內(nèi)毒素致急性肺損傷發(fā)生、發(fā)展中的作用。
1 材料和方法
1.1 動物、試劑及儀器
7日齡清潔級sd新生大鼠30只(由東南大學(xué)醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供),體重12.0~15.0g,雌雄不限。大腸桿菌lps(sigma公司,血清型0111b4),兔抗大鼠單克隆抗體(北京博奧森生物技術(shù)有限公司),pcr試劑盒(南京建成生物公司),olympus光學(xué)顯微鏡(日本)。
1.2 動物分組及模型制備
30只大鼠隨機分為生理鹽水對照組(n=6)和急性肺損傷組(n=24),后者進一步分為1、2、4及6h亞組,每組6只。急性肺損傷組予以5mg·kg-1 lps腹腔注射;生理鹽水對照組予以5ml·kg-1生理鹽水腹腔注射。
1.3 大鼠肺組織病理學(xué)觀察
1.3.1 he染色 采用朱列偉等[1]的方法對大鼠肺組織病理學(xué)改變進行評價。lps腹腔注射后1、2、4和6h觀察大鼠肺組織大體病理改變,并取左肺浸泡于4%多聚甲醛溶液中24h,石蠟包埋,5μm切片,常規(guī)he染色,光鏡觀察大鼠肺組織病理學(xué)改變。
1.3.2 免疫組織化學(xué)染色 免疫組織化學(xué)染色按標(biāo)準(zhǔn)程序操作。磷酸鹽緩沖液(pbs)代替一抗作為陰性對照。染色陽性為棕黃色顆粒。每個時間點各組選取切片5張,高倍鏡下每張切片隨機選擇5個視野,利用imaging porporation圖像分析系統(tǒng),應(yīng)用meta morph軟件測定其平均灰度值。
1.3.3 rt?pcr觀察肺組織中mmp?2和timp?2的基因表達 按trizol常規(guī)一步法提取肺組織總rna,按逆轉(zhuǎn)錄試劑盒中的說明書進行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng),得到cdna,在pcr儀中反應(yīng):taq酶0.5μl,pcr buffer(含鎂離子)2.5μl,dntp 0.5μl,10μm的上下游引物各0.5μl,rt 產(chǎn)物 4μl,用雙蒸水補足體系至25μl。mmp?2(269bp)上游引物:5′?gattgatgccgtgtac gagg?3′,下游引物:5′?agtctgcgatgagcttcgg?3′,退火溫度62℃,30個循環(huán)。timp?2(309bp)上游引物:5′?gcagataaagatgttcaaagg?3′,下游引物:5′?cagtccatccagaggcac?3′,退火溫度58℃,30個循環(huán)。β?actin(632bp)上游引物:5′?gatggtggg tatgggtcagaagga?3′,下游引物:5′?gctcattgc cgatagtgatgacct?3′。反應(yīng)結(jié)束后取pcr產(chǎn)物于1.5%瓊脂糖凝膠中電泳,經(jīng)凝膠成像分析系統(tǒng)分析電泳條帶。以目的基因與內(nèi)參基因條帶的吸光度的比值代表其表達的相對量。引物均由上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司合成。
1.4 統(tǒng)計學(xué)處理
所有數(shù)據(jù)采用spss 15.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行分析。計量資料采用x-±s表示,組間比較行方差分析及t檢驗,p<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
2 結(jié) 果
2.1 大鼠肺組織he染色
光鏡下生理鹽水對照組肺組織結(jié)構(gòu)完整,肺泡腔清晰,肺泡隔無水腫、炎癥等改變(圖1a);急性肺損傷組肉眼見肺組織有不同程度的出血,光鏡下見肺泡腔狹窄,肺組織有明顯滲出、水腫出血及大量炎性細胞浸潤(圖1b)。
圖1 兩組肺組織切片 he×400
2.2 大鼠肺組織mmp?2及timp?2蛋白表達
mmp?2陽性表達定位于胞漿。生理鹽水對照組mmp?2呈弱陽性表達,呈淡棕黃色;急性肺損傷組mmp?2表達增強,主要在氣道上皮細胞、肺泡上皮細胞基底膜和內(nèi)皮細胞,且隨著lps注射時間的延長,其表達逐漸增強,6h時呈現(xiàn)深褐色,兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05或p<0.01)。急性肺損傷組 timp?2呈淡棕黃色弱陽性表達,6h內(nèi)呈微弱增加趨勢,與生理鹽水對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05)。見圖2、表2。
