土壤滅菌的方法精選(九篇)
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第1篇：土壤滅菌的方法范文
高溫悶棚滅菌法
高溫悶棚滅菌法也稱太陽能滅菌法在溫室蔬菜倒茬的時(shí)間，利用夏季高溫的季節(jié)，及時(shí)拔除老秧，均勻撒施有機(jī)肥料或生石灰或麥麩米糠或碎秸稈等，將土壤充分進(jìn)行翻耕。同時(shí)利用水的導(dǎo)熱性，將翻耕的土壤澆透水，使土壤的含水量達(dá)到70%以上，將雙層地膜覆蓋于土壤表層：密閉整個(gè)溫室，在7～8月份高溫季節(jié)，氣溫達(dá)35℃以上時(shí)，0～10cm土層的溫度可達(dá)70℃以上，20cm左右的土層可達(dá)62℃左右，多數(shù)病原菌的致死溫度為50～60℃，可以有效殺死棚內(nèi)和土壤中的病菌以及土壤中線蟲和蟲卵，悶棚時(shí)間一般掌握在40天左右，在不影響種植的前提下，悶棚時(shí)間越長(zhǎng)效果越好。在種植前1周，開棚通氣起壟作畦同時(shí)施用一定量的生物菌肥，以便占領(lǐng)土壤中的優(yōu)勢(shì)空間。
大水浸泡滅菌法
土傳病害的發(fā)生受溫濕度、光照等氣候條件的影響。多數(shù)病原菌的致死溫度為50～60℃，但有一些病原菌如絲核菌和鐮刀菌等可在干燥土壤中休眠并繼續(xù)存活，而濕潤(rùn)的土壤條件有利于細(xì)菌生長(zhǎng)。因此，可利用作物休閑季節(jié)，將溫室內(nèi)土壤水分澆透，并將水堵起來浸泡土壤。浸泡時(shí)間越長(zhǎng)，效果越明顯。如果浸泡20天以上，可基本控制線蟲和土傳病害的危害。
火燒土壤滅菌法
利用溫室倒茬的時(shí)間，將溫室內(nèi)土壤充分翻耕，不要打碎坷垃，然后撒上大約一尺厚的麥秸草，分段點(diǎn)燃，麥秸草點(diǎn)燃，待燃燒完后，只要不冒明火了，趁著火灰還紅著的時(shí)候馬上把草翻倒地里去，這樣分段翻耕，可使整個(gè)的土溫可以達(dá)到90℃左右，不但可以把土壤當(dāng)中的細(xì)菌性病害、真菌性病害消滅，還可以從根本上殺死根結(jié)線蟲。（此法容易引起環(huán)境的污染，不適用于城市周邊的蔬菜地。）
第2篇：土壤滅菌的方法范文
無菌包裝食品，是指不需要再加熱殺菌，而用無菌材料包裝滅菌后的食品。要得到無菌包裝食品，需在包裝前將食品按規(guī)定進(jìn)行的滅菌和冷卻等工藝處理，以保證無菌。食品滅菌的方法有很多，主要有加熱滅菌如:低溫滅菌、超高溫瞬時(shí)滅菌，輻射滅菌如:紫外線滅菌、微波滅菌，化學(xué)藥劑滅菌及過濾除菌等。每種滅菌方法都有各自的優(yōu)缺點(diǎn)，在食品滅菌過程中，可單獨(dú)使用，也可兩種或兩種以上滅菌方法相結(jié)合，來提高滅菌效果。由于同樣的滅菌方法對(duì)不同性質(zhì)的食品其效果差異較大，所以可根據(jù)食品的性狀、是否耐高溫、色澤是否有要求等情況選擇不同的滅菌方法。目前加熱是最常用的滅菌方法，所以這里介紹一下巴氏滅菌(低溫滅菌)和超高溫瞬時(shí)滅菌(UHT)。低溫滅菌，是指溫度比較低的熱處理方法。將需要滅菌食品在61～63℃的滅菌條件下，滅菌30分鐘，或在72～75℃的溫度條件下，滅菌10～15分鐘。這種滅菌方法可直接使用在食品上，也可將食品進(jìn)行包裝后，浸漬于熱水中。低溫滅菌食品有受熱時(shí)間長(zhǎng)，生產(chǎn)過程不連續(xù)，營(yíng)養(yǎng)成分和風(fēng)味損失大，殺菌效果不理想等特點(diǎn)。超高溫瞬時(shí)殺菌是將需要滅菌食品在125～150℃下滅菌2～8秒，冷卻至20℃左右，并在無菌區(qū)進(jìn)行密封的處理，使處理后的食品達(dá)到無菌要求的一種滅菌過程。例如牛奶的UHT滅菌參數(shù)是在高溫下殺菌3～4s。瞬時(shí)高溫滅菌由于只將食品高溫瞬時(shí)滅菌、而且食品受熱時(shí)間短，包裝材料不進(jìn)行高溫瞬時(shí)滅菌，所以包裝材料可以不耐高溫，并且滅菌結(jié)束后才進(jìn)行灌裝，營(yíng)養(yǎng)成分和風(fēng)味損失較小，目前在食品滅菌過程中應(yīng)用廣泛。
二、無菌包裝容器
(一)無菌包裝材料的特點(diǎn)。
1．高強(qiáng)度。食品在銷售的過程中需要裝卸、運(yùn)輸、擺放、倉儲(chǔ)等，在過程中易受到壓力、振動(dòng)力、沖擊力等外界的破壞力，如果包裝材料強(qiáng)度不夠，將會(huì)導(dǎo)致包裝被破壞，會(huì)影響食品的外觀且食品受到微生物的污染，及光、空氣等進(jìn)入為微生物提供生存條件，而縮短食品的保質(zhì)時(shí)間或直接使食品變質(zhì)。因此要確保包裝材料有足夠的強(qiáng)度，使食品包裝在流通過程中不被損壞。2．耐滅菌能力。微生物是導(dǎo)致食品腐敗、變質(zhì)最主要的原因，為了確保食品的健康安全，要對(duì)食品和包裝材料在包裝過程中分別進(jìn)行滅菌處理。因此要求包裝材料需要透過滅菌所需的熱或射線，要求材質(zhì)在滅菌過程中不被損壞，且保證均勻全面地做到徹底的滅菌。3．良好阻隔性。阻隔性是食品包裝材料的重要性質(zhì)之一。為了更好地延長(zhǎng)食品的儲(chǔ)存期，必須阻隔微生物及能夠讓細(xì)菌生長(zhǎng)的空氣和水分的進(jìn)入，所以包裝材料必須具備良好阻隔性。4．良好的耐熱、耐寒性。對(duì)需要冷凍的食品，如果耐寒性達(dá)不到要求，在深冷條件下保存時(shí)，不能保持材料原有的性能，發(fā)脆將會(huì)使得包裝材料強(qiáng)度下降，使得包裝袋破損，不能對(duì)食品起到保護(hù)作用。除此之外，為了更好地銷售食品，還需要對(duì)食品的包裝進(jìn)行裝點(diǎn)。所以要求包裝材料上的圖案在滅菌后仍然圖案清晰，色彩艷麗，不影響食品銷售。
(二)食品無菌包裝材料。
1．紙質(zhì)材料。為了包裝需要可制成紙盒。紙質(zhì)材料重量輕、成本較低，可用于糕點(diǎn)的無菌包裝過程中。但紙質(zhì)材料防水和氣密性不好，都為一次性使用，使用后容易回收。而且紙質(zhì)材料可以在自然界分解，材料更環(huán)保。應(yīng)用于袋裝牛奶、糕點(diǎn)等食品無菌包裝過程。2．金屬材料。以鋁板為主，材料重、成本高、防水和氣密性很好，但不易清洗和滅菌。應(yīng)用于肉類罐頭、灌裝汽水、灌裝啤酒等食品無菌包裝過程中，為了包裝需要可制成金屬罐。3．玻璃材料。材料重、成本低、透明，可觀察材料內(nèi)部，防水和氣密性好，可是易碎，不方便攜帶和滅菌，但可重復(fù)使用和回收處理。廣泛用于水果罐頭、瓶裝牛奶、瓶裝啤酒等食品包裝中，為了包裝的需要，一般為玻璃瓶。4．塑料。其重量輕、成本低、透明，可觀察材料內(nèi)部，防水和氣密性好。但塑料材料多為一次性使用，使用后不容易回收，由于塑料都是人工合成的高分子聚合物，很難被土壤中的微生物分解掉，對(duì)環(huán)境污染較大。廣泛用于膨化食品、袋裝榨菜、瓶裝飲料等食品包裝中。5．復(fù)合材料。不同于前面幾種材料，在科技發(fā)展的基礎(chǔ)上，食品包裝材料也得到了相應(yīng)的發(fā)展，為了更好地包裝食品，便于攜帶，價(jià)格低等要求，從簡(jiǎn)單的包裝材料發(fā)展到復(fù)合材料。復(fù)合材料是指兩種或兩種以上的材料復(fù)合而成的固體材料，材料在性能上取長(zhǎng)補(bǔ)短，優(yōu)于原組成材料而滿足各種不同的要求?？梢杂薪饘倥c金屬的復(fù)合材料，金屬與非金屬的復(fù)合材料、金屬塑料復(fù)合材料、紙金屬塑料復(fù)合材料，非金屬與非金屬的復(fù)合材料紙塑復(fù)合材料。由于紙金屬塑料復(fù)合材料在綜合性能上具有紙金屬和塑料的優(yōu)點(diǎn)，因此在食品包裝過程中，使用較廣泛。
(三)無菌包裝容器的滅菌方法。
包裝材料滅菌方法主要有四種:加熱滅菌;藥劑滅菌;紫外線滅菌;射線滅菌。1．加熱滅菌。用溫度為130～160℃的過熱蒸汽噴射于需滅菌的包裝容器內(nèi)，在數(shù)秒鐘即完成滅菌操作。加熱滅菌具有無毒、無殘留有害物質(zhì)等優(yōu)點(diǎn)，但只適用于耐熱容器，如金屬容器、玻璃容器等，所以目前應(yīng)用并不很多。2．藥劑滅菌。用對(duì)微生物有殺死作用且對(duì)人體無害的化學(xué)藥劑進(jìn)行滅菌操作，一般可選用過氧化氫(雙氧水)、乙醇等。過氧化氫對(duì)包裝材料的適應(yīng)性強(qiáng)、殺菌的安全性高，是當(dāng)前無菌包裝容器滅菌采用最多的藥劑。3．紫外線滅菌。紫外線能使微生物細(xì)胞在吸收紫外線后，細(xì)胞內(nèi)的成分發(fā)生化學(xué)變化，使細(xì)胞質(zhì)變性而引起死亡。這種滅菌方法在常溫下可進(jìn)行，性價(jià)比好，安全性高，很適合包裝材質(zhì)的殺菌，其中波長(zhǎng)在250～260mm左右的紫外線滅菌能力最強(qiáng)。但紫外線易受物體表面平整度的影響，而且殺菌效果隨菌種不同也有較大差異。4．射線滅菌。用C060放射的γ射線在常溫下處理，穿透力強(qiáng)，殺菌可靠性高。此種滅菌方法成本高，但方法既高效又安全。在選擇包裝容器的滅菌方法時(shí)，應(yīng)考慮到不同容器的包裝材料、食品不同的包裝需要、價(jià)格的要求、各個(gè)殺菌方法的特點(diǎn)等。各滅菌方法也可結(jié)合，以達(dá)到更好的滅菌效果。例如紙盒先以環(huán)氧乙烯殺菌，充填前再涂抹H2O2，再加熱吹干;塑料袋狀容器常采用紫外線滅菌與藥劑滅菌合并使用。
三、無菌包裝的設(shè)備及環(huán)境
第3篇：土壤滅菌的方法范文
關(guān)鍵詞：菌肥;解磷菌;篩選;16S rDNA
中圖分類號(hào)：Q939.96;Q8 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2014）12-2763-04
Screening and Applying Strains as a Microbial Fertilizer of Phosphate and Potassium
WANG Fan1，LI Xue2，SUN Fang-yan3，LUO Zhe2，WANG Jian-ming1，QIAO Chang-sheng2，3
（1.Key Laboratory of Food Nutrition and Safety，Ministry of Education，College of Food Engineering and Biotechnology，Tianjin University of Science & Technology，Tianjin 300457，China; 2.Tianjin Peiyang Biotrans Co.，Ltd.，Tianjin 300457，China;
3.Tianjin Key Laboratory of Industry Microbiology/Key Laboratory of Industrial Fermentation Microbiology，Ministry of Education，Tianjin University of Science and Technology，Tianjin 300457，China）
Abstract： Three strains of bacteria including Bacillus megatherium，Bacillus thuringiensis，Bacillus mucilaginosus were screened according to great capacity of solubilzing phosphorus（P） and potassium（K） from 47 strains stored in the lab. Planting effect was tested with pot culture contained the fertilizer consisting of these three strains when it was applied to chlorophytum. The results showed that the fertilizer could increase length of roots and leaves，height of plant and fresh weight.
