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分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)精選(九篇)

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分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)

第1篇:分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)范文

文章指出研究生分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中存在的問題,提出從注重各個實(shí)驗(yàn)內(nèi)容之間的銜接與關(guān)聯(lián)、根據(jù)學(xué)生實(shí)驗(yàn)技能設(shè)置相關(guān)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、充分利用網(wǎng)絡(luò)教學(xué)資源等幾個方面的教學(xué)改革措施,以期增強(qiáng)學(xué)生的學(xué)習(xí)信心和興趣,提高學(xué)習(xí)效率。

關(guān)鍵詞:

研究生;分子生物學(xué);實(shí)驗(yàn)技能;教學(xué)改革

分子生物學(xué)是研究核酸、蛋白質(zhì)等生物大分子的結(jié)構(gòu)與功能,并從分子水平上闡述蛋白質(zhì)與核酸、蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)之間相互作用的關(guān)系及其基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制的一門學(xué)科[1]。該學(xué)科前沿性強(qiáng)、發(fā)展迅速、對生命科學(xué)領(lǐng)域各分支學(xué)科具有廣泛和深入影響,是學(xué)習(xí)和學(xué)好專業(yè)課程的必要前提。針對生命科學(xué)專業(yè)學(xué)生而言,分子生物學(xué)是一門重要的(專業(yè))基礎(chǔ)課程,是普通生物學(xué)、生物化學(xué)、有機(jī)化學(xué)等課程的后續(xù)課程,同時為基因工程、微生物工程、細(xì)胞工程等課程的后續(xù)實(shí)踐環(huán)節(jié)奠定了理論基礎(chǔ)[2]。分子生物學(xué)作為新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院農(nóng)學(xué)、生物技術(shù)、種子科學(xué)與工程等本科專業(yè)普遍開設(shè)的重要專業(yè)基礎(chǔ)課程,在學(xué)生由基礎(chǔ)課轉(zhuǎn)向?qū)I(yè)課的學(xué)習(xí)中占有重要的地位。同時對分子生物學(xué)基本原理和基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)的掌握是本校生物學(xué)、作物學(xué)、草學(xué)、林學(xué)、食品科學(xué)與工程等學(xué)科研究生站在新的高度和視野揭示生命奧妙的共同需求。雖然本校生命科學(xué)類和食品科學(xué)與工程等學(xué)科研究生都在上這門課程,但是由于研究生是來自于全國各地的各個大學(xué),每個大學(xué)對相關(guān)專業(yè)所設(shè)置的專業(yè)課程也不一樣,加上一些轉(zhuǎn)專業(yè)的學(xué)生,所以加大了我們開設(shè)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課的難度。

一、研究生開展分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)存在的問題

(一)資金投入有限和實(shí)驗(yàn)耗資較大相互矛盾由于分子生物學(xué)是20世紀(jì)中期才興起的一門新興學(xué)科,研究對象主要是圍繞著核酸和蛋白質(zhì)這兩大分子,因此實(shí)驗(yàn)室開展相關(guān)的實(shí)驗(yàn)對儀器和實(shí)驗(yàn)條件都要求很高,相應(yīng)實(shí)驗(yàn)的試劑和耗材也比較貴,尤其是實(shí)驗(yàn)耗材不能重復(fù)利用,這大大增加了實(shí)驗(yàn)成本[3]。研究生分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課要體現(xiàn)出與本科教學(xué)的區(qū)別和高層次的特點(diǎn),但經(jīng)費(fèi)的限制確實(shí)使實(shí)驗(yàn)可選擇的余地不多,而且分子生物學(xué)技術(shù)每年都在持續(xù)發(fā)展,新的技術(shù)和研究手段層出不窮,使研究水平不斷向廣度和深度發(fā)展,但耗材和試劑也在成倍上漲,要使實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目與學(xué)科發(fā)展相適應(yīng),就要不斷增加的實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)預(yù)算,這筆增加的預(yù)算如何合理的解決,是影響分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革的矛盾之一[4]。

(二)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容設(shè)置和專業(yè)及學(xué)科特點(diǎn)相矛盾分子生物學(xué)是橫跨我校生物學(xué)、作物學(xué)、草學(xué)、林學(xué)、食品科學(xué)與工程等學(xué)科研究生的一門專業(yè)課程。因此開設(shè)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程,必須與這些相關(guān)學(xué)科緊密滲透,只有因材施教地開展實(shí)驗(yàn)教學(xué),才能更好地理論聯(lián)系實(shí)際。雖然分子生物學(xué)設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容很多,但是目前以我校的實(shí)驗(yàn)條件和經(jīng)費(fèi)條件,對分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)操作環(huán)節(jié),主要是圍繞以現(xiàn)代生物技術(shù)的核心“基因工程技術(shù)”為主要內(nèi)容開展實(shí)驗(yàn)課對理論知識驗(yàn)證,主要以大腸桿菌為研究對象進(jìn)行、基因的克隆和轉(zhuǎn)化,載體構(gòu)建,基因的表達(dá)和檢測實(shí)驗(yàn),中間貫穿講解以中心法則為理論主線的各個理論知識點(diǎn)[5]。這些基本實(shí)驗(yàn)內(nèi)容是我校生物學(xué)、作物學(xué)、草學(xué)、林學(xué)、動醫(yī)和動科等學(xué)科本科生生物技術(shù)引論與實(shí)踐課程的教學(xué)內(nèi)容,對研究生的實(shí)驗(yàn)教學(xué)而言,顯然開展所有的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容無論是時間還是實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)上都是不可能完成的。新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)的研究生主流群體是我校本科生,由于他們本科階段已經(jīng)做過相關(guān)實(shí)驗(yàn)了,所以再開展相關(guān)的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容,恐難激發(fā)他們的興趣。而對于校外考入農(nóng)大的研究生來說,他們可能對分子生物學(xué)這些基本的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容是完全陌生的,因此需要針對不同學(xué)科背景的研究生設(shè)置不同的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容[6]。

二、分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的改革

為了克服上述實(shí)驗(yàn)教學(xué)環(huán)節(jié)中存在的問題,我們應(yīng)加深對分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)改革措施的探索,努力營造有利于學(xué)生創(chuàng)新能力的培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)環(huán)境,作者認(rèn)為應(yīng)該從以下幾方面進(jìn)行著手,以此加快創(chuàng)新人才培養(yǎng)的步伐。

(一)注重各個實(shí)驗(yàn)內(nèi)容之間的銜接與關(guān)聯(lián)由于研究生實(shí)驗(yàn)學(xué)時的限制,要開展一個完整的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)具有一定的難度,結(jié)合實(shí)際情況,我們建立分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)體系時,盡量做到充分利用教學(xué)學(xué)時,集中在一起利用,開展一個具有關(guān)聯(lián)度和銜接性的實(shí)驗(yàn),而不是一個個獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容,這樣有利于學(xué)生系統(tǒng)科學(xué)思維的培養(yǎng)。比如我們制定的兩個實(shí)驗(yàn)方案,一個是基因表達(dá),模擬植物干旱脅迫下基因的表達(dá)情況,這中間涉及到植物總RNA的提取,反轉(zhuǎn)錄,RT-PCR,內(nèi)參基因的調(diào)平,目的基因的表達(dá),這部分實(shí)驗(yàn)內(nèi)容對應(yīng)我們理論教學(xué)中真核生物基因表達(dá)的理論知識,這樣通過實(shí)際應(yīng)用加深對理論知識的理解,同時又能做到學(xué)習(xí)致用,讓學(xué)生覺得所學(xué)的分子生物學(xué)知識是有用的,而不是一些晦澀難懂的語言;另一個是圍繞基因亞克隆,涉及的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括、植物DNA的提取、以DNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增目的基因、回收目的片段、連接T載體、轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞、提取質(zhì)粒酶切鑒定。這兩個實(shí)驗(yàn)每個內(nèi)容之間都是彼此承接和關(guān)聯(lián)的,這就要求學(xué)生在做實(shí)驗(yàn)時每個實(shí)驗(yàn)都要認(rèn)真完成,否則會影響下一個實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行,這樣有助于培養(yǎng)學(xué)生做事的認(rèn)真性和耐心,培養(yǎng)日后科研的系統(tǒng)性和邏輯性。

(二)根據(jù)學(xué)生實(shí)驗(yàn)技能設(shè)置相關(guān)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容把握專業(yè)特點(diǎn),根據(jù)我校生物學(xué)、作物學(xué)、草學(xué)、林學(xué)、食品科學(xué)與工程等學(xué)科專業(yè)特點(diǎn),在開展實(shí)驗(yàn)時,我們既注重分子生物學(xué)常規(guī)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的選取,又要結(jié)合農(nóng)大研究生的學(xué)科背景和自身教育背景選擇更能體現(xiàn)和反應(yīng)專業(yè)特點(diǎn)的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。學(xué)生根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)技能,在兩個實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行選擇,例如,我校本科生考入研究生們考慮選擇開展實(shí)驗(yàn)主要是圍繞基因表達(dá)進(jìn)行,這樣避免了和本科階段的基因克隆實(shí)驗(yàn)重復(fù),而校外學(xué)生考入農(nóng)大研究生同時又沒有一點(diǎn)專業(yè)相關(guān)知識的學(xué)生,選擇進(jìn)行基因克隆為主線的相關(guān)實(shí)驗(yàn)。學(xué)生對這些分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)最常用實(shí)驗(yàn)技術(shù)的掌握,使其具備未來科研工作需求所必須具備的基本素養(yǎng)。

(三)充分利用網(wǎng)絡(luò)教學(xué)資源受制于實(shí)驗(yàn)儀器和相關(guān)試劑耗材等實(shí)驗(yàn)條件和上課人數(shù)多因素的影響,因此無法滿足每個學(xué)生都能操作實(shí)驗(yàn)的要求,這樣就達(dá)不到預(yù)期的實(shí)驗(yàn)效果。為此,我們建立了分子生物學(xué)網(wǎng)絡(luò)課程中心,這其中包含教學(xué)課件,每個實(shí)驗(yàn)的教學(xué)視頻,這樣即使上課期間沒能操作實(shí)驗(yàn)觀看進(jìn)行學(xué)習(xí),形象直觀地掌握該實(shí)驗(yàn)的操作過程,避免浪費(fèi)時間,達(dá)到在有限的時間內(nèi)完成實(shí)驗(yàn)任務(wù)的要求,增強(qiáng)他們科研的成就感,更有效地開展科研工作。

三、結(jié)束語

分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課是我校生命科學(xué)領(lǐng)域一門十分重要的實(shí)驗(yàn)課程,如何在學(xué)時減少和學(xué)生基礎(chǔ)參差不齊的情況下,完成教學(xué)任務(wù),對我們老師來說是一個考驗(yàn),希望我們提出的實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革對我校生命科學(xué)相關(guān)專業(yè)分子生物學(xué)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)產(chǎn)生積極而深遠(yuǎn)的影響。

參考文獻(xiàn)

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第2篇:分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)范文

關(guān)鍵詞: 分子生物學(xué) 綜合性實(shí)驗(yàn) 設(shè)計(jì)思路 教學(xué)內(nèi)容 教學(xué)條件

分子生物學(xué)是生物技術(shù)及生物科學(xué)專業(yè)的一門必修課,它是在分子水平上研究生命活動及其規(guī)律的科學(xué),主要研究的內(nèi)容是核酸、蛋白質(zhì)等生物大分子的結(jié)構(gòu)、功能及其相互作用[1]。隨著科技的突飛猛進(jìn)的發(fā)展,遺傳學(xué)、生理學(xué)、免疫學(xué)等基礎(chǔ)領(lǐng)域的研究工作也已深入到分子水平,分子生物學(xué)成為各學(xué)科的領(lǐng)先學(xué)科,而且已逐漸滲透到農(nóng)業(yè)、工業(yè)、醫(yī)學(xué)等科學(xué)的各個領(lǐng)域之中[2],[3]。在我國分子生物學(xué)已成為國家‘863’高新技術(shù)和‘十一五’、‘十二五’計(jì)劃的一項(xiàng)重要內(nèi)容,越來越得到廣泛的發(fā)展和應(yīng)用[4]。