2.3 mmp?2和timp?2的基因表達
pcr產(chǎn)物于1.5%瓊脂糖凝膠中電泳,在269bp附近見mmp?2 mrna陽性電泳帶,mmp?2 mrna在生理鹽水對照組有輕微表達,lps注射1h后mmp?2 mrna表達逐漸增強。lps注射1h后在309bp附近有timp?2 mrna陽性電泳帶,在生理鹽水對照組幾乎不表達,lps注射后6h內(nèi)表達未見明顯變化(圖3)。注射lps后mmp?2 mrna表達有逐漸增強趨勢,注射后2~6h與生理鹽水對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05或 p<0.01),注射后 6h,mmp?2 mrna表達達高峰。lps注射后timp?2 mrna表達較生理鹽水對照組可見微弱增加趨勢,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05)(表3)。表2 兩組大鼠肺組織mmp?2和timp?2蛋白表達表3 兩組大鼠肺組織mmp?2和timp?2 mrna表達
3 討 論
引發(fā)急性肺損傷的各種因素如環(huán)境及內(nèi)源性毒素,均能觸發(fā)多種效應(yīng)細胞、炎癥介質(zhì)和細胞因子參與反應(yīng)。近來發(fā)現(xiàn),在急性肺損傷過程中基底膜的斷裂與mmps有關(guān)[2],尤其是mmp?2被認(rèn)為與急性肺損傷密切相關(guān)[3?4]。mmp?2是一種廣泛分布的明膠酶,正常上皮細胞和內(nèi)皮細胞均有表達,可降解基底膜的多種成分,參與基底膜的轉(zhuǎn)換[5]。mmp?2的組織抑制因子timp?2是它的主要內(nèi)源性抑制因子。組織中mmps與timps之間保持著相對平衡狀態(tài),它們的平衡和相互影響決定著細胞外基質(zhì)是降解還是聚集[6]。有學(xué)者[7?8]應(yīng)用選擇性的環(huán)氧化酶抑制劑可顯著減少內(nèi)毒素性肺損傷時肺組織mmp?2 mrna的表達,進而能減輕肺水腫、出血和炎性細胞浸潤。下調(diào)高氧誘導(dǎo)新生大鼠mmp?2 mrna的高表達可使膠原蛋白含量增加從而減緩急性呼吸窘迫綜合征病情進展,這些進一步證實了新生大鼠急性肺損傷與mmp?2的過度表達有關(guān)。
革蘭陰性桿菌內(nèi)毒素產(chǎn)物lps是制備成年動物急性肺損傷模型中最常用的誘導(dǎo)劑。本實驗通過新生大鼠腹腔注射5mg·kg-1 lps建立急性肺損傷模型,大鼠肺組織病理改變符合急性肺損傷的病理改變[9]。本實驗結(jié)果顯示,與生理鹽水對照組比較,新生大鼠lps腹腔注射后肺組織中mmp?2蛋白表達增強,且隨lps作用時間延長而逐漸增強,4~6h達高峰,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05),該結(jié)果與mmp?2 mrna的表達結(jié)果一致。lps注射后timp?2蛋白及mrna僅弱陽性表達,6h內(nèi)有微弱增加趨勢,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05)。組織中mmp?2活性的升高與急性肺損傷發(fā)生的時間及程度一致,這提示新生大鼠急性肺損傷可能與mmp?2的過度表達有關(guān)。由于mmp?2表達增加的幅度較timp?2大,導(dǎo)致mmps與tipms比例失調(diào),相對增多的mmp?2失去了內(nèi)源性的抑制,從而加強了對基底膜的降解,造成其嚴(yán)重受損,促進了炎癥反應(yīng),進而導(dǎo)致了急性肺損傷的發(fā)生。然而lps作用后導(dǎo)致mmp?2表達增加的作用靶點及其具體分子機制尚有待深入研究。
lps致新生大鼠急性肺損傷與新生兒肺出血的病理機制相似,這提示如能使用人工合成的mmps抑制劑(mmpi),在新生兒肺出血發(fā)病早期及時采取積極措施,干預(yù)mmps的表達,從而使mmps/tipms比例協(xié)調(diào),發(fā)揮正常生理作用,將為新生兒肺出血早期防治提供新的思路。近年來,人工合成的mmpi已有10多種,已應(yīng)用于成人腫瘤及關(guān)節(jié)炎方面治療,但在新生兒領(lǐng)域尚存在使用劑量不明確、生物利用率低及不良反應(yīng)等問題,故臨床上如何確切判斷mmps和tipms在新生兒肺出血中的表達及作用,進而合理的使用mmpi值得進一步探討。