Key words： microbial fertilizer; phosphate-solubilizing bacteria; screen; 16S rDNA
由于化學(xué)肥料或有機(jī)肥料的大量施用以及施肥結(jié)構(gòu)的不合理，中國(guó)農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境的污染和破壞以及土壤理化性能下降等問題越來越嚴(yán)重。在綠色農(nóng)業(yè)已成為世界農(nóng)業(yè)發(fā)展方向的今天，應(yīng)大力提倡、發(fā)展和施用微生物肥料，堅(jiān)持走可持續(xù)發(fā)展的道路。
磷是植物生長(zhǎng)發(fā)育不可缺少的營(yíng)養(yǎng)元素之一，它以多種方式參與植物體內(nèi)生理生化過程，對(duì)促進(jìn)植物的生長(zhǎng)發(fā)育和新陳代謝起著重要的作用[1]。中國(guó)土壤中有大量含磷礦物質(zhì)存在，而可溶性磷缺乏，植物很難直接吸收利用[2]。研究表明，土壤中存在使難溶性磷溶解的微生物，能夠?qū)⒅参镫y以吸收利用的磷轉(zhuǎn)化為可吸收利用的形態(tài)，具有這種解磷能力的微生物叫做解磷菌[3]。
硅酸鹽細(xì)菌是土壤中一類能夠分解硅酸鹽類礦物并釋放出磷、鉀等元素供植物利用的細(xì)菌，同時(shí)具有固氮功能[4]。在植物根際能形成優(yōu)勢(shì)種，可以抑制其他病原菌的生長(zhǎng)，達(dá)到增產(chǎn)的效果，其發(fā)酵液中有激素物質(zhì)，代謝產(chǎn)物如多糖、有機(jī)酸、蛋白質(zhì)等有刺激和調(diào)控作物生長(zhǎng)的作用[5]。
利用生物菌肥將土壤中無效磷鉀轉(zhuǎn)變?yōu)榭衫脩B(tài)的磷鉀以供作物吸收利用，這無疑是一條新的重要的農(nóng)業(yè)技術(shù)途徑。
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 菌株 所用的菌株的名稱和來源見表1。
1.1.2 培養(yǎng)基 蒙金娜無機(jī)磷培養(yǎng)基：葡萄糖10.0 g/L，（NH4）2SO4 0.5 g/L，NaCl 0.3 g/L，KCl 0.3 g/L，MgSO4?7H2O 0.3 g/L，F(xiàn)eSO4?7H2O 0.03 g/L，MnSO4?4H2O 0.03 g/L，Ca3（PO3）2 5.0 g/L，蒸餾水1 000 mL，pH 7.0～7.5，121 ℃滅菌20 min;解鉀種子培養(yǎng)基：淀粉5.0 g/L，酵母膏1.0 g/L，K2HPO4?3H2O 2.0 g/L，MgSO4?7H2O 0.5 g/L，CaCO3 0.1 g/L，F(xiàn)eCl3?6H2O 0.005 g/L，pH 7.5～8.5，121 ℃滅菌20 min;解鉀發(fā)酵培養(yǎng)基：蔗糖10.0 g/L，MgSO4?7H2O 0.5 g/L，（NH4）2SO4 0.2 g/L，NaCl 0.1 g/L，CaCO3 0.1 g/L，鉀長(zhǎng)石粉5.0 g/L，pH 7.2～7.5，121 ℃滅菌20 min;通用培養(yǎng)基：葡萄糖10.0 g/L，K2HPO4?3H2O 6.0 g/L，KH2PO4 3.0 g/L，尿素1.5 g/L，酵母粉5.0 g/L，MgSO4?7H2O 0.4 g/L，pH 7.2，121 ℃滅菌20 min;膠質(zhì)芽孢桿菌培養(yǎng)基：蔗糖10.0 g/L，K2HPO4?3H2O 5.0 g/L，酵母粉0.5 g/L，F(xiàn)eCl3?6H2O 0.02 g/L，CaCO3 0.4 g/L，MgSO4?7H2O 0.2 g/L，pH 7.0，121 ℃滅菌20 min;營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基：蛋白胨10.0 g/L，牛肉膏3.0 g/L，NaCl 5.0 g/L，pH 7.2～7.4，121 ℃滅菌20 min。
1.1.3 主要儀器設(shè)備 電泳儀、基因擴(kuò)增儀、立式壓力蒸汽滅菌鍋、凝膠分析儀、超凈工作臺(tái)、數(shù)顯pH計(jì)、恒溫振蕩搖床、原子吸收分光光度計(jì)、紫外-可見分光光度計(jì)，具體情況見表2。
1.2 方法
1.2.1 解磷菌的初篩 將試驗(yàn)菌點(diǎn)接在蒙金娜無機(jī)磷平板上，5～7 d后觀察，菌落周圍有透明圈生成的即為解磷菌。
1.2.2 解磷菌的復(fù)篩 將初篩得到的各解磷菌1環(huán)接入蒙金娜無機(jī)磷液體培養(yǎng)基中，30 ℃，200 r/min，培養(yǎng)5 d，將發(fā)酵液以15 000 r/min離心10 min，收集上清液，采用鉬銻抗比色法[6]測(cè)定發(fā)酵液中速效磷含量，將各菌含磷量扣除空白值后進(jìn)行排序，選出5個(gè)高效解磷菌。
1.2.3 解鉀菌解鉀能力的測(cè)定 按照NY 882-2004附錄B的方法測(cè)定。
1.2.4 生物拮抗性 采用牛津杯法[7]將功能性強(qiáng)的菌株與膠質(zhì)芽孢桿菌進(jìn)行拮抗性篩選，培養(yǎng)后觀察菌落周圍有無抑菌圈，選出互不拮抗的功能菌株。
1.2.5 未知菌株的菌種鑒定 ①菌種初步鑒定。根據(jù)菌落形態(tài)與菌株生理生化特征，參照文獻(xiàn)[8]對(duì)分離所得菌株進(jìn)行鑒定：革蘭氏染色、菌體形態(tài)鏡檢、淀粉水解、蔗糖發(fā)酵、葡萄糖產(chǎn)酸反應(yīng)、V-P反應(yīng)、MR反應(yīng)。②16S rDNA的測(cè)序。C3解磷菌株的基因組提取參照參考文獻(xiàn)[9]，并以1%瓊脂糖凝膠電泳（110 V，35 min）驗(yàn)證：基因組2.0 μL，marker 3.0 μL，經(jīng)EB染色10 min后，利用凝膠成像系統(tǒng)成像。采用購于北京鼎國(guó)昌盛生物科技有限責(zé)任公司的PCR試劑盒進(jìn)行PCR擴(kuò)增（引物：AGAGTTTGATCCTGGCTCAG，GGTTACCTTGTTACGACTT）：94 ℃預(yù)變性2 min，擴(kuò)增30輪（94 ℃變性45 s，56 ℃復(fù)性45 s，72 ℃延伸60 s），72 ℃延伸加時(shí)5 min，4 ℃保存。完成后每管加上樣緩沖液2.0 μL，通過1%的瓊脂糖凝膠電泳（120 V，35 min）檢測(cè)，經(jīng)EB染色10 min后，利用凝膠成像系統(tǒng)成像，采用購于北京鼎國(guó)昌盛生物科技有限責(zé)任公司的DNA凝膠回收試劑盒進(jìn)行切膠回收純化，送至華大基因雙向測(cè)序鑒定，將測(cè)序結(jié)果雙向拼接后與NCBI數(shù)據(jù)庫比對(duì)，確定菌種。
1.2.6 生物菌肥產(chǎn)品的制備 ①生長(zhǎng)曲線的測(cè)定。將解磷菌接于裝有100 mL通用培養(yǎng)基的500 mL錐形瓶中，37 ℃，200 r/min培養(yǎng);定期取樣，測(cè)定其OD600 nm;將膠質(zhì)芽孢桿菌接于裝有50 mL膠質(zhì)芽孢桿菌培養(yǎng)基的500 mL擋板瓶中，37 ℃，200 r/min培養(yǎng)，定期取樣，測(cè)定其OD400 nm，并確定產(chǎn)品菌體培養(yǎng)時(shí)間。②產(chǎn)品生物量測(cè)定。將達(dá)發(fā)酵終點(diǎn)的解磷菌與膠質(zhì)芽孢桿菌稀釋涂布于營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基與膠質(zhì)芽孢桿菌培養(yǎng)基上，培養(yǎng)24～48 h，計(jì)數(shù)。③菌體培養(yǎng)與收集。將各菌按上述培養(yǎng)條件下培養(yǎng)至平穩(wěn)期，將各菌發(fā)酵液等體積混合，3 000 r/min，離心8 min，收集沉淀，以與總發(fā)酵液體積相等的自來水復(fù)溶菌體，即為成品肥液。
1.2.7 植株培養(yǎng)試驗(yàn) 取300 g土壤，裝于花盆（盆底打孔）中，施加肥液200 mL，待肥液浸透土壤后，將長(zhǎng)勢(shì)相當(dāng)?shù)牡跆m植株幼體（無根，4片葉，葉長(zhǎng)6 cm，平均株高6 cm，鮮重1 g）插于土中培養(yǎng)，每日澆水，每7 d追肥一次，同時(shí)設(shè)置空白對(duì)照組，當(dāng)試驗(yàn)組施肥時(shí)對(duì)照組施加等量自來水。定期觀察兩組植株長(zhǎng)勢(shì)，測(cè)定土壤pH，45 d時(shí)觀察植株，測(cè)量株高、葉長(zhǎng)、根長(zhǎng)、鮮重等參數(shù)，與空白對(duì)照對(duì)比。
2 結(jié)果與分析
2.1 解磷菌的初篩
按“1.2.1”操作，平板上出現(xiàn)透明圈的菌株為C1、C2、C3、11433、r3、r4、r8、r10、11002、11003、11008、11010、11020。
2.2 解磷菌的復(fù)篩
采用鉬銻抗比色法對(duì)r3、r4、r8、r10、11002、11003、11008、11010、11020、11433、C1、C2、C3進(jìn)行解磷量測(cè)定，結(jié)果見表3。確定11433、C1、C2、C3、11020為解磷菌，待做拮抗試驗(yàn)。
2.3 解鉀菌解鉀能力的測(cè)定
按照“1.2.3”所述方法對(duì)解鉀菌進(jìn)行解鉀量的測(cè)定，結(jié)果見表4。膠質(zhì)芽孢桿菌解鉀率為15.43%，有解鉀作用，待與解磷菌進(jìn)行拮抗試驗(yàn)。
2.4 生物拮抗性實(shí)驗(yàn)
由表5可知，C1、C2與11433、C3、23575相互拮抗，根據(jù)產(chǎn)品功能定位，最終確定11433、C3、23575為目標(biāo)菌株。
2.5 未知菌株16S rDNA鑒定
2.5.1 菌種初步鑒定 對(duì)篩選得到的解磷菌株C3進(jìn)行初步鑒定，試驗(yàn)結(jié)果見表6。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果，將C3菌株初步歸為蘇云金芽孢桿菌類群。