分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)是進(jìn)行各個學(xué)科研究、實(shí)踐的基礎(chǔ),實(shí)驗(yàn)課的教學(xué)直接影響學(xué)生對分子生物學(xué)課程的理解程度;它不僅是學(xué)生掌握基本知識、基本理論和發(fā)展基本技能的重要手段,而且對培養(yǎng)學(xué)生的科技創(chuàng)新能力,探索科學(xué)的研究方法和喚起學(xué)生的求知欲望都有著重要的意義。但是由于本課程實(shí)驗(yàn)相對較抽象,難理解,對學(xué)生而言,如果不能充分激發(fā)其興趣,就會導(dǎo)致厭學(xué)情緒。因此,分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課的重要作用在高校生物技術(shù)及生物科學(xué)專業(yè)中日益凸顯。近年來,衡水學(xué)院根據(jù)培養(yǎng)創(chuàng)新型、應(yīng)用型人才的目標(biāo),結(jié)合學(xué)生特點(diǎn),對分子生物學(xué)綜合性實(shí)驗(yàn)教學(xué)進(jìn)行了初步探索。

1.綜合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路

1.1注重經(jīng)典,結(jié)合先進(jìn)。

分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的設(shè)置既要保留基本的操作訓(xùn)練,又要不斷更新,使學(xué)生盡可能多地接觸新的前沿技術(shù)?;镜膶?shí)驗(yàn)技術(shù)主要包括質(zhì)粒DNA的提取、分光光度計(jì)檢測、瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)、感受態(tài)細(xì)胞的制備及轉(zhuǎn)化等,均需要學(xué)生在實(shí)驗(yàn)過程中熟練掌握原理和基本操作。同時對一些先進(jìn)的儀器,要盡可能地使學(xué)生掌握基本的實(shí)驗(yàn)操作,為以后進(jìn)一步開展科學(xué)研究奠定基礎(chǔ)。對于一些新的實(shí)驗(yàn)技術(shù),不能正常在實(shí)驗(yàn)課中開展的內(nèi)容,可播放錄像和示范,也可制成精美的多媒體課件,利用相關(guān)教學(xué)資源制成Flash[5],使學(xué)生們在有限的學(xué)習(xí)條件下學(xué)到更多的知識。

1.2強(qiáng)調(diào)教學(xué),結(jié)合科研。

實(shí)驗(yàn)教學(xué)的目標(biāo),不僅是知識的傳承和實(shí)驗(yàn)技能的訓(xùn)練,更要在實(shí)驗(yàn)教學(xué)中培養(yǎng)學(xué)生的科研素質(zhì)、科研技能和創(chuàng)新能力[6]。強(qiáng)調(diào)教學(xué)的同時,將教師的科研內(nèi)容引入到學(xué)生的實(shí)驗(yàn)中來,不僅可增強(qiáng)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣,也可以使學(xué)生了解到最新的科研動態(tài)和科研成果,為學(xué)生今后考研及發(fā)展提供有價值的參考。同時,將教師的科研成果進(jìn)入教學(xué),引導(dǎo)學(xué)生參與到教師的科研中去,以教學(xué)帶科研,以科研促教學(xué),讓學(xué)生得到最大的實(shí)驗(yàn)收獲。

1.3強(qiáng)調(diào)系統(tǒng),側(cè)重綜合。

在強(qiáng)調(diào)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的綜合性的同時,也要保持它的系統(tǒng)性,只有系統(tǒng)地完成一系列連續(xù)的實(shí)驗(yàn),才能充分展示其綜合性。所以實(shí)驗(yàn)內(nèi)容要豐富,加強(qiáng)涵蓋分子生物學(xué)基礎(chǔ)技術(shù)的訓(xùn)練,每個系列實(shí)驗(yàn)由若干個小實(shí)驗(yàn)組成,各個實(shí)驗(yàn)之間緊密相連,注重強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)的整體性和連貫性,這樣有助于激發(fā)學(xué)生的實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)興趣,發(fā)展學(xué)生的觀察分析能力及實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)能力,從而全面提高學(xué)生的綜合素質(zhì)。

2.實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容

實(shí)驗(yàn)課中實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的選擇是體現(xiàn)綜合性實(shí)驗(yàn)教學(xué)的重要方面,在優(yōu)化實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容的過程中,將教師科研中較成熟的內(nèi)容開發(fā)為可供學(xué)生操作的實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)材料和內(nèi)容均來源于實(shí)驗(yàn)教師的科研課題,例如植物DNA的提取,DNA的檢測及純化,基因的克隆、連接及轉(zhuǎn)化,克隆的篩選等一系列的連貫性實(shí)驗(yàn)。從提取的方法、引物的設(shè)計(jì)到篩選,均讓學(xué)生查閱教師提供的文獻(xiàn)資料來設(shè)計(jì),從而鍛煉學(xué)生的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)能力,使學(xué)生對基因克隆的整個過程有清晰的認(rèn)識,同時強(qiáng)調(diào)這些實(shí)驗(yàn)的連貫性和整體性,使學(xué)生充分認(rèn)識到每個實(shí)驗(yàn)的重要性。

3.實(shí)驗(yàn)條件

分子生物學(xué)綜合性實(shí)驗(yàn)涉及的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容多、實(shí)驗(yàn)方法和手段多、實(shí)驗(yàn)中使用的儀器設(shè)備多、實(shí)驗(yàn)材料和試劑較多,因此我們在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)方法選取時,應(yīng)盡量使用經(jīng)典的方法,避免使用昂貴的試劑盒操作,這樣既可以使學(xué)生充分了解實(shí)驗(yàn)中藥品的配置及作用,同時可節(jié)約藥品的開銷。此外,我們要合理利用實(shí)驗(yàn)室,充分利用實(shí)驗(yàn)學(xué)時,多個實(shí)驗(yàn)穿行,把相近的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容安排在一個單位時間內(nèi)完成。通過這樣的合理安排,在較少的課時計(jì)劃下,盡可能多地安排實(shí)驗(yàn),學(xué)生能夠得到扎實(shí)的實(shí)驗(yàn)技能培訓(xùn),從而充分鍛煉學(xué)生的動手能力。

4.結(jié)語

近年來,隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,實(shí)驗(yàn)手段的不斷增多,以及在人類社會中所發(fā)揮作用的日益凸顯,使高校在講授分子生物學(xué)理論的同時,需要對學(xué)生實(shí)驗(yàn)技能和科學(xué)的思維方法進(jìn)行綜合性的培養(yǎng)。高校綜合性實(shí)驗(yàn)教學(xué)的開展及進(jìn)一步實(shí)施正是這一理念的體現(xiàn)。我院分子生物學(xué)綜合性實(shí)驗(yàn)教學(xué)的開展必將在一定程度上提高學(xué)生的實(shí)驗(yàn)動手能力、實(shí)驗(yàn)分析能力、數(shù)據(jù)處理能力和創(chuàng)新能力。

參考文獻(xiàn):

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第3篇:分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)范文

【關(guān)鍵詞】生物化學(xué)與分子生物學(xué);實(shí)驗(yàn)室;安全隱患;安全管理

21世紀(jì),生命科學(xué)迅速發(fā)展,生物化學(xué)與分子生物學(xué)作為聯(lián)系基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床醫(yī)學(xué)的重要學(xué)科,是醫(yī)學(xué)院校學(xué)生的必修課,而實(shí)驗(yàn)課則是生物化學(xué)與分子生物學(xué)教學(xué)中的一個重要環(huán)節(jié)。隨著一些高校教育模式的轉(zhuǎn)變,對學(xué)生動手和科研能力的要求越來越高,在生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中涉及到的儀器設(shè)備日益增加,易燃、易爆、有毒試劑藥品的使用越來越多,實(shí)驗(yàn)過程可能伴隨高速離心、高溫、高壓等特點(diǎn),實(shí)驗(yàn)廢棄物的處理不當(dāng),使得實(shí)驗(yàn)室安全問題日益凸顯。因此,加強(qiáng)生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)和安全管理對實(shí)驗(yàn)教學(xué)和科研活動的開展有著重要的意義[1]。

生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的安全管理是一項(xiàng)長期復(fù)雜的工程,需要在發(fā)展中不斷的進(jìn)行改進(jìn)和完善,我們針對本實(shí)驗(yàn)室生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備和教學(xué)中可能存在的安全問題進(jìn)行總結(jié)并提出防范措施,以確保實(shí)驗(yàn)教學(xué)順利進(jìn)行。

1 實(shí)驗(yàn)室不安全因素分析

近年來我校的招生規(guī)模逐漸擴(kuò)大,生化與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)工作量急劇增加,實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備、試劑藥品的使用量越來越多,實(shí)驗(yàn)室的安全面臨以下幾方面問題。

1.1 儀器設(shè)備因素

基礎(chǔ)生化實(shí)驗(yàn)中常用儀器設(shè)備包括高速離心機(jī)、恒溫水浴鍋、高壓滅菌鍋等,這些儀器在使用時未按操作規(guī)程如使用時離心機(jī)沒有配平、水浴鍋溫度異常、電路老化仍在使用等會造成儀器設(shè)備的損壞從而引發(fā)安全事故。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常用的二氧化碳、氮?dú)獾葔嚎s氣體容器在搬運(yùn)使用時發(fā)生碰撞極易引起爆炸的事故。此外一些需要在紫外燈下操作的實(shí)驗(yàn)若防護(hù)不當(dāng)會引起人體眼部和皮膚的不適,長期接觸會誘發(fā)癌癥。

1.2 試劑藥品因素

基礎(chǔ)生化實(shí)驗(yàn)中用到的危險(xiǎn)試劑藥品如易燃易爆的乙醇、甲醇、三氯甲烷等,強(qiáng)腐蝕性的濃硝酸、濃鹽酸、苯酚等存放不當(dāng)或保管不善都會使其發(fā)生變化,降低使用效果,有的甚至?xí)l(fā)重大事故。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常用到丙烯酰胺、溴化乙錠、TEMED、DEPC等試劑會對實(shí)驗(yàn)人員的身體健康有很大危害。

1.3 實(shí)驗(yàn)廢棄物因素

在基礎(chǔ)生化實(shí)驗(yàn)中會產(chǎn)生一些有毒、強(qiáng)腐蝕、有刺激性的化學(xué)廢液或氣體,分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)后廢棄的菌液、移液槍頭、離心管、使用過的組織樣品等,這些廢棄物如果未經(jīng)處理S意丟棄,會造成病毒傳播或環(huán)境污染,直接或間接的危害人體健康。

1.4 安全防范意識薄弱

部分學(xué)生安全觀念不強(qiáng),不按操作規(guī)程操作儀器設(shè)備,常見的現(xiàn)象如將早飯帶進(jìn)實(shí)驗(yàn)室;隨意接觸毒性試劑藥品;在實(shí)驗(yàn)課堂上吵鬧嘻戲,造成課堂混亂等,這些行為容易造成安全事故。

2 防范措施

為了避免由于各種原因引起的實(shí)驗(yàn)室安全事故,及時消除安全隱患,處理解決好實(shí)驗(yàn)室安全的問題,防止事故發(fā)生,需從以下幾方面著手。

2.1 健全實(shí)驗(yàn)室安全管理制度

為保證實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行,加強(qiáng)師生的安全意識,防止實(shí)驗(yàn)事故,我們制定了相應(yīng)的規(guī)章條例,并要求所有進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的師生嚴(yán)格執(zhí)行,儀器設(shè)備的使用要建立嚴(yán)格的工作責(zé)任制度,儀器設(shè)備要責(zé)任到人,加大對實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員的基本操作培訓(xùn),特別是大型精密儀器應(yīng)實(shí)行專人負(fù)責(zé)[2]。對違反儀器設(shè)備操作規(guī)程者,實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員有權(quán)要求其停止使用。對實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的儀器設(shè)備應(yīng)按精密程度分級使用,在實(shí)驗(yàn)開始前檢查儀器裝置是否完整穩(wěn)妥。