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我期盼花,期盼花開的季節(jié)。夏季,公園里花兒朵朵,田野里滿山鮮花,那只不過是它們的。而我心中的花一直不開,盡管也在追尋自己的夢想,可觀賞的是別人的花,自己卻沒有花。
我堅信,只要心中有愛,心中有念,花一定會開。于是天天盼花開,天天盼未來。
難道花開的季節(jié)不適合我,還是我不夠用心,沒有努力培養(yǎng)。別人的花爭芳斗艷,而我的花,沒有一點花瓣。也許是我不夠出眾,不會得到別人的愛戴;也許是我不繁華,沒有得到別人的賞識。但我只知自己的路自己走,自己的事自己做??傆蟹比A的一天,總有花開之時。
別人走著走著花就開了,而我用盡心思花不開。經(jīng)常在思索,經(jīng)常在納悶。眼看年過半百了,可花在哪?我多希望有一朵花開在我心中,也希望有一個人住在我心里,多年未果。就這樣多年的希望已成了泡沫。
臺灣成功學(xué)大師黑幼龍說:“養(yǎng)孩子就像種花,要耐心等待花開。”每個孩子都是一顆花的種子,只不過每個人的花期不同。有的花很快就燦爛綻放,有的花則需要漫長的等待。始終堅信,每一朵花,都有屬于自己的美麗花期。只要我們教育工作者用心呵護,用愛澆灌,必能待得朵朵花兒的美麗綻放。
初一伊始,有這樣一朵花走進了我的視野……
剛開學(xué),就有老師反映班上的俊楠上課時很隨便,作業(yè)也不做。我找到他,在走廊里簡單交流時,就有兩個學(xué)生很奇怪地說:“老師,你還管他?我們小學(xué)老師都從來不管他的。”我很驚異地看著他們,再看看俊楠,他神情中閃過一絲羞澀,但轉(zhuǎn)而又變得淡定了?!斑@是真的?”“嗯?!彼燥@遲疑,轉(zhuǎn)而又肯定地點點頭,“我們小學(xué)老師從來不管我?!?/p>
我心中一凜,一個孩子自己講出這樣的話,該是件多么殘酷的事?。∥乙话褤н^孩子的肩,動情地說:“老師心里真難過,從今以后,老師會加倍地關(guān)心你,愛護你,幫助你,好嗎?”俊楠詫異地看著我,眼中閃過一絲光亮,稍作遲疑,但轉(zhuǎn)而還是勉強地點了點頭。
畢竟小學(xué)時荒廢的東西太多了,就我所教的語文學(xué)科而言,他小學(xué)時的最高得分沒超過10分,進入初中后的第一次考試,他的語文是7分。如何讓孩子重新點燃學(xué)習(xí)的信心,我一時感到很棘手……
終于,機會來了!那是一堂作文課,孩子們?nèi)褙炞⒌卦趯憽锻耆な隆?,俊楠卻托著腮,呆呆地看著窗外。我走過去,彎下腰,輕輕地對他耳語:“快寫啊,要不來不及交?。 彼卮鸬煤芎唵危骸拔也粫懽魑?,小學(xué)時我從沒寫過作文?!蔽毅蹲×恕?/p>
下課了,我把他請到辦公室,微笑地說:“小學(xué)時沒寫過沒關(guān)系,但只要現(xiàn)在開始寫就還不遲!”“我不會寫!”“沒事,老師和同學(xué)都會幫你?!蔽艺垇戆嗌舷惹俺靶^他的一個他的小學(xué)同班同學(xué),然后對俊楠說:“你會講故事嗎?”他點點頭?!澳蔷桶涯阃曜詈猛鎯旱囊患轮v給我們聽,一定很有趣,我們好想聽!”他低頭沉思了一會兒,斷斷續(xù)續(xù)地開始講他兒時養(yǎng)小鴨子的趣事,越講越流暢,以至于眉飛色舞。講到和鴨子游戲時,他手舞足蹈;講到鴨子死時黯然神傷……那名同學(xué)邊聽邊記錄著。講完后,我讓那名同學(xué)讀給俊楠聽,“俊楠,其實你會講故事的,作文就是把你講的寫下來啊!”我鼓勵道?!翱¢?,真看不出來,其實你挺會講故事的??!”那名同學(xué)也由衷地贊嘆道,俊楠眼中有了一絲得意……
作文講評課上,我繪聲繪色地朗讀了俊楠的故事,并請班上幾名同學(xué)點評,同學(xué)們的評價很高,俊楠很開心。我適時地說:“這是別人幫你記錄的,如果你自己把它記下來,那就更好了!”同學(xué)們的掌聲很熱烈。這以后,他開始寫了,50字,100字……進步越來越大,他學(xué)習(xí)的信心也不斷增強。其他老師也反映他有進步。
教師節(jié)那天,無意中發(fā)現(xiàn)俊楠在我辦公室門口徘徊?!坝惺聠??”我把孩子請進來,他靦腆地把背在身后的手舉到我面前,手中是一朵異常美麗的玫瑰!“老師,節(jié)日快樂!”我心里暖暖的,接過花,拍拍孩子的小腦袋,“謝謝你,可愛的孩子!老師很喜歡!老師更想說,你是老師心中最美的花!”