2.5.2 16S rDNA測(cè)序 提取菌株基因組后，進(jìn)行1%瓊脂糖凝膠電泳，在約1 500 bp處出現(xiàn)明顯特征條帶，將DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增、純化、測(cè)序，測(cè)序后拼接結(jié)果經(jīng)在NCBI上比對(duì)分析，此菌與Bacillus thuringiensis Bt407同源性最高，二者在發(fā)育樹上處于同一個(gè)分支上。根據(jù)文獻(xiàn)[10]，確定C3為蘇云金芽孢桿菌（Bacillus thuringiensis）。
根據(jù)微生物肥料生物安全通用技術(shù)準(zhǔn)則（NY 1109-2006）規(guī)定，蘇云金芽孢桿菌（C3）、巨大芽孢桿菌（11433）、膠質(zhì)芽孢桿菌（23575）的安全分級(jí)均為第一級(jí)，為可免做毒理學(xué)試驗(yàn)的菌種，直接用于生產(chǎn)。
故將菌肥生產(chǎn)菌株確定為蘇云金芽孢桿菌（C3）、膠質(zhì)芽孢桿菌（23575）、巨大芽孢桿菌（11433）。
2.6 生物菌肥產(chǎn)品的制備
2.6.1 生長(zhǎng)曲線的測(cè)定 按照“1.2.6”所述方法，對(duì)3菌進(jìn)行生長(zhǎng)曲線的測(cè)定與繪制，如圖1所示。由圖1可知，11433與23575在15 h左右進(jìn)入平穩(wěn)期，C3在18～19 h進(jìn)入平穩(wěn)期，為獲得最大的菌體量，選擇11433與23575培養(yǎng)16 h，C3培養(yǎng)18 h。
2.6.2 發(fā)酵終點(diǎn)生物量的測(cè)定 根據(jù)“1.2.6”所述方法，對(duì)3菌發(fā)酵液進(jìn)行涂布計(jì)數(shù)，測(cè)得此時(shí)發(fā)酵液的菌體濃度均達(dá)到108個(gè)/mL以上。
2.7 植株培養(yǎng)試驗(yàn)
采用成品肥液種植吊蘭，45 d時(shí)觀察吊蘭長(zhǎng)勢(shì)（圖2，表7），可見，施肥植株的長(zhǎng)勢(shì)明顯優(yōu)于空白對(duì)照，體現(xiàn)在葉長(zhǎng)、根長(zhǎng)、葉片展闊程度上。施肥植株的根系發(fā)達(dá)，葉長(zhǎng)有明顯增長(zhǎng)，新生葉片也多于空白對(duì)照，磷鉀生物菌肥對(duì)植株的生長(zhǎng)起到了促進(jìn)作用。
施肥后的土壤pH比未施肥的土壤pH有明顯降低（表8），這可能是由于菌體在生長(zhǎng)過程中分泌了酸類物質(zhì)至土壤中。
3 小結(jié)與討論
本研究從47株菌種篩選出2株解磷菌巨大芽孢桿菌和蘇云金芽孢桿菌，同時(shí)鑒定了膠質(zhì)芽孢桿菌的解鉀能力。對(duì)C3的個(gè)體形態(tài)進(jìn)行觀察與鑒定，結(jié)合菌落形態(tài)、生理生化指標(biāo)和16S rDNA序列分析，確定C3為蘇云金芽孢桿菌。將此3菌進(jìn)行培養(yǎng)并測(cè)定生長(zhǎng)曲線，確定平穩(wěn)期到達(dá)時(shí)間并以此作為培養(yǎng)終點(diǎn)，以獲得較大生物量。培養(yǎng)后取菌體與發(fā)酵液等體積自來水混合，施于土壤，培養(yǎng)吊蘭幼體，45 d時(shí)觀察吊蘭長(zhǎng)勢(shì)，其根長(zhǎng)、葉長(zhǎng)、葉片展闊程度與葉表光澤均表明施肥液培養(yǎng)的吊蘭狀態(tài)優(yōu)于空白對(duì)照，且施加了菌肥的土壤其pH有明顯的下降，說明菌體對(duì)植株的生長(zhǎng)有促進(jìn)作用，這是由于菌體在生長(zhǎng)過程中將土壤中難溶性的磷鉀分解為可被植物利用的形態(tài)，促進(jìn)植株生長(zhǎng)。并且施加了菌肥的土壤pH降低，這能否改變中國(guó)北方的鹽堿性土壤有待進(jìn)一步研究。
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第4篇：土壤滅菌的方法范文
關(guān)鍵詞：石油殘留污染；土壤；微生物修復(fù)
experimental study of microbial remediation for oil contaminated soil in central plains
zhang sheng,chen li,li zheng-hong,zhang cui-yun,yin mi-ying,he ze,
sun zhen-hua,ma lin-na,ning zhuo,zhang fa-wang （the institute of hydrogeology and environmental geology,cags，shijiazhuang 050061，china）
abstract:the laboratory modeling experiments of the oil residue pollution degradation in soil were carried out,which used the optimistic techniques of in-situ microbial communities combining with the physical and chemistry methods and the experimental study of microbial remediation for oil residue pollution in zhongyuan oil field.the results showed that degradation rate could reach 6227%-7240% for oil contents of 13 4200 mg/kg,10220.0 mg/kg and 8 6600 mg/kg in polluted soil after 56 d microbial degradation,which provided us the technology and the feasibility study of the remediation of oil residue pollution in soil.
key words: oil residual contamination;soil;microbial remediation
我國(guó)中原地區(qū)由于石油資源的長(zhǎng)期大量開采利用，產(chǎn)生了一些環(huán)境問題。尤其是落地原油的污染已影響土壤的質(zhì)量安全,特別是開采早期行成的石油污染，在土壤中經(jīng)長(zhǎng)期的自然降解許多易揮發(fā)和易降解的組分均已降解，土壤中殘留的難降解石油組分仍大量存在，且危害性更大，土壤石油污染的防治研究工作已受到人們的廣泛重視。jorgensen的試驗(yàn)顯示,經(jīng)生物堆埋,石油污染的土壤中石油可降低71%［1］。微生物修復(fù)技術(shù)主要機(jī)理是石油烴直接參與了微生物的生化反應(yīng),通過代謝作用降解土壤中的污染物［2］。土壤微生物修復(fù)技術(shù)的開發(fā)與研究已受到國(guó)內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注［3-16］。目前已知能降解石油中各種烴類的微生物共有約100余屬200多種，它們分屬于細(xì)菌、放線菌、霉菌、酵母以及藻類［16］。本文利用優(yōu)化土著微生物菌群輔以物理和化學(xué)方法相結(jié)合的綜合修復(fù)技術(shù)，對(duì)土壤中長(zhǎng)期殘留石油污染進(jìn)行降解模擬實(shí)驗(yàn)，取得了一些效果。該方法具有處理方法簡(jiǎn)單、費(fèi)用低、修復(fù)效果好、對(duì)環(huán)境影響小、無二次污染、可原位治理等優(yōu)點(diǎn)。因此，本研究為該技術(shù)的應(yīng)用提供了技術(shù)支撐，具有重要的實(shí)際意義。
1 實(shí)驗(yàn)材料和方法
1.1 實(shí)驗(yàn)材料
化學(xué)試劑： mgso.4·7h.2o、 nh.4no.3 、cacl.2、fecl.3、kh.2po.4、k.2hpo.4、kcl、（nh.4）.2so.4、 caco.3、nacl、可溶性淀粉、蔗糖、乳酸、鹽酸、酵母膏、牛肉膏、乙酸鈉、瓊脂、液體石蠟、石油醚、三氯甲烷等均為分析純。
其它實(shí)驗(yàn)材料：新鮮馬鈴薯、濮陽徐鎮(zhèn)鎮(zhèn)石油殘留污染土樣等等。
添加劑：牛糞晾干粉碎（過2 mm篩）在121℃滅菌30 min。
實(shí)驗(yàn)用土壤樣品采自河南省濮陽徐鎮(zhèn)鎮(zhèn)一廢棄采油井周圍，該油井1996年廢棄距今已有十多年。樣品采集從井口附近表層油泥至井口北部2 m處，2 m處采集表層0～25 cm和50～60 cm的土樣，表層土壤為褐色粉土土壤，可見有含石油團(tuán)塊。土壤下層為土黃色粉土土壤。表層土壤中含有少量2～5 mm的碎石，土壤濕容重為196 ～199 g/cm3；土壤干容重為161～172 g/cm3。自然含水量1445%～2414%；ph為827～89。井口附近表層油泥中殘油含量在421 200～64 800 mg/kg，井口北2 m外表層0～25 cm處殘油含量在8 320～27 400 mg/kg，混合平均后為13 420 mg/kg。下層50～60 cm的土樣殘油含量在214 mg/kg。
實(shí)驗(yàn)用玻璃器皿：150 ml、250 ml具塞三角瓶，125 ml、1 000 ml磨口細(xì)口試劑瓶，各種不同類型的細(xì)菌培養(yǎng)試管、培養(yǎng)皿、橡膠塞等。
主要儀器：qzd-1型電磁振蕩器、kq218超聲波清洗器、生物恒溫培養(yǎng)箱、高速離心機(jī)、高壓蒸汽滅菌器、無菌實(shí)驗(yàn)室、生化培養(yǎng)箱、hz150l恒溫?fù)u床培養(yǎng)箱、奧林巴斯生物顯微鏡、752n紫外可見光柵分光光度計(jì)、電熱干燥箱及各種化學(xué)分析用玻璃儀器。
1.2 測(cè)試方法
石油分析測(cè)試方法：為紫外分光光度法。
降解石油微生物細(xì)菌培養(yǎng)優(yōu)選方法：土壤微生物細(xì)菌培養(yǎng)用《土壤微生物研究法》［17］，和參考文獻(xiàn)［18］－［20］介紹的方法，細(xì)菌初步鑒定用《常見細(xì)菌系統(tǒng)鑒定手冊(cè)》［21］中的方法。