2.2 加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室的儀器設(shè)備管理

實(shí)驗(yàn)室常用儀器設(shè)備的日常維護(hù)是保證儀器設(shè)備量值穩(wěn)定、可靠的常用手段。特別是對大型儀器設(shè)備要注意防塵、防潮、防霉、防曬。做好儀器設(shè)備的分類,根據(jù)各自的特點(diǎn)要求進(jìn)行維護(hù)保養(yǎng)對故障儀器設(shè)備及時登記報(bào)修。同時建立各種儀器的操作規(guī)程,在學(xué)生初次使用儀器時實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員應(yīng)事先講解,并隨時注意給予必要的指導(dǎo),讓每位學(xué)生都能標(biāo)準(zhǔn)、規(guī)范、合理的使用儀器。例如高速離心機(jī)在使用前應(yīng)配平,恒溫水浴箱和高壓滅菌鍋在使用前應(yīng)檢查是否有水,并且在使用過程中應(yīng)密切觀察儀器狀況不得離開崗位[3]。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,實(shí)驗(yàn)技術(shù)員應(yīng)切斷實(shí)驗(yàn)室所有儀器電源同時檢查水龍頭是否關(guān)閉以防引起火災(zāi)水災(zāi)。

2.3 試劑藥品的安全管理

實(shí)驗(yàn)室設(shè)立專門的試劑藥品室,依據(jù)試劑藥品自身的物理性質(zhì)和化學(xué)性質(zhì)分門別類存放,并設(shè)置編號。易燃易爆強(qiáng)腐蝕的試劑藥品應(yīng)要專人、專門儲藏室、專柜存放,實(shí)行雙人雙鎖管理制度,同時建立易燃易爆有毒試劑藥品的領(lǐng)用登記制度。規(guī)范管理危險(xiǎn)化學(xué)藥品包括藥品的合理定購、合理存放、合理使用。

2.4 加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)人員安全防范意識教育

有危險(xiǎn)的實(shí)驗(yàn)在操作過程中應(yīng)使用防護(hù)眼鏡、口罩、手套等防護(hù)設(shè)備,如產(chǎn)生刺激性氣體或有毒氣體的實(shí)驗(yàn)應(yīng)在通風(fēng)櫥內(nèi)操作,可產(chǎn)生含生物因子的氣溶膠的實(shí)驗(yàn)應(yīng)在相應(yīng)的生物安全柜內(nèi)操作。

2.5 廢棄物的處理

絕大多數(shù)生化與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,實(shí)驗(yàn)后都會不可避免地產(chǎn)生各種廢物、廢液、廢氣、有毒有害的包裝容器和微生物污染物,均應(yīng)按屬性分別妥善處理,以免對環(huán)境及人體造成污染、損害。例如蛋白質(zhì)硝酸纖維薄膜電泳后的漂洗液可經(jīng)活性炭吸附后回收利用,試驗(yàn)后的動物尸體應(yīng)統(tǒng)一于焚燒爐內(nèi)焚燒,分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)后的腫瘤細(xì)胞、細(xì)菌等應(yīng)經(jīng)過滅活和消毒處理。

實(shí)驗(yàn)室安全問題是一個涉及多方面的問題,我們應(yīng)充分了解并熟悉實(shí)驗(yàn)室存在的安全隱患,建立安全制度、培養(yǎng)安全意識,以人為本安全第一,預(yù)防為主,把安全教育納入到正常的教學(xué)工作中,按照相應(yīng)的對策去做好防范工作,使生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室課堂真正成為輔助教學(xué)中培養(yǎng)人才的重要平臺。

【參考文獻(xiàn)】

[1]孫莉麗,李榮華.高校生化實(shí)驗(yàn)室的安全管理[J].學(xué)術(shù)論壇,2010(2):281-282.

第4篇:分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)范文

【關(guān)鍵詞】分子生物學(xué);實(shí)驗(yàn)教學(xué);高等教育;教學(xué)質(zhì)量

近年來,隨著高科技向生物學(xué)各個領(lǐng)域的滲透,特別是免疫學(xué)、分子生物學(xué)與基因工程學(xué)及基因組學(xué)等基礎(chǔ)研究的不斷深化,分子生物學(xué)是一門新興的前沿學(xué)科,已成為現(xiàn)代生命科學(xué)中最具活力的帶頭學(xué)科之一,分子生物學(xué)研究日新月異的發(fā)展,使人類對疾病的認(rèn)識、預(yù)防、診斷和治療發(fā)生了深刻的變革,醫(yī)學(xué)科學(xué)已從整體、細(xì)胞水平逐步深入到了分子水平。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)作為分子生物學(xué)整個課程中重要的必不可少的組成部分,不僅能讓學(xué)生鞏固和加深理論課知識,而且能加強(qiáng)對學(xué)生良好綜合素質(zhì)和動手能力的培養(yǎng),以及對他們后續(xù)的學(xué)習(xí)都會起著非常重要的作用。

1.培養(yǎng)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣,激發(fā)他們的學(xué)習(xí)動力

學(xué)習(xí)興趣是學(xué)習(xí)活動的重要動力。成功的教學(xué)所需的不是強(qiáng)制,而是激發(fā)學(xué)生的興趣,學(xué)習(xí)興趣是一種力求認(rèn)識世界、渴望獲得文化科學(xué)知識的意識傾向,能推動人們?nèi)で笾R、鉆研問題和開闊眼界,是一個人走向成才之路的一種高效能的催化劑。分子生物學(xué)因其學(xué)習(xí)涉及面廣、內(nèi)容繁雜、抽象往往成為諸多學(xué)生學(xué)習(xí)的一大障礙,甚至成為一種負(fù)擔(dān),缺乏積極學(xué)習(xí)的動力。因此我們利用實(shí)驗(yàn)課以實(shí)踐動手為主要教學(xué)內(nèi)容的特點(diǎn),通過營造良好學(xué)習(xí)氛圍、開展互動式討論學(xué)習(xí)和體驗(yàn)成功實(shí)驗(yàn)等方法激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣。一來可以彌補(bǔ)理論課學(xué)習(xí)的不足,培養(yǎng)學(xué)生掌握實(shí)驗(yàn)基本操作技能和基礎(chǔ)知識;其次,可以逐步培養(yǎng)學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)態(tài)度和創(chuàng)新意識,提高科學(xué)的觀察能力、分析思維能力、動手能力和解決實(shí)驗(yàn)問題的能力,真正達(dá)到有效地提高實(shí)驗(yàn)課學(xué)習(xí)效率的目的。例如學(xué)習(xí)胰島素、腎上腺素對血糖濃度的影響時,我們首先以糖尿病的臨床治療進(jìn)行設(shè)疑,激發(fā)學(xué)生的好奇心;在完成實(shí)驗(yàn)后由學(xué)生根據(jù)自已的實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行答疑;最后由老師結(jié)合臨床應(yīng)用進(jìn)行總結(jié)。通過這樣的教學(xué)“三步曲”,激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣,把抽象、枯燥的理論教學(xué)轉(zhuǎn)變成興趣學(xué)習(xí),提高了教學(xué)質(zhì)量。

2.引導(dǎo)學(xué)生進(jìn)入角色,培養(yǎng)良好的學(xué)習(xí)習(xí)慣

在教學(xué)活動中,教師發(fā)揮學(xué)習(xí)的引導(dǎo)作用,學(xué)生是學(xué)習(xí)的主體。但在傳統(tǒng)的教學(xué)模式中, 我們往往只重視教師的引導(dǎo)作用,而忽略了學(xué)生的主體作用,這樣的結(jié)果往往導(dǎo)致學(xué)生只是被動地接受知識,過度地依賴?yán)蠋?,而不能充分調(diào)動學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性和學(xué)習(xí)的潛能。為了提高課堂教學(xué)效率,我們應(yīng)該充分發(fā)揮學(xué)生的主體作用,調(diào)動其自主參與意識,從根本上引導(dǎo)學(xué)生形成良好的學(xué)習(xí)習(xí)慣,實(shí)現(xiàn)教與學(xué)的互動,以取得理想的教學(xué)效果。為此,我們讓學(xué)生從課前、課堂、課后參與實(shí)驗(yàn),引導(dǎo)進(jìn)入角色,培養(yǎng)課前預(yù)習(xí)、課上積極參與、課后總結(jié)的良好學(xué)習(xí)習(xí)慣。實(shí)驗(yàn)課前鼓勵學(xué)生參與一些實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備與設(shè)計(jì),提高對實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的理解和把握,增強(qiáng)計(jì)劃性學(xué)習(xí)思維的培養(yǎng);課堂上增加實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容,盡可能增加每個學(xué)生的動手操作機(jī)會,同時通過“問題-討論”的方法培養(yǎng)學(xué)生獨(dú)立思考、自主學(xué)習(xí)、積極參與的習(xí)慣;課后組織學(xué)生參與本學(xué)科的學(xué)習(xí)交流,不僅可以在實(shí)踐中對所學(xué)的理論與技術(shù)進(jìn)行檢驗(yàn),同時提高實(shí)驗(yàn)中分析問題和解決問題的能力,進(jìn)而增加對分子生物學(xué)理論與實(shí)驗(yàn)課學(xué)習(xí)的興趣。在上述提到的胰島素、腎上腺素對血糖濃度的影響教學(xué)時,我們對糖尿病的臨床治療方法進(jìn)行提問,讓學(xué)生融入到教學(xué)內(nèi)容,實(shí)現(xiàn)主動進(jìn)入角色。

3.改革傳統(tǒng)課程,開設(shè)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)

分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技能對于科研工作大有裨益。因此,我們在實(shí)驗(yàn)教學(xué)中,除要加強(qiáng)學(xué)生基本實(shí)驗(yàn)技能的訓(xùn)練外,還應(yīng)增加設(shè)計(jì)性綜合實(shí)驗(yàn)的內(nèi)容,使分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)在內(nèi)容、方法和手段上更加符合培養(yǎng)新型人才和社會發(fā)展的要求。設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)是一種介于基本教學(xué)實(shí)驗(yàn)與實(shí)際科學(xué)研究實(shí)驗(yàn)之間,對科學(xué)實(shí)驗(yàn)全過程進(jìn)行初步訓(xùn)練的教學(xué)實(shí)驗(yàn)。它要求學(xué)生在充分理解分子生物學(xué)基本原理的基礎(chǔ)上,綜合運(yùn)用所掌握的基礎(chǔ)理論、實(shí)驗(yàn)技能以及各種檢測手段和實(shí)驗(yàn)方法,自行設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案、確定實(shí)驗(yàn)方法、選用配套的儀器設(shè)備,進(jìn)行實(shí)驗(yàn),記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),最后寫出比較完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告乃至學(xué)術(shù)論文。設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)具有綜合性、典型性和探索性的特點(diǎn)。此外,它還可以激發(fā)學(xué)生的創(chuàng)造性思維和探索性精神,是培養(yǎng)學(xué)生終生具有創(chuàng)造精神和創(chuàng)新意識的重要途徑。目前我們的實(shí)驗(yàn)教學(xué)雖然在內(nèi)容上進(jìn)行了一定的改革,減少了驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn),增加了諸如DN斷的切割、連接、轉(zhuǎn)化和鑒定的系列實(shí)驗(yàn),但是學(xué)生仍然很難系統(tǒng)掌握實(shí)際的實(shí)驗(yàn)技能,達(dá)不到提高學(xué)生整體科研能力的要求。因此在改革的同時開設(shè)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)將是我們未來實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革與發(fā)展的方向。因?yàn)樵O(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)教學(xué)的開設(shè),不僅使實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容有了新的變化,更重要的是對開發(fā)學(xué)生智力、培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)造性思維能力和實(shí)踐能力具有重要作用。