后來,孩子不斷努力,終于成功地考入了專業(yè)技術(shù)學(xué)校,這朵花兒也許花期稍長了些,但,最終還是美麗綻放了!
“教育是一種慢的藝術(shù)”,給成長一些時間,予教育一分等待,這才是教育的真諦!
花兒顧影自憐,覺得自己的美變得毫無意義,它拒絕了雨露的滋潤,倔強地站立在炙熱的陽光下,等待著生命的枯干與終結(jié)。
這時,與它相鄰的另一朵花開口了:“萎謝是我們的宿命,但并不是結(jié)束,你不必自怨自艾的。”
花兒看了看說話的那朵花,發(fā)現(xiàn)它的花瓣已經(jīng)有了許多的褶皺,顯然,它距離凋謝的時間已經(jīng)不遠了,花兒說:“看起來,你已經(jīng)快要凋謝了,難道你并不害怕嗎?”
年老的花兒笑了:“起初,我也有過不安,但是,我一直沒有放棄過努力,我沒有拒絕雨露的滋養(yǎng),雖然我的花期并沒有延長,但我卻感覺到身體中有另一股更強大的力量正在蓄積著,雖然,我不知道接下來我將迎來什么,但是,我感覺到,那必然是一種巨大的喜悅。”
沮喪的花兒沒有再說話,它陷入了深思之中。
三天過后,花兒開始接受雨露的滋養(yǎng),因為它覺得,自己的生命無論多么短暫,都應(yīng)當(dāng)飽含熱情地度過,要把最好的一面留給這個世界。
但是,花兒的心里還是有一絲揮之不去的陰影,那就是對于萎謝的恐懼,它舉目四望,想要詢問那朵年老的花兒,卻驚奇地發(fā)現(xiàn),那朵花兒竟然已經(jīng)消失了,而它曾經(jīng)居住的枝頭上竟然墜著一個青澀的果。
花兒驚奇地看著這細小的果,說:“你是誰,那朵花兒呢?”
果兒聽到了花兒的話,它微笑著開口了:“你好,認(rèn)不出我了嗎?我就是那朵將要凋謝的老花啊?!?/p>
花兒更加驚奇了:“難道,這就是你說的那種巨大的喜悅?”
果兒微笑著說:“沒錯,因為我是最努力的一朵花兒,所以,我也是第一個結(jié)出果實的花兒,你知道嗎?當(dāng)我褪去只余殘紅的花瓣,那一刻,我感覺到了另一種生命力量的蓬勃,也明白了生存的意義,原來,花兒美麗卻柔弱的表象只是為了迎接果實平和而飽滿的幸福,所以,你也要努力了?!?/p>
聽了果兒的話,花兒心中最后一抹沮喪也消失無蹤了,因為,僅僅經(jīng)過一小段時間雨露的滋養(yǎng),它就已經(jīng)感受到了身體中澎湃的力量,看著不遠處微笑的果,它暗下決心,一定要盡快掙脫這美麗而脆弱的束縛,生長出一顆屬于自己的果實。
在我們的人生中,也常常會有沮喪失意的時候,因為看不清未來而恐懼,因為找不到方向而迷惘,在這個時刻,就想一想沮喪的花與微笑的果吧,其實,我們只要堅持最初的方向,堅信內(nèi)心的力量,不停地努力生長,那么,每一朵因為美麗無法長存而沮喪的花兒都一定能夠涅重生,成為一個擁有更強大內(nèi)心力量的微笑的果。
(《深圳晚報》2013年5月23日)
【賞析】
花兒只有吸收陽光雨露,才能生長出屬于自己的果實,心懷恐懼,拒絕努力,就是遠離成功。
寓意深刻。沮喪的花注定無法開出微笑的果。本文通過兩朵花的成長歷程反映出人生奮斗的意義,內(nèi)涵十分深刻。兩朵花相互映襯,從不安到恐懼,到堅定,最后成功的不同表現(xiàn),展現(xiàn)了它們實現(xiàn)價值的過程和心路歷程,最后,作者聯(lián)系生活實際,鼓勵人們?nèi)コ砷L為“微笑的果”。