1.3 實(shí)驗(yàn)步驟
1.3.1 石油降解菌的分離與優(yōu)選
自然界的物質(zhì)循環(huán)微生物細(xì)菌的生化作用是非常重要的一環(huán)，碳的循環(huán)也不例外。許多細(xì)菌就是碳循環(huán)的主要驅(qū)動(dòng)因子之一，機(jī)理就是在細(xì)菌的作用下，將碳?xì)浠衔锝到鉃閏o.2和h.2o的整個(gè)過程，也是自然界對(duì)石油污染的自凈功能的生態(tài)效應(yīng)，對(duì)土壤和地下水環(huán)境保護(hù)具有一定的實(shí)際意義。據(jù)此用細(xì)菌的選擇性培養(yǎng)基和富集培養(yǎng)基，對(duì)中原油田濮陽徐鎮(zhèn)鎮(zhèn)一廢棄采油井石油殘留污染土壤的樣品進(jìn)行菌種、菌群的培養(yǎng)分離，選擇優(yōu)化出實(shí)驗(yàn)用降解土壤殘油的菌種、菌群。本次實(shí)驗(yàn)選擇優(yōu)化出的細(xì)菌初步鑒定主要為：假單胞菌屬、微球菌屬、放線菌屬、真菌類（毛霉、曲霉）等菌群。
1.3.2 土壤殘油污染降解實(shí)驗(yàn)步驟
根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)選出的降解殘油污染的優(yōu)勢(shì)菌群，利用不同的培養(yǎng)基對(duì)所選出的各類菌群進(jìn)行放大培養(yǎng)。各類菌群培養(yǎng)3～5 d后進(jìn)行混合培養(yǎng)，繼續(xù)培養(yǎng)5～7 d后作為相應(yīng)的石油烴降解實(shí)驗(yàn)。進(jìn)行模擬不同含量條件下土壤殘油污染的微生物修復(fù)實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)裝置為250 ml具塞三角瓶。
土壤殘油污染微生物降解模擬實(shí)驗(yàn)，用若干（按實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的數(shù)量）250 ml具塞三角瓶，每個(gè)瓶中加入100 g風(fēng)干過2 mm篩含有不同殘油含量的土壤樣品。實(shí)驗(yàn)用土樣考慮避免其它因素的影響,選用同一采樣點(diǎn)的樣品,只是采集60 cm以上不同深度含油量不同土樣,進(jìn)行了一定的配制。不同殘油含量的土壤樣品制備如下:1號(hào)樣為采樣點(diǎn)表層0～25 cm混合均勻后,測(cè)殘油含量為13 420 mg/kg。2號(hào)樣為1號(hào)樣加入同一采樣點(diǎn)下層50～60 cm的土樣20%混合均勻后,經(jīng)測(cè)試殘油含量為10 220 mg/kg。3號(hào)樣為1號(hào)樣加入同一采樣點(diǎn)下層50～60 cm的土樣35%混合均勻后,經(jīng)測(cè)試殘油含量為8 660 mg/kg。每個(gè)樣品均勻接入3 ml培養(yǎng)好的菌液，加入30 ml營(yíng)養(yǎng)液，營(yíng)養(yǎng)液按培養(yǎng)基成分比例調(diào)控氮、磷、鈣、鎂、硫、鐵等營(yíng)養(yǎng)元素，營(yíng)養(yǎng)液均勻加入，調(diào)節(jié)試驗(yàn)土層含水量在25%左右。按30 ℃溫度條件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，一定的間隔時(shí)間取出約1 g左右樣品，50 ℃～60 ℃烘干研碎，分析土壤中石油的降解去除的含量。在實(shí)驗(yàn)中每次取樣時(shí)要將剩余的實(shí)驗(yàn)瓶塞打開一下約3～5 min并攪拌，以利于氧氣進(jìn)入，使實(shí)驗(yàn)過程中有足夠的氧，并保持實(shí)驗(yàn)裝置內(nèi)土樣有一定的含水量。在第1號(hào)實(shí)驗(yàn)樣品中為增強(qiáng)細(xì)菌的作用利用牛糞晾干粉碎過篩滅菌后作為添加劑，添加量為1%。該添加劑有兩個(gè)主要作用，一是牛糞中主要成分為未分解的木纖維素，可為改良土壤的膨松劑，另外是其它有機(jī)成分，可作為細(xì)菌容易利用的營(yíng)養(yǎng)素來源，其它實(shí)驗(yàn)條件同其它。在一定時(shí)間取樣測(cè)試石油含量的變化。
2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
不同土壤殘油含量降解野外實(shí)驗(yàn)，是在2009年4月16日至6月12日進(jìn)行。 考慮研究區(qū)地表土壤春、夏、秋溫度一般在20 ℃～30 ℃左右，選擇了30 ℃溫度進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見
從上述3個(gè)實(shí)驗(yàn)條件來看差異不是很大，僅有兩點(diǎn)不同，一是1號(hào)樣添加了1%的滅菌牛糞作為添加劑，二是石油殘油量不同，其它實(shí)驗(yàn)條件一樣。但是對(duì)石油殘油的降解率還是有影響的，1號(hào)樣添加了1%的滅菌牛糞作為添加劑，改良了土壤，另外它增加了細(xì)菌利用的營(yíng)養(yǎng)來源加大了降解能力。其石油殘油量不同，因加入的營(yíng)養(yǎng)量是一樣的則降解效果不同。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,微生物細(xì)菌對(duì)土壤石油殘油污染確有一定的降解作用。表1、表2顯示,雖然實(shí)驗(yàn)選擇了不同的殘油含量的土壤進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)效果也有一定的差異。1號(hào)樣殘油含量最高，因其加入了1%的添加劑牛糞，從測(cè)試結(jié)果看雖然降解率是低了一點(diǎn)，但在相同其它條件下它的降解量是最大的，牛糞改良了土壤，增加了細(xì)菌利用的營(yíng)養(yǎng)來源加大了降解能力。殘油量在13 420 mg/kg經(jīng)56 d降解率達(dá)6267%。2號(hào)、3號(hào)樣因其殘油含量不同降解率有一定的差別，2號(hào)樣殘油量在10 220 mg/kg經(jīng)56 d降解率達(dá)6389%。3號(hào)樣殘油量在8 660 mg/kg經(jīng)56 d降解率達(dá)7240%。從2號(hào)、3號(hào)實(shí)驗(yàn)結(jié)果看，在相同實(shí)驗(yàn)條件下殘油含量越低降解效果越好，其原因是微生物細(xì)菌在同等條件下所利用的營(yíng)養(yǎng)資源量不同。從整個(gè)實(shí)驗(yàn)看土壤中因石油的長(zhǎng)期殘留污染，易降解的石油組分早已自然降解，殘留的組分是較難降解的有一部分是很難降解的，如瀝青等組分。本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果同前期的降解實(shí)驗(yàn)結(jié)果對(duì)比也有很大的差異，前期實(shí)驗(yàn)是用的新鮮原油加入實(shí)驗(yàn)體系中，一般在相同條件30 d可使石油降解率達(dá)85%～95%以上。而本次實(shí)驗(yàn)是在56 d實(shí)驗(yàn)，時(shí)間延長(zhǎng)了近一倍，殘油的降解也只有6267%～724%，也就是說石油污染土壤中的殘油確實(shí)較難降解。但是，只要是將實(shí)驗(yàn)條件和微生物菌群優(yōu)化選擇好，其殘油降解還是有較好的效果，從3組實(shí)驗(yàn)結(jié)果也得到了相互驗(yàn)證。
天然土壤中含有豐富的微生物,具有潛在的降解石油污染物的能力。且可降解石油的細(xì)菌在多年連續(xù)的污油中不斷馴化,具有較強(qiáng)的降解石油污染物的潛力。采用投加從原來土著體系中篩選出的微生物進(jìn)行生物強(qiáng)化，能克服其他外源菌所面臨的存活力較弱、與土著微生物之間可能存在競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系等一系列問題，且這種生物強(qiáng)化技術(shù)操作簡(jiǎn)便，實(shí)用性強(qiáng)，在生物修復(fù)方面具有較廣闊的應(yīng)用前景。石油是由上千種化學(xué)性質(zhì)不同的物質(zhì)組成的復(fù)雜混合物，用單種微生物細(xì)菌很難將其徹底降解，目前在石油污染的生物處理上，越來越多的國(guó)內(nèi)外學(xué)者采用細(xì)菌菌群進(jìn)行生物處理 。如何能消除菌群種間的抑制作用，構(gòu)建出優(yōu)勢(shì)混合菌群是目前菌群研究所要解決的一個(gè)問題，也是本實(shí)驗(yàn)研究的目的之一。本次實(shí)驗(yàn)通過對(duì)石油殘油污染土壤微生物修復(fù)方法的模擬實(shí)驗(yàn)研究，利用優(yōu)化原位土著微生物菌群輔以物理和化學(xué)方法相結(jié)合的修復(fù)技術(shù)，進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)溫度、水、氧氣、營(yíng)養(yǎng)元素等的調(diào)控，對(duì)土壤中殘油的降解實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了微生物修復(fù)技術(shù)在土壤石油殘油污染降解的有效性和應(yīng)用的可行性。為野外原位試驗(yàn)提供了經(jīng)驗(yàn)，奠定了基礎(chǔ)，積累了技術(shù)。
3 結(jié)論