4.以開放實(shí)驗(yàn)室為平臺,進(jìn)行創(chuàng)新研究

由于科技創(chuàng)新是將科學(xué)研究成果轉(zhuǎn)化為現(xiàn)實(shí)生產(chǎn)力的實(shí)踐活動,因此提高學(xué)生的創(chuàng)新能力,必須注重實(shí)踐能力特別是主動實(shí)踐能力的培養(yǎng)。所以我們開放實(shí)驗(yàn)室,鼓勵學(xué)生自主進(jìn)行科技實(shí)踐,開辟分子生物學(xué)第二課堂,組織興趣小組。同學(xué)們報(bào)名非常踴躍,我們將興趣組分成3~5人/組。在實(shí)驗(yàn)方案中選出最適合開展的方案,由教師點(diǎn)評,學(xué)生修改實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案后,在老師的指導(dǎo)下,由興趣小組來實(shí)施。同學(xué)們通過課堂的理論學(xué)習(xí)—課后查閱相關(guān)資料—課堂討論—實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)—綜合實(shí)踐的過程能使學(xué)生深刻理解分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的技術(shù)與理論,能熟練運(yùn)用已經(jīng)學(xué)習(xí)的多種技術(shù),學(xué)會充分利用本實(shí)驗(yàn)室已有的實(shí)驗(yàn)設(shè)備和條件,自主設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)并實(shí)踐,培養(yǎng)了學(xué)生的創(chuàng)新思維和獨(dú)立分析問題、解決問題的能力。

5.結(jié)語

總之,在實(shí)驗(yàn)教學(xué)中,我們應(yīng)該從教與學(xué)的關(guān)系入手,充分發(fā)揮教師的主導(dǎo)作用和學(xué)生的主體作用,通過教學(xué)改革引導(dǎo)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣,培養(yǎng)他們良好的學(xué)習(xí)習(xí)慣,并充分調(diào)動他們的學(xué)習(xí)主觀能動性,從而最終達(dá)到提高實(shí)驗(yàn)教學(xué)效果、實(shí)現(xiàn)學(xué)生綜合素質(zhì)和能力全面提高的目的。

【參考文獻(xiàn)】

[1]陶萍,屈蘭竺.淺談在生物化學(xué)教學(xué)中如何培養(yǎng)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣[J].安康師專學(xué)報(bào),2005,17(6):121-122.

[2]邢杰,馬平,閻玉文.發(fā)揮學(xué)生主體作用,提高教學(xué)效果[J].山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)教育版),2004 ,6(2):154-155.

第5篇:分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)范文

[關(guān)鍵詞]現(xiàn)代分子生物學(xué) 實(shí)驗(yàn)教學(xué) 教學(xué)改革 方案

目前,許多高等院校都把分子生物學(xué)作為本科生和研究生的必修課或選修課,分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課也是高等院校生物相關(guān)專業(yè)重要的實(shí)驗(yàn)課之一[1]。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)是提升學(xué)生生物科學(xué)素養(yǎng)的重要手段和途徑,能有效提高學(xué)生的動手操作能力、觀察能力、思維能力、語言表達(dá)能力以及學(xué)生之間相互交流和合作的能力。然而在現(xiàn)代分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)過程中,筆者發(fā)現(xiàn)存在著一些較為突出的問題,本文就這些主要問題提出改革與創(chuàng)新的應(yīng)對措施。

一、地方高?,F(xiàn)代分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的現(xiàn)狀和存在的問題

分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課教學(xué)是生物教學(xué)的重要組成部分,是培養(yǎng)學(xué)生動手能力、創(chuàng)新能力、創(chuàng)新意識和科研能力的基本途徑。目前,分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的現(xiàn)狀令人堪憂,實(shí)驗(yàn)教學(xué)中存在的問題主要體現(xiàn)在以下幾個方面:

(一)實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)和設(shè)施有限

現(xiàn)代分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中所用藥品,如Taq聚合酶、DNA連接酶和載體等,均較貴,由于經(jīng)費(fèi)原因許多實(shí)驗(yàn)大打折扣,甚至無法開展?,F(xiàn)代分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)所需的設(shè)施也較為先進(jìn)、昂貴,如PCR擴(kuò)增儀、移液槍、高壓滅菌鍋、高速冷凍離心機(jī)、超低溫保存冰箱、電泳儀、超凈工作臺和凝膠成像系統(tǒng)等,這些設(shè)備的數(shù)量都是有限的。上課的人數(shù)較多,教師講解儀器的使用方法時有相當(dāng)一部分的學(xué)生不能完全聽明白,連儀器的基本操作都不會,要求他們熟練地使用儀器時就顯得有點(diǎn)困難。

(二)教學(xué)方式較為僵化

分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)方式較為單一,一般是老師準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)、講實(shí)驗(yàn)原理和操作步驟,學(xué)生模仿教師的演示或照著黑板的步驟按部就班地進(jìn)行操作。操作前,教師講明實(shí)驗(yàn)過程,這雖然利于學(xué)生掌握實(shí)驗(yàn)步驟,教師易管理,但學(xué)生思考和主動參與的過程被省略了。動手完全與動腦脫節(jié),動手能力的培養(yǎng)是實(shí)驗(yàn)教學(xué)的一個重要內(nèi)容,但不經(jīng)思考地完成實(shí)驗(yàn)根本談不上能力的培養(yǎng)。

(三)學(xué)生自主學(xué)習(xí)能力不強(qiáng)

學(xué)生在實(shí)驗(yàn)中被動成分大于主動成分。課前雖然預(yù)習(xí)了,但對實(shí)驗(yàn)內(nèi)容還不是很熟悉。上課時有的學(xué)生不認(rèn)真聽教師講實(shí)驗(yàn)原理、實(shí)驗(yàn)步驟、注意事項(xiàng),結(jié)果在實(shí)驗(yàn)過程中常常出錯,卻不知道如何解決。實(shí)驗(yàn)材料、實(shí)驗(yàn)藥品和實(shí)驗(yàn)儀器都是教師事先安排好的,實(shí)驗(yàn)時間和實(shí)驗(yàn)具體實(shí)施步驟也是按教師安排進(jìn)行的,學(xué)生做實(shí)驗(yàn)僅憑好動的天性,既沒有時間、機(jī)會去思考或詢問為什么要這樣做?有沒有其他方法或方式去嘗試?對實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、方法、步驟是只知其然、不知其所以然。實(shí)驗(yàn)后得到的結(jié)果若與理論結(jié)果不同,并不能獨(dú)立地思考出現(xiàn)該結(jié)果的原因。耐人尋味的是,一些學(xué)生對實(shí)驗(yàn)結(jié)果對答如流,實(shí)驗(yàn)操作卻極不熟練。有些學(xué)生組織紀(jì)律意識不強(qiáng),經(jīng)常遲到早退。有的學(xué)生馬馬虎虎做完實(shí)驗(yàn),不管操作是否規(guī)范、結(jié)果是否正確,甚至有的在一旁觀看別人操作自己根本就不動手,最后照抄別人的實(shí)驗(yàn)結(jié)果[2]。

(四)實(shí)驗(yàn)教學(xué)安排、管理不合理

現(xiàn)代分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)所涉及的一系列相關(guān)實(shí)驗(yàn)都需要相當(dāng)長的時間,并且所做的實(shí)驗(yàn)一般都具有強(qiáng)的連續(xù)性,如DNA的提取、檢測、PCR擴(kuò)增、DNA回收、DNA與載體連接、感受態(tài)細(xì)胞的制作、轉(zhuǎn)化等實(shí)驗(yàn)。由于學(xué)校安排的課時相對較少,并且比較固定。因此,許多實(shí)驗(yàn)過程只是老師講解,學(xué)生并不能進(jìn)行操作,這樣學(xué)生根本就不能順利地掌握實(shí)驗(yàn)的全部過程,不利于學(xué)生全面掌握整個實(shí)驗(yàn)過程。除此之外,上課的人數(shù)多,實(shí)驗(yàn)分組每組人數(shù)多,實(shí)驗(yàn)儀器少,每個學(xué)生所擁有的自由空間就很小,影響實(shí)驗(yàn)的進(jìn)程,同時也不利于教師指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)。

(五)教學(xué)要求較低、課程考核不合理

教師一般對實(shí)驗(yàn)教學(xué)要求較低,對學(xué)生的基本操作要求不嚴(yán)格,但地方高校學(xué)生學(xué)習(xí)多數(shù)自主性較差,這樣不能較好的促進(jìn)學(xué)習(xí)進(jìn)行學(xué)習(xí)。最后的考核方式也比較單一,基本都為兩種方式:一是書面形式,考核學(xué)生對實(shí)驗(yàn)結(jié)果或要證實(shí)的理論的掌握;二是操作觀察,考核學(xué)生的實(shí)驗(yàn)操作技能[3]。這種單一的考核極易養(yǎng)成學(xué)生投機(jī)取巧、不踏踏實(shí)實(shí)做實(shí)驗(yàn)的壞習(xí)慣,而實(shí)驗(yàn)操作評價往往是突擊性的,為了應(yīng)付期末考核,學(xué)生反復(fù)機(jī)械地訓(xùn)練操作技能,很難促進(jìn)學(xué)生能力的發(fā)展。

二、現(xiàn)代分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革

現(xiàn)代分子生物學(xué)是一門建立在實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)之上的學(xué)科,一切的真知灼見都來源于時實(shí)踐和實(shí)驗(yàn),為了提高實(shí)驗(yàn)教學(xué)的質(zhì)量,促進(jìn)學(xué)生素質(zhì)的培養(yǎng),筆者認(rèn)為應(yīng)從以下幾點(diǎn)進(jìn)行改進(jìn):

(一)加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)教學(xué)管理和經(jīng)費(fèi)投入

學(xué)校應(yīng)逐步完善實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)、儀器設(shè)備和用具的配置,保證實(shí)驗(yàn)教學(xué)經(jīng)費(fèi)的投入。建立一套公正、合理、科學(xué)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)評估體系,包括實(shí)驗(yàn)人員管理與考核體系、教師實(shí)驗(yàn)教學(xué)質(zhì)量評價體系和學(xué)生實(shí)驗(yàn)教學(xué)質(zhì)量評價體系。課程上采取評比競爭,讓教師感到有一定的壓力,從而提高他們的責(zé)任心和進(jìn)取心。任課教師要認(rèn)真?zhèn)湔n,做好預(yù)備實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)過程中精講多練,親自示范,示范的同時提出關(guān)鍵步驟以及注意事項(xiàng),多指導(dǎo)學(xué)生,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后進(jìn)行歸納總結(jié),認(rèn)真批改實(shí)驗(yàn)報(bào)告。

(二)優(yōu)化實(shí)驗(yàn)教學(xué)模式

讓學(xué)生積極參與到實(shí)驗(yàn)中來,由被動變?yōu)橹鲃?。鼓勵學(xué)生多參與實(shí)驗(yàn)課相關(guān)活動,如與實(shí)驗(yàn)相關(guān)的講座、參與教師相關(guān)科研項(xiàng)目、“挑戰(zhàn)杯”等。在科研教師的指導(dǎo)下,學(xué)生獨(dú)立地思考實(shí)驗(yàn)過程中出現(xiàn)的問題,并不斷通過實(shí)驗(yàn)找出問題的根源所在,最后完成科研任務(wù)[4]。體會實(shí)驗(yàn)帶給學(xué)生的苦與樂,幫助學(xué)生真正理解科學(xué)的含義,讓學(xué)生從心底里改變對實(shí)驗(yàn)的態(tài)度,激發(fā)學(xué)生對實(shí)驗(yàn)濃厚的興趣,從而由衷地?zé)釔蹖?shí)驗(yàn)。

不應(yīng)只重視實(shí)驗(yàn)結(jié)果,更應(yīng)看重實(shí)驗(yàn)過程。實(shí)驗(yàn)過程中,手、腦的結(jié)合可使學(xué)生在掌握知識、方法、技能的同時也得到態(tài)度、意識、能力的培養(yǎng),即獲得了綜合性、協(xié)調(diào)性的發(fā)展。教師可以鼓勵學(xué)生嘗試用不同的方法,也許他們的嘗試不一定是得到了正確結(jié)果,但更重要的是參與了探究過程,體驗(yàn)了探究過程中的成功感與失敗感。

采用各種激勵措施,讓每位學(xué)生都進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。教師在實(shí)驗(yàn)中或?qū)嶒?yàn)后提出一些與實(shí)驗(yàn)結(jié)論相悖的現(xiàn)象或是與實(shí)驗(yàn)過程有關(guān)的問題讓學(xué)生思考,從而使每一位學(xué)生都能體驗(yàn)到一種動手實(shí)驗(yàn)的快樂。同時,應(yīng)獎“勤”罰“懶”,制造出一個活躍的實(shí)驗(yàn)氛圍[5]。在此過程中和學(xué)生相互交流也是有必要的,可以更加了解學(xué)生的學(xué)習(xí)情況,對實(shí)驗(yàn)的理解、消化程度,也可以從中了解到教師在教學(xué)過程中的不足。在教學(xué)中,教師還應(yīng)該了解當(dāng)前分子生物學(xué)的前緣學(xué)科知識,在實(shí)驗(yàn)課程中穿插一些新知識,引導(dǎo)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣,提高學(xué)生的科研能力。

(三)充分利用現(xiàn)有資源

雖然學(xué)校實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限,實(shí)驗(yàn)室空間有限,但可以將學(xué)生分為幾個小組,每次各個小組依次按實(shí)驗(yàn)順序輪流做實(shí)驗(yàn)。這樣不僅有利于教師管理和指導(dǎo),也避免了實(shí)驗(yàn)儀器的浪費(fèi),使其得以充分利用。同時在某種程度上也節(jié)約了不少時間。在課余時間開放實(shí)驗(yàn)室,讓學(xué)生學(xué)會自己設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)并進(jìn)行實(shí)驗(yàn),從而加深他們對儀器的使用熟練程度和提升他們的創(chuàng)新能力[6]。

(四)提高教學(xué)要求,培養(yǎng)科研意識

在實(shí)驗(yàn)過程中嚴(yán)格要求學(xué)生,特別是實(shí)驗(yàn)的基本操作,包括各種儀器的使用、每個步驟的要求、注意事項(xiàng)。該實(shí)驗(yàn)所涉及的是分子水平上的操作,對藥品的接觸較多,其中也有毒的試劑,在使用時應(yīng)該極其小心。除此之外對無菌操作要求也較為嚴(yán)格,這些都是不能馬虎的。久而久之在學(xué)生的意識中就建立起實(shí)事求是的科學(xué)態(tài)度,獨(dú)立自主的思想意識和追求科學(xué)真理的不懈精神和創(chuàng)新精神等。

在地方高校中存在相當(dāng)一部分要考研究生的學(xué)生,分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)正好可以為他們提供一個科研實(shí)踐的平臺,在學(xué)習(xí)專業(yè)課程實(shí)驗(yàn)的同時,提高動手和思考問題的能力,為后續(xù)的研究生學(xué)習(xí)打下基礎(chǔ)[7]。所以分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程可以積極鼓勵和引導(dǎo)學(xué)生投身于科學(xué)研究,增強(qiáng)學(xué)生學(xué)習(xí)的興趣,同時可以使他們更加重視這門課程,使得實(shí)驗(yàn)課教學(xué)可以順利完成,獲得更好的教學(xué)效果。

(五)加強(qiáng)考勤管理,改善考核方法

實(shí)驗(yàn)課教師要加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)課堂紀(jì)律,課前點(diǎn)名,要求每個學(xué)生獨(dú)立完成實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和實(shí)驗(yàn)報(bào)告,對遲到、早退、曠課、實(shí)驗(yàn)不動手、抄襲實(shí)驗(yàn)報(bào)告的學(xué)生給與嚴(yán)厲的批評。提高實(shí)驗(yàn)課考試在課程成績中的比例,考核采取實(shí)際操作、設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)和平時實(shí)驗(yàn)中的表現(xiàn)三種方式,考試時應(yīng)嚴(yán)格監(jiān)考,提高要求。只有這樣才能增強(qiáng)學(xué)生的實(shí)驗(yàn)意識,親自動手實(shí)驗(yàn),提高實(shí)際操作能力和思考能力。

由于當(dāng)今高等院校要培養(yǎng)高能力高素質(zhì)的全方面發(fā)展的人才,因此,怎樣才能保證學(xué)生具有強(qiáng)的、好的科學(xué)素養(yǎng),還需進(jìn)一步的探討。

[參考文獻(xiàn)]

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[2]姚發(fā)興.生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中存在的問題及對策《湖北師范學(xué)院學(xué)報(bào):自然科學(xué)版》2005年.第3期3頁.101-103

[3]張榮,汪效組.實(shí)驗(yàn)教學(xué)的創(chuàng)新模式.安慶師范學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2003,9(3):97-98

[4]張彥定,黃義得.本科分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的思考[J].新課程研究,2008,126(9):115-116

[5]朱俊華,尹芳.“分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)”課程體系的建立和考核方法的改革[J].北京城市學(xué)院學(xué)報(bào),2007,(2):37-39

[6]余曉麗,李淑平.分子生物學(xué)教學(xué)改革與實(shí)踐[J].南陽師范學(xué)院學(xué)報(bào),2005,4(6):95-96

第6篇:分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)范文

關(guān)鍵詞 醫(yī)學(xué)生物化學(xué) 分子生物學(xué) 實(shí)驗(yàn)教學(xué) 分層教學(xué) 教學(xué)改革

中圖分類號:G424 文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A DOI:10.16400/ki.kjdkz.2015.09.054

Application of Lamination Teaching in Medical Biochemistry

and Molecular Biology Experimental Teaching

LI Cuiping, ZHANG Wei, ZHAO Chunpeng

(Department of Biochemistry and Molecular Biology,

Xinxiang Medical College, Xinxiang, He'nan 453003)

Abstract Medical biochemistry and molecular biology experiments is an important subject, which has a significant enlightenment role in promoting the operative ability and developing the innovative potential and scientific research ability of the students, to connect medical theory with practice. However, traditional medical biochemistry and molecular biology experiments teaching has its limits, such as the quickly update theoretical knowledge with the obsolete experiment content and students participating in the experimental courses passively, which is not conducive to the innovation ability development and practice participation of the medical students. To solve above limitations, we put forward the concept of "lamination teaching" and divide the experimental classes into basic experiment, comprehensive experiment, designed experiment, according to the difference of each student in educational resources including biochemistry and molecular biology knowledge, ability level and personal development direction. The important role of "lamination teaching" in teaching reform of biochemistry and molecular biology experiments is also analyzed.

Key words Medical biochemistry; Molecular biology; experiment teaching; Lamination teaching; teaching reform

醫(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)是從分子水平研究生命現(xiàn)象本質(zhì)、疾病發(fā)生機(jī)制的學(xué)科。由于生物化學(xué)、分子生物學(xué)的內(nèi)容繁多、理解和記憶難度較大,對于臨床醫(yī)學(xué)的學(xué)生而言,醫(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)既有利于學(xué)生理解理論知識、掌握相關(guān)技術(shù),又可以提高動手能力、參與能力、分析及解決問題的能力、團(tuán)結(jié)合作的能力,可以說實(shí)驗(yàn)課的學(xué)習(xí)過程是一個理論與實(shí)際聯(lián)系的過程,更是一個對理論知識進(jìn)一步升華的過程。通過實(shí)驗(yàn)課的學(xué)習(xí),可以讓學(xué)生充分認(rèn)識到醫(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)對人類醫(yī)學(xué)發(fā)展的重要作用。但是,在實(shí)際教學(xué)中出現(xiàn)了很多不利于學(xué)生學(xué)習(xí)和發(fā)展的問題,顯示出傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)模式的局限性。分層教學(xué)的應(yīng)用可以解決這些弊端,讓學(xué)生根據(jù)自己的知識、能力、發(fā)展傾向選擇不同層次的實(shí)驗(yàn)課題,從調(diào)動學(xué)生的主動性和創(chuàng)造性出發(fā),對培養(yǎng)高素質(zhì)的創(chuàng)新型人才發(fā)揮重要作用。

1 傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的局限性

生物化學(xué)與分子生物學(xué)知識繁多、內(nèi)容抽象、概念枯燥,理解和記憶的難度很大,使得不少學(xué)生越學(xué)越記不住,越學(xué)越難理解,產(chǎn)生厭煩和畏難情緒。隨著時間的積累,各個學(xué)生對生物化學(xué)與分子生物學(xué)知識的掌握參差不齊,從而影響在實(shí)驗(yàn)課上的表現(xiàn)和發(fā)揮;生物化學(xué)與分子生物學(xué)教材更新迅速,但實(shí)驗(yàn)內(nèi)容陳舊落后,主要為一些簡單的驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn),與臨床實(shí)踐、實(shí)際應(yīng)用明顯脫節(jié),嚴(yán)重滯后于學(xué)科發(fā)展;①實(shí)驗(yàn)課教學(xué)采用教師預(yù)先優(yōu)化實(shí)驗(yàn)環(huán)節(jié),講授實(shí)驗(yàn)原理、介紹實(shí)驗(yàn)試劑、演示重要操作步驟、強(qiáng)調(diào)注意事項(xiàng),然后學(xué)生按照操作步驟依次做實(shí)驗(yàn)、寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告的教學(xué)方法,學(xué)生僅僅被動學(xué)習(xí),缺乏主動思考,很多學(xué)生甚至出現(xiàn)了抄襲實(shí)驗(yàn)報(bào)告的現(xiàn)象,根本不知其所以然,更不懂得實(shí)驗(yàn)中觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象,發(fā)現(xiàn)問題、分析并解決問題的重要性;生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課是一門強(qiáng)調(diào)學(xué)生動手操作,在動手的過程中獨(dú)立思考,發(fā)現(xiàn)問題、分析問題、解決問題的重視實(shí)踐的學(xué)科,但由于實(shí)驗(yàn)操作中以組為單位,有些學(xué)生不親自做實(shí)驗(yàn),抄襲實(shí)驗(yàn)報(bào)告,養(yǎng)成了眼高手低的習(xí)慣,對于臨床本科生而言,不利于今后的發(fā)展;可見,傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)教學(xué)理論與實(shí)踐脫節(jié),對其改革是學(xué)科發(fā)展、培養(yǎng)創(chuàng)新型人才的教育需求。

2 應(yīng)用分層教學(xué)法,全面改革醫(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)

分層教學(xué)又稱分組教學(xué)、能力分組,是教師根據(jù)學(xué)生的知識、能力水平和潛力傾向把學(xué)生科學(xué)地分成幾組水平相近的群體并區(qū)別對待,使得各群體在教師恰當(dāng)?shù)姆謱硬呗院拖嗷プ饔弥械玫阶詈玫陌l(fā)展和提高。根據(jù)分層教學(xué)的理念,教師可以根據(jù)各個學(xué)生對生物化學(xué)與分子生物學(xué)知識的掌握、能力水平及個人的發(fā)展方向,將實(shí)驗(yàn)課分為基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)、綜合實(shí)驗(yàn)、設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)等。醫(yī)學(xué)的學(xué)習(xí)過程是一個重視實(shí)踐的過程,所以基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)、綜合實(shí)驗(yàn)作可為必修課程要求每個學(xué)生都參加并進(jìn)行實(shí)驗(yàn)考核;而設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)可作為選修課程,根據(jù)學(xué)生自己的科研興趣及未來發(fā)展志向,自愿選擇。大體規(guī)劃如下:

2.1 精選基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn),掌握基本實(shí)驗(yàn)技能