通過上述降解實(shí)驗(yàn),微生物細(xì)菌對(duì)土壤石油殘油污染的修復(fù)是有較好的降解作用。雖然實(shí)驗(yàn)樣品土壤石油殘油含量不同，實(shí)驗(yàn)效果還是有一定的差異。1號(hào)樣利用牛糞晾干粉碎作為添加劑，增加了細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)來源，增大了去除效果。2號(hào)、3號(hào)樣在同等實(shí)驗(yàn)條件下殘油含量低降解效果好，得到了相互驗(yàn)證的效果。從整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程可得出土壤中石油殘油含量在13 420 mg/kg、10 220 mg/kg、8 660 mg/kg、時(shí)，經(jīng)過56 d微生物降解實(shí)驗(yàn)，土壤中石油殘油含量降解可達(dá)6267%、6389%、7240%，為土壤石油殘油污染的修復(fù)提供了技術(shù)方法和應(yīng)用的可行性。驗(yàn)證了本次實(shí)驗(yàn)調(diào)控添加的營(yíng)養(yǎng)元素和對(duì)土壤環(huán)境的改善是比較適度的，方法是可行的。具有處理方法簡(jiǎn)單、費(fèi)用低、修復(fù)效果好、對(duì)環(huán)境影響小、無二次污染、可原位修復(fù)等優(yōu)點(diǎn)。雖然是實(shí)驗(yàn)研究,用于野外大面積修復(fù)還有待完善,但通過不斷努力是可以實(shí)現(xiàn)的，是具有較好的應(yīng)用價(jià)值。
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第5篇：土壤滅菌的方法范文
1 材料和方法
1.1 材 料
供試黃瓜品種:津研4號(hào),市售。
病原菌:尖孢鐮刀菌( Fusarium oxysporum f. sp.Cucumerinum )由天津市植物保護(hù)研究所蔬菜病害室分離保存。
1.2 方 法
1.2.1 黃瓜根系分泌物的收集 采用穴盤播種,每穴1粒,種子用無菌水沖洗3 次,然后在55 ℃的溫水中攪拌至恒溫浸種10 h ,在25 ℃恒溫箱內(nèi)催芽,待胚根長(zhǎng)約0. 5 cm 時(shí),分別播種于盛有滅菌蛭石、泥炭土及生物土壤添加劑混合的50 孔穴盤中。待所有試驗(yàn)用苗第2 片真葉展開時(shí),洗凈根部,沖洗后,移至滅菌穴盤內(nèi),放入含有5 L 蒸餾水的培養(yǎng)槽中通氣培養(yǎng)2 d 后收集培養(yǎng)液,將收集的培養(yǎng)液用布氏漏斗粗過濾3 遍,再用0.45 μm膜過濾后,取收集液200 mL,將濾液冷藏備用。
1.2.2 種子發(fā)芽試驗(yàn) 將飽滿的黃瓜種子浸漬在根系分泌物中8 h,取出后每皿放20粒,用浸液將濾紙浸潤(rùn),置于皿底,重復(fù)3次,以滅菌水處理為對(duì)照,室溫下培養(yǎng)72 h調(diào)查種子發(fā)芽數(shù),計(jì)算發(fā)芽率,以及測(cè)量發(fā)芽種子的下胚軸長(zhǎng)度。
1.2.3 培養(yǎng)基的制備 將收集的根系分泌物與融化后冷卻至50 ℃左右的PDA培養(yǎng)基按1∶9混勻,制成平板。試驗(yàn)處理為:A,菇渣浸提液;B,菇渣浸提液+根系分泌物;C,木屑;D,木屑+根系分泌物;E,生物土壤添加劑浸提液;F,生物土壤添加劑浸提液+根系分泌物; G,滅菌水;H,根系分泌物。每處理重復(fù)3次,平皿中央接入活化培養(yǎng)的黃瓜枯萎病鐮刀菌5 mm菌片,置于25 ℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)4 d 后調(diào)查菌落半徑增加值,計(jì)算不同處理的抑菌率。
1.2.4 根系分泌物對(duì)黃瓜主要土傳病菌的影響 培養(yǎng)基制備及調(diào)查同1.2.3。試驗(yàn)處理為: 生物土壤添加劑根系分泌物,對(duì)照為無菌水。每處理重復(fù)3次,平皿中央分別接入活化培養(yǎng)的黃瓜枯萎病鐮刀菌、立枯絲核菌、腐霉菌及核盤菌,菌片直徑5 mm,置于25 ℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48 h后調(diào)查菌落半徑增加值,計(jì)算不同處理的抑菌率。
2 結(jié)果與分析
2.1 生物土壤添加劑處理的根系分泌物對(duì)種子發(fā)芽的影響
圖1表明,生物土壤添加劑處理根系分泌物較對(duì)照田園土的根系分泌物種子發(fā)芽率提高5.33%,較枯萎病菌處理提高27.42%,略低于清水對(duì)照處理。生物土壤添加劑浸提液的處理具有明顯促進(jìn)種子萌發(fā)作用。圖2顯示根系分泌物對(duì)黃瓜種子生長(zhǎng)勢(shì)的影響,具體表現(xiàn)為對(duì)下胚軸生長(zhǎng)的影響,生物土壤添加劑浸提液具有同樣的促進(jìn)下胚軸伸長(zhǎng)作用,生物土壤添加劑根系分泌物對(duì)下胚軸伸長(zhǎng)僅次于清水對(duì)照處理,顯著好于常規(guī)根系分泌物及枯萎病菌處理。由此可見,生物土壤添加劑能夠消解根系分泌物的抑制作用。
2.2 根系分泌物對(duì)黃瓜枯萎病菌的影響
室內(nèi)抑菌作用表明,生物土壤添加劑浸提液對(duì)枯萎病菌具有顯著的抑制作用,與根系分泌物混合后的抑制率仍可達(dá)97.3%,根系分泌物對(duì)枯萎病菌無抑制作用。菇渣的提取液同樣具有較強(qiáng)的抑菌作用,與根系分泌物混和,抑菌效果可達(dá)89%,木屑的提取液及木屑與根系分泌物混合物的抑菌效果均在85%以上。生物土壤添加劑及其組分處理的根系分泌物均對(duì)黃瓜枯萎病菌有很好的抑制作用。
2.3 根系分泌物對(duì)黃瓜立枯絲核菌、腐霉菌等土傳病菌的影響
由圖4可以看出,生物土壤添加劑處理后,黃瓜根系分泌物對(duì)立枯絲核菌抑制作用最明顯,達(dá)50%以上,對(duì)黃瓜枯萎病和菌核病也有一些抑制作用,對(duì)腐霉菌的抑制作用較差。對(duì)照處理的根系分泌物對(duì)幾種病原菌無抑制作用,對(duì)一些病原菌如枯萎病反而有促進(jìn)作用。
3 討 論
單一作物的連續(xù)種植,形成了特殊的土壤環(huán)境,作物根系分泌物和植株殘茬腐解物給病原菌提供了豐富的營(yíng)養(yǎng)和寄主,長(zhǎng)期適宜的溫度和環(huán)境,使病原菌具有良好的繁殖條件,從而使得病原菌數(shù)量不斷增加,致使病害蔓延。利用工農(nóng)業(yè)廢棄物結(jié)合拮抗菌配制的生物土壤添加劑對(duì)黃瓜連作障礙具有明顯的緩解作用。以適量生物土壤添加劑為基質(zhì)收集的根系分泌物較常規(guī)根系分泌物對(duì)黃瓜種子發(fā)芽的影響小,對(duì)種子生長(zhǎng)勢(shì)的影響同樣較小。生物土壤添加劑根系分泌物對(duì)黃瓜立枯病的抑菌作用較強(qiáng),同時(shí)對(duì)枯萎病鐮刀菌、菌核病等土傳病菌也有抑制作用。生物土壤添加劑浸提液能明顯促進(jìn)種子萌發(fā),促進(jìn)種子下胚軸的伸長(zhǎng),對(duì)枯萎病菌有很強(qiáng)的抑制作用。研究表明,生物土壤添加劑能夠消解根系分泌物的抑制作用,促進(jìn)植株提早出苗及生長(zhǎng)。
根系分泌物作為微生物的營(yíng)養(yǎng)源,隨著連作年限的增加,根系分泌物中的某些有毒物質(zhì)提供了病原菌的營(yíng)養(yǎng),促進(jìn)了病原菌的繁殖,減弱或消除了某些有益菌的拮抗作用,使有害菌增殖,結(jié)果表現(xiàn)為發(fā)病率高,土傳病害嚴(yán)重。吳鳳芝[6]認(rèn)為,連作條件下黃瓜的根系分泌物可以有效促進(jìn)黃瓜枯萎菌菌絲的生長(zhǎng),在作物連作條件下,根系分泌物的產(chǎn)生是根際環(huán)境的核心問題。鄒麗蕓[7]在研究西瓜自毒作用中發(fā)現(xiàn),西瓜根系分泌物中大多數(shù)是酚類物質(zhì),是西瓜產(chǎn)生自毒作用的主要原因。黃奔立[8]報(bào)道了茄根系分泌物對(duì)大麗輪枝菌及菌核病菌的生長(zhǎng)和孢子萌發(fā)有明顯的促進(jìn)作用,對(duì)灰葡萄孢的影響較小。田永強(qiáng)[9]研究發(fā)現(xiàn),根系分泌物中的確有一種或幾種物質(zhì)能夠?qū)菸【鹱饔?不同抗性材料的根系分泌物對(duì)病原菌作出的反應(yīng)不同, 抗病材料的反應(yīng)強(qiáng)于感病材料;在菌絲體侵入到根的皮層細(xì)胞時(shí), 抗病品種中出現(xiàn)的細(xì)胞增厚, 感染細(xì)胞溶解死亡的現(xiàn)象多于感病品種。韓雪[10]報(bào)道了黃瓜對(duì)枯萎病等土傳病害的抗性與根系分泌物對(duì)病原菌的作用有密切關(guān)系。生物土壤添加劑將有益微生物菌株與發(fā)酵肥有機(jī)結(jié)合的一種土壤調(diào)理劑,從改善土壤養(yǎng)分,促進(jìn)養(yǎng)分吸收,抑制土傳病害分解或轉(zhuǎn)化自毒物質(zhì),誘導(dǎo)抗性物質(zhì)等方面,減緩連作障礙的發(fā)生。生物土壤添加劑對(duì)根系分泌物的作用可能有拮抗菌株的降解作用,也可能是生物土壤添加劑浸提液中的一些化合物對(duì)根系分泌物中某些成分起作用,還需進(jìn)一步研究。
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第6篇：土壤滅菌的方法范文
關(guān)鍵詞 果園套種；木耳；金福菇；姬菇；栽培技術(shù)
中圖分類號(hào) S646.04+.7 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 B 文章編號(hào) 1007-5739（2014）15-0120-02
Interplanting Cultivation Techniques of Edible Fungi in Orchard
YANG Gui-zhen E Xiao-qing GAN Min-jian
（Guigang Institute of Agricultural Sciences in the Guangxi Zhuang Autonomous Region，Guikang Guangxi 537100）
Abstract Interplanting cultivation techniques of edible fungi in orchard were summarized，including agaric，Tricholoma Lobayense Heim，Pleurotus cornucopiae etc.，so as to provide reference.
Key words interplanting in orchard；agaric；Tricholoma Lobayense Hei；Pleurotus cornucopiae；cultivation techniques
果園內(nèi)空氣濕度大，光照強(qiáng)度低，富含氧氣，正符合食用菌生長(zhǎng)，食用菌生長(zhǎng)所釋放出大量的二氧化碳又能使果樹加強(qiáng)光合作用，促進(jìn)果樹的生長(zhǎng)，食用菌菌渣成為有機(jī)肥施進(jìn)果園，有效改善果園土壤結(jié)構(gòu)，在干旱季節(jié)食用菌管理過程中多余的水又可以使果樹再利用，果園里建棚栽培食用菌，可以抑制果園雜草滋生，減少水土流失，提高土地利用率，促進(jìn)生產(chǎn)發(fā)展，增加經(jīng)濟(jì)收入。近幾年來，貴港市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所一直從事果園食用菌間套種栽培技術(shù)方面的研究，探索出一種創(chuàng)新的農(nóng)業(yè)種植模式，果菌結(jié)合，做到了樹上長(zhǎng)果，樹下結(jié)菇，取得了較好的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。現(xiàn)將具體栽培技術(shù)總結(jié)如下。
1 食用菌栽培場(chǎng)地的選擇與建棚
選擇樹齡較大、遮蔭較好的果園建棚，一般用鐵管拱成1個(gè)長(zhǎng)30～40 m，寬4.2～4.5 m、高2.0～2.2 m的拱形棚，距離地面1 m高的周邊（除門外）用60目的防蟲網(wǎng)圍住，棚頂用薄膜蓋好（與防蟲網(wǎng)相交接），然后蓋上遮光率為90%的遮陽網(wǎng)[1-2]。
2 木耳栽培技術(shù)
木耳是一種木腐生型食用菌，其生長(zhǎng)發(fā)育需要的主要營(yíng)養(yǎng)為纖維素、半纖維素、木質(zhì)素，還需要適量的蛋白質(zhì)、維生素和無機(jī)鹽。菌絲的最適宜溫度為20～28 ℃，子實(shí)體生長(zhǎng)的最適溫度為15～25 ℃，按照貴港地區(qū)的氣候，出菇季節(jié)安排在4―5月出菇，裝袋提前50～60 d。
2.1 培養(yǎng)基配制
使用的培養(yǎng)基配方為玉米芯20%、桑枝30%、棉籽殼41.8%、麥皮5%、石灰2%、石膏1%、防霉劑0.2%。
2.2 原料處理
按配方所需的已粉碎的玉米芯、桑枝淋濕鋪在已淋濕的棉籽殼上，放置1 d讓多余的水流走，灑上所需的石灰、石膏，用拌料機(jī)將料充分?jǐn)嚢杈鶆蚪ǘ选?/p>
2.3 裝袋、滅菌與接種
料建堆3～4 d后可進(jìn)行裝袋。先調(diào)濕度，把料堆表面的干料淋濕，使料的含水量達(dá)料水比為1.00∶（1.10～1.25），加上配方所需的防霉劑、麥皮，用拌料機(jī)把料攪拌均勻即可進(jìn)行裝袋，用聚乙烯塑料袋裝袋，裝袋時(shí)要使培養(yǎng)料松緊適宜，上下均勻一致，周圍豐滿無空隙，裝料過實(shí)過緊容易使塑料袋破損，料過松菌絲生長(zhǎng)纖細(xì)無力。一般1袋裝濕料重1.9～2.0 kg，裝好袋后用繩子扎緊袋口裝進(jìn)鐵框，每框9袋。裝袋完畢，立即裝爐滅菌，滅菌采用常壓滅菌，溫度到達(dá)100 ℃時(shí)保壓9 h。滅菌結(jié)束后，爐溫下降至60～70 ℃時(shí)進(jìn)行御爐，把菌包移入已清潔消毒好的接種培養(yǎng)室的培養(yǎng)架上擺好，待菌包溫度降至30 ℃以下時(shí)進(jìn)行接種，1個(gè)菌包用種為8～10 g，接種完畢，把培養(yǎng)室打掃干凈[3-4]。
2.4 發(fā)菌管理
培養(yǎng)室的濕度為50%～70%即可，春季氣溫較低，氣溫低于20 ℃時(shí)要注意加溫，使培養(yǎng)室的溫度為20～25 ℃，溫度高于30 ℃時(shí)注意通風(fēng)換氣，以利于菌絲生長(zhǎng)。
2.5 出菇管理
菌包接種后45～60 d，菌包菌絲吃透料，部分菌包出現(xiàn)耳芽時(shí)就可以把菌包移入出菇棚出菇。菇包入棚前首先把菇棚周圍的雜草清除干凈，把樹葉清掃干凈燒掉，菇棚及周邊殺蟲殺螨1次，棚內(nèi)再撒一些石灰粉后即可把菌包移入出菇棚擺包出菇。擺包時(shí)，1個(gè)棚留1條縱向的人行道以便噴水和采菇，菌包用繩子把袋口扎緊后擺放成行，行距一般為20～24 cm，菌包擺成行后用小刀在每一個(gè)菌包上割3～4個(gè)長(zhǎng)10 cm、深1.0～1.5 cm的豎裂口，裂口一般距菌包頂部4 cm、距菌包底部5 cm。擺包完畢，向地面灑水以增加空氣濕度。割包5～7 d后木耳陸續(xù)現(xiàn)蕾，此時(shí)期注意加強(qiáng)水分的管理工作，隨著耳片的增多增大，逐漸加大噴水量和通風(fēng)量，噴水量要根據(jù)天氣變化而變化，晴天多噴，雨天少噴，注意菇體的干濕交替，有利于木耳的正常生長(zhǎng)。
2.6 采收及轉(zhuǎn)潮管理
當(dāng)耳片充分展開、邊緣起皺就可以采收了，采收的原則是摘大留小，不傷小耳，一般采2～3次把一潮的木耳全部采完。采完一潮后，清除菌包上的殘留耳根，將耳床清理干凈，殺蟲殺螨1次，停水2～3 d，以利于菌絲的恢復(fù)，4～5 d第2潮木耳現(xiàn)蕾，又像第1潮一樣管理。一般木耳可采3～4潮，生物學(xué)轉(zhuǎn)化率可達(dá)88%～94%。
3 金福菇的栽培技術(shù)
金福菇菇體碩大，菌肉肥厚嫩白，營(yíng)養(yǎng)豐富，味微甜而鮮，耐貯性好，適宜鮮銷。菌絲生長(zhǎng)溫度15～38 ℃，最適溫度為27～30 ℃，子實(shí)體形成溫度范圍為18～30 ℃，最適溫度為20～28 ℃，金福菇對(duì)低溫較敏感，晝夜溫差大時(shí)對(duì)出菇不利。一般在4月上旬濕料、裝袋、接種，7月上旬覆土，覆土后10～15 d現(xiàn)蕾出菇。
3.1 培養(yǎng)基配制
使用的培養(yǎng)基配方為玉米芯36.8%、棉籽殼55%、麥皮5%、石灰2%、石膏1%、防霉劑0.2%。
3.2 原料處理
方法與木耳的原料處理方法一樣。
3.3 裝袋、滅菌、接種
除了滅菌時(shí)間保壓6 h不同外，其他的與木耳的裝袋、接種方法一樣。
3.4 發(fā)菌管理
在菌包的發(fā)菌過程中，氣溫較高時(shí)注意通風(fēng)換氣，及時(shí)清除感染雜菌的菌包。
3.5 出菇管理
菌包菌絲培養(yǎng)60～65 d后，菌絲吃透料就可以把菌包脫袋覆土，覆土的泥土最好選擇塘泥土，它透氣性好，富含有機(jī)質(zhì)。覆土前先對(duì)塘泥進(jìn)行調(diào)濕與消毒，把土粒敲成0.5～3.0 cm大小的顆粒，調(diào)成含水量為 20%～30%，邊噴5%福爾馬林溶液，建堆，用薄膜密封24 h后揭膜讓福爾馬林的氣味揮發(fā)掉，2 d后即可以覆土。覆土前把菌包薄膜全部脫掉側(cè)臥擺成畦，菌棒之間留1～2 cm的空隙，然后蓋上3～4 cm厚的已消毒的泥土，把畦面弄平，覆土結(jié)束。覆土后可大量淋水，使土壤含水量達(dá)飽和狀態(tài)。6～8 d后白色的菌絲爬出土面，12～14 d后菌絲扭結(jié)，保持空間含水量達(dá)80%～90%，加強(qiáng)通風(fēng)換氣，促進(jìn)原基的形成。15～17 d形成菇蕾，菇蕾階段在小氣候中生長(zhǎng)，一般不噴水，干燥時(shí)噴霧化水于空間使空氣相對(duì)濕度達(dá)80%～90%，當(dāng)菇體長(zhǎng)到3 cm高時(shí)每天噴水1～2次，噴水時(shí)要掌握菇多菇大的地方多噴，菇小菇少的地方少噴或不噴[5-6]。
3.6 采收及轉(zhuǎn)潮管理
從菇蕾形成到成熟采收一般需要5～7 d，當(dāng)菌蓋肥厚緊實(shí)、菌膜尚未破傘時(shí)采收，品質(zhì)最好；采收過遲，成熟過度，品質(zhì)下降；過小采收，會(huì)影響產(chǎn)量。采收時(shí)成叢拔起，把菇體分開，用小刀削去菇體上的泥土。一潮菇采收結(jié)束之后，清除料面的殘留菌柄、菇腳和死亡的菇蕾，用泥土把外露菌包的畦面填平，停水2～3 d養(yǎng)菌，然后像第1潮一樣管理，2周內(nèi)會(huì)形成第2批原基。一般可采2～3潮，生物學(xué)轉(zhuǎn)化率達(dá)50%～70%。
4 姬菇的栽培技術(shù)
姬菇的菌蓋為貝殼狀或扇狀，側(cè)生，嫩滑可口，是百姓餐桌上的佳品，耐儲(chǔ)運(yùn)，投資少，見效快，收益高，市場(chǎng)前景很好。菌絲的生長(zhǎng)溫度為6～28 ℃，最適溫度為20～26 ℃，高于32 ℃菌絲生長(zhǎng)不良；出菇溫度為4～26 ℃，最適溫度為6～20 ℃，夏季炎熱的季節(jié)不出菇，低于4 ℃時(shí)不易形成原基[1]。根據(jù)貴港地區(qū)的氣候與市場(chǎng)銷售情況，一般安排9月中下旬至11月上旬做出菇袋，10月中下旬至翌年的3月收菇結(jié)束。
4.1 培養(yǎng)基配方
使用的培養(yǎng)基配方為棉籽殼47.06%、玉米芯44.76%、玉米粉5%、石灰3%、防霉劑0.2%。
4.2 原料處理
方法與木耳的原料處理方法相同。
4.3 裝袋、滅菌、接種及發(fā)菌管理