基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)的教學(xué)目標(biāo)是掌握基本實(shí)驗(yàn)技能,如醫(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常見玻璃儀器的使用、清洗和干燥、電泳技術(shù)、層析技術(shù)、光譜光度技術(shù)、離心技術(shù)、物質(zhì)的分離提純及含量測定。按照教學(xué)目標(biāo),可安排如下基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn):血清蛋白含量的測定、血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳、氨基酸薄層層析、肝臟DNA的提取等。通過基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn),學(xué)生加深了對基本理論知識的理解,掌握了分光光度計(jì)、離心機(jī)、電泳儀、水浴鍋等常見生化儀器的使用,熟悉了基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)的操作過程,為開設(shè)綜合實(shí)驗(yàn)、研究型實(shí)驗(yàn)奠定了基礎(chǔ)。

2.2 開設(shè)綜合性實(shí)驗(yàn),提高動手能力和科研素質(zhì)

綜合性實(shí)驗(yàn)的教學(xué)目標(biāo)是提高學(xué)生的動手能力,培養(yǎng)分析問題、解決問題等科研素質(zhì)。綜合實(shí)驗(yàn)側(cè)重以生物大分子的分離、提純及測定為主,涉及各種實(shí)驗(yàn)技術(shù)的綜合。②為了達(dá)到上述教學(xué)目標(biāo),可篩選以下實(shí)驗(yàn):細(xì)胞核分離純化及DNA、RNA含量的定量測定、聚丙烯酰胺凝膠電泳分離血清蛋白、堿性磷酸酶的提取和測定等。通過基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)課的學(xué)習(xí),學(xué)生已掌握了基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)。在綜合性實(shí)驗(yàn)的開展過程中,要突出學(xué)生的主體地位,以學(xué)為主,以教為輔。學(xué)生通過預(yù)習(xí)課本,動手實(shí)驗(yàn)、發(fā)現(xiàn)問題、分析問題,最后解決不了的問題,教師可以組織學(xué)生討論,最后再答疑,指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)的完成。通過實(shí)驗(yàn),學(xué)生對實(shí)驗(yàn)原理有了更深入認(rèn)識、提高了發(fā)現(xiàn)問題、分析問題及解決問題的能力,發(fā)揮了學(xué)生的主觀能動性。如“細(xì)胞核分離純化及DNA、RNA含量的定量測定”實(shí)驗(yàn)中,由于細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核的水解液中容易吸入少量沉淀,導(dǎo)致比色時吸光度偏大,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)有偏差,出現(xiàn)該問題怎樣解決呢?首先讓學(xué)生觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象,試管中的反應(yīng)液是不是有懸浮物,不清澈呢?然后分析問題。根據(jù)分光光度計(jì)的測定原理Lamer-Beer定律A=KCL可知,在實(shí)驗(yàn)條件一定的情況下,A與C成正比,那么吸光度(A)偏大是由反應(yīng)液的濃度(C)增大而引起的。是什么原因引起反應(yīng)液的濃度增大呢?引導(dǎo)學(xué)生思考,是由于吸取水解液時混入少量沉淀而造成的。那如何解決該問題呢?是不是可以采用離心技術(shù),將懸浮物沉淀,再用上清液比色呢?通過離心前后實(shí)驗(yàn)結(jié)果的比較,學(xué)生懂得了實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)問題的重要性,體會了運(yùn)用所學(xué)知識去分析并解決問題的成就感。當(dāng)然,也有同學(xué)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)還沒認(rèn)真分析,就已經(jīng)把反應(yīng)液倒掉了,若實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)有問題,已來不及查找原因,在這種情況下,可以讓學(xué)生再重復(fù)進(jìn)行測定部分的實(shí)驗(yàn)。通過重復(fù)實(shí)驗(yàn),學(xué)生了解到保存實(shí)驗(yàn)材料的必要性及其對實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析的重要性。綜合實(shí)驗(yàn)的開設(shè),提高了學(xué)生分析問題、解決問題的能力,更重要的是學(xué)生通過自己的主動學(xué)習(xí),參與實(shí)驗(yàn)的熱情提高,對實(shí)驗(yàn)過程的理解更加透徹,科研素質(zhì)得到了提升。

2.3 組織“研究性實(shí)驗(yàn)”,突出學(xué)生創(chuàng)新能力的培養(yǎng)

研究性實(shí)驗(yàn)可作為選修課,實(shí)驗(yàn)題目待定或由各學(xué)業(yè)導(dǎo)師出相關(guān)題目,讓學(xué)生參考。學(xué)生根據(jù)自己的專業(yè)特點(diǎn)、興趣愛好、發(fā)展傾向選擇研究項(xiàng)目,由學(xué)業(yè)導(dǎo)師負(fù)責(zé)指導(dǎo)。學(xué)業(yè)導(dǎo)師負(fù)責(zé)做好以下相關(guān)工作:(1)幫助學(xué)生選題,引導(dǎo)學(xué)生查閱資料,設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)并跟蹤指導(dǎo)實(shí)驗(yàn);(2)做好實(shí)驗(yàn)室開放工作,保障實(shí)驗(yàn)藥品、器械的正常供應(yīng);(3)幫助學(xué)生分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。③當(dāng)然,研究性實(shí)驗(yàn)也可以在學(xué)業(yè)導(dǎo)師自己的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。在完成實(shí)驗(yàn)的過程中,學(xué)生圍繞自己感興趣的課題經(jīng)歷了查閱資料、選擇材料、確定方案、準(zhǔn)備試劑、分析結(jié)果、撰寫研究報(bào)告等一系列過程,教師則全程跟蹤指導(dǎo)。研究性實(shí)驗(yàn)的開設(shè)讓學(xué)生體會到科研的過程,體會到自己查找資料、學(xué)習(xí)知識的過程,體會到發(fā)現(xiàn)問題、解決問題的過程,體會到獨(dú)立思考在科研中的重要性,培養(yǎng)了嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)態(tài)度,同時提高了學(xué)生的動手能力,激發(fā)了學(xué)生對科研的熱情,提高了學(xué)生的創(chuàng)新能力,更重要的是提高了學(xué)生的獨(dú)立性和自信心,這對學(xué)生日后從醫(yī)或搞科研是非常重要的。在教師的指導(dǎo)下,一些學(xué)生通過查閱資料后提出有價值的問題,寫出課題申請,獲得了大學(xué)生創(chuàng)新項(xiàng)目的資助,還有一些學(xué)生將自己的研究成果在學(xué)術(shù)刊物發(fā)表。④可以說研究性實(shí)驗(yàn)為那些喜歡做實(shí)驗(yàn)、搞科研的學(xué)生提供了一個平臺。

總之,應(yīng)用分層教學(xué)法,開設(shè)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)、綜合實(shí)驗(yàn)、研究性實(shí)驗(yàn),是全面改革醫(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的有效途徑。各學(xué)校根據(jù)情況設(shè)定實(shí)驗(yàn)內(nèi)容,本文只提供了一種改革思路,僅供參考。

*通信作者:李翠萍

基金項(xiàng)目:新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院高學(xué)歷人才資助計(jì)劃(505026)

注釋

第7篇:分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)范文

關(guān)鍵詞 RNA 綜合性實(shí)驗(yàn) 分子生物學(xué)檢驗(yàn)技術(shù) 教學(xué)

中圖分類號:G424 文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A DOI:10.16400/ki.kjdkx.2016.12.042

Abstract Molecular Biology Diagnostic Technique is an important professional course in laboratory Medicine. Experimental teaching, especially the teaching of comprehensive experiment is very important to the cultivation of students' comprehensive skills. This paper expound the teaching implementation of comprehensive experiment “extraction and quantification of RNA and RT-PCR” in molecular biology diagnostic technique from the experimental design ideas, organization, implementation, implementation effect, teaching experience and so on. Analyze the problems existing in the teaching, and put forward the corresponding countermeasures. Provide a reference of teaching on experiment of “extraction and quantification of RNA and RT-PCR” for some colleges.

Keywords RNA; comprehensive experiment; Molecular Biology Diagnostic Technique; teaching

1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路

RNA提取、定量及RT-PCR綜合性實(shí)驗(yàn)主要由RNA提取、RNA定量和RT-PCR這三個部分組成。在本校的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中,目標(biāo)基因采用常用 -actin基因片段。實(shí)驗(yàn)首先用TRizol試劑提取小鼠肝臟總RNA,然后用紫外分光光度法和瓊脂糖凝膠電泳法檢測所提取RNA的純度和含量,最后利用引物oligo(dT)在逆轉(zhuǎn)錄酶作用下制備cDNA模板,通過小鼠 -actin基因的特異引物擴(kuò)增出 -actin基因片段,并用瓊脂糖凝膠電泳法檢測擴(kuò)增產(chǎn)物。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容涉及RNA的分離與純化技術(shù)、紫外比色技術(shù)、凝膠電泳技術(shù)、RT-PCR技術(shù)等研究技術(shù)與方法,具有較好的實(shí)用性和先進(jìn)性。

2 實(shí)驗(yàn)組織實(shí)施

RNA提取、定量及RT-PCR綜合性實(shí)驗(yàn)所涵蓋的知識面非常廣,整個實(shí)驗(yàn)歷時長,對學(xué)生的細(xì)心程度和實(shí)驗(yàn)技能要求較高,在實(shí)驗(yàn)過程中,有些試劑(比如TRizol試劑和氯仿)有強(qiáng)烈的刺激性氣味且伴有毒性,而且任何一個環(huán)節(jié)的微小錯誤,都有可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)最終失敗,故實(shí)驗(yàn)需要在特殊環(huán)境下(如通風(fēng)櫥)進(jìn)行。為了使學(xué)生在實(shí)驗(yàn)中能夠?qū)W到更多的知識,并且順利地完成實(shí)驗(yàn),首先,學(xué)生應(yīng)該在實(shí)驗(yàn)課前通過實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書和互聯(lián)網(wǎng)了解實(shí)驗(yàn)的相關(guān)內(nèi)容進(jìn)行預(yù)習(xí),熟悉實(shí)驗(yàn)的原理、儀器的使用方法、試劑的作用、操作步驟和注意事項(xiàng),并與其他學(xué)生討論預(yù)習(xí)過程中遇到的問題,若仍不能解決,則在老師講解實(shí)驗(yàn)時邊聽邊思考,務(wù)必在做實(shí)驗(yàn)之前弄懂實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵點(diǎn)和每個步驟的目的,盡量避免盲目操作和錯誤操作;其次,實(shí)驗(yàn)施教時,教師通過PPT展示和現(xiàn)場演示進(jìn)行講解,同時提出問題讓學(xué)生回答,加深學(xué)生對實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)的理解,并解答學(xué)生在預(yù)習(xí)過程中遇到的疑惑;再次,學(xué)生了解清楚每個步驟的操作、目的和注意事項(xiàng)后,開始進(jìn)行實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)過程中,學(xué)生嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)的說明來進(jìn)行操作,在通風(fēng)廚中進(jìn)行加樣,且要注意戴好口罩和手套,防止酶等因素影響實(shí)驗(yàn),教師應(yīng)督促和提醒學(xué)生是否有不當(dāng)?shù)牟僮鳎o助學(xué)生完成實(shí)驗(yàn);最后,教師對實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行引導(dǎo)性的講解,布置學(xué)生寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告,并要求學(xué)生在實(shí)驗(yàn)報(bào)告中結(jié)合實(shí)驗(yàn)原理對結(jié)果進(jìn)行分析討論,寫明實(shí)驗(yàn)中的注意事項(xiàng)和實(shí)驗(yàn)要點(diǎn),提出一些具有探究性的問題,以此啟發(fā)學(xué)生的邏輯思維和創(chuàng)新思維,加深學(xué)生對實(shí)驗(yàn)的了解,并在一定程度上激發(fā)學(xué)生對分子生物學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)實(shí)驗(yàn)的興趣。