料建堆2～3 d后可進(jìn)行裝袋。先調(diào)濕度，把料堆表面的干料淋濕，使料的含水量達(dá)料比水為1.0∶（1.2～1.4），加上配方所需的防霉劑、玉米粉，用拌料機(jī)把料攪拌均勻即可進(jìn)行裝袋，用36 cm×13/23 cm的聚乙烯塑料袋裝袋，裝袋時(shí)要使培養(yǎng)料松緊適宜，上下均勻一致，周圍豐滿無空隙。一般1袋裝濕料重2.0～2.2 kg，裝好袋后用繩子扎緊袋口裝進(jìn)鐵框，每框9袋。裝袋完畢，立即裝爐滅菌，滅菌采用常壓滅菌，溫度到達(dá)100 ℃時(shí)保壓6 h。滅菌結(jié)束后，爐溫下降至60～70 ℃時(shí)進(jìn)行御爐，把菌包移入已消毒的清潔的果園里的出菇棚里，待菌包溫度降至30 ℃以下時(shí)進(jìn)行接種，1個(gè)菌包用種為8～10 g，套上套環(huán)，用膠圈把報(bào)紙（已滅菌的）扎緊在套環(huán)外封口，然后把菌包單個(gè)直立成行擺放培養(yǎng)菌絲，菌包之間留1～2 cm的空隙以便散熱。在此期間要注意如果氣溫過高，可以把菇棚的防蟲網(wǎng)掀起以通風(fēng)降溫。
4.4 出菇管理
菌包菌絲培養(yǎng)30 d左右，菌絲吃透料，少數(shù)菌包現(xiàn)蕾，就可以疊包解報(bào)紙出菇，疊包時(shí)菇棚中間留1條便于淋水和采菇的人行道，在人行道兩側(cè)把菌包壘成4～6個(gè)菌包高單排或雙排的墻式堆碼，把菌包口的報(bào)紙解完后立即淋水進(jìn)入第1潮的出菇管理工作，每天噴水2次，3～4 d現(xiàn)蕾，菇棚的空氣濕度保持85%～95%，噴水的次數(shù)與多少應(yīng)根據(jù)天氣情況、出菇數(shù)量和菇體大小而定，宜噴霧狀水，子實(shí)體珊瑚期不宜直接向菇體噴水[2]。
4.5 采收及轉(zhuǎn)潮管理
當(dāng)一叢菇中大部分子實(shí)體菌蓋直徑達(dá)2～3 cm、菌柄長(zhǎng)度4～5 cm時(shí)，及時(shí)采收，用手握住整叢菇的基部，拔下整叢菇體，小心放入框內(nèi)，避免損傷，然后在距菌蓋3～4 cm處剪去菌柄基部，將連接的菇體分為單個(gè)，去掉小菇，分級(jí)真空包裝，每袋2.5 kg。采完一潮后，清理菇腳，停水2～3 d讓菌絲休復(fù)，5～7 d即可轉(zhuǎn)潮，又像第1潮一樣管理。姬菇一般可采5～7潮，生物學(xué)轉(zhuǎn)化率可達(dá)90%～110%。
5 參考文獻(xiàn)
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第7篇：土壤滅菌的方法范文
關(guān)鍵詞：白蠟；育苗；技術(shù)
收稿日期：2012-01-06
作者簡(jiǎn)介：沙明良（1971―），男，吉林通化人,工程師,主要從事營(yíng)林工作。
中圖分類號(hào)：S759.7
文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B
文章編號(hào)：1674-9944(2012)02-0092-01
1 引言
白蠟(Fraxinus chinensis Roxb)屬于木樨科,屬植物,是東北林區(qū)主要造林樹種和綠化樹種。白蠟分布比較廣泛,在我國(guó)的吉林、遼寧、黑龍江、內(nèi)蒙古、河北、山西、河南、湖南、湖北、廣東、廣西、福建、陜西、甘肅等省份均有分布,此外,俄羅斯、朝鮮、日本也有分布。白蠟為落葉喬木,高達(dá)25m,胸徑可達(dá)40cm。樹冠卵圓形,樹皮黃褐色。小枝光滑無毛。奇數(shù)羽狀復(fù)葉,對(duì)生,小葉5~9枚,通常7枚,卵圓形或卵狀披針形,長(zhǎng)3~10cm,先端漸尖,基部狹,不對(duì)稱,緣有齒及波狀齒,表面無毛,背面沿脈有短柔毛。圓錐花序惻生或頂生于當(dāng)年生枝上,大而疏松;橢圓花序頂生及側(cè)生,下垂,夏季開花。花萼鐘狀，無花瓣。翅果倒披針形,長(zhǎng)3~4cm?；ㄆ?~5月,果10月成熟,翅果扁平,披針形。
白蠟為陽性樹種,幼齡期稍耐庇蔭,成齡后需要充分光照。比較耐干旱,也耐水濕,喜歡生長(zhǎng)在排水良好的沙質(zhì)壤土。耐寒,在東北地區(qū)-40℃的嚴(yán)寒條件下生長(zhǎng)發(fā)育正常。主根、側(cè)根都比較發(fā)達(dá),伐根具有較強(qiáng)的萌蘗性,萌條生長(zhǎng)迅速。
白蠟既是制作各種家具、樂器、體育器具、車船、機(jī)械及特種建筑材料,又是獨(dú)特風(fēng)景園林、庭院景觀綠化的精品樹種。
2 材料與方法
2.1 苗圃地的選擇
選擇了土層深厚、土壤肥沃、結(jié)構(gòu)疏松,排水性能好的沙質(zhì)壤土,土壤pH值在6左右,便于灌溉,便于管理,便于運(yùn)輸,坡度比較平緩的地塊作為苗圃。
2.2 整地做床。
苗圃地選擇之后,秋季進(jìn)行了深翻,以殺蟲滅菌。播種前細(xì)致整地,做到平、松、勻、細(xì)。對(duì)沙土地、粘土地則采取有效的土壤改良措施,如多施有機(jī)肥料,大量混沙或客土,改善土的理化性狀。春季進(jìn)行耙地整平做床。新開墾的山地苗圃土壤比較肥沃,可以適當(dāng)減少施肥量,施腐熟的豬糞4kg/m2。同時(shí),要搞好土壤消毒處理,施40kg/hm2滅菌靈和50kg/hm2硫酸亞鐵以預(yù)防病害。床長(zhǎng)度一般以20m為宜,床面寬1.10m,床高12cm,步道寬40cm,床面要整平壓實(shí),方可播種。
2.3 種子處理
白蠟春播種子采用低溫層積催芽處理方法。即在播種前3個(gè)月,將種子用常溫水浸種2d撈出,將種子混濕沙(種為1∶3)進(jìn)行低溫層積處理。選勢(shì)地勢(shì)較高,排水良好,背風(fēng)背陰的地方挖溝,溝的深度原則上在凍土層以下,地下水位以上,溝寬80cm,溝的長(zhǎng)度視種子的數(shù)量而定。先在溝底鋪一層10cm厚的濕沙,再把種子與濕沙充分混合均勻,放入溝內(nèi),種沙厚度為50~70cm,離地面10cm加蓋濕沙,留好通氣孔。然后,覆土使頂呈屋脊?fàn)?。一般處理時(shí)間為80d左右。翌年春播種前一周將種子篩出,在陽光下翻曬,種子裂嘴率達(dá)30%以上即可播種。
2.4 播種及田間管理
第8篇：土壤滅菌的方法范文
一、栽培技術(shù)
1、整地：選擇土壤疏松，排水良好，有機(jī)質(zhì)豐富，保水保肥力強(qiáng)的土壤為宜，深耕曬地。
2、 施肥：每畝施入腐熟農(nóng)家肥2-3噸，曬垡7～10天后精細(xì)整地，以1.8～1.9米開墑。
3、 播種：當(dāng)苗地準(zhǔn)備好后，然后把種子直接播在苗地上，澆水后用4.5%百事達(dá)乳油3000倍液、5%功夫乳油3000倍液澆施苗地防止地下害蟲，每畝大田栽培需苗地15-20平方米，一般每畝大田用種量25～30克，用遮陽網(wǎng)覆蓋，然后壓實(shí)即可。一般按32×35公分的株行距進(jìn)行移栽，每畝種植4800-5200株，移栽時(shí)淘汰莖部已膨大的苗子，以免早期抽薹。
4、 田間管理
移栽后及時(shí)澆水，移栽成活后兌水澆施氫銨每畝8～10公斤加普鈣10公斤。以后控水控肥，加強(qiáng)中耕，蓮座期至葉片封壟澆水追肥，每畝施尿素10～15公斤，硫酸鉀5公斤，以后見干見濕。莖部開始肥大時(shí)，第三次追肥，每畝穴施三元復(fù)合肥50公斤，硫酸鉀10公斤，尿素15公斤。
二、病害防治技術(shù)
1、霜霉病
1.1癥狀：霜霉病主要為害葉片，從幼苗至成株期都可發(fā)生，以生長(zhǎng)中后期發(fā)生較重。植株的下部葉片先發(fā)病，葉面出現(xiàn)淡黃色近圓形病斑，逐漸擴(kuò)大成不定形，或因受葉脈限制而呈多角形，病斑顏色轉(zhuǎn)為黃褐色，潮濕時(shí)病斑背面長(zhǎng)出稀疏的霜狀霉層。許多病斑相連可使葉片枯干。
1.2防治方法：防治萵筍霜霉病宜采取以加強(qiáng)農(nóng)業(yè)管理為主，輔以藥劑防治的綜合措施。
加強(qiáng)栽培管理收獲后種植前搞好清園，深耕曬田，提高和整平畦面以利排水降濕，防止漫灌。適度密植，勤除畦面雜草。發(fā)病初期及時(shí)清除下部病殘葉，適當(dāng)增施磷鉀肥。
藥劑防治： 75%百菌清可濕性粉劑500～600倍液。隔7～10天噴一次，連續(xù)噴2～3次。上述藥劑最好交替使用。
2、葉緣壞死病
2.1病因：連作地、前茬病重、土壤存菌多；或地勢(shì)低洼積水，排水不良；或土質(zhì)黏重，土壤偏酸；（2）氮肥施用過多，植株生長(zhǎng)過嫩；栽培過密，株、行間郁敝，通風(fēng)透光差；（3）種子帶菌、育苗用的營(yíng)養(yǎng)土帶菌、有機(jī)肥沒有充分腐熟或帶菌。
2.2防治方法：選用地勢(shì)高燥的田塊，并深溝高畦栽培，雨停不積水（2）播種后用藥土做覆蓋土，移栽前噴施一次除蟲滅菌劑，這是防治病蟲的重要措施；（3）使用的有機(jī)肥要充分腐熟，并不得混有上茬本作物殘?bào)w；（4）水旱輪作、育苗的營(yíng)養(yǎng)土要選用無菌土，用前曬三周以上；（5）大棚栽培的可在夏季休閑期，棚內(nèi)灌水，地面蓋上地膜，閉棚幾日，利用高溫滅菌；（6）選用抗病、包衣的種子，如未包衣，用拌種劑或浸種劑滅菌。
3、菌核病
3.1癥狀：植株的整個(gè)生育期都可受菌核病危害，中后期蔭蔽多，通風(fēng)透氣性差，濕度大，危害更重，植株下部的莖、葉柄或葉片一般先發(fā)病，莖部受害后，引起地上部分萎蔫，最后枯死，葉柄、葉部受害，癥狀與莖部相同。發(fā)病部位初期呈水浸狀，淡褐色，逐漸擴(kuò)大引起組織軟化腐爛，但無臭味，在潮濕條件下病部產(chǎn)生濃密白色棉絮狀菌絲，后期菌絲體交織紐集成白色顆粒，并產(chǎn)生黃色水珠，白色顆粒長(zhǎng)大后成為黑色褐色的鼠糞狀菌核。
3.2病原：萵筍菌核病是由子襄菌亞門核盤屬病原真菌侵染所致，其營(yíng)養(yǎng)體為有隔菌絲。菌核萌發(fā)長(zhǎng)出子襄盤，底部有柄，直徑約2-8毫米。子襄棍棒形，無色，大小為91-125×6-9微米，內(nèi)含8個(gè)子襄孢子。子襄孢子橢圓形，單孢，無色，大小為9-14×3-6微米，整齊地排列在子襄內(nèi)，子襄孢子是它的有性繁殖器官。
傳器途徑及發(fā)病條件
菌核在土壤中越冬，遇適宜條件，形成子襄盤，放射出子襄孢子，通過風(fēng)雨傳播，成為初侵染源。田間侵染一般通過帶病組織與健株接觸，菌絲直接蔓延危害。
菌核萌發(fā)適溫15℃左右。子襄孢子萌發(fā)的溫度范圍0-35℃，適溫5-10℃。菌絲0-30℃都能生長(zhǎng)，適溫20℃。菌核在PH值為1.68-10的環(huán)境中可以生長(zhǎng)，相對(duì)濕度高于85%有利于孢子萌發(fā)及菌絲生長(zhǎng)，低于70%發(fā)病輕。因此，當(dāng)田間氣溫在20℃左右，相對(duì)濕度高于85%時(shí)，會(huì)導(dǎo)致病害的流行。
3.3防治方法：發(fā)病初期，及時(shí)用藥防治：①40%菌核凈可濕性粉劑400-500倍液；②50%托布津可濕性粉劑500倍液；③40%多菌靈膠懸劑500倍液；④40%紋枯利可濕性粉劑800-1000倍液；⑤50%速克靈可濕性粉劑1500-2000倍液；⑥50%普海因可濕性粉劑1000倍液噴霧，每畝用量50-75公斤，視植株大小而定，7-10天1次，連續(xù)3-4次，也可用70%五氯硝基苯粉劑每畝0.25公斤混細(xì)土15公斤，均勻撒于行間。
三、收獲、采收
第9篇：土壤滅菌的方法范文
男，華中農(nóng)業(yè)大學(xué)副校長(zhǎng)、博士生導(dǎo)師，國(guó)家大宗蔬菜產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系產(chǎn)業(yè)經(jīng)濟(jì)研究室主任與崗位科學(xué)家，享受國(guó)務(wù)院政府特殊津貼專家、新世紀(jì)百千萬人才工程國(guó)家級(jí)人選、農(nóng)業(yè)部有突出貢獻(xiàn)中青年專家、湖北省跨世紀(jì)中青年學(xué)術(shù)帶頭人、教育部高校優(yōu)秀青年教師獎(jiǎng)獲得者。主持承擔(dān)國(guó)家社會(huì)科學(xué)基金重點(diǎn)、國(guó)家自然科學(xué)基金、國(guó)家軟科學(xué)、農(nóng)業(yè)部軟科學(xué)及省部級(jí)科研項(xiàng)目20余項(xiàng)；出版《農(nóng)產(chǎn)品比較優(yōu)勢(shì)與對(duì)外貿(mào)易整合》專著及國(guó)家規(guī)劃教材《農(nóng)產(chǎn)品營(yíng)銷學(xué)》等多部著作；70多篇。先后獲省部級(jí)科技進(jìn)步二等獎(jiǎng)2項(xiàng)、省部級(jí)社科優(yōu)秀成果二等獎(jiǎng)1項(xiàng)、國(guó)家教學(xué)成果二等獎(jiǎng)1項(xiàng)。
廣西賀州種植的淮山塊根圓直、口感好、淀粉含量高，深受各地客商的青睞，并通過農(nóng)業(yè)部評(píng)審，成為國(guó)家農(nóng)產(chǎn)品地理標(biāo)志產(chǎn)品。當(dāng)?shù)鼗瓷椒N植面積穩(wěn)定在667 hm2，種植品種主要為本地傳統(tǒng)農(nóng)家淮山、高州早薯、紫玉淮山，品種各有特色，其中本地傳統(tǒng)農(nóng)家淮山品種塊根圓直、口感好、淀粉含量高，適合煲湯、打火鍋；高州早薯口感清脆爽滑，適合作各色炒菜；紫玉淮山肉質(zhì)紫色、風(fēng)味獨(dú)特，含有大量花青素，有抗氧化、美容養(yǎng)顏?zhàn)饔谩?/p>
當(dāng)?shù)爻Ｄ攴N植淮山，因?yàn)槿硕嗟厣伲瑹o作，導(dǎo)致土壤出現(xiàn)連作障礙，使得淮山出現(xiàn)生長(zhǎng)勢(shì)變?nèi)踉缢?、產(chǎn)量下降、品質(zhì)降低、病蟲害加重等現(xiàn)象，制約了當(dāng)?shù)鼗瓷疆a(chǎn)業(yè)的健康持續(xù)發(fā)展。為了在有限的耕地資源條件下實(shí)現(xiàn)農(nóng)業(yè)增產(chǎn)增值，近年來當(dāng)?shù)剞r(nóng)民在農(nóng)技人員的指導(dǎo)下，通過不斷試驗(yàn)探索，實(shí)行清潔生產(chǎn)技術(shù)，克服淮山連作障礙因子，使淮山能夠在同一地塊中連續(xù)多年種植的情況下保持產(chǎn)量、品質(zhì)不變，維系產(chǎn)品的市場(chǎng)連續(xù)供給性，保證淮山產(chǎn)業(yè)的穩(wěn)定、健康發(fā)展。
1 淮山連作障礙
1.1 土壤元素比例失衡，理化性質(zhì)改變
由于淮山對(duì)土壤中某些特定元素的選擇性吸收，多年連作栽培會(huì)使土壤養(yǎng)分比例失衡，造成某一類營(yíng)養(yǎng)元素不足或缺乏，而另一類營(yíng)養(yǎng)元素則累積增加，一定程度上破壞了土壤原有的特性及物理結(jié)構(gòu)，比如pH值下降、土壤次生鹽漬化、土壤結(jié)構(gòu)改變等。
1.2 淮山病蟲害加重
淮山連作容易引起炭疽病、白銹病、根結(jié)線蟲病、蠐螬等病蟲害加重發(fā)生。原因如下：一是根系分泌物和植株殘?bào)w給病原菌提供了豐富的營(yíng)養(yǎng)和寄主，加劇了土壤有害微生物的積累；二是連作環(huán)境為作物本身易發(fā)的病蟲害提供了良好繁殖場(chǎng)所，包括土壤、水源、周邊雜草寄主等；三是連續(xù)多年施用同類的化肥、農(nóng)藥等，打破了土壤微生物種群的平衡，導(dǎo)致土壤中某些有益菌減少，而有害菌則增加。
1.3 淮山植株生長(zhǎng)受阻，產(chǎn)量、質(zhì)量下降
淮山連作多年后其根系、葉片、植株殘?bào)w、病原物的代謝產(chǎn)物等會(huì)造成土壤有毒物質(zhì)如有機(jī)酸、萜烯類、根系分泌物的積累，這些物質(zhì)通過多種途徑對(duì)淮山生長(zhǎng)產(chǎn)生抑制及致毒作用，影響植株代謝，導(dǎo)致植株長(zhǎng)勢(shì)變?nèi)?、早衰，最終影響產(chǎn)量和質(zhì)量等。
2 解決連作障礙的措施
2.1 選用良種是關(guān)健
選用良種是解決淮山連作障礙最為簡(jiǎn)單有效的途徑，可根據(jù)當(dāng)?shù)氐臍夂驐l件選擇市場(chǎng)暢銷的優(yōu)良淮山品種。
2.2 精心選種，提高抗性
選擇粗細(xì)勻稱，沒有分叉、破損、病斑、蟲害的淮山塊根或零余子作種。用塊根作種的，可在收獲時(shí)將莖基按20 cm一段每株選留2段集中貯藏；也可在收獲時(shí)挖去薯塊，選留狀況良好的根基作種。
2.3 清潔田間環(huán)境
及時(shí)摘除病枝、病葉，拔除病株，病株拔除后種植穴用石灰粉或藥劑消毒；前茬作物收獲后徹底清除病株殘?bào)w和周圍雜草，集中燒毀或深埋，減少病菌初侵染源，控制病害蔓延。
2.4 合理間套作
通過與病原菌非寄主植物輪作，可顯著減少土壤中病原菌基數(shù)，從而減輕土傳病害的發(fā)生。
2.5 土壤處理
①深翻曬土 清潔田園后，耕作層深翻30 cm，覆蓋薄膜在陽光下暴曬15天以上，提高土壤溫度、殺死病菌，還有利于加速病殘?bào)w分解和腐爛。
②放水泡田 放水泡田時(shí)間在3個(gè)月以上，越長(zhǎng)越好，可殺死土壤中殘存的病菌及蟲體，減少鹽分積累、排除鹽分。
③土壤消毒 土壤消毒是消滅土壤中前茬作物殘留病菌的有效方法，主要有化學(xué)藥劑消毒滅菌、石灰消毒滅菌、蒸汽滅菌等。
2.6 預(yù)防為主、綜合防治病蟲害
①淮山種塊處理 選符合所栽品種特征的無病塊根作種，切成15～20 cm長(zhǎng)的小段，將斷面在消石灰粉中蘸一下，再經(jīng)陽光曬2～3天，至兩頭切口有細(xì)裂縫為止，不僅促進(jìn)種塊發(fā)芽整齊，還可殺菌。種塊處理時(shí)要輕拿輕放，防止擦傷。
②綠色防控 應(yīng)用頻振式殺蟲燈、性誘劑、黃色粘蟲板、毒餌、生物農(nóng)藥等植保新技術(shù)防治病蟲害。按照太陽能誘蟲燈的誘殺范圍，每13 340～26 680 m2安裝1盞太陽能誘蟲燈誘殺害蟲。
2.7 科學(xué)管理
①注重施用腐熟有機(jī)肥 增施經(jīng)漚堆腐熟的有機(jī)肥，一是改善土壤結(jié)構(gòu)，提高土壤保肥供肥、保水、透氣、調(diào)溫等功能，促進(jìn)植株生長(zhǎng)；二是減少化肥投入，減輕污染源，創(chuàng)造更好的農(nóng)業(yè)環(huán)境。
②適時(shí)間苗 幼苗出齊一星期內(nèi)，去掉多余的弱苗、病苗、小苗，每穴只留1株強(qiáng)壯苗，保證養(yǎng)分集中供應(yīng)，培育壯苗，減輕病蟲害，提高產(chǎn)量。
③科學(xué)搭架，疏剪分枝 淮山是蔓繞生長(zhǎng)性藤本植物，為利于植株通風(fēng)透光、減少病蟲害發(fā)生，要及時(shí)插桿搭架；當(dāng)淮山藤蔓長(zhǎng)到架頂時(shí)，視生長(zhǎng)情況疏剪分枝。
2.8 種植洞穴客土法
種植洞穴客土法是解決淮山連作障礙的特效方法。與全田客土相比，種植洞穴客土法投入少、操作可行、效果好，且松軟的土壤環(huán)境為淮山創(chuàng)造了有利條件，所種的淮山塊根比常規(guī)種植的大且直，產(chǎn)量因此得到提高。具體方法：淮山種植采用定向栽培技術(shù)，用淮山電動(dòng)鉆洞機(jī)垂直打1 m深的種植洞，再用新的砂壤土填滿（土中可混入腐熟農(nóng)家肥等有機(jī)肥），將淮山苗植于洞中即可。
參考文獻(xiàn)
[1] 段峰，王秀云，高志紅.園藝作物連作障礙發(fā)生原因及防治措施[J].江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2011（23）：34-39.