3 實(shí)驗(yàn)實(shí)施效果

3.1 鞏固理論知識,提高運(yùn)用知識能力

由于分子生物學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)這門學(xué)科的理論知識較為抽象、復(fù)雜難懂,學(xué)生在預(yù)習(xí)實(shí)驗(yàn)的過程中,需要查閱書本、上網(wǎng)觀看實(shí)驗(yàn)視頻或者在網(wǎng)上查找資料以便更好地理解實(shí)驗(yàn)原理、操作步驟和注意事項(xiàng),等等。同時,學(xué)生也對這個實(shí)驗(yàn)所涉及的知識點(diǎn)有了更好的掌握。學(xué)生在分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果的過程中,復(fù)雜、抽象的理論知識轉(zhuǎn)化成實(shí)物(比如凝膠電泳結(jié)果、測量吸光度的結(jié)果等等),可以幫助學(xué)生對課本中的知識點(diǎn)有更清晰的認(rèn)識,這正是每個實(shí)驗(yàn)所要達(dá)到的目的。

第8篇:分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)范文

關(guān)鍵詞:分子生物學(xué);雙語教學(xué);教學(xué)模式

中圖分類號:G642.41 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號:1674-9324(2015)19-0146-02

雙語教學(xué)是我國大學(xué)教育進(jìn)軍國際化的一個重要舉措和標(biāo)志,同時也是我國高等校院培養(yǎng)具有國際競爭能力的高端人才的戰(zhàn)略部署和實(shí)踐手段[1]。為了促進(jìn)我國高等院校學(xué)生,特別是研究生能夠結(jié)合自身專業(yè)知識和專業(yè)外語學(xué)習(xí)及在實(shí)際科研工作中的運(yùn)用能力,從而提高他們的外語水平,廣東海洋大學(xué)研究生處對有條件進(jìn)行雙語教學(xué)的課程設(shè)立專項(xiàng)資金進(jìn)行資助,以積極推進(jìn)雙語教學(xué)模式。學(xué)校研究生雙語教學(xué)因開展時間較短,經(jīng)驗(yàn)欠缺,再加上研究生的英文底子薄弱,因此在具體工作中存在很多問題和困難,這不僅表現(xiàn)在雙語教學(xué)實(shí)踐中,學(xué)生聽不懂,更體現(xiàn)在教師很難選擇出合適的教材,備課存在一定的難度,有些教師甚至不會講。值得肯定的是,雖然雙語教學(xué)仍然是摸著石頭過河,改革推進(jìn)較慢,但隨著教學(xué)經(jīng)驗(yàn)的日益豐富,教師出國培訓(xùn)機(jī)會的增多,教師雙語教學(xué)能力會得到較大提升,可以實(shí)實(shí)在在地為研究生開展雙語教學(xué)活動,為他們在英語聽說讀寫等方面進(jìn)行拓展訓(xùn)練,從而培養(yǎng)出一批有專業(yè)思想和語言優(yōu)勢的高素質(zhì)創(chuàng)新型科研人才。

分子生物學(xué)是現(xiàn)代生命科學(xué)領(lǐng)域中最具有活力的前沿學(xué)科之一,其理論基礎(chǔ)知識和相關(guān)技術(shù)手段幾乎已應(yīng)用到水產(chǎn)學(xué)科的所有領(lǐng)域[2]。然而,因分子生物學(xué)本身具有極強(qiáng)的抽象性和前瞻性,其研究的分子對象看不見,摸不著,且理論與技術(shù)進(jìn)展日新月異,新的概念層出不窮,幾乎該學(xué)科的所有重大研究成果是以學(xué)術(shù)論文的形式發(fā)表在高水平的英文期刊上,因此,國內(nèi)高等院校特別是涉海、涉農(nóng)高校在分子生物學(xué)教學(xué)和科研方面與西方發(fā)達(dá)國家相比存在較大差距,這決定我們只有借助熟練閱讀英文文獻(xiàn)、英文教材,才能快速地掌握該學(xué)科的前沿知識,追蹤最新發(fā)展動態(tài)[3]。在分子生物學(xué)教學(xué)中采用中英文雙語教學(xué),查閱分子生物學(xué)領(lǐng)域的外文資料及與國外專家直接交流學(xué)習(xí),是使研究生快速邁向信息化、國際化的重要手段?!斗肿由飳W(xué)》是學(xué)校水產(chǎn)養(yǎng)殖和海洋生物學(xué)專業(yè)碩士生培養(yǎng)方案的重要基礎(chǔ)課,從2013年開始,該課程實(shí)行雙語教學(xué)。就近年來對《分子生物學(xué)》課程進(jìn)行雙語教學(xué)的體會和實(shí)踐,本文主要闡述對該課程進(jìn)行雙語教學(xué)的一些思考。

一、重視研究生英語運(yùn)用能力

語言不僅僅是一個交流工具,更是一個思想、文化和知識的傳播載體。目前,學(xué)校水產(chǎn)學(xué)科專業(yè)碩士研究生的英語水平普遍較低,特別是英語聽說能力嚴(yán)重不足,還有部分研究生的漢語基礎(chǔ)運(yùn)用能力也較薄弱。而在現(xiàn)實(shí)的教學(xué)科研工作中,碩士研究生的英語聽說讀寫能力直接影響其獲取分子生物學(xué)學(xué)科最前沿知識和最新科研成果的能力,因此,在《分子生物學(xué)》雙語教學(xué)中,必須首先重視研究生的英語運(yùn)用能力,建立科學(xué)的學(xué)生語言和知識評價體系。該體系需要以雙語教學(xué)中知識點(diǎn)的掌握和語言能力的提升作為雙重目標(biāo),重視對研究生英文運(yùn)用能力的考核。具體的考核方式和考核內(nèi)容應(yīng)重點(diǎn)放在研究生運(yùn)用英文進(jìn)行遣詞造句、固定語法搭配及時態(tài)、科技論文慣用語等方面,力求讓他們在課外閱讀到地道而寫作規(guī)范的分子生物學(xué)領(lǐng)域的英文文獻(xiàn),同時,教師要給出某些實(shí)驗(yàn)結(jié)果,讓學(xué)生模仿范文進(jìn)行科技論文寫作,以此手段提升他們的英語讀寫能力,具備迅速掌握分子生物學(xué)前沿知識的能力。

在《分子生物學(xué)》雙語教學(xué)過程中,強(qiáng)調(diào)研究生與授課教師的互動性[4]。教師用英語教學(xué)時,對不常見的單詞應(yīng)板書,在內(nèi)容講授過程中要經(jīng)常提問,讓學(xué)生用英文回答;準(zhǔn)許研究生在課堂上隨時用英文提問,教師也要用英文對問題進(jìn)行解答。上課前及時了解研究生整體專業(yè)知識和英語水平的差異,及時調(diào)整教學(xué)內(nèi)容,認(rèn)真聽取他們對教學(xué)方法的意見和看法,從而調(diào)整教學(xué)過程中的語速、板書內(nèi)容等,提升學(xué)生英語聽說運(yùn)用能力,達(dá)到與國外分子生物學(xué)專家直接交流及學(xué)習(xí)國外先進(jìn)實(shí)驗(yàn)方法的能力。

二、師資培訓(xùn)及教材選擇

加強(qiáng)《分子生物學(xué)》雙語教學(xué)任課教師的英語口語表達(dá)能力是該課程雙語教學(xué)成敗的關(guān)鍵因素之一。在該課程雙語教學(xué)任課教師的遴選中,應(yīng)首先以分子生物學(xué)領(lǐng)域、有國外留學(xué)經(jīng)歷及博士學(xué)位的教師為先。目前,學(xué)校擔(dān)任該課程的四名教師均在廣東外語外貿(mào)大學(xué)進(jìn)行過為期6個月的英語脫產(chǎn)學(xué)習(xí)培訓(xùn),然后在國家留學(xué)基金的資助下赴英語國家進(jìn)行過為期一年的分子生物學(xué)領(lǐng)域的研究訪問,他們均有較好的聽說讀寫能力,完全能滿足擔(dān)任《分子生物學(xué)》雙語教學(xué)任課教師所應(yīng)有的素質(zhì)和條件。但在該課程的雙語教學(xué)過程中,我們?nèi)园l(fā)現(xiàn)存在一些問題,主要表現(xiàn)為雖然教學(xué)語言是英文的,但思維方式仍是中式的,如一些專業(yè)名詞用英文解釋做得不夠到位時,聽課學(xué)生也無法真正理解,對一些最新的專業(yè)術(shù)語或最新的發(fā)展技術(shù)就連授課教師也無法進(jìn)行流利的描述,所以對《分子生物學(xué)》雙語教學(xué)授課教師進(jìn)行師資培訓(xùn)非常必要。這種培訓(xùn)主要以請國際上在分子生物學(xué)領(lǐng)域研究處于前沿的科學(xué)家來校報(bào)告、座談或派授課教師到該領(lǐng)域有建樹的國外實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行研究訪問,以期讓教師能及時掌握國際前沿的分子生物學(xué)領(lǐng)域的知識和技術(shù)[5]。

分子生物學(xué)與多個學(xué)科有交叉,涵蓋內(nèi)容寬,技術(shù)應(yīng)用廣泛。目前,學(xué)校水產(chǎn)學(xué)科研究生《分子生物學(xué)》雙語教學(xué)選用的是由Jocelyn E. Krebs等主編的Lewin's GENES X及中國科學(xué)院研究生院教學(xué)叢書系列之《分子生物學(xué)(第3版)》(英文)作為授課教材和補(bǔ)充教材,但在備課和授課過程中會發(fā)現(xiàn)兩本教材內(nèi)容過多,Lewin's GENES X在教材組織體系與我們的學(xué)習(xí)思維方式不匹配,而中國科學(xué)院研究生院教學(xué)叢書系列之《分子生物學(xué)(第3版)》(英文)對分子生物學(xué)基礎(chǔ)知識薄弱的水產(chǎn)學(xué)科研究生而言過于深奧。為了更緊密地與學(xué)校水產(chǎn)學(xué)科相結(jié)合,本課程授課教師計(jì)劃在現(xiàn)有選用教材的基礎(chǔ)上做調(diào)整,自編Current Molecular Biology for Aquaculture,且每年更新,以便讓研究生及時了解水產(chǎn)學(xué)科相關(guān)的分子生物學(xué)的發(fā)展前沿。

三、存在問題和建議

目前,我國高等院校高度重視雙語教學(xué),但僅從語言的運(yùn)用和教學(xué)效果的好壞來評判,使得雙語教學(xué)缺乏具體、規(guī)范的參考和評價標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)英文在課堂上的所占比例,我國高等院校的雙語教學(xué)可以分為三種類型:第一種類型是全英文授課,授課教師以少數(shù)英文水平較高的教師和相關(guān)專業(yè)的外籍教師構(gòu)成。目前,學(xué)校水產(chǎn)學(xué)科專業(yè)研究生《分子生物學(xué)》雙語教學(xué)就屬于這種類型。第二種類型是授課時中英文比例大致相等。比如課程上所使用的教材是英文,講授時以中文為主;或使用的教材是中文,講授時以英文為主。第三種類型是課程講授主要以中文為主,英文僅用于組織教學(xué)用語及對專業(yè)名詞的翻譯和解釋。比較這三種類型,顯示最好的是采用第一種類型,但對授課教師和學(xué)生的英文能力要求也最高,普通高等院校學(xué)生無法達(dá)到這一要求,所以目前第二種類型的雙語教學(xué)模式在我國高校中占主導(dǎo)地位。目前,學(xué)校水產(chǎn)學(xué)科專業(yè)《分子生物學(xué)》雙語教學(xué)課程組師資優(yōu)良,不像其他許多雙語教學(xué)授課教師是在非自愿或自身專業(yè)知識條件不成熟的情況下被“趕鴨子上架”[6]的。但從近年來的雙語教學(xué)效果來看未能達(dá)到預(yù)計(jì),其主要原因有兩個:一是因?yàn)檎n程使用英文教學(xué),導(dǎo)致大量的時間用于學(xué)生練習(xí)專業(yè)詞匯的聽說,而實(shí)際授課內(nèi)容相應(yīng)減少,即較之母語教學(xué),同樣的內(nèi)容使用雙語教學(xué)時所需的學(xué)時更長,這主要是因?yàn)閹熒褂猛庹Z交流不可能達(dá)到信息交流如直接傳遞的母語交流狀態(tài),因而使教學(xué)內(nèi)容在量上被打了折扣[7]。二是課堂上師生用英文交流會阻礙師生對分子生物學(xué)重要內(nèi)容或前沿技術(shù)的深入討論,直接導(dǎo)致《分子生物學(xué)》雙語教學(xué)中的授課內(nèi)容出現(xiàn)介紹性多、描述性多而研究性少的弊端,阻礙學(xué)生創(chuàng)造性思維的發(fā)展和對解決關(guān)鍵科學(xué)問題的思考。因此,本課程在被設(shè)為雙語教學(xué)課程的同時應(yīng)相應(yīng)增加課時,最好先對學(xué)生的英文能力進(jìn)行測評,選擇20名左右語言能力不錯的研究生進(jìn)行試點(diǎn)上課,并與整班雙語教學(xué)的教學(xué)效果進(jìn)行縱向比較,從而探討本課程的最佳雙語教學(xué)模式。

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第9篇:分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)范文

視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤( retinoblastoma,RB)是嬰幼兒最常見的一種眼內(nèi)惡性腫瘤, 不僅嚴(yán)重影響患兒的視力,更危及生命。隨著生物學(xué)技術(shù)的迅猛發(fā)展,RB的生物學(xué)研究已取得一些突破,探討RB的發(fā)病機(jī)制對抑制腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移,提高患兒的生存率,具有重要的臨床意義?,F(xiàn)將視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤發(fā)病機(jī)制的研究進(jìn)展綜述如下。

【關(guān)鍵詞】 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤;基因突變;p53;鼠雙微粒體2;Rb蛋白

Abstract Retinoblastoma is a common pediatric eye malignant tumor, it not only seriously affects childrens eyesight, but also endangers their lives. With the rapid development of biological technology, some breakthroughs have been made in retinoblastoma biological research. It has an important clinical significance to explore the pathogenesis of retinoblastoma in order to inhibit tumor growth and metastasis and improve the survival rate of children. Now the pathogenesis of retinoblastoma research is summarized.

KEYWORDS: retinoblastoma; mutation; p53; MDM2; pRb

0 引言

視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤(retinoblastoma,RB)是發(fā)生于嬰幼兒時期最為常見的眼內(nèi)惡性腫瘤[1],出現(xiàn)首個體征的平均年齡為生后7mo(雙側(cè)發(fā)病病例)和24mo(單側(cè)發(fā)病病例)[2],嚴(yán)重危害著患兒的視力和生命,已經(jīng)受到醫(yī)學(xué)界的廣泛關(guān)注。我國每年新病例約有1000人,占全世界每年新病例的20%。其中30%~40%的病例屬于遺傳型,符合常染色體不完全顯性遺傳,外顯率約90%;60%~70%的病例屬于非遺傳型。遺傳型是由生殖細(xì)胞突變引起,變異存在于每一個體細(xì)胞中;非遺傳型,基因突變僅發(fā)生在視網(wǎng)膜細(xì)胞。因此,遺傳型RB通常為雙側(cè)、或單眼多發(fā)性;非遺傳型則以單側(cè)、散發(fā)型多見。

RB是人類特有的一種視網(wǎng)膜腫瘤,對其成因?qū)W者們提出了許多假說:1971年,Knudson[3]的二次突變假說認(rèn)為RB需要經(jīng)歷某個基因的兩次突變才能發(fā)生;Benedict等[4]在1983年提出類似Knudson的假說;同年Cavenee證實(shí)了兩個等位基因的失活致RB發(fā)生,該基因位于13q14位點(diǎn),編碼pRb蛋白,靠近脂酶D的編碼區(qū),命名為Rb1基因。pRb在細(xì)胞的增殖和分化中起重要作用,決定細(xì)胞是否進(jìn)入S期[5]。Rb1基因啟動子包含多個轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合位點(diǎn)(RBF1, Sp1, ATF和E2F)[6],遺傳型Rb在這些位點(diǎn)上發(fā)生突變,造成轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子無法結(jié)合,降低了轉(zhuǎn)錄活性[7],導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)pRb功能低下或缺失,細(xì)胞的正常周期被打破,表現(xiàn)出細(xì)胞快速生長形成腫瘤。

1 RB基因突變

1970年代,Knudson[3]首次提出視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤發(fā)生的“二次突變學(xué)說”,即一個正常的視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤變成腫瘤細(xì)胞需發(fā)生2次突變。隨機(jī)發(fā)生的2次突變可使RB基因中正常的等位基因失活。當(dāng)兩個等位基因均發(fā)生突變,由體細(xì)胞的雜合子型變成了純合子狀態(tài),細(xì)胞將失去正常RB蛋白功能,細(xì)胞分化失去控制,從而形成腫瘤。1980年代,對RB基因的位置和作用方式有了基本了解。多位學(xué)者對RB腫瘤細(xì)胞內(nèi)RB基因及產(chǎn)物進(jìn)行詳細(xì)分析[8,9]:(1)在DNA分子水平,大約15%~30%的RB腫瘤顯示RB基因結(jié)構(gòu)異常,主要限于顯示大的缺失、易位、重組以及影響限制性酶切位點(diǎn)的點(diǎn)突變;(2)在mDNA表達(dá)水平,更多的RB腫瘤表現(xiàn)出低于正常胎兒視網(wǎng)膜或分子量大小異常。RB的mDNA異常被認(rèn)為是由于不同的RB基因點(diǎn)突變對mDNA穩(wěn)定性轉(zhuǎn)錄及剪接影響所致;(3)在蛋白質(zhì)水平,絕大多數(shù)RB或缺失RB蛋白或僅表達(dá)少量的或分子量異常的RB蛋白。RB基因突變的類型:(1)大片段缺失[811]:即大片段(全部或部分)RB基因缺失,缺失斷裂點(diǎn)可出現(xiàn)于整個RB基因范圍內(nèi)(外顯子13~17區(qū)域內(nèi));(2)在基因編碼序列中缺失或插入幾個堿基,引起閱讀框架移位[1214]。(3)點(diǎn)突變:按其性質(zhì)可分為2類:錯義突變和無能突變。據(jù)文獻(xiàn)統(tǒng)計(jì),遺傳型患者中,僅25%有陽性家族史,多數(shù)RB患者為新發(fā)生的生殖細(xì)胞突變。這說明RB發(fā)病過程除了基因突變外可能有其他機(jī)制的參與。

2 癌基因、抑癌基因論

近年來,對RB中一些癌基因和抗癌基因的研究開始引起人們的重視。越來越多的研究表明,視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的發(fā)生、發(fā)展是一個復(fù)雜的過程,有多個癌基因和抑癌基因的異常改變,其中MDM2基因的擴(kuò)增或過表達(dá)及p53基因突變有著舉足輕重的作用。我們著重對P53及與其可能相關(guān)的癌基因MDM2做一綜述。p53為一公認(rèn)的抗癌基因,50%以上的腫瘤組織中可檢測到它的突變。腫瘤抑制基因p53位于人類17號染色體短臂17P13.1上,其編碼產(chǎn)物位于細(xì)胞核,是一種分子量約為53KD的含磷蛋白,可分為野生型和突變型兩種。正常細(xì)胞所產(chǎn)生的P53蛋白(野生型)很少,而且在細(xì)胞中易水解,半衰期為20min左右,用常規(guī)免疫組化方法難以檢出[15]。突變型p53基因由野生型突變產(chǎn)生,失去抑癌基因活性,可導(dǎo)致正常細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化、腫瘤發(fā)生[1618]。因其多積聚在細(xì)胞核內(nèi),穩(wěn)定性增加,半衰期延長,故可通過免疫組織化學(xué)染色檢測[17]。在正常細(xì)胞中,p53信號通路主要調(diào)節(jié)細(xì)胞損傷后反應(yīng)(修復(fù)或凋亡)[19]。研究發(fā)現(xiàn)[2023],RB組織中有高水平的突變型p53基因蛋白表達(dá),提示p53基因突變與RB發(fā)生關(guān)系密切。p53基因突變與P53蛋白過度表達(dá)間的高度一致性己經(jīng)被證實(shí)[24]。

MDM2是一種癌基因,其主要的功能是與野生型或突變型P53蛋白的相互作用[25]。野生型p53基因誘導(dǎo)MDM2轉(zhuǎn)錄增強(qiáng),致使MDM2蛋白水平升高;反過來,MDM2蛋白與P53結(jié)合形成復(fù)合物,促使P53蛋白降解,抑制其功能的發(fā)揮,二者構(gòu)成了負(fù)反饋調(diào)節(jié)環(huán)。通過這種調(diào)節(jié),二者在細(xì)胞內(nèi)能處于平衡狀態(tài),這即利于DNA損傷后的修復(fù),同時又防止修復(fù)后細(xì)胞生長受阻[26]。研究表明:MDM2P53負(fù)反饋調(diào)節(jié)環(huán)異常可導(dǎo)致細(xì)胞中抑癌基因p53功能失活,與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[27] 。MDM2(鼠雙微粒體2)癌基因定位于12q13 14,多項(xiàng)實(shí)驗(yàn)證實(shí)了該基因能使體外細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)化并具有動物成瘤性[28,29]。

MDM2還可通過P53非依賴性方式在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中起作用。最近新的研究表明MDM2和P53的調(diào)節(jié)通路有新的酶化途徑參與[30],這表明兩者之間的作用不是單一途徑。

3 其他觀點(diǎn)

Rb基因編碼的Rb蛋白(pRb)是一種具有廣泛生物學(xué)意義的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子,為具有DNA結(jié)合能力的核磷酸化蛋白,主要參與細(xì)胞周期的調(diào)節(jié),對細(xì)胞生長起負(fù)調(diào)控作用,它是調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖信號通路的中心成分。近期研究認(rèn)為,pRb與RB的發(fā)生密切相關(guān)。

pRb作用于腫瘤的發(fā)生、發(fā)展可能是通過兩種機(jī)制:(1)細(xì)胞周期調(diào)控作用,pRb及其相關(guān)蛋白是決定細(xì)胞分裂增殖還是休止、分化的重要分子[31]。pRb的功能受磷酸化狀態(tài)影響,pRb以非磷酸化的活性形式與轉(zhuǎn)錄因子E2F結(jié)合而抑制其活性,阻止細(xì)胞從G1期進(jìn)入S期[32],抑制細(xì)胞增殖,而pRb的磷酸化可使其失活。(2)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,通過p53依賴和p53非依賴的細(xì)胞凋亡途徑,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[33]。有研究表明[3436]:pRb功能異常導(dǎo)致中心體和非整倍體的擴(kuò)增。這就意味著pRb與中心體擴(kuò)增和染色體穩(wěn)定性有關(guān)。最近研究發(fā)現(xiàn):腫瘤的發(fā)生開始于干細(xì)胞的表觀遺傳變異,這就意味著基因表達(dá)的后天性缺失(非突變性的)比突變更常見。所以就有人提出質(zhì)疑“二次基因突變論”的合理性。

4 展望

眾所周知,腫瘤的發(fā)生和發(fā)展是一個復(fù)雜的過程,有很多影響因素,包括癌基因的激活、抗癌基因的失活、凋亡機(jī)制的異常及其他因子的改變。腫瘤細(xì)胞既是分化紊亂的產(chǎn)物又是增殖失控的產(chǎn)物。視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤亦是如此。目前的研究還沒有對RB的發(fā)病機(jī)制做出較權(quán)威的結(jié)論,但其分子生物學(xué)研究取得了一定進(jìn)展,我們了解到RB的發(fā)生不僅是基因突變那么簡單,可能有抑癌基因、癌基因、抗凋亡因子的參與,我們已了解了相當(dāng)一部分,以后要繼續(xù)完善研究它們之間的內(nèi)在關(guān)系及相互影響,找出RB發(fā)病的主要機(jī)制。從分子水平重新認(rèn)識RB的發(fā)生、發(fā)展規(guī)律,具有明顯的理論價值與廣泛的應(yīng)用前景,能為以后基因治療RB提供科學(xué)依據(jù)。

